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猪胆粉抗炎作用研究

更新时间:2009-03-28

炎症是具有血管系统的动物针对损伤因素所产生的以防御为主的复杂反应。炎症过程的中心环节是血管反应和渗出[1]。炎症的发生机制已研究的非常清楚[2-3]。炎症介质在炎症时的血管反应、液体渗出和白细胞游出过程中具有十分重要的作用[4]。组胺主要能够引起血管壁通透性的增强,使局部血浆外渗,促进炎性水肿。当机体受到外来的刺激时,花生四烯酸经不同的代谢途径,分别生成前列腺素、白三烯、脂质素等代谢产物,从而发挥炎症介质作用[5]。前列腺素强烈的扩张血管作用,能够使毛细血管和后微静脉的通透性增高,使皮肤对疼痛刺激更加敏感[6]。白三烯尤其是LTB4对中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞和白细胞等具有很强的趋化作用,而且能够提高血管壁的通透性,促进血浆的渗出[7]

糖皮质激素类药物有着多种药理作用,其中利用它显著的抗炎作用作为临床严重感染和严重炎症的对症治疗,可以明显减轻炎症临床症状的表现。然而,在发挥抗炎作用的同时也降低或抑制了机体的免疫功能,这正是医生在用药时所顾虑的。为此,寻找既有糖皮质激素类药物同等抗炎作用又对机体免疫功能有平衡调节作用的药物就非常必要[8]。猪胆粉为猪科动物猪胆汁的干燥制品,具有促进消化、镇咳平喘、抗炎抗过敏、抗病原微生物以及抗肿瘤等作用[9-12]。但尚未看到以猪胆粉抗炎为主题的系统研究报道。为此,本试验通过采用急性、慢性炎症模型[13],较为系统地观察了猪胆粉的抗炎作用,旨在为寻找新的抗炎药物提供参考。

在研发阶段,可以通过网络化操作降低人工成本,网络化的操作不仅让我们在进行成本管理的时候提高效率,而且还最大可能地减少了人工费用的花费;增强研发人员成本意识,严格控制企业的成本是研发人员在互联网行业从事工作的必备要求,作为研发人员必须深刻地认识到研发费用监督的迫切性;整合信息资源缩减研发支出,利用互联网进行信息整合之后,就完全不用担忧不一样的系统、不一样的数据库之间的集成效果,进而实现信息资源配置最优化、拓宽信息资源应用领域和最大化挖掘信息价值的管理过程。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验动物 SPF级昆明小鼠,雄性,体重18~22 g。购于北京斯贝福生物技术有限公司。动物许可证号:SCXK(京)2016-0002。

下面对某220 kV GIS断路器合闸时间、合闸不同期时间严重超标、合闸速度偏低缺陷案例进行分析,排查、核实测试数据异常原因,并总结类似断路器操作机构检修经验,为提升断路器安装、验收、运维质量提供参考。

1.2.6 数据处理 应用SPSS19.0软件进行数据分析。组间数据比较使用单因素方差分析(AVONA),试验数据以平均数±标准差表示,P<0.05为差异显著,P<0.01为差异极显著。

低蛋白日粮饲料的倡导或将有效减少豆粕等蛋白饲料原料用量。新标准全面推行后,理论上有望使得养殖业豆粕年消耗量降低约1100万吨,带动减少大豆需求约1400万吨。

[7] 张青.鸡胆汁的药理作用及应用[J].食品与药品,2005,7(2A):18-19.

1.2 方法

1.2.1 二甲苯致小鼠耳肿胀试验 选取健康的昆明小鼠50只,雄性,18~22 g。随机分成5组,分别灌胃给高(400 mg/kg)、中(200 mg/kg)、低(100 mg/kg)不同剂量的猪胆粉及空白对照组(蒸馏水)和阳性对照组(地塞米松)5 mg/kg,每日灌胃一次,每次灌胃0.25 mL,连续给药7 d,在最后一次给药1 h后,在小鼠的右耳两侧均匀涂布二甲苯0.05 mL,左耳不做任何处理以作为对照。致炎30 min后,脱颈处死小鼠,并剪下左右两侧耳廓,用9 mm打孔器取双耳对称耳片并称重。将左右耳片重量差(右耳重-左耳重)作为肿胀度(mg),并计算抑制率。

抑制率(%)=

 

1.2.2 蛋清致小鼠足肿胀试验 选取健康的昆明小鼠50只,雄性,18~22 g。随机分成5组,先用游标卡尺测量各鼠右后趾,并做好记录。然后分别给小鼠灌胃给高、中、低不同剂量的猪胆粉及空白对照组(蒸馏水)和阳性对照组(地塞米松)5 mg/kg,每日灌胃1次,每次灌胃0.25 mL,连续给药7 d,在最后一次给药后1 h,将提前配好的10%的蛋清0.1 mL皮下注射于小鼠的右后趾,再用游标卡尺分别测量致炎后小鼠0.5,1,2,4 h的足趾直径(mm),观察足趾肿胀程度(致炎后右后足趾直径-致炎前右后足趾直径),分别计算足趾肿胀度(mm)和抑制率。

[8] 郝满良,甄大玲,单玉姣,等.糖皮质激素抗炎替代品药理作用的研究[J].河北农业大学学报,2004, 27(3): 97-100.

1.2.4 小鼠炎性渗出物中组胺含量的测定 取试验小鼠,在致炎4 h后沿踝关节处剪下右后致炎足,用预冷的PBS液 (0.01 mol/L, pH=7.4)冲洗组织,去除足趾上残留血液,称重后将足趾剪碎。将剪碎的组织放入高通量组织研磨机中充分研磨,在研磨前先经液氮处理,最后将匀浆液在离心机中以5 000 r/min离心5~10 min,取其上清液进行检测。按照组胺试剂盒说明书进行操作,测定小鼠炎性渗出物中组胺的含量。

1.2.5 角叉菜胶致小鼠气囊炎灌洗液中PGE2和LTB4含量的影响 取健康昆明小鼠50只,雄性,18~22 g。随机分成5组,每组小鼠分别灌胃给高、中、低不同剂量的猪胆粉及空白对照组(蒸馏水)和阳性对照组(地塞米松)5 mg/kg。每日灌胃一次,每次灌胃0.25 mL,连续灌胃7 d。于给药当日起在小鼠的背部肩胛区皮下注入空气5 mL,空气经过滤器过滤,在第3天和第6天再次注射3 mL无菌空气,用以维持气囊的膨胀度。最后一次给药1 h后,在小鼠的气囊内注入1 mL 0.25%的角叉菜胶,诱发炎症。并在致炎6 h后脱颈处死小鼠,在气囊内注入生理盐水4 mL(含肝素50 U/mL)进行灌洗。收集灌洗液。将灌洗液置于离心机中离心,取上清液,分别按照前列腺素试剂盒和白三烯试剂盒说明书进行操作,测定小鼠气囊炎灌洗液中PGE2及LTB4的含量。

1.1.2 药物及配制 猪胆汁采集于河北省保定市屠宰加工厂,猪胆汁经干燥箱干燥后,将其充分研磨成粉末状。所得粉末即为猪胆粉。试验前用蒸馏水将其按照400,200和100 mg/kg的比例配成1.6%,0.8%,0.4%的不同浓度。

杨紫的穿衣风格一直饱受诟病,被网友称为“土肥圆”。大大咧咧的杨紫曾经毫不在乎:好好磨炼演技才是正经事!有一次,杨紫无意中翻开《上海的金枝玉叶》这本书,里面有个场景给她留下了深刻的印象:被下放到农场劳动的富家千金郭婉莹在命运的风暴里优雅如初,穿着浆洗得干净整洁的旗袍去刷马桶,脚上也是一双擦得锃亮的皮鞋。杨紫恍然大悟:衣服里藏着一个人与命运对抗的顽强精神,时尚也无关贫富,而是一种品位、一种态度。

2 结果与分析

2.1 猪胆粉对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响

试验结果如表1所示,猪胆粉中剂量组和地塞米松组两耳重量差极显著低于空白组(P<0.01),其抑制率分别为39.53%和41.10%。高剂量组两耳重量差与空白组相比差异显著(P<0.05),其抑制率为20.94%。低剂量组与空白组无明显差异。数据表明猪胆粉高、中剂量组对二甲苯致小鼠耳肿胀具有显著的抑制作用。

其次,教师的态度直接影响着学生是否能够很好的在学习中发挥主体作用。因此,教师需要不断地更新教学的理念,掌握好在英语学习中的角色。教师是学生英语学习的领路人,是促进者,是朋友,是分享者。学生大部分的学习时间来自于课堂,课堂是主阵地。教师把握好在教学中的角色,就能更好的守住教学的阵地。教师要用平等民主的态度面对学生,用对英语的热情感染学生学习英语的热情,激起英语学习的欲望。教师对知识的点拨和引导能够激起学生对知识的好奇心和求知欲,这样才能使课堂成为学生展现自我的舞台,成为学习的主人,从而形成“自主、合作、探究”的学习方法,这样学生才能真正投入到英语学习中来,成为英语学习的主宰者。

 

表1 猪胆粉对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响(Mean±SD)

 

Table 1 Effect of pig bile powder on swelling of mice ear caused by xylene (Mean±SD)

  

组别Groups剂量/(mg·kg-1·d-1)Dose肿胀度/mgSwellingdegree抑制率/%Inhibitionrate空白组—3.82±0.57—高剂量组4003.02±0.40*20.94中剂量组2002.31±0.83**39.53低剂量组1003.67±0.7617.99地塞米松组52.25±0.85**41.10

注:与空白组相比较,**P<0.01,*P<0.05。

2.2 猪胆粉对蛋清致小鼠足趾肿胀的影响

试验结果如表2所示,在对小鼠致炎后0.5,1,2,4 h测量小鼠右后趾发现,中剂量组和地塞米松组与空白组差异极显著(P<0.01),高剂量组在1,2 h与空白组差异显著(P<0.05)。低剂量组与空白组无明显差异。表明猪胆粉对蛋清致小鼠足趾肿胀有明显抑制作用。

 

表2 猪胆粉对蛋清致小鼠足趾肿胀的影响(Mean±SD)

 

Table 2 Effect of pig bile powder on swelling of mice foot caused by egg white(Mean±SD)

  

组别Groups剂量/(mg·kg-1·d-1)Dose0.5h1h2h4h肿胀度/mmSwellingdegree抑制率/%Inhibitionrate肿胀度/mmSwellingdegree抑制率/%Inhibitionrate肿胀度/mmSwellingdegree抑制率/%Inhibitionrate肿胀度/mmSwellingdegree抑制率/%Inhibitionrate空白—1.37±0.08—1.48±0.07—1.22±0.24—0.88±0.14—高剂4001.25±0.148.851.34±0.12*9.141.03±0.15*15.560.79±0.14*10.78中剂2001.23±0.0910.601.29±0.08*12.560.81±0.11**34.070.64±0.11**27.36低剂1001.29±0.216.171.38±0.146.501.18±0.103.030.87±0.143.01 地塞米松50.99±0.07**27.41.12±0.15**24.100.80±0.16**34.320.60±0.11**31.78

注:与空白组相比较,**P<0.01,*P<0.05。

2.3 对棉球所致小白鼠肉芽肿的影响

试验结果如表3所示,中剂量组和地塞米松组与空白组比较差异极显著(P<0.01),高剂量组与空白组相比差异显著(P<0.05)。低剂量组与空白组相比无明显的差异(P>0.05)。表明猪胆粉对棉球所致小白鼠肉芽肿有明显抑制作用。

表3 猪胆粉对棉球所致小白鼠肉芽肿的影响

Table 3 Effect of pig bile powder on granulomainduced by cotton ball (Mean±SD)

  

组别Groups剂量/(mg·kg-1·d-1)Dose肿胀度/mgSwellingrate空白组— 18.6±3.12高剂量组400 16.1±3.00*中剂量组200 14.5±3.10**低剂量组100 18.1±2.60地塞米松组5 11.3±1.60**

注:与空白组相比较,**P<0.01,*P<0.05。

2.4 小鼠炎性渗出物中组胺含量的测定

试验结果如表4所示,高、中剂量组和地塞米松组其组胺浓度极显著低于空白组(P<0.01),低剂量组炎性渗出物中组胺浓度与空白组相比无明显差异(P>0.05)。表明猪胆粉能有效抑制炎症反应中组胺的渗出。

 

表4 猪胆粉对小鼠炎性渗出物中组胺含量的影响

 

Table 4 Effect of pig gall powder on histamine content in inflammatory exudate of mice

  

组别Groups剂量/(mg·kg-1·d-1)Dose组胺浓度/(U·L-1)Histamineconcentration空白组—19.82±3.80高剂量组40015.31±3.54**中剂量组20014.44±3.10**低剂量组10017.25±2.53地塞米松组513.58±2.11**

注:与空白组相比较,**P<0.01,*P<0.05。

2.5 角叉菜胶致小鼠气囊炎渗出液中PGE2 LTB4 浓度的影响

试验结果如表5所示,小鼠气囊炎渗出液中前列腺素PGE2含量,高、中剂量组和地塞米松组与空白组比较差异极显著(P<0.01),低剂量组与空白组无明显差异(P>0.05)。表明猪胆粉能够抑制炎症反应中前列腺素的渗出。对白三烯(LTB4)浓度的影响,高、中剂量组和地塞米松组,均可抑制炎性渗出液中白三烯的渗出(P<0.05),但地塞米松组效果较好(P<0.01)。低剂量组与空白组无明显差异(P>0.05)。表明猪胆粉对炎症反应中白三烯的分泌有抑制作用。

引起肺部感染而造成肺炎的原因有很多,大部分肺炎是病毒感染引起的,例如呼吸道合胞病毒、流感病毒、副流感病毒、腺病毒等;也有部分是细菌感染引起的,例如肺炎球菌、流感嗜血杆菌、葡萄球菌等;近年来肺炎支原体感染引起的肺炎也有增多趋势。

 

表5 对角叉菜胶致小鼠气囊炎渗出液中PGE2和LTB4含量的影响

 

Table 5 Effect of pig bile powder on the content of PGE2 and LTB4in the mice airsac inflammatory exudate induced by carrageenan

  

组别Groups剂量/(mg·kg-1·d-1)DosePGE2浓度/(pg·mL-1)ConcentrationLTB4浓度/(pg·mL-1)Concentration空白组—443.18±34.21236.56±17.88高剂量组400378.96±40.10**214.32±22.30*中剂量组200366.84±30.17**213.45±19.24*低剂量组100402.10±46.81221.15±10.52地塞米松组5356.15±39.20**182.45±34.36**

注:与空白组相比较,**P<0.01,*P<0.05。

3 结论与讨论

炎症因子血管活性胺、花生四烯酸代谢产物、白细胞产物以及细胞因子和趋化因子在炎症病理过程中发挥着非常重要的作用。近些年研究发现核转录因子κB (Nuclear transcription factor kappa B, NF-κB)激活后可促进细胞因子、黏附因子和趋化因子等基因转录[14-15]。它们在急性炎症或炎症早期、慢性炎症或炎症后期发挥作用。在本试验中采用多种急慢性炎症模型,并且采用糖皮质激素类药物地塞米松作为阳性对照研究猪胆粉的抗炎作用。研究结果表明上述制造炎症模型的方法可靠,造模成功。但以后也可以尝试使用细胞炎症模型[16-17]。试验中,高剂量组和中剂量组猪胆粉能够抑制二甲苯致小鼠耳肿胀试验和蛋清致小鼠足趾肿胀试验的肿胀程度,同时能减轻小鼠棉球肉芽肿试验中棉球的重量,说明猪胆粉对急慢性炎症有抑制作用,这与袁帅等[11]的研究结果较为一致。组胺是一种活性胺类的的炎症介质,目前已知组胺发挥炎症介质作用主要与组胺H1、H2和H4的受体表达有关。本试验中,高剂量组和中剂量组猪胆粉能够显著降低小鼠足趾炎性渗出物中组胺含量,这与其抑制蛋清致小鼠足趾肿胀结果一致。提示猪胆粉可通过抑制组胺的释放,从而减轻炎症反应。PGE2和LTB4都是花生四烯酸的代谢产物,可增高毛细血管通透性,PGE2还可使局部产生痛觉[19]。猪胆粉显著降低了小鼠气囊炎炎性渗出物中PGE2和LTB4的含量,提示猪胆粉的抗炎机制可能与减少炎症反应中PGE2和LTB4的合成有关。

[5] 余昕,欧丽兰,钟志容,等.坚龙胆抗炎活性部位筛选及抗炎机制探讨[J].中国实验方剂学杂志,2015,21(6):160-164.

参考文献

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[4] 徐红梅,魏伟.前列腺素E2与类风湿关节炎及其药物研究[J].中国药理学通报,2005,21(3):262-265.

综上所述,猪胆粉具有显著的抗炎作用,其作用机制可能与降低血管活性胺—组胺的分泌以及影响花生四烯酸代谢有关。本研究结果将为开发胆汁类动物药提供了一定的药效学基础,但其发挥抗炎作用的主要成分以及机制仍需更加深入的研究。

[6] Scalia S,Scagliarini R,Pazzi P.Evaluation of ursodeoxycholicacid bioavailability from immediate-and sustainted-release preparations using gas chromatography-mass spectrometry and high-preformance liquid chromatography[J].Arzneimittelforschung,2000,50(2):129-134.

1.1.3 试剂 角叉菜胶(美国Sigma公司),地塞米松磷酸钠注射液(石药集团欧意药业有限责任公司),小鼠前列腺素(PGE2)试剂盒、组胺试剂盒、白三烯(LTB4)试剂盒均购自北京冬歌博业生物公司。

1.2.3 对棉球所致小白鼠肉芽肿的影响 取健康昆明小鼠50只,雄性,18~22 g,然后分别灌胃给高、中、低不同剂量的猪胆粉及空白对照组(蒸馏水)和阳性对照组(地塞米松)5 mg/kg,在灌胃之前用赛拉嗪将小鼠麻醉后,背部剪毛消毒,切一个 0.5 cm 的小口,从切口向两侧腋下各植入一个 5 mg 重的灭菌棉球,最后将皮肤缝合。从手术当日开始连续给药 7 d,每日一次,每次灌胃0.25 mL,第8天脱颈处死小白鼠,切开背部的皮肤,将棉球连同周围的肉芽组织一起取出,将脂肪组织剔除。将所得棉球置于60 ℃干燥箱烘干,用电子天平精确称取棉球重量,减去原棉球重量即为肉芽组织增生的重量。

[10] 鄢海燕,邹纯才.四种动物胆粉中胆酸类成分分析及药理作用比较[J].皖南医学院学报,2012,31(4):274-277.

[9] 李泽浩.猪胆汁酸的药理作用研究(Ⅱ)—猪胆汁酸镇咳作用的初步观察[J].杭州师范学院学报,1992(6):64-66.

[11] 袁帅,赵文静,旺建伟.猪胆的药理作用和临床应用研究进展[J].中医药学报,2014,42(3):166-168.

新村沙水域综合整治工程 (如图1)的实施,启东市获得了14.25km2的土地指标,但是由于工程位置位于崇明岛中北沿,导致崇明岛鸽龙港北闸、老滧北闸由沿江水闸变成内河闸。2014年拟定的排水方法是,通过新村沙综合整治外侧新建的水闸适当降低夹泓水位,再通过鸽龙港北闸、老滧北闸向夹泓排水。但是,内河与夹泓水位差相对较小,导致排水流速慢,两座水闸的排涝能力受到严重影响。

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[12] 车锡平,徐元秀,赵东科,等.猪胆粉药理作用的研究[J].中药药理与研究,1985:206-207.

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[15] 郭双平,王文亮,翟宇强.核转录因子 NF-κB 的研究进展[J].中华病理学杂志,2000,29(5):379-380.

[16] 杨倩,史万玉,赵驻军,等.小鼠子宫内膜细胞炎症模型的建立[J].河北农业大学学报,2011,34(6):87-90.

[17] 田梦悦,刘宝京,代飞,等.LPS致奶牛蹄真皮细胞炎症模型的建立[J].河北农业大学学报,2017,40(5):90-93.

例3中的“highly likely”不仅表达极大的可能性,还透露出一种积极的主观上的高度期待,而例4中的“likely”却表达一种负面的推测,暗示“一带一路”倡议的一种消极的可能性。这种差异也表现在“基于证据或表象的假定”(evidence/appearance-based postulation)的使用上,例如:

[18] 薛瑞,苗一非,杨吉春,等.前列腺素E2对免疫细胞及炎症相关疾病的调控作用[J].生理科学进展,2011,42 (3):165-168.

(3)创新一些学生喜闻乐见的工作方法或活动,将微信公众号等引入工作。发掘有特长老同志,将有摄影特长的老党务工作者邀请前来做宣讲,引导学生关注其微信公众号,计划邀请老职工做好爱美爱笑(校)的报告,感染带动一片,弘扬校园美、祖国美,让学生具有一双发现美的眼睛,配合书香校园。

 
张程,郝满良
《河北农业大学学报》2018年第02期文献

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