钩吻又名断肠草、山砒霜、野葛等，为马钱科胡蔓藤属植物胡蔓藤Gelsemium elegans Benth.的全株，因毒性巨大，民间一直以外用为主，主治湿疹、痈肿、体癣、跌打损伤、风湿痹痛、神经痛等［1］。钩吻毒性成分主要为吲哚类生物碱［2］，然吲哚类生物碱也有着独特的生物活性，现代药理实验也表明其对肿瘤、疼痛、炎症、免疫、皮肤病等的治疗发挥着重要作用［3-5］。但由于其治疗量和中毒量非常接近，安全指数较小，不乏中毒的临床报道［6］，大大限制了钩吻在临床上的应用。因而，如何降低钩吻的毒性，同时保持其药理活性，对于提高钩吻临床应用的安全性具有十分重要的意义。本研究旨从配伍减毒角度阐明钩吻减毒存效的有效方法。

1 材料

1.1 药品与试剂 钩吻碱甲对照品（由我院实验室自制，氢谱、碳谱、核磁共振和质谱数据与文献比较确认纯度大于99.9%）；钩吻（Gelsemium elegans）采自福建省龙岩市胡蔓藤种植基地；玉叶金花（Mussaenda pubescens）生药采自福建省福州市郊外；薄荷（Mentha haplocalyx Briq.）、鱼腥草（Houttuynia cordata Thunb.）购于福建中医药大学国医堂医院。均经福建中医药大学王河山老师鉴定。无水乙醇、醋酸钠、冰醋酸、氯仿、溴甲酚绿等均为分析纯。

1.2 实验仪器 紫外-可见分光光度计（UV-9100型，北京瑞利分析仪器公司）；电子分析天平（FA20004N型，北京赛多利斯天平有限公司）；旋转蒸发仪（RE-52型，上海亚荣生化仪器厂）；数显恒温水浴锅（HH-S型，上海锦屏仪器仪表有限公司）；中草药粉碎机（FY135型，天津市泰斯特仪器有限公司）；超声波清洗器（KQ-500E型，昆山市超声仪器有限公司）。

1.3 实验动物 健康昆明种6～8周龄小鼠，雌雄各半，体质量（20±2）g，由福建医科大学实验动物中心代购，购于上海斯莱克实验动物有限责任公司，实验动物许可证号：SCXK（沪）2012-0002。

另外，APA与表层沉积物pH值显著负相关(r=-0.634，p=0.036)。说明对于碱性磷酸酶而言，并非碱度越高其活性越强，保持其活性的碱度存在一定的阈值。

2 方 法

2.1 药物制备

我们国家在贸易上发展快速，产品多层次化、多样化、高精尖化，在产品升级改造过程当中，应继续增加其产品的附加值，对产品的新加工力度不断加强，实现全线产品的升级改造，将更多的高精尖技术融合到我们的传统产业当中，加大更多的研发投入，尤其是自主知识产权的开发，要掌握更多的核心技术。例如我们国家正大力投入的芯片技术，增加其投入和科技含量，树立自己的品牌，不断加大生产过程中贸易投入产品的比重，同时减少国产投入的比重，来避免人民币汇率波动以及相应的金融工具改变对出口产品价格的影响，升级改造产品结构就是要提升产品的价格竞争力以及科技含量竞争力。

2.1.1 钩吻水煎液制备 取同一植株钩吻药材干品 10 g，水煎煮 2次，每次 30 min，合并滤液，浓缩并转移定容至10 mL，即得Ⅰ提取液，浓度为1 g／mL（以钩吻生药量计）。

2.1.2 钩吻醇提液制备 取同一植株钩吻药材干品10 g，置圆底烧瓶中，乙醇回流提取2次，每次30 min，合并上清液，回收乙醇，减压浓缩并转移定容至 10 mL，即得Ⅱ提取液，浓度为 1 g·mL-1（以钩吻生药量计）。

电力安全工器具的管理需要资金和人员的投入的，对安全工器具管理资金投入很少的时候，就会使得安全工器具的存放环境得不到保障，安全工器具管理室、有干燥功能的存放柜等存放设施等配置不到位；要对电力安全工器具的功能、特性等十分的了解，这样才会更好的管理安全工器具，但是在人员的配置上不是很合理，其知识、能力有限，往往难以满足电力安全工器具管理的要求。

2.1.3 钩吻配伍玉叶金花液制备 取同一植株钩吻药材干品10 g、玉叶金花药材干品10 g，水煎煮2次，每次30 min，合并滤液，浓缩并转移定容至10 mL，即得Ⅲ提取液，浓度为 1 g·mL-1（以钩吻生药量计）。

2.1.4 钩吻配伍鱼腥草、薄荷液制备 取同一植株钩吻药材干品10 g、鱼腥草药材干品5 g、薄荷药材干品5 g，水煎煮 2次，每次 30 min，合并滤液，浓缩并转移定容至10 mL，即得Ⅳ提取液，浓度为1 g／mL（以钩吻生药量计）。

2.1.5 缺钩吻药材的中药液制备 称取玉叶金花药材干品 10 g，水煎煮 2次，每次 30 min，合并滤液，浓缩并转移定容至10 mL，即得Ⅴ提取液，浓度为1 g／mL（以玉叶金花生药量计）；称取鱼腥草药材干品5 g、薄荷药材干品 5 g，水煎煮2次，每次30 min，合并滤液，浓缩并转移定容至10 mL，即得Ⅵ提取液，浓度为1 g／mL（以鱼腥草、薄荷生药量计）。2.2 钩吻不同配伍方式总生物碱的含量测定

2.2.1 标准曲线建立 参照文献［7］中的方法，精密称取钩吻碱甲对照品约0.01 g，加入少量1 mol／L HCl溶解，用无水乙醇定容于10 mL容量瓶中，摇匀；分别精密吸取此对照品溶液 10、15、30、50、60 μL置于分液漏斗中，挥干乙醇，然后分别加入pH为4.0的醋酸-醋酸钠缓冲溶液5.0 mL，加入0.5 mL溴甲酚绿酸性染料溶液，摇匀；加入7.0 mL氯仿萃取，在40 min时终止反应，将氯仿层放出，在410 nm处测定吸光度，进行线性回归分析建模。

2.3.2 急性毒性试验 将24只小鼠随机分成3组：钩吻组（给药剂量为预试Dm剂量，下同）、钩吻配玉叶金花组、钩吻配鱼腥草、薄荷组，每组8只。用苦味酸标记，试验前禁食不禁水24 h，然后将各组小鼠按照2.3.1中计算所得的剂量进行一次性灌胃给药。观察并记录小鼠24 h内的中毒症状和死亡情况。

2.2.3 钩吻不同配伍液中总生物碱含量测定 分别精密移取Ⅲ、Ⅳ提取液各0.2 mL置于分液漏斗中，按2.2.1项下的方法显色，测定吸光度值，计算总生物碱含量。

2.2.4 缺钩吻药材提取液的干扰吸收研究 分别精密移取Ⅴ、Ⅵ提取液各0.2 mL置于分液漏斗中，按2.2.1项下的方法显色，测定吸光度值，以确定是否存在干扰吸收。

2.3 钩吻不同配伍方式的小鼠急性毒性研究

喜姑答应着，赶紧换了一件衣服，出门一瞧，宝刚爹早已不见了踪影。她径直往香娭毑家里走去。老远就看见香娭毑坐在屋前小坪里，与她坐在一块的，还有桂娭毑，桃娭毑，这让喜姑颇感意外。

2.3.1 急性毒性预试验 目的在于先确认引起100%死亡率（Dm）的剂量。取小鼠16只，随机分成4 组，每组 4 只，禁食 24 h，自由饮水。按 4、2、1、0.5 g／kg的剂量分别给4组小鼠一次性灌胃给药钩吻水煎液。观察并记录小鼠24 h内的中毒症状和死亡情况。

2.2.2 钩吻单煎液中总生物碱含量测定 分别精密移取Ⅰ、Ⅱ提取液各0.2 mL置于分液漏斗中，按2.2.1项下的方法显色，测定吸光度值，计算总生物碱含量。

2.4 钩吻配伍玉叶金花的减毒存效研究

3.2.2 急性毒性实验 钩吻不同配伍的急性毒性试验结果表明：小鼠给予钩吻1 g／kg时，全部死亡，但钩吻配伍玉叶金花、钩吻配伍鱼腥草、薄荷后，小鼠死亡率均下降至87.5%，且死亡时间亦明显延长，与钩吻组比较有显著性差异（P＜0.05）。综合3.1.2项下研究结果，选用钩吻配伍玉叶金花进一步考察其减毒存效的研究。

几经勘测，刘雁衡找到那条夹巷。在这过程中，警察局的人都好奇地看着这个赤色疑犯，手执石警官的那一管古箫，态度闲适地走来走去。

公众参与是避免决策失误的有效工具，也是规划水资源论证的重要内容。目前，规划水资源论证的公众参与面不广，参与方式方法有待进一步拓展。一是规划水资源论证公众参与往往沿袭建设项目水资源论证公众参与的做法；二是规划水资源论证公众参与面还不够广泛，采用的方法比较单一，仅限于问卷调查、专家审查等，收到的效果相对有限；三是公众参与缺乏明确具体的规定与程序，这使得规划水资源论证公众参与在实际工作中缺乏约束性，带有一定盲目性，往往工作不够到位，甚至流于形式。

2.4.2 钩吻不同配比玉叶金花的急性毒性实验将32只小鼠随机分成4组：钩吻组、钩吻配玉叶金花 1∶1 组（配伍Ⅰ组）、钩吻配玉叶金花 1∶2 组（配伍Ⅱ组）、钩吻配玉叶金花1∶3组（配伍Ⅲ组），每组8只。用苦味酸标记，试验前禁食不禁水24 h，然后将各组小鼠按0.875 g／kg给予Ⅲ、Ⅶ、Ⅷ水提液进行一次性灌胃。观察记录小鼠24 h内的中毒症状和死亡情况。

2.4.3 钩吻不同配比玉叶金花的镇痛实验 将20只小鼠随机分成4组：生理盐水组、钩吻组、配伍Ⅱ组、配伍Ⅲ组，每组8只。用苦味酸标记，钩吻组、钩吻配玉叶金花组分别按0.5 g／kg灌胃给药，1 h后，每只小鼠腹腔注射0.6%醋酸溶液0.1 mL／10 g。观察并记录注射醋酸溶液后15 min内小鼠因疼痛扭体的次数。

统一思想，凝聚力量，抓好食品药品安全监管工作。第一师阿拉尔市位于新疆维吾尔自治区南部，师市食品药品监管局紧紧围绕社会稳定和长治久安总目标，在做好维稳值班工作的前提下，高度重视食品药品安全工作，及时对食品药品安全工作进行安排部署，落实职责，实现对食品药品安全的齐抓共管，让人民群众吃得放心，不因食品药品安全问题影响社会和谐稳定。

图1 钩吻碱甲标准曲线图

3 结 果

3.1 钩吻不同配伍方式总生物碱的含量测定

4.1 钩吻分别配伍玉叶金花、薄荷与鱼腥草后均可在一定程度上降低钩吻总生物碱含量，降低小鼠死亡率，延长小鼠死亡时间，其中钩吻配伍玉叶金花减毒作用尤为明显。

3.1.1 标准曲线绘制 以钩吻碱甲对照品含量为横坐标，以吸光度为纵坐标，进行线性回归，得到回归方程：Y＝0.0233X＋0.2228（r＝0.999 0）。 结果表明当钩吻碱甲对照品含量在10～60 μg，吸光度与对照品含量呈现良好的线性关系。

3.1.2 不同配伍方式总生物碱的含量测定 钩吻单煎液、不同配伍液中总生物碱的含量测定结果显示：钩吻配伍鱼腥草、薄荷总生物碱含量较醇提液有所降低；钩吻配伍玉叶金花后总生物碱含量较钩吻水煎液、醇提液均明显降低，而缺钩吻药材的提取液几乎没吸收。可见，钩吻不同配伍方式均可在一定程度上降低其总生物碱含量，尤其是钩吻配伍玉叶金花。结果见图2。

图2 不同配伍方式钩吻总生物碱含量测定

3.3.2 不同配比的急性毒性试验 钩吻不同配比的急性毒性结果表明：钩吻、玉叶金花合用，随着配比的增加，小鼠死亡率大幅降低，综合3.3.1项结果可知，钩吻配伍玉叶金花后可达到“减毒”作用。

3.2.1 急性毒性预实验 急性毒性预试验结果表明：钩吻不同剂量给药后，小鼠出现痉挛、惊厥、跳跃，最后呼吸衰竭而死，死亡时间均在给药后0.5 h内。当钩吻剂量≥1 g／kg时，小鼠死亡率为100%，故确定钩吻的Dm剂量为1 g／kg，进行下一步急性毒性实验。

2.4.1 钩吻不同配比玉叶金花对总生物碱含量的影响 参照2.1.3项“钩吻配伍玉叶金花液制备”分别制备钩吻∶玉叶金花 1∶2、1∶3 提取液，分别得浓度为1 g／mL的Ⅶ、Ⅷ水提液（均以钩吻生药量计）。总生物碱含量测定：分别精密移取Ⅰ、Ⅲ、Ⅶ、Ⅷ提取液0.2 mL置于分液漏斗中，按2.2.1项下的方法显色，测定吸光度，计算总生物碱含量。

表1 钩吻的急性毒性预试验

剂量 ／（g／kg） 死亡数 ／只动物数／只4 2 1 0.5 4 4 4 4 4 4 4 2死亡率／%100.0 100.0 100.0 50.0

表2 钩吻不同配伍的急性毒性试验（x±s）

注：与钩吻组比较，1） P＜0.05。

死亡时间／min 24.80±5.07 35.50±8.851）33.25±1.711）组 别钩吻剂量 ／（g·kg-1） 动物数／只 死亡数／只组钩吻配伍玉叶金花组钩吻配伍鱼腥草、薄荷组1 1 1 8 8 8 8 7 7死亡率／%100.0 87.5 87.5

3.3 钩吻配伍玉叶金花的减毒存效研究

3.3.1 不同配比对总生物碱的影响 钩吻不同配比的总生物碱含量测定结果表明：钩吻、玉叶金花合用，随着配比的增加，总生物碱含量降低，见图3。

图3 不同配比对钩吻总生物碱含量的影响

3.2 钩吻不同配伍方式的小鼠急性毒性研究

仿真时考虑了0.18μm CMOS后端工艺对光子量子效率的影响，在SPAD器件上方分别设置了实际厚度为4.63μm 的SiO2介质层和0.6μm 的SiN钝化层，模拟了入射光子在SPAD器件上方介质层和钝化层中的折射与吸收情况[8-9]，从而获得更加准确的量子效率η(λ)。

表3 钩吻不同配比的急性毒性试验

组别钩吻组配伍Ⅰ组配伍Ⅱ组配伍Ⅲ组剂量 ／（g·kg-1）0.875 0.875 0.875 0.875动物数／只 死亡数／只8 8 8 8 7 5 4 1死亡率／%87.5 62.5 50.0 12.5

3.3.3 不同配比的镇痛试验 钩吻与玉叶金花不同配比组的镇痛结果表明：给药组与生理盐水组比较，扭体次数显著降低（P＜0.01或＜0.05），且钩吻配伍玉叶金花（1∶2）组与钩吻组小鼠醋酸扭体次数差异无显著性（P＞0.05），表明钩吻配伍玉叶金花后仍保留镇痛作用，但镇痛效果随玉叶金花比例增加而减弱。

图4 钩吻与玉叶金花不同配比组小鼠醋酸扭体次数（x±s）

4 结 论

2.中国参与国际税收征管协作方式较单一。《多边公约》规定的国际税收征管协作形式包括国际税收情报交换、税款追缴和文书送达，这三种协作方式共同作用，形成国际社会打击国际逃避税的强大征管网络和合力。基于国内税收征管能力的考虑，中国国内税法中目前仅引入国际税收情报交换的协作形式，其他两种协作形式暂时排除在外，这在某种程度上影响中国参与国际税收征管合作的广度和深度，制约中国参与国际税收征管合作打击国际逃避税的影响力。

学生笔记的目的是为了记录课程内容中的有意义信息，并对之进行编码而实现对新知识的同化建构。三次笔记模型，是根据学生的学习阶段将笔记分成三个阶段，即第一次笔记(Notes for the First time)，第二次记笔记(Notes for the Second time)，第三次记笔记(Notes for the Third time)，简称(FST)。三次笔记模型能帮助学生对课程内容的信息贮存与编码，帮助学生对课程内容的同化建构，帮助学生对课程内容的元认知。这种笔记的方法，几乎适用于一切课型，是分析、总结与反思相结合的有效方法。

4.2 钩吻配比不同比例玉叶金花（1∶1、1∶2、1∶3）后，随着配比的增加，总生物碱含量降低，小鼠死亡率亦大幅降低，达到“配伍减毒”的效果，且保留明显的镇痛作用，达到“存效”的效果。

4.3 中药配伍减毒增（存）效是中医药学的特色和优势之一。钩吻为剧毒植物，配伍玉叶金花后能减缓其毒性，保留其镇痛药效，但配伍解毒机制有待进一步深入探讨。

2.3 MS不同组分对应终点事件10年发生情况将基线状态下的研究对象按照MS诊断标准，分成5个不同组分，MS＝0代表不符合MS任何1个诊断条件，MS＝1代表只满足MS基本腰围诊断1个条件，MS＝2代表满足MS基本腰围诊断且合并其他4个条件任意1个，MS＝3代表满足MS基本腰围诊断且合并其他4个条件任意2个，MS≥4代表满足MS基本腰围诊断且合并其他4个条件任意3个及以上。以最低暴露水平组MS＝0为对照，计算各暴露水平的相对危险度，结果显示冠心病事件、缺血性脑卒中和出血性脑卒中，均随着MS组分的增多RR值增大，MS组分与终点事件之间存在剂量效应关系（表 3）。

参考文献：

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