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肿瘤坏死因子-α与强直性脊柱炎中医辨证分型相关性的研究

更新时间:2016-07-05

强直性脊柱炎(AS,ankylosing spondylitis)是一种以骶髂关节、脊柱关节和肌腱附着点慢性炎症为特征的慢性、周身性免疫性疾病[1]。AS主要造成脊柱的疼痛和僵硬,受累关节不可避免地发生进行性融合,严重者可发生关节强直和畸形,造成患者残疾,且患者通常发病隐匿,一旦发病难以逆转。迄今为止,AS的发病机制尚不十分明确。大量研究表明,AS的发病与许多炎症细胞因子的异常表达密切相关[2-4]。祖国医学根据临床表现把AS归属于“痹”病范畴,因主要以累及脊柱为主,临床早期常称为“骨痹”,晚期称为“龟背风”、“竹节风”。中医本病多认为肾督亏虚、肝肾不足,复感外邪,内外合邪,阳气不化,邪气内盛,影响筋骨的荣养淖泽而致脊柱伛偻。

使用统计学软件SPSS17.0对数据进行处理,计量与计数资料分别采用(±s)和(%)形式表示,两组资料分别行t检验与χ2检验,P<0.05,差异有统计学意义。

肿瘤坏死因子-α(TNF-α,tumor necrosis factor-α)是一种具有杀伤肿瘤细胞能力的促炎细胞因子,其由单核巨噬细胞产生,并在炎症反应、免疫调节中发挥重要作用。TNF-α是公认的在AS骶髂关节中介导炎症的一种关键细胞因子,过量的血清TNF-α表达可以导致侵袭性、破坏性滑膜炎的发生[5]。研究主要检测TNF-α在AS患者的疾病活动期、稳定期及各中医辨证分型血清中的浓度,了解TNF-α血清浓度水平变化与疾病活动及各AS中医分型相关性,探寻能否把TNF-α浓度作为AS中医分型和疾病活动的预测因子。

1 材料与方法

1.1 主要试剂和仪器

DAS-ELISA检测试剂盒(美国Agida公司),TNF-α试剂盒(上海酶联生物科技有限公司),台式高速离心机(德国Eppendorf公司),超低温冰箱(日本SANYO公司)。

1.2 临床资料

实验组:选取2016年6月—2017年6月六安市人民医院住院和门诊AS患者68例,年龄18~40岁,平均年龄(28±9)岁,其中男性65例,女性3例;所有病例HLA-B27(人类白细胞抗原B-27)检测均为阳性,符合1984年美国风湿病学会修订的纽约标准,将检测无肝肾疾病、自身免疫性疾病、恶性肿瘤、感染及血液系统疾病。健康对照组:30例,年龄20~38岁,平均年龄(27±8)岁,其中男性28 例,女性2例;所有对照组成员HLA-B27检测均呈阴性,无免疫性疾病,无高血压、糖尿病、冠心病等慢性疾病,C型反应蛋白(CRP,C-reactive protein)、 红细胞沉降率(ESR,erythrocyte sedimentation rate)、血脂、血糖、肾功能、肝功能检测指标均在正常参考值范围内。

1.3 实验分组

强直性脊柱炎疾病活动性指数(BASDAI,bath AS disease activity index)评分总分0~10分,根据BASDAI评价[6],把AS患者分为稳定组和活动组,稳定组评分≤4,活动组评分>4。根据患者临床症状进行中医辨证分型[7],将AS患者分为:风湿热痹组、风寒湿痹组和肝肾亏虚组。

1.4 实验方法

[5] Goldring S R.Pathogenesis of Bone and Cartilage Destruction in Rheumatoid Arthritis[J].Rheumatology,2003,42(Suppl 2):1-6.

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1.5 统计学分析

研究发现AS活动期和稳定期患者体内血清TNF-α水平均显著高于健康对照组,AS 活动期患者血清TNF-α水平显著高于AS稳定期患者,其差异有统计学意义(p<0.01)。上述结果与彭琪彦[12]研究相符。这说明TNF-α水平与AS 疾病活动具有相关性,可以作为判断AS急性期和缓解期的参考指标。

2 结果

2.1 各组间TNF-α比较

各组间TNF-α的检测结果如表1所示。活动组、稳定组和对照组中TNF-α质量浓度分别为(315.82±36.82)pg/mL、(120.35±20.12)pg/mL、(68.56±16.21)pg/mL,因此,活动组和稳定组患者血清TNF-α水平均显著高于正常对照组,具有统计学意义(p<0.05)。

表1 各组之间的血清TNF-α比较(x±s)

Table 1 Serum TNF-α comparison betweenvarious groups(x±s)

组别例数TNF-α质量浓度/(pg·mL-1)活动组45315.82±36.82稳定组23120.35±20.12对照组3068.56±16.21

2.2 各分型间TNF-α比较

因此推测该病稳定期中医证型以肝肾亏虚为主,活动期中医证型以风湿热痹、风寒湿痹为主。根据实验的研究结果,可初步将AS中医辩证分为二型,即活动期和稳定期。AS活动期的主要特征为:正气不足,正虚则邪自内生,湿、热、痰、瘀不一而足,间或有感触热毒之邪。临床表现包括:夜间下背部出现明显疼痛,睡眠质量受影响,病情严重者会在睡眠中痛醒,晨僵加重,持续时间越来越长,不同症状与体征出现较快。可突然出现腰骶疼痛,有时痛的比较严重,有时上窜胸颈,有时下趋大腿足跟,甚至活动受限,生活不能自理。兼见郁怒烦躁,心烦起急,口干舌燥,便干溲赤,或有低热,舌苔薄白或薄黄,脉象弦数。AS稳定期是在原本肾虚的体质上,余热未清,有阴虚、阳虚2种表现。可表现为下腰背疼痛缓解或消失,晨僵缓解、偶可加重,但加重较缓慢,各种症状与体征变化不大,并呈稳定趋势,伴口干、烦躁,舌质红,苔薄白或无苔,脉沉细。

表2 各分型之间的血清TNF-α比较(x±s)

Table 2 Serum TNF-α comparison betweenvarious groups (x±s)

组别例数TNF-α质量浓度/(pg·mL-1)风湿热痹13338.23±40.20风寒湿痹34305.49±37.56肝肾亏虚21125.67±30.62对照组3068.56±16.21

3 讨论

强直性脊柱炎是一种慢性、系统性免疫疾病。中医认为AS的病位在肾、骨。肾气虚是致病之本,肾主骨生髓,督脉行于背正中,总督一身之阳气,肾气不足,骨髓不充,督脉失养。故腰膝酸软疼痛。 “腰者肾之府,转摇不能,肾将惫矣”。TNF-α是一种重要的促炎细胞因子,其可通过诱导Dickkopf-1(DKK-1)的表达而促进骨吸收,DKK-1会抑制WNT信号通路,并增强核转录因子-KB受体激活物配体的表达,诱导破骨细胞生成或增强破骨细胞功能,造成炎症性骨破坏[9-10]。此外,TNF-α在患者的滑膜、滑液和血清中显著增加,导致骨关节的持续损伤[11]

2.3.1 Box-Behnken模型建立及试验结果。通过响应面设计Box-Behnken对GASP提取率建立数学模型,优化提取工艺参数,共有17个试验点,12个分析因子,5个零点。以分析因子为自变量在A、B、C构成三维顶点;零点为区域的中心点。零点试验重复5 次,用以估算试验误差[20]。以GASP提取率为响应值,试验结果见表2。

采用SPSS13.0软件进行数据处理,所有实验数据均表示为以均数±标准差(x±s)。组间差异比较采用t检验(student′s t-test)或者单因素方差分析(one-way ANOVA)。p≤0.05认为具有统计学差异。

研究表明在中医分型中患者血清TNF-α水平风湿热痹>风寒湿痹>肝肾亏虚>对照组,其中风湿热痹组和风寒湿痹组TNF-α水平均高于肝肾亏虚组,风湿热痹组、风寒湿痹组和肝肾亏虚组均高于对照组,其差异均具有统计学意义。风湿热痹组血清TNF-α水平高于风湿热痹组,但无显著性差异,这说明风湿热痹、风寒湿痹是AS 疾病活动的主要中医辩证分型,肝肾亏虚是AS 疾病稳定期的主要中医辩证分型,这与夏璇等[13]的临床经验辩证分型研究相符。表明疾病早期(风湿热痹、风湿热痹)以邪实为主,疾病处于活动期,TNF-α血清水平高,人体炎症反应明显;痹病日久,气血耗伤,损及肝肾,肝肾阴虚,疾病处于稳定期,机体炎症反应减弱。

各分型间血清TNF-α水平比较见表2。风湿热痹组、风寒湿痹组、肝肾亏虚组和对照组中TNF-α质量浓度分别为(338.23±40.20)pg/mL、(305.49±37.56)pg/mL、(125.67±30.62)pg/mL、(68.56±16.21)pg/mL。由此得出,各分型AS患者血清TNF-α水平均高于正常对照组,有统计学意义(p<0.05)。其中风湿热痹组和风寒湿痹组均高于肝肾亏虚组,肝肾亏虚组高于对照组,其差异均具有统计学意义(p<0.05),而风湿热痹高于风寒湿痹组,但无显著性差异(p>0.05)。

[4] 黄建武,黄建华,黄影.肿瘤坏死因子-α在强直性脊柱炎活动期患者中的表达[J].中医正骨,2013,25(11):23-25.

研究结果提示血清TNF-α水平可以作为AS疾病活动的判断指标,同时也可以作为中医辩证分型依据之一,指导AS中医辨证分型。

参考文献

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抽取各组成员外周血4 mL,离心10 min后,收集血清置于试管,并储存-80 ℃冰箱待用。采用DAS-ELISA法检测各组患者血清TNF-α浓度水平[8]

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在古巴时,开拍之前我会和拍摄对象一起抽支雪茄。在越南一个偏远的民族村落,我和村落首领一起喝茶或吃水果。我乐于花几个小时甚至几天时间和人们畅谈。

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李兴锐,葛显应,谭悦,刘童,陆继娣
《甘肃科学学报》 2018年第02期
《甘肃科学学报》2018年第02期文献

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