良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasin,BPH)是引起中老年男性排尿障碍的一种常见良性疾病。大约20%的患者最终需要外科手术切除增生前列腺组织来缓解下尿路症状。课题组前期对犬2μm激光前列腺切除术后前列腺部尿道创面修复机制研究时发现：与膀胱颈创面相比，前列腺部尿道创面产生较少的纤维组织[1]，呈“少瘢痕”创面愈合方式；前列腺部尿道创面由创面下前列腺基底细胞增殖、迁移、覆盖创面再分化完成再上皮化过程，修复完成后，创面内存在大量前列腺上皮细胞[2-3]。创面内上皮细胞可能对成纤维细胞的功能及转归、创面瘢痕形成具有一定的调控作用。为观察前列腺部尿道创面中前列腺上皮细胞是否对成纤维细胞的功能产生影响，本研究采用前列腺上皮细胞与成纤维细胞非接触性共培养，观察前列腺上皮细胞对成纤维细胞转化生长因子(transforming growth factor-β1，TGF-β1)及平滑肌动蛋白(α-SMA)表达的影响。

DNA条形码（DNA barcoding）是利用基因组中一段公认的标准短序列进行物种鉴定的分子诊断新技术[4]。DNA 条形码具有鉴定简单、精确的特点，有明确的判断标准，其鉴定能力在多个科属药用植物的鉴定中得到了验证[5-13]。迄今，滨海白首乌及其近缘种药用植物的相关研究少有报道。本研究提取滨海白首乌及萝藦科近缘种植物DNA并测定其ITS2序列进行分子鉴定，旨在为滨海白首乌的快速准确鉴定及开发利用奠定基础。

1 材料与方法

1.1 主要试剂及细胞株 人前列腺上皮细胞(BPH-1细胞)及人成纤维细胞株(HFF-1细胞)分别购于湖南赢润生物技术有限公司和中科院上海干细胞库。DMEM高糖培养基、青—链霉素均购于美国HyClone公司，PBS缓冲液购于北京索莱宝科技有限公司，胎牛血清购于美国BI公司，Transwell insert半透膜(6.5 mm，0.4 μm)购于美国Corning Costar公司。TGF-β1、α-SMA和GAPDH一抗购于Abcam公司，二抗购于北京中杉金桥。

1.2 细胞非接触式共培养及实验分组 共培养组：把预先培养好的BPH-1细胞和HFF-1细胞消化成悬液，在Transwell半透膜上室接种BPH-1细胞悬液200 μL，然后在Transwell下室内接种HFF-1细胞悬液500 μL；对照组：在Transwell下室内接种HFF-1细胞悬液500 μL，Transwell半透膜上室不接种细胞。37 ℃、5% CO2的恒温培养箱中培养72 h。

1.3 Western blot方法检测TGF-β1 、α-SMA蛋白表达 取出Transwell半透膜上室后，刮取下室细胞(HFF-1细胞)提取总蛋白。BCA法测定蛋白浓度，取适量蛋白行十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺胶体电泳(SDSPAGE)凝胶电泳，将蛋白用湿转法转印到聚偏二氟乙烯膜(PVDF)上，封闭液封闭2 h，TGF-β1、α-SMA和GAPDH一抗4 ℃过夜，TBST洗膜，加入二抗室温孵育1 h，TBST洗膜，ECL发光显影。以Labworks软件分析结果时以GAPDH蛋白条带作为内参照，计算TGF-β1、α-SMA蛋白条带与GAPDH蛋白条带像素灰度的百分比值作为TGF-β1、α-SMA蛋白表达的相对水平。

BPH-1细胞和HFF-1细胞共培养HFF-1细胞TGF-β1及α-SMA表达结果显示：与对照组相比，共培养组HFF-1细胞TGF-β1及α-SMA表达分别减低了20%及30%，差异有统计学意义(P<0.05)。

1.4 统计学方法 采用SPSS20.0统计软件进行统计分析，数据用表示，组间比较采用t检验，P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结 果

要促进云南少数民族传统体育旅游的发展，需要将少数民族传统体育旅游资源进行转化，一是严格依据市场规律，将云南丰富的少数民族传统体育旅游资源优势转化为高速增长的旅游产业优势；二是把原始山水人文优势通过挖掘、开发、雕凿转化为人们喜爱、具有极大容量的旅游产品优势，为地方和旅游企业带来一定的经济效益。三是切实转变经济发展模式，创新商业模式，不断扩大企业市场竞争优势，将零散旅游资源进行整合，实现标准化服务，提升发展能力，抢抓“桥头堡”建设机遇。

3 讨 论

据此获得新村金矿的原生晕轴向分带序列为(自上而下)：As-Ag-Ba-Zn-Mn-Hg-Cu-W-Pb-Mo-Au-Sb-Co-Bi-Ni。典型前缘晕元素Sb等出现在分带序列的中下部，典型的后尾晕元素W、Mo出现在中部，可反映至少有两次矿化的叠加，这就意味着深部还有盲矿存在或第二个富集带[1-2]。

随着对瘢痕形成机制的深入研究，人们逐渐认识创面内上皮细胞可能对成纤维细胞的功能、转归及瘢痕形成有一定的调控作用。皮肤浅度烧伤后无或仅有轻微的瘢痕组织，而深度烧伤愈合后存在明显瘢痕组织，人们意识到真皮组织中某些上皮成分，如皮肤附件，可能引导了成纤维细胞功能表达及转归[6]。尿道修复组织工程学研究显示，当尿道损伤大时，仅采用单纯脱细胞基质修复尿道，修复段尿道很容易出现尿道狭窄并纤维化形成[7]，而接种了上皮细胞的脱细胞基质修复损伤尿道，重建尿道则无狭窄发生[8]。

伤口愈合过程中，创面常常会形成瘢痕，如何在创面修复中避免瘢痕性修复以及瘢痕预治一直是外科研究的热点和难点。以往研究发现，机体部分创面可呈现“无瘢痕或少瘢痕”愈合的创面修复方式[4-5]，对该些创面修复过程进行研究，将为瘢痕的防治提供新的视角和思路。

成纤维细胞是创面愈合的主要修复细胞，可促进胶原合成及细胞外基质形成；但修复后期成纤维细胞持续增生，又可造成创面纤维组织过度增生、细胞外基质过度沉积，导致瘢痕形成。以往的研究主要集中在受伤早期成纤维细胞被激活机理的探讨，关于伤口愈合后对成纤维细胞起抑制作用的因素的来源与机理研究甚少。

原发性甲状腺淋巴瘤(primary thyroid lymphoma,PTL)指原发于甲状腺的淋巴瘤，伴或不伴有颈部淋巴结转移，不包括其它部位淋巴瘤扩散或转移到甲状腺的淋巴瘤。根据目前报道，PLT较少见，是主要累及B族淋巴细胞的结外非何杰金淋巴瘤[1]，约占甲状腺恶性肿瘤的2%～5%，占结外淋巴瘤的1%～2.5%[2]。

细胞因子在创面修复中起到非常重要的调控作用。其中，TGF-β1是创面愈合中最重要的细胞因子，也是与瘢痕形成关系最密切的促瘢痕生成因子。修复后期，创面肉芽组织中成纤维细胞成为该时期TGF-β1的主要来源，可通过自分泌或旁分泌方式对自己进行调节，促进成纤维细胞向纤维组织转化并改建转变为瘢痕组织。而修复后期TGF-β1相对缺乏或低表达可能是创面“无瘢痕或少瘢痕”愈合发生的重要原因之一。此外，成纤维细胞在创面愈合过程中还可转化为α-SMA的肌成纤维细胞，TGF-β1可能是调节成纤维细胞转化为肌成纤维细胞的重要因子，TGF-β1可诱导α- SMA在成纤维细胞中的表达，使肌成纤维细胞的数量增加，与创伤后瘢痕的形成及其挛缩有关。

前期课题组研究显示犬前列腺切除术后前列腺部尿道创面修复完成后创面内存在大量的前列腺上皮细胞。我们推测前列腺部尿道创面中大量的前列腺上皮细胞可能影响重塑期创面内成纤维细胞的功能及转归，导致前列腺部尿道创面呈现“少瘢痕”愈合修复方式。为观察前列腺上皮细胞是否影响了创面成纤维细胞的功能及转归，我们将前列腺上皮细胞与成纤维细胞非接触性共培养后检测成纤维细胞TGF-β1及α-SMA的表达。结果显示，在含有前列腺上皮细胞的培养基中，成纤维细胞的TGF-β1及α-SMA的表达均减少，提示创面内大量前列腺上皮细胞可对创面周围成纤维细胞TGF-β1的表达调控，降低影响成纤维细胞TGF-β1的表达，减少了成纤维细胞向纤维组织的转化；此外，成纤维细胞TGF-β1的表达降低，也抑制了成纤维细胞向肌成纤维细胞转化，减少了创伤瘢痕形成及其挛缩，可能与前列腺部尿道创面产生较少胶原纤维有关，但深入机制还需进一步研究。

参考文献

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[2] 曹颖，罗光恒，罗蕾，等.2 μm激光前列腺切除术后犬前列腺部尿道创伤修复的病理组织学观察[J].临床及实验病理学杂志，2013，29(10)：1084-1088.

[3] Ying Cao，Guang-Heng Luo，Lei Luo，et al.Re-epithelialization resulted from prostate basal cells in canine prostatic urethra may represent the ideal healing method after two-micron laser resection of the prostate [J].Asian J Andro，2015,17(5)：831-838.

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[6] 陆树良，青春，刘英开，等.瘢痕形成机制的研究：真皮“模板缺损”学说[J].中华烧伤杂志，2007，23(1)：6-12.

[7] Le Roux PJ.Endoscopic urethroplasty with unseeded small intestinal submucosa collagen matrix grafts： A pilot study [J].J Urol，2005，173(1)：140-143．

[8] De Filippo RE，Yoo JJ，Atala A.Urethral replacement using cell seeded tubularized collagen matrices [J].J Urol，2002，168(4 Pt 2)：1789-1793．