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短波紫外线处理对紫背天葵采后贮藏品质的影响

更新时间:2009-03-28

紫背天葵(Gynura bicolor)多年生植物,原产于中国温暖湿润地区,整个植株呈紫绿色,叶长卵型,边缘有锯齿,叶面绿色略带紫,背面紫红色具蜡质,有光泽,具有清热解毒、润肺止咳、凉血止血、消炎散瘀、散癌消肿等功效[1-2]。紫背天葵中含有大量的黄酮和总酚,具有一定的抗氧化性,且作为一种功能性蔬菜有其特殊的生理优势,相较于其他蔬菜的营养成分更加多元化。但其蒸腾和呼吸作用旺盛,在贮藏过程中感官和食用品质下降迅速,营养物质流失严重,给采后紫背天葵的贮藏带来了极大困难,故对紫背天葵的保鲜要求需要进一步提高。

短波紫外线(ultraviolet C irradiation,UV-C)是一种波长在200~280 nm范围内的低辐射流。近年来,UV-C处理在果蔬采后贮藏、诱导提高新鲜农产品抗病性、促进功能成分合成等方面受到了重视。研究表明,低剂量的UV-C处理可以延缓生菜[3]、石榴[4]、山楂果[5]、豌豆[6]和香梨[7]等多种植物的衰老,并诱导植物提高抗病性,控制并减轻马铃薯[8]的腐烂,增加杨梅[9]、草莓[10]和苹果[11]的耐储性。

目前,国内主要运用1-甲基环丙烯(1-MCP)和植酸处理,以及气调纳米包装来延长采后紫背天葵的贮藏时间[12]。国外对紫背天葵保鲜相关研究较少,多集中于体内活性成分评价方面。同时,UV-C处理对采后水果、蔬菜保鲜的研究日益增多,但在叶菜类蔬菜中的应用研究较少,故本试验研究不同强度短波紫外线处理对紫背天葵贮藏品质的影响,以期为提高采后紫背天葵的商品性探索适宜的贮藏方法。

1 材料与方法

1.1 材料与处理

紫背天葵于2017年10月购自浙江省嵊州市浙江飞翼生态农业有限公司,采收当天运回实验室,挑选茎叶完好、无破损、无虫害的新鲜紫背天葵,随机分成4组。采用低压紫外灯(254 nm,8 W×5)作为辐照源,距离灯管下方20 cm处对紫背天葵进行辐照处理,用紫外线强度计测得辐照强度为0.145 mW·cm-2,根据不同的辐照时间设置3个辐照剂量1、3、5 kJ·m-2,辐照时将新鲜紫背天葵均匀平铺,辐照中点将紫背天葵翻面,使叶面照射均匀。以未处理组为对照(control,CK)。处理完毕后将紫背天葵放入聚丙烯(PP)保鲜盒中,套上聚乙烯(PE)保鲜袋进行挽口处理,并置于4℃的恒温培养箱中保存备用。每个处理重复3次,贮藏21 d,每隔3 d取样1次,测定各处理组的色泽、失重率、菌落总数指标,然后随机取样100 g左右,用液氮速冻后于-70℃冰箱保存,用于其他生理指标的检测。

无核白鸡心天然无籽,内源激素缺乏,自然状态下果粒平均质量4 g左右,如果不补充任何外源激素,则果粒小,商品价值低。适时补充外源激素(增大剂处理),可使果粒增大1倍左右,能大大提高商品价值。

1.2 仪器与设备

T5-8 W低压紫外灯,Philips;TN-2254紫外线强度计,泰纳TAINA;CR-400手持色差仪,日本Konica Minolta Sensing公司;Cintra404紫外—可见分光光度计,澳大利亚GBC公司;MICRO 17R台式冷冻离心机,美国Thermo公司;DK-8D电热恒温水槽,上海精宏实验设备有限公司;KQ5200DE数控超声波清洗器,昆山超声仪器有限公司;TD2102电子天平,梅特勒—托利多仪器上海有限公司;MLS-3 781L-PC高压蒸汽灭菌器,松下健康医疗器械株式会社;细菌恒温培养箱,MIR-253 SANYO Electric Co. Ltd。

1.3 方法

1.3.4 叶绿素含量的测定 采用分光光度法测定叶绿素含量[15]。取1.0 g冰浴研磨后的紫背天葵冻样置于试管中,加入20 mL 80%丙酮溶液,静置提取4 h,然后取滤纸折叠后置于漏斗中,用80%丙酮溶液润湿,再将提取液过滤到50 mL的棕色容量瓶中,用80%丙酮溶液冲洗冲洗试管数次,直至滤液和残渣中无绿色为止,最后用80%丙酮溶液定容至刻度。以80%丙酮溶液为参比调零,652 nm波长处测定提取液的吸光值,重复3次。

1.3.2 失重率的测定 采用称重法进行测定。用样品的初始重量减去贮藏过程中每次称得的重量,该差值与样品的初始重量之比。

1.3.7 丙二醛含量的测定 参考曹建康等[14]的方法并略作改动,测定丙二醛(malonaldehyde, MDA)含量。称取1 g紫背天葵冻样于10 mL离心管中,加入5 mL 100 g·L-1的TCA溶液,于4℃条件下10 000 r·min-1离心20 min,收集上清液。取2.0 mL上清液(空白对照加入2.0 mL 100 g·L-1TCA溶液),加入2.0 mL 0.67%硫代巴比妥酸溶液,混合后沸水浴20 min,分别测定450、532、600 nm波长处的吸光值。

式中,W1为样品初始重量,WF为样品贮藏第F天的重量。

1.3.3 维生素C含量的测定 采用分光光度计法对冻样紫背天葵进行维生素C(vitamin C,Vc)的测定[14]。称取2 g紫背天葵冻样,加入5 mL 50 g·L-1三氯乙酸(trichloroacetic acid,TCA)溶液进行提取。取0.5 mL上述提取液,依次加入1.5 mL 20 g·L-1TCA溶液、1 mL无水乙醇、0.5 mL 4%磷酸-乙醇溶液、1 mL 5 g·L-1邻菲啰啉-乙醇溶液、0.5 mL 0.3 g·L-1三氯化铁-乙醇溶液,在30℃条件下反应60 min,在534 nm波长处测定吸光度,根据标准曲线计算含量。

1.3.1 色泽的测定 采用手持色差仪[13]测定。将手持色差仪用白板进行校准后,对每组紫背天葵进行L*a*b*值的测定,每组记录6个点,取平均值。

1.3.5 总酚含量的测定 采用Folin-Ciocalteau方法[16]进行紫背天葵总酚含量的测定。取2 g紫背天葵冻样,加入5 mL 60%乙醇,提取液浸提2 h,于4℃条件下10 000 r·min-1离心20 min,取1 mL上清液置于25 mL的具塞试管中,然后加入3 mL福林酚试剂,摇匀静止5 min后加入6 mL 7.5%碳酸钠,用蒸馏水定容至25 mL,室温条件下暗静置2 h,于760 nm波长处测定吸光度值。

采用Excel 2003和SPSS 18.7进行数据分析,并利用邓肯式多重比较(显著水平为0.05)进行差异显著性分析。

失重率=(W1-WF/W1)×100%

Vc和叶绿素含量是叶菜类蔬菜重要营养指标。由图2-A可知,在贮藏过程中,紫背天葵Vc含量整体呈下降趋势,局部表现为波动变化,其中,各UV-C处理组的Vc含量下降速率明显小于CK,且一直维持在较高的水平。此外,5 kJ·m-2UV-C处理组的效果最好,能很好减缓Vc的损失。综上,UV-C处理能够有效地防止紫背天葵Vc含量的下降,提高其贮藏期间的营养品质。

1.3.8 菌落总数的测定 采用PCA平板计数法,参考GB 4789.2-2010食品微生物学检验[18]进行。用灭菌的小刀随机切取紫背天葵25 g,分别置于225 mL的灭菌蒸馏水中摇晃150次,然后按照10倍梯度法进行稀释,选取2~3个合适的稀释度,倒平板,每个稀释度三块平板,随后将其置于37℃培养箱中培养24 h,用菌落计数仪计算菌落数(一般选择数量在30~300个菌落的平板进行计数)。

1.3.9 超氧化物歧化酶活性的测定 采用试剂盒法,超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)试剂盒购于南京建成生物工程研究所。将紫背天葵组织于0.1 mol·L-1 pH值7.2的磷酸盐缓冲液中匀浆,制备20%匀浆液,4 000 r·min-1离心10 min后,取上清液,根据试剂盒说明书进行测定。

再有就是能不能造出设备搬货,比如说冰箱搬上楼去,我们常常跟客户讨论,再过五年,是不是中国连搬一个冰箱的人都没了?这个东西太重,赚的钱又少,怎么办呢?我们是不是研究一个工具?我们开玩笑可以找一个蜘蛛人,爬墙上去装空调,这现在只是我们的想象,但是国外已经在研究了。

1.3.10 过氧化物酶活性的测定 采用愈创木酚法[14]测定样品的过氧化物酶(peroxidase,POD)活性。取紫背天葵冻样1.0 g于10 mL离心管中,加入5 mL pH值6.8 的磷酸缓冲液,然后在4℃条件下,10 000 r·min-1下冷冻离心30 min,取上清液备用。

活性测定:反应体系包括3.0 mL 25 mmol·L-1愈创木酚溶液、0.5 mL 酶提取液和200 μL 0.5 mol·L-1 H2O2溶液。以蒸馏水为空白参比,H2O2加入时间为启动时间,每10 s记录一次反应体系在470 nm处的吸光值,连续记录1 min,重复3次。以每克果蔬样品(鲜重)每分钟吸光值变化值增加1时为一个过氧化物酶活性单位。

某“三甲”综合性医院腹腔镜手术围手术期抗菌药物预防使用情况调查及合理性评价 …………………… 陈 猛等(8):1065

由图1-B可知,在贮藏期间各UV-C处理组与CK的失重率均呈上升趋势,CK的失重率明显高于UV-C处理组。贮藏第3天时,CK的紫背天葵失重率为1.03%,1、3、5 kJ·m-2UV-C处理组的失重率依次为0.68%、0.51%、0.32%,且与CK均存在显著差异(P<0.05),但各UV-C处理组间差异不显著。表明UV-C处理能显著降低紫背天葵的失重率。

活性测定:反应液体系包含3 mL 0.1 mol·L-1 Tris-HCl缓冲液(pH值7.8)、0.2 mL上清酶液、0.4 mL 0.75%H2O2。加入反应液后迅速摇匀,立即测定其在240 nm处3 min内光吸收度值的变化。以240 nm处光吸收度值每分钟变化0.01表示一个酶活单位(U)。

1.4 数据分析

1.3.6 总黄酮含量的测定 采用分光光度法[17]测定总黄酮含量。称取紫背天葵冻样3 g,置于25 mL具塞容瓶中,用甲醇定容至刻度,然后避光静置24 h,超声(80 kHz,300 W)提取1 h后过滤。精密吸取滤液5.0 mL于25 mL的容量瓶中,加入1.0 mL 5%亚硝酸钠溶,放置6 min后再加1.0 mL 10%硝酸铝溶液,继续放置6 min,再加入10.0 mL氢氧化钠溶液,用水定容至刻度,常温放置15 min后于500 nm波长处测定吸光值,重复测定3次。

2 结果与分析

2.1 UV-C处理对紫背天葵色泽与失重率的影响

色泽和失重率是影响紫背天葵品质的外观指标。由图1-A可知,随着贮藏时间的延长,紫背天葵的L*值逐渐降低,UV-C处理组的紫背天葵L*值下降速率低于CK。贮藏第9天开始,各个处理组的L*值均开始快速下降,与CK差异显著(P<0.05),且在贮藏21 d时,各UV-C处理组的L*值均高于CK,说明低辐照剂量UV-C处理对紫背天葵采后色泽下降具有显著的抑制作用。

1.3.11 过氧化氢酶活性的测定 参考胡琼英等[19]的方法并略作改动,测定样品的过氧化氢酶(catalase,CAT)活性。酶液制备:称取紫背天葵冻样1.0 g于10 mL离心管中,加入5 mL缓冲溶液(pH值7.8),冰浴提取30 min,然后将上述提取液于4℃、10 000 r·min-1条件下冷冻离心30 min,取上清液备用。

  

图1 UV-C处理对紫背天葵L*值和失重率的影响Fig.1 Effect of UV-C treatment on L* value and weight losing rate of Gynura bicolor

2.2 UV-C处理对紫背天葵Vc及叶绿素含量的影响

超长效局麻药[EXPAREL (Bupivacaine Liposome),Pacira Pharm,USA]近期有望进入临床[25]。国内华西医院刘进教授团队也在开展相关工作。倘若局麻药的有效作用时间能够持续72h以上,能否改变现有的麻醉模式,实现以局麻为主的复合麻醉?能否一站式解决术后镇痛问题,开创以切口浸润、创面浸润,甚至无需神经阻滞的以局麻为主的多模式镇痛?值得期待!

离散事件动态系统(Discrete Event Dynamic System,DEDS)是指系统的状态由于某种事件的驱动而在一些不确定的离散时间点上发生变化,它是控制系统分析、设计和大型复杂信息处理的重要理论基础。由于其内部机制的复杂性和状态空间缺乏易操作的运算结构等特点,使得它无法用常规的数学方法来研究,所以计算机仿真实验就成了最为实用的方法之一。现阶段离散事件动态系统的研究目标是运用理论方法结合各种模型,全面反映离散事件动态系统的特性并给出针对实际问题的行之有效的解决方法。

由图2-B可知,随着贮藏时间的延长,紫背天葵的叶绿素含量逐渐降低,但各UV-C处理组的叶绿素含量下降幅度均小于CK。贮藏第21天时,1、3、5 kJ·m-2UV-C处理组叶绿素含量分别下降了25.48%、23.04%、20.49%,CK叶绿素含量下降了29.76%,各UV-C处理组与CK均差异显著(P<0.05)。表明UV-C处理可以减少贮藏过程中紫背天葵叶绿素的损失。

3)参见参考文献[1]第285页,布罗认为“由于社会的关系使某些含义成为集中的,而另一些成为分散的。”

  

图2 UV-C处理对紫背天葵Vc含量和叶绿素含量的影响Fig.2 Effect of UV-C treatment on Vc and chlorophyll contents of Gynura bicolor

2.3 UV-C处理对紫背天葵总酚及总黄酮含量的影响

总酚是抗氧化性的一个重要指标。由图3-A可知,整个贮藏过程中,紫背天葵的总酚含量呈下降趋势,各UV-C处理组的总酚含量差异不明显,但均高于CK,说明UV-C处理可以减少紫背天葵贮藏过程中总酚的损失。总黄酮也是反映蔬菜抗氧化性的一个重要指标。由图3-B可知,在贮藏期间,紫背天葵的总黄酮含量呈缓慢下降趋势,各UV-C处理组与CK间差异显著(P<0.05),且UV-C处理组的黄酮含量始终高于CK。说明UV-C处理可以减少贮藏过程中紫背天葵总黄酮的损失。

  

图3 UV-C处理对紫背天葵总酚含量和总黄酮含量的影响Fig.3 Effect of UV-C treatment on total phenolic and total flavonoids contents of Gynura bicolor

2.4 UV-C处理对紫背天葵MDA含量影响

MDA被认为是膜脂过氧化的产物,其含量是衡量膜脂过氧化的一个重要指标。由图4可知,在整个贮藏过程中,各UV-C处理组间的MDA含量差异不明显,但均低于CK。在贮藏第15天时,3 kJ·m-2UV-C处理组的MDA含量为12.62 nmol·g-1,CK的MDA含量为16.64 nmol·g-1,表明适量的UV-C处理可以抑制紫背天葵中MDA含量的积累。

2.5 UV-C处理对菌落总数的影响

菌落总数是衡量食物可否食用的一个重要指标。由图5可知,贮藏期间,CK的菌落总数逐渐上升,在贮藏第18天时,菌落总数超出了卫生安全标准的要求[5 log(CFU·g-1)][18];UV-C处理组在贮藏第21天仍未超过5 log(CFU·g-1)。各UV-C处理组前期有一个明显的杀菌过程,前3 d的菌落总数均低于0 d,其中5 kJ·m-2UV-C处理组的杀菌效果最好,菌落总数显著高于CK(P<0.05)。表明UV-C处理可以抑制紫背天葵采后贮藏过程中菌落总数的上升。

2.6 UV-C处理对采后紫背天葵活性氧代谢相关酶活性的影响

  

图4 UV-C处理对紫背天葵MDA含量的影响Fig.4 Effect of UV-C treatment on MDA content of Gynura bicolor

  

图6 UV-C处理对紫背天葵POD、CAT和SOD活性的影响Fig.6 Effect of UV-C treatment on POD, CAT and SOD activity of Gynura bicolor

  

图5 UV-C处理对紫背天葵菌落总数的影响Fig.5 Effect of UV-C treatment on total plate count of Gynura bicolor

由图6-A、B可知,UV-C处理可以诱导POD和CAT活性的上升,且5 kJ·m-2UV-C处理组的诱导效果优于3、1 kJ·m-2处理组,各UV-C处理组的POD和CAT活性均高于CK,且与CK差异显著(P<0.05)。由图6-C可知,在贮藏期间,各UV-C处理组的SOD活性呈先上升后下降趋势,CK则一直呈下降趋势。5 kJ·m-2UV-C处理组的诱导效果优于3、1 kJ·m-2 UV-C处理组,且高于CK。综上,UV-C处理能够诱导紫背天葵内活性氧代谢相关酶活性的上升,有利于清除体内活性氧。

3 讨论

UV-C处理紫背天葵可以一定程度上保持紫背天葵的贮藏品质和营养物质。本研究中,UV-C有效延缓了紫背天葵水分含量和L*值的下降,表明UV-C处理可在一定程度上保持紫背天葵的外观品质,这与Costa等[20]利用UV-C处理延缓花椰菜衰老的研究结果相似。Vc含量是叶菜类的重要营养指标之一。本试验结果表明,各UV-C处理组的Vc含量始终高于CK,这与 Vicente等[21]研究结果相似,说明利用UV-C处理能有效抑制Vc含量降低。叶绿素含量的改变是衡量植物是否衰老的重要指标,随着叶片的衰老,叶绿素含量逐渐降低。本研究中,UV-C处理组的叶绿素含量均高于CK,表明UV-C处理可有效延缓紫背天葵中叶绿素的降解,这可能是因为UV-C处理可以保护叶绿体膜完好,使叶绿体内淀粉粒形态、基粒片层结构正常,从而延缓叶绿素的降解[22]

慕课就是新兴的学习方法,它就是“互联网+教育”的形式,也是一种在线学习的方法。现在有许多的教育机构都是慕课教育的方式,这种方式能够将许多处在不同地方的人们聚集在一起学习,通过视频的方式。他们可以在线交流,在线回答问题,解决了许多的实际问题。例如有事情不能及时赶到学校或是有个地方听一位资深学者的课,如果没有慕课,那么我们只能选择放弃,而慕课就很好地解决了这个问题,它可以在线观看,这就解决了许多在现实中办不到的事情。

本研究的目的是通过标准矩张量反演(即,假设为点源),探讨选定强震的机制中非双力偶的成分并检查其由于忽略地震记录中有限震源效应而可能出现的偏差。因此,我们评估了有限震源效应对地震记录图的影响(通过二阶矩描述),随后将其从数据中去掉。这些记录,通过这种方式校正了震源有限性后,应是与标准矩张量检索匹配的数据。Adamová和Šílen(2010)对该方法作了详细的描述,由此机制中假非双力偶部分的减少通过对合成数据使用二阶矩方法来证明。

总酚和总黄酮是体现抗氧化性的重要指标。本试验结果表明,UV-C处理组的紫背天葵总酚和总黄酮含量均高于CK,且5 kJ·m-2UV-C处理组的总黄酮含量最高,这与马素娟[23]、梁敏华等[24]的研究结果相似,说明UV-C处理可促进果蔬贮藏前期酚类物质和黄酮类物质的积累,延缓贮藏后期总酚和总黄酮含量的下降,维持果蔬整个贮藏期间的营养品质。菌落总数是衡量蔬菜果实可否食用的卫生指标。本研究中,UV-C处理组的菌落总数明显低于CK,说明UV-C处理具有抑制细菌生长以及杀灭细菌的作用,这与尹明安等[25]应用低剂量UV-C处理苹果以提高其采后贮藏品质的研究结果相似。UV-C辐照通过直接改变微生物DNA杀死病原菌,进而延长果蔬采后货架期。

时间名词儿化,也较为频繁。彭鲜红女士根据电脑初步查询得出以下结果:“今儿”一词出现约229次,“明儿”一词约169次,“昨儿”约为108次,“前儿”约出现98次,“后儿”则约为13次。如:

MDA累积会损伤果蔬的生物膜,使膜蛋白发生聚合,同时降低膜脂的不饱和度而引起膜流动性降低,造成细胞膜系统的损害,加速果蔬的衰老[26]。本研究中,3 kJ·m-2UV-C处理组的MDA含量低于1、5 kJ·m-2UV-C处理组,但1 kJ·m-2UV-C处理组与5 kJ·m-2UV-C处理组的MDA含量差异不明显,且各UV-C处理组的MDA含量均低于CK,说明适量的UV-C处理对紫背天葵MDA含量的积累有很大的抑制作用。姜天甲等[27]发现香菇在贮藏期间,0.5、2.0和4.0 kJ·m-2UV-C处理可抑制MDA含量的上升,这与本研究结果一致。SOD、POD、CAT是细胞抵御活性氧伤害的酶保护系统[28-30],可诱导果蔬产生抗病性。Pombo等[31]用4.1 kJ·m-2 UV-C辐照草莓,发现其POD活性提高,且增强了草莓对灰霉病的抗性。本研究中,随着贮藏时间的延长,CK的紫背天葵SOD、POD、CAT活性均呈先上升后下降的趋势;UV-C处理组前期,紫背天葵POD、CAT活性均升高,这可能与其对UV-C辐照敏感有关,但随着贮藏时间的延长,POD和CAT活性逐渐降低,清除自由基的能力下降,这与郑杨等[32]研究UV-C对韭菜采后贮藏品质及活性氧代谢相关酶影响的结果相似。Barka[33]也发现UV-C辐照可提高活性氧相关酶的活性。

4 结论

本研究以色泽、失重率、总酚、总黄酮、Vc、MDA含量、菌落总数、CAT、SOD、POD活力为指标,综合评价不同辐照剂量UV-C对紫背天葵采后品质、活性氧代谢相关酶的影响及其保鲜效果,发现5 kJ·m-2UV-C处理组效果最好。UV-C处理能有效延缓采后紫背天葵的失重率和色泽变化,保持紫背天葵的营养品质,抑制MDA含量和菌落总数的上升,提高相关抗氧化酶(SOD、POD、CAT)的活性,从而提高采后紫背天葵的贮藏品质和商品性。

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施衡乐,吴伟杰,郜海燕,韩延超,陈杭君,刘瑞玲
《核农学报》 2018年第07期
《核农学报》2018年第07期文献

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