乳腺癌是全球范围内发病率最高的女性恶性肿瘤，也是女性因癌症死亡的首要病因[1]。乳腺癌的复发和转移是造成疾病死亡率较高的原因，病灶内癌细胞恶性增殖及侵袭是与肿瘤复发和转移直接相关的病理特征，但具体的调控机制仍未明确。高迁移率族蛋白A1(high mobility group protein A1，HMGA1)是高迁移率族(HMG)蛋白家族的成员，能够作用于多种基因的启动子及增强子来调控相应基因的表达，进而产生相应的生物学效应[2]。已有研究证实，在离体培养的乳腺癌细胞中，抑制HMGA1的表达能够使细胞的增殖和侵袭能力减弱[3]，由此提示HMGA1参与了乳腺癌细胞增殖和侵袭行为的调控。但目前关于乳腺癌病灶内HMGA1对肿瘤增殖、侵袭病理特征的影响尚未明确。在下列研究中，我们具体分析了乳腺癌病灶及血清中HMGA1含量与肿瘤病理特征的相关性。

随着高职院校招生规模的不断扩大，班级规模也不断扩大，多保持在40-50人左右。在这样的班级上课，因学生个性差异、学习能力、知识水平等方面的差异较大，任课教师难以因材施教面面俱到地照顾到每位学生的课堂学习。从而，教师也就难以针对不同学生的差异情况，采取有针对性的教学方法和辅导方法，使得课堂教学效果较差，无法满足学生的个性化需求。

为验证改进后的遗传算法在排课问题中的应用效果，与文献[10]及基本遗传算法进行对比实验。种群数量设为400，基本遗传算法迭代数设为500，本文改进的遗传算法最大允许停滞代数设为20，交叉概率为0.89，变异概率为0.02。分别在不同授课任务数时，三种算法得到的平均运行时间及适应度值如图所示。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2014年8月～2017年10月期间在绵阳市中心医院手术治疗的乳腺癌患者及乳腺良性肿瘤患者，所有患者均经超声、钼靶及磁共振检查明确病灶位置并初步判断性质，手术切除后根据病理结果明确病灶性质，乳腺癌患者纳入恶性组、乳腺良性肿瘤患者纳入对照组。恶性组共92例，年龄39～59岁，病灶位于左乳44例、右乳48例；对照组共36例，年龄36～55岁，病灶位于左乳17例、右乳19例。两组患者一般资料的比较无显著性差异(P>0.05)。

1.2 研究方法

1.2.1 血清收集及指标测定方法 手术前，采集两组患者的空腹外周静脉血3 mL，静置1～2小时后离心，取上层血清后按照Elisa试剂盒的操作流程进行实验，测定HMGA1的含量。

根据HMGA1的生物学特点，乳腺癌病灶内HMGA1含量的变化能够通过影响下游基因的表达来产生相应的生物学效应。在乳腺癌的发生过程中，癌细胞的增殖受到多种增殖基因的调控。CCN5、MMRN2、TCEAL7是具有抑制细胞增殖作用的抑癌基因。CCN5又称为WISP2，能够通过阻碍上皮间质转化的方式抑制细胞的生长[7,8]；MMRN2的编码产物是定位于细胞膜的糖蛋白，能够拮抗VEGF/VEGFR2通路来减少肿瘤血供、阻碍细胞生长[9]；TCEAL7的编码产物具有转录调节活性，能够阻碍端粒酶逆转录酶的表达并使细胞的生存能力减弱[10]。HPK1、Ki67是具有促增殖作用的原癌基因，两者均能在细胞周期过程中发挥正性调控作用，通过加速细胞周期跨过检查点的方式来增强细胞的增殖活力[11,12]。我们通过分析乳腺癌病灶内上述增殖基因表达的变化发现：恶性组患者乳腺癌病灶内CCN5、MMRN2、TCEAL7的mRNA表达量显著低于对照组患者乳腺肿瘤病灶，HPK1、Ki67的mRNA表达量显著高于对照组患者乳腺肿瘤病灶。这就说明抑癌基因表达缺失、原癌基因表达增加与乳腺癌的发生密切相关。进一步分析血清HMGA1含量与增殖基因表达的相关性可知：高HMGA1含量的恶性组患者乳腺癌病灶内CCN5、MMRN2、TCEAL7的表达量降低，而HPK1、Ki67的表达量升高。这就说明HMGA1的高表达能够减少抑癌基因的表达、增加原癌基因的表达，通过血清HMGA1含量的测定能够对病灶内增殖基因表达的变化做出评估。

曾几何时，手机的摄影功能落后，自拍的人像模糊不清。随着科技的不断发展，新技术不断涌现，影像越来越清晰。但人们又有了新烦恼——过分清晰，使人面部的皱纹、雀斑等瑕疵一览无余，喜欢自拍的人们，还要使用修图软件，把照片重新改回模糊状态。

2016年8月，国家能源局正式复函《关于四川省创建国家清洁能源示范省有关事项的复函》[10]，对四川省进行的清洁能源示范省创建工作给予了大力支持，并把四川省清洁能源示范省创建工作加入到我国的“十三五”能源创建规划当中，而且在清洁能源等重要项目、产业政策、体系体制改革等层面都进行大力的支持。《四川省创建国家清洁能源示范省实施方案》[11]提出在经济发达、能源品质要求较高的地区或天然气资源地，鼓励发展工业园区、楼宇式、生态园区天然气分布式能源项目。建设示范工程，不断积累经验，打造四川模式。

1.3 统计学处理

乳腺癌病灶内癌细胞的增殖和侵袭是与乳腺癌病情发展关系最为密切的病理特征，探明细胞增殖及侵袭的调控机制有助于深入认识乳腺癌的发病机制。已有细胞学实验研究结果表明，在离体培养的乳腺癌细胞中，抑制HMGA1的表达能够使细胞的增殖和侵袭能力减弱[3]。这就提示HMGA1能够调控乳腺癌细胞的增殖和侵袭行为，但该分子在乳腺癌病灶局部的变化趋势未见报道，是否能够直接影响病灶局部增殖、侵袭的病理特征也未明确。HMGA1属于HMG蛋白家族，能够进入细胞核并与多种基因的启动子区域及增强子区域结合，进而影响相应基因的表达并产生特定的生物学效应[4]。在恶性肿瘤的发生发展过程中，HMGA1能够与多种增殖及侵袭基因的启动子、增强子结合，进而影响增殖及侵袭基因的表达并改变细胞增殖、侵袭的能力[5,6]。在上述研究中，我们通过分析乳腺癌病灶及乳腺癌患者血清中HMGA1含量的变化可知：恶性组患者乳腺癌病灶内HMGA1的含量以及血清中HMGA1的含量均显著升高。这就说明局部病灶组织中HMGA1的高表达与乳腺癌的发生密切相关并且高表达的HMGA1会分泌进入血液循环、造成血清中HMGA1含量也发生相应的升高，通过血清HMGA1含量的测定能够反应病灶内HMGA1含量的变化。

2 结果

2.1 乳腺癌病灶及血清中HMGA1的含量

恶性组患者乳腺癌病灶及良性组患者乳腺肿瘤病灶内增殖基因CCN5、MMRN2、TCEAL7、HPK1、Ki67表达量的分析如下：恶性组患者乳腺癌病灶内CCN5、MMRN2、TCEAL7的mRNA表达量显著低于对照组患者乳腺肿瘤病灶，HPK1、Ki67的mRNA表达量显著高于对照组患者乳腺肿瘤病灶。见表1。

2.2 乳腺癌病灶内增殖基因的表达量

恶性组患者乳腺癌病灶内HMGA1的含量为(22.95±3.86)ng/mL、血清中HMGA1的含量为(183.61±22.35)ng/mL；良性组患者乳腺肿瘤病灶内HMGA1的含量为(14.14±1.77)ng/mL、血清中HMGA1的含量为(108.36±14.25)ng/mL。经t检验分析，恶性组患者乳腺癌病灶内HMGA1的含量以及血清中HMGA1的含量均显著高于对照组。

恶性组患者乳腺癌病灶及对照组患者乳腺肿瘤病灶内侵袭基因Sema4D、RhoA、Gab2、ARK5、SGK3、MMP9表达量的分析如下：恶性组患者乳腺癌病灶内Sema4D、RhoA、Gab2、ARK5、SGK3、MMP9的mRNA表达量显著高于对照组患者乳腺肿瘤病灶。 不同血清HMGA1含量的恶性组患者乳腺癌病灶内侵袭基因Sema4D、RhoA、Gab2、ARK5、SGK3、MMP9表达量的分析如下：高HMGA1含量的恶性组患者乳腺癌病灶内Sema4D、RhoA、Gab2、ARK5、SGK3、MMP9的mRNA表达量显著高于低HMGA1含量的恶性组患者。见表3、4。

 

表1 乳腺癌病灶及乳腺肿瘤病灶内增殖基因的比较

  

组别nCCN5MMRN2TCEAL7HPK1Ki67恶性组920.41±0.070.54±0.080.62±0.072.11±0.351.76±0.25对照组361.03±0.151.01±0.150.99±0.130.97±0.141.04±0.18t14.98613.21711.98313.68610.938P<0.05<0.05<0.05<0.05<0.05

表2 不同血清HMGA1含量的恶性组患者乳腺癌病灶内增殖基因的比较

  

HMGA1含量nCCN5MMRN2TCEAL7HPK1Ki67高含量460.27±0.040.31±0.060.38±0.052.77±0.462.21±0.34低含量460.56±0.090.79±0.100.88±0.111.42±0.221.33±0.16t16.40813.74515.41911.38310.576P<0.05<0.05<0.05<0.05<0.05

2.3 乳腺癌病灶内侵袭基因的表达量

不同血清HMGA1含量的恶性组患者乳腺癌病灶内增殖基因CCN5、MMRN2、TCEAL7、HPK1、Ki67表达量的分析如下：高HMGA1含量的恶性组患者乳腺癌病灶内CCN5、MMRN2、TCEAL7的mRNA表达量显著低于低HMGA1含量的恶性组患者，HPK1、Ki67的mRNA表达量显著高于低HMGA1含量的恶性组患者。见表2。

 

表3 乳腺癌病灶及乳腺肿瘤病灶内侵袭基因的比较

  

组别nSema4DRhoAGab2ARKSGK3MMP9恶性组921.79±0.222.08±0.351.91±0.272.33±0.362.67±0.411.87±0.26对照组361.04±0.171.01±0.140.96±0.151.03±0.170.98±0.131.02±0.16t13.72718.49816.48222.18129.95516.473P<0.05<0.05<0.05<0.05<0.05<0.05

 

表4 不同血清HMGA1含量的恶性组患者乳腺癌病灶内侵袭基因的比较

  

HMGA1含量nSema4DRhoAGab2ARKSGK3MMP9高含量462.20±0.352.64±0.392.39±0.413.01±0.473.67±0.572.39±0.38低含量461.41±0.181.55±0.221.48±0.231.68±0.211.89±0.221.39±0.18t13.09211.85514.85715.29818.95815.431P<0.05<0.05<0.05<0.05<0.05<0.05

3 讨论

采用SPSS23.0软件录入数据并对两组间计量资料的差异进行t检验分析，按照P<0.05判断差异有统计学意义。

1.2.2 病灶组织收集及指标测定方法 手术后，采集恶性组患者的乳腺癌病灶组织及良性组患者的乳腺良性肿瘤病灶组织，裂解组织后按照Elisa试剂盒的操作流程进行实验，测定HMGA1的含量；按照RNA抽提及反转录试剂盒的操作流程进行实验，分离RNA并合成cDNA后进行荧光定量PCR反应，测定CCN5、MMRN2、TCEAL7、HPK1、Ki67、Sema4D、RhoA、Gab2、ARK5、SGK3的mRNA表达量。

大连大学[2]从本科培养目标出发，着重于高校汽车创新型人才的培养，及结合科研教学与企业技术岗位人才的需求，以汽车拆装实践课程为改革对象，在实训基地建设、课程内容、考核方式上进行探索：在实训基地建设改革方面，加强与企业和兄弟院校的合作并引入汽车维修中级工证的考核；在课程内容上引入虚拟技术，利用视频动画等多媒体手段，展示世界知名汽车生产商的总装过程，同时增加零部件的测绘检测内容；在考核方式上引入竞赛机制等。

乳腺癌病灶内癌细胞侵袭的过程则受到了多种侵袭基因的调控，Sema4D、RhoA、Gab2、ARK5、SGK3、MMP9等促侵袭基因能够通过不同的路径来影响细胞外基质及基底膜的完整性，进而为细胞侵袭创造有利条件。Sema4D最早在神经系统内被发现，具有神经轴突生长导向的作用；新近的研究证实，该分子能够通过与相应的酪氨酸激酶受体结合来激活下游RhoA通路，进而通过RhoA通路来增加蛋白酶的表达[13,14]。Gab2的编码产物是Gab家族中的一类支架蛋白，通过下游ARK5通路能够增加多种蛋白酶的生成[15]。SGK3是一类具有丝/苏氨酸磷酸化活性的蛋白激酶，能够通过引起PI3K/AKT通路内的信号分子发生磷酸化来增加相应蛋白酶的表达[16]。MMP9与恶性肿瘤侵袭关系最为密切的蛋白酶之一，对细胞外基质及基底膜中的明胶、弹性蛋白、层黏连蛋白均具有水解作用，通过水解相应蛋白来促进细胞的侵袭[17]。我们通过分析乳腺癌病灶内上述侵袭基因表达的变化发现：恶性组患者乳腺癌病灶内Sema4D、RhoA、Gab2、ARK5、SGK3、MMP9的mRNA表达量显著高于对照组患者乳腺肿瘤病灶。这就说明促侵袭基因表达增加与乳腺癌的发生密切相关。进一步分析血清HMGA1含量与侵袭基因表达的相关性可知：高HMGA1含量的恶性组患者乳腺癌病灶内Sema4D、RhoA、Gab2、ARK5、SGK3、MMP9的表达量显著升高。这就说明HMGA1的高表达能够增加促侵袭基因的表达，通过血清HMGA1含量的测定能够对病灶内侵袭基因表达的变化做出评估。

综合以上HMGA1与增殖、侵袭基因相关性的讨论和分析，可以得出初步结论：乳腺癌病灶及血清中HMGA1的含量异常升高；异常升高的HMGA1一方面能够反应病灶内高表达的HMGA1，另一方面能够评估病灶内肿瘤细胞异常增殖及侵袭的病理特征。

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