乳腺癌是发生在乳腺腺上皮组织的恶性肿瘤，发病率高，已成为我国重大公共卫生问题[1]。乳腺癌的病因尚未完全清楚，有研究认为，乳腺癌的发生和发展是多种因素综合作用的结果，某些生物学标记物的表达可能与乳腺癌患者的预后有关[2]。Mel-18基因是多梳基因家族中的一员，在细胞增殖、衰老和肿瘤的发生中都具有重要的作用。Mel-18编码负性调控蛋白，抑制肿瘤的发生、发展[3]；Notch-1的异常表达与多种肿瘤的发生发展密切相关[4]；PLK-1是广泛存在于真核细胞中的丝/苏氨酸激酶，与细胞的有丝分裂密切相关，PLK-1可以参与细胞凋亡的调控，有利于肿瘤的靶向治疗[5]。浸润性乳腺癌是乳腺癌中常见的病理类型，本研究分析生物标记物Mel-18、Notch-1及PLK-1在浸润性乳腺癌中的表达情况，探讨三者在浸润性乳腺癌的发生发展中可能的作用。

1 材料与方法

1.1 材料收集 2014年11月—2016年9月我院病理科的乳腺组织89例，其中正常乳腺组织40例，浸润性乳腺组织49例。49例乳腺癌患者均为女性，年龄33～72岁，平均52.311.4岁。标本入选条件：术前未经任何抗癌治疗，无重大手术及外伤史，且组织类型均经病理检查证实。

1.2 主要试剂与设备 Mel-18鼠抗人单克隆抗体(Abcam公司，产品编号：ab203638)、Notch-1兔抗人抗体(博士德公司，产品编号：BA2743-2)、PLK-1兔抗人单克隆抗体(Abcam公司，产品编号：ab138496)、光学显微镜Nikon Eclipse E200(日本)。

比较两组手术效果;住院的总天数、引流管留置时间;手术前后患者神经功能缺损评分、格拉斯哥晕迷分值、血肿水平、FIM评分;脑水肿。

1.3 操作方法 用4%中性甲醛溶液将所有标本固定，经过石蜡包埋并切片备用。Mel-18、Notch-1和PLK-1的工作浓度分别为1:200、1:100和1:200。采用罗氏全自动免疫组织化学染色仪进行染色，用PBS代替一抗做阴性对照。

系统总体框图如图1所示。天线输出的信号被第一级低噪放大器(Low Noise Amplifier，LNA)与第二级LNA放大后，经二等分功分器分别输入两个射频通道。射频通道采用本振搭配混频器的方式实现。混频器输出波形滤波后经输出接口输出给后级电路。

水秧村无矿产资源，无乡镇企业，农村产业结构单一，农业是全村的支柱产业，群众依土为生，粮食作物以种植玉米、水稻为主，作物收成得不到保障。农业生产方式和劳动生产工具落后，劳动生产效率极低，农业产业化、规模化程度低。

1.4 阳性率判定 ①以着色细胞数占视野细胞总数(镜下随机取10个视野)的百分比计分。1分：≤10%的核阳性；2分：11%～50%；3分：51%～75%；4分：>75%。②根据染色强度进行计分。1分：阴性；2分：弱染色；3分：中度染色；4分：重度染色。将上述两种方法的计分结果进乘积，若乘积≥4分，便认为阳性，否则为阴性。Mel-18和PLK-1主要在细胞核内表达，呈现棕褐色或者棕黄色颗粒。Notch-l主要在细胞质内表达，呈现棕黄色或黄色颗粒。

1.5 统计学处理 应用SPSS 19.0统计软件分析数据，计数资料的比较采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

[1] 吴骥, 管小青, 顾书成, 等. 乳腺浸润性导管癌组织中COX-2和Ki-67的表达及相关性分析[J]. 中国普外基础与临床杂志, 2014, 21 (2): 197-201.

将该节点的一组实验的10次检测结果导入到Origin软件[16]中做成绘制成图。图（a）、图（b）、图（c）分别为距离、方位角、俯仰角的单点检测与数据融合的结果比较。

 

表1 Mel-18、Notch-1及PLK-1

 

在乳腺组织中的表达[n(%)]

  

分组例数Mel-18Notch-1PLK-1正常乳腺组织4031(77.5)17(42.5)9(22.5)浸润性乳腺组织4917(34.7)35(71.4)38(77.6)χ216.2427.58726.781P<0.0010.005<0.001

2.2 Mel-18、Notch-1及PLK-1与浸润性乳腺癌临床病理参数的相关性 Mel-18的表达与淋巴结转移和临床分期有关(P<0.05)，与患者年龄和组织学分级无关(P>0.05)；Notch-1和PLK-1的表达均与组织学分级、淋巴结转移和临床分期有关(P<0.05)，与患者年龄无关(P>0.05)。见表2。

即我们体育教师在课堂尾声中引导学生适当腾出一些“空白”，设法留下余味，促使学生去思考、去探究、去想象、去创新和消化、吸收。比如水平一：跑跳单元“龟兔赛跑”一课的结束部分中，教师可以这么设计：乌龟和兔子在赛跑中，虽说乌龟赢了比赛。但是，兔子如果不偷懒的话，你们有没有想过，最终谁会取得胜利呢？（生：乌龟。生：兔子。）最后的答案有待于同学们课后去揭晓吧。这样的留白式课堂尾声不露声色地将学生的好奇心、求知欲完全激发了起来，使得课堂自然由课内延伸课外，拓展了学生学习的空间。

3 讨论

乳腺癌是女性常见恶性肿瘤之一，发病率高，但死亡率却呈逐年下降趋势。究其原因，一是乳腺癌筛查工作的开展，二是乳腺癌综合治疗的开展。因此，乳腺癌的早期筛查或诊断是降低乳腺癌死亡率的关键。随着分子生物学的发展，乳腺癌生物标记物的研究也越来越深入。本研究对Mel-18、Notch-1及PLK-1在浸润性乳腺癌中的表达进行研究，以期为临床浸润性乳腺癌的研究和乳腺癌的预后提供有力支撑。

 

表2 Mel-18、Notch-1及PLK-1与浸润性乳腺癌临床病理参数的相关性

  

临床病理参数例数Mel-18+(%)PNotch-1+(%)PPLK-1+(%)P患者年龄<50岁2117(81.0)≥50岁2816(57.1)0.07215(71.4)16(57.1)0.23414(66.7)15(53.6)0.265组织学分级G1～G21912(63.2)G33019(63.3)0.6127(36.8)21(70.0)0.0239(47.4)23(76.7)0.037淋巴结转移有3225(78.1)无177(41.2)0.01227(84.4)6(35.3)0.00128(87.5)10(58.8)0.029临床分期I～II2922(75.9)III～IV208(40.0)0.01325(86.2)11(55.0)0.01826(89.7)12(60.0)0.018

[4] 张奇, 宋鑫. Notch信号通路在肿瘤干细胞中的研究进展[J]. 中国肿瘤, 2014, 23 (7): 585-590.

“整个美国救了通用汽车，但这就是通用汽车怎么回报我们的。我现在正考虑去除给予通用汽车产品的补贴，包括它旗下的电动汽车。”

人类的PLK基因定位于16p12.3，PLK-1是调节细胞周期的重要分子，位于细胞周期的中心环节。PLK-1稳定分裂细胞基因组，参与了细胞周期各个检测点功能，在细胞DNA修复后，进入有丝分裂，从而抑制细胞增殖，促进细胞凋亡[9]。本研究结果显示PLK-1在浸润性乳腺组织中的表达高于正常组织，且PLK-1的表达与组织学分级、淋巴结转移和临床分期有关，说明PLK-1在肿瘤中高表达与肿瘤的生物学行为及预后有密切关系，这与King等[10]研究结果相似。

综上所述，Mel-18、Notch-1及PLK-1在浸润性乳腺癌的发生发展中具有一定的作用，与淋巴结转移和临床分期密切相关，可能是影响浸润性乳腺癌预后的重要指标。

参考文献：

2.1 Mel-18、Notch-1及PLK-1的表达 Mel-18、Notch-1、PLK-1在正常乳腺组织中的阳性率与在浸润性乳腺组织中的阳性率，差异均有统计学意义(P<0.05)；见表1。

[3] Lee JY, Kong G. Mel-18, a tumor suppressor for aggressive breast cancer[J]. Oncotarget, 2015, 6 (18): 15710-15711.

本节对振动数据降噪分析的方法进行简单介绍,为后续矿用自卸车驾驶室悬置系统振动实测信号的预处理及悬置振动特征研究作基础.

[2] 李庆霞, 邢雅军, 闫晓路, 等. 乳腺浸润性导管癌Survivin和AIB-1表达及其相关性研究[J]. 中华肿瘤防治杂志, 2013, 20 (12): 935-938.

Mel-18定位于染色质17q12，由13个外显子组成，通过结合序列5'-GACTNGACT-3'起转录抑制作用，此序列位于c-myc，bcl-2，hox基因的非编码区或调控区。Mel-18基因通过下调c-myc基因的表达，调节细胞增殖，加速细胞衰老[6]，从而抑制肿瘤生长。本研究结果发现，Mel-18在正常乳腺组织中的表达高于浸润性乳腺组织，且Mel-18的表达与淋巴结转移和临床分期有关，这与贠田等[7]研究结果相似，对于乳腺癌的预后具有重要的意义。

Notch-1定位于染色体9q34，是许多重要信号通路(调节细胞增殖)的交汇点，在细胞分化、发育中具有一定的作用，且影响其下游多种癌基因参与细胞的增殖、分化及凋亡过程[8]。本研究结果发现，Notch-1在浸润性乳腺组织中的表达高于正常组织，且Notch-1的表达与组织学分级、淋巴结转移和临床分期有关(P<0.05)，表明在一定程度高表达Notch-1加剧了乳腺癌浸润和转移，预后不良。

[5] 王冲, 余建, 黄河. Plk1磷酸化修饰PinX1对宫颈癌HeLa细胞有丝分裂及凋亡的影响[J]. 郑州大学学报：医学版, 2013, 48 (3): 323-327.

[6] Won HY,Lee JY,Shin DH,et al.Loss of Mel-18 enhances breast cancer stem cell activity and tumorigenicity through activating Notch signaling mediated by the Wnt/TCF pathway[J].FASEB J,2012,26(12): 5002-5013.

[7] 贠田,王仰坤,原旭涛,等. Mel-18、Notch-1和PLK-1在不同乳腺组织中的表达及临床意义[J]. 诊断病理学杂志,2017,24(1):30-33.

[8] Yuan X,Zhang M,Wu H,et al.Expression of Notch1 Correlates with Breast Cancer Progression and Prognosis[J].PLoS One,2015,10(6):e0131689.

[9] 钱锋. 吉西他滨对胰腺癌细胞增殖、凋亡及PLK-1表达的影响[J]. 解放军医药杂志,2015,27(7):53-55.

[10] King I Sharon,Colin PA,Susan BE,et al.Immunohistochemical detection of Polo-like kinase-1(PLK1)in primary breast cancer is associated with TP53 mutation and poor clinical outcome[J].Breast Cancer Res,2012,14(2):R40.