更全的杂志信息网

卵孢侧耳野生菌株人工栽培及营养成分分析

更新时间:2009-03-28

侧耳属Pleurotus (Fr.) P. Kumm.真菌是一类具有极大药用潜质和食用价值的食用菌(戴玉成和杨祝良 2008;戴玉成等 2010)。该属的许多物种都含有丰富的多糖、氨基酸、蛋白质、脂肪酸及其他各种生物活性物质,可以提高机体免疫力、延缓衰老、抗疲劳、抗肿瘤、调节血糖、调节血脂等(Im et al. 2014;Lin et al. 2014;Xu et al. 2014);侧耳属真菌可以利用农业、工业废弃物为基质进行栽培生产,且生物学效率较高,具有重要应用价值,对农业可持续发展具有重要意义。此外,侧耳属真菌还是一类具有生物修复功能的环保菌,通过产生木质素氧化酶、锰过氧化物酶和漆酶等酶类可以降解多环芳烃、染料等有害物,可应用于纺织厂、造纸厂、橄榄油厂废水及城市废水的处理(Ahmed et al.2014;Akdogan & Canpolat 2014;Tegli et al. 2014;韩美玲等2017)。

据记载我国是世界上最早食用侧耳属真菌的国家,同时侧耳属真菌因其适应性强,分布广泛,生物多样性丰富成为我国目前栽培种类和品种最多的一类食用菌(Zervakis et al. 2004;Kirk et al.2008)。目前全世界关于侧耳属真菌的名称有1 000多个(Guzman 2000),但广泛承认的物种有50个左右(邹亚杰等 2015),其中商业栽培种主要有糙皮侧耳P. ostreatus (Jacq.) P. Kumm.、肺形侧耳P. pulmonarius (Fr.) Quél.、白黄侧耳 P. cornucopiae(Paulet) Rolland、刺芹侧耳 P. eryngii (DC.) Quél.、金顶侧耳 P. citrinopileatus Singer、佛州侧耳P. floridanus Singer、白灵侧耳P. tuoliensis (C.J. Mou)M.R. Zhao & Jin X. Zhang等(Zhao et al. 2016)。

卵孢侧耳 P. placentodes (Berk.) Sacc.最早在1852年由英国真菌学家 Berkeley首次描述(Berkeley 1852),之后长达100多年都未曾报道。直到 2016年,中国科学院昆明植物研究所研究人员在我国西藏和云南海拔3 000–4 200m的亚高山森林中发现卵孢侧耳的分布,这是该物种在我国的首次报道(Liu et al. 2016)。本研究团队于2015年在对喜马拉雅山脉中段南坡原始森林的伞菌科考中,也采到了该物种标本并进行了菌种分离保存,随后进行了人工驯化试验。驯化成功后对其营养成分分析结果表明,卵孢侧耳可作为一个潜在的含有较高的组氨酸和丰富的矿物质元素食用菌新物种进行深度挖掘。本研究对保护大型真菌种质资源、丰富我国食用菌资源库、推进真菌种质资源经济价值的深度挖掘都具有一定意义。

1 材料与方法

1.1 菌种来源

2015年采自喜马拉雅山脉中段南坡,珠穆朗玛峰东南侧(属于西藏自治区日喀则市定结县陈塘镇)阔叶森林的野生子实体。标本(采集号ZRL20152036)保存于中国科学院菌物标本馆(馆藏号HMAS279131)。

1.2 标本分离与鉴定

1.2.1 菌种分离:采用组织分离法在PDA培养基上获得菌丝体,菌种保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心(保藏号CGMCC13698)。

1.2.2 标本鉴定:形态学鉴定:对新鲜标本用解剖刀纵切子实体观察其菇盖组成、菌肉的颜色、质地、菌褶形状和着生情况、菌柄的组成、菌柄的质地、中实或中空等宏观形态特征。充分干燥后,置于塑料封口袋中保存并带回实验室,进行微观形态观察。首先用尖头镊取一块 2–3mm的菌褶放在清洁的载玻片中央,滴半滴95%的酒精软化,标本回软后加一滴10%刚果红染色剂,1min后用吸水纸将染色剂吸干;再加入5%氢氧化钾水溶液作为悬浮剂,制成镜检材料;加盖盖玻片,在光学显微镜下观察其微观特征,包括担子和担孢子形状、大小、颜色、囊状体有无等特征。

1.2.3 分子系统发育分析:DNA提取:将野外采的集标本 ZRL20152036、分离的菌株、人工栽培的子实体(馆藏号HMAS255159)采用CTAB法提取DNA。

ITS扩增:参照黄晨阳等(2015)和罗韵等(2016)的方法,利用 ITS4(5′‐TCCTCCGCTTATTGATA GC‐3′)和 ITS5(5′‐GGTGAGAGATTTCTGTGC‐3′)引物对ITS1‐5.8S‐ITS2 rDNA进行PCR扩增。PCR反应体系:2μL DNA 模板、1μL ITS4(10pmol/μL)、1μL ITS5(10pmol/μL)、12.5μL 2× Taq PCR MasterMix(200mol/L dNTPs、4.0mmol/L MgCl2、2.5U Taq DNA聚合酶)、ddH2O补齐至25μL。扩增程序为94℃预变性4min,然后94℃变性40s、50℃退火50s、72℃延伸50s,35个循环,最后一个循环72℃延伸8min,PCR扩增产物由北京博迈德测序公司进行测序。

Han ML, An Q, Wu XJ, Zheng F, Si J, 2017. Effects of different lignocelluloses as inducers on laccaseactivities of Pleurotus ostreatus in submerged fermentation.Mycosystema, 36(3): 349‐357 (in Chinese)

1.3 人工驯化试验

Yan WL, Wang LJ, 2010. The mineral content determination and the nutritional evaluation of edible fungus and the algae food. Food Science and Technology, 35(7): 81‐84(in Chinese)

1.3.2 人工驯化试验:将野外分离保存的菌丝体在综合PDA培养基上纯化。挑取纯化后的菌落尖端部分菌丝于综合 PDA培养基上,在 25℃恒温培养箱中避光培养。待菌丝长满培养皿后切取 3cm×3cm的菌丝块接种在装有原种培养基的原种瓶中,24–25℃避光培养。原种菌丝长满后转接到22cm×45cm×2.5cm的栽培料中,在白天温度为22℃、夜晚温度18℃的人工气候室中发菌。待菌丝长满栽培料后,通过加大昼夜温差刺激,促进形成原基,然后加大通风和相对湿度等出菇管理,出菇后进行采摘。期间记录各生长阶段的温度、湿度、菌丝生长情况、现蕾时间、出菇时间;出菇后记录菇体农艺特征,如菌盖大小、颜色、菌柄长短、重量等。

1.4 商品价值评价

1.4.1 毒性及风味:将人工栽培的卵孢侧耳鲜品和加热煮熟后的子实体分别喂食猫、狗、小白鼠等动物,确认无毒后进行口感及风味的调研,从子实体的外观、鲜菇味道、口感、烹饪方式等方面做出评价。

提高护理质量不仅需要构建科学、实用的指标体系,还需要形成正能量的护理质量控制文化氛围。本研究中除严重影响病人生命或财产安全的事件(指标),正向要求100%达标,负向要求0%发生外[10],不设置护理质量评价指标阈值,只计科室质量分,且不与科室及个人绩效挂钩;护理质量评价重在找出自身存在的质量缺陷,针对问题展开持续质量改进,不断提升护理质量;评价过程注意避免人为因素干预,提倡质量控制员发现问题敢于记录反馈,真正挖掘和暴露护理质量存在的问题,将持续质量改进落到关键之处,实现护理质量提升。

1.4.3 重金属含量分析:对人工栽培卵孢侧耳子实体的重金属含量进行检测,铅含量测定参照 GB 5009.12‐2017《食品安全国家标准·食品中铅的测定》;镉含量测定参照GB 5009.15‐2014《食品安全国家标准·食品中镉的测定》;汞含量测定参照 GB 5009.17‐2014《食品安全国家标准·食品中汞的测定》;砷含量测定参照GB 5009.11‐2014《食品安全国家标准·食品中砷的测定》。

 

表1 构建侧耳属真菌系统发育树的序列信息Table 1 Sequence information of Pleurotus used in molecular phylogenetic analyses

  

种名Species采集号No. of specimen or strain采集地Location GenBank序列号GenBank acc. #P. purpureo-olivaceus PDD91632 New Zealand GQ411523 P. australis PDD87/021XP New Zealand AY315764 P. tuberregium RV95/174 USA AF109964 P. cystidiosus PSUMCC609 USA AY315792 P. smithii ATCC 46391 USA AY315783 P. djamor HKAS94069 Sri Lanka KX061788 P. salmoneostramineus ASI 2104 Korea AY265844 P. djamor f. calyptratus HMAS 63355 China AY562495 P. calyptratus CCRC 36211 Korea AY265814 P. cornucopiae CBS383.80 Korea AY265817 P. citrinopileatus PHZAU1 China DQ077889 P. abieticola HKAS45720 Tibet, China KP771696 P. albidus Duke327 Brazil AF345658 P. populinus TENN56749 USA AY450346 P. fossulatus HIK127 Armenia HM998828 P. nebrodensis UPA6 Madonie Mt., Italy HM998816 P. nebrodensis S498 China AY540331 P. ostreatus CCMSSC06141 China KP867915 P. floridanus S039 China AY540322 P. placentodes HKAS57781 Yunnan, China KR827694 P. placentodes HKAS57145 Tibet, China KR827693 P. placentodes HKAS94408 Yunnan, China KX061786 P. placentodes HKAS94409 Yunnan, China KX061787 P. placentodes JZB2115007 China JQ283967 P. placentodes HMAS279132 China KY967595 P. placentodes HMAS279131 China KY967596 P. placentodes HMAS255159 China KY967597 P. placentodes HMAS255160 China KY967598 P. placentodes HKAS94410 China KX836365 P. placentodes YAASM3153 China KX836364 P. placentodes YAASM2083 China KX836363 Hohenbuehelia auriscalpium T‐082 Canada EF409725

2 结果与分析

2.1 野外采集结果

采集卵孢侧耳野生标本2份,分离纯化,获得野生菌株 2份:采集号 ZRL20152036(馆藏号HMAS279131)、分离菌株(保藏号CGMCC13698);采集号ZRL20152015(馆藏号HMAS279132)、分离菌株(编号ZRL20162237)。

本文作者将从野外分离获得的卵孢侧耳菌株进行人工驯化栽培试验,结果表明该菌株在人工栽培过程中菌丝生长速度较快,生长周期从接种到出菇3个月左右,菇体外观、气味、口感等均良好。对卵孢侧耳的营养成分进行检测,发现卵孢侧耳含有丰富的粗蛋白(30.1g/100g),其含量比糙皮侧耳(12.8g/100g)、香菇(26.6g/100g)、柱状田头菇(28.8g/100g)高;8种必需氨基酸含量(7.07g/100g)比糙皮侧耳(平菇)(4.96g/100g)、香菇(5.96g/100g)、柱状田头菇(5.66g/100g)、双孢蘑菇(6.68g/100g)高(郑海阳等 2016),是理想的健康食材。卵孢侧耳还含有丰富的矿物质元素,其中钙含量、铁含量(17.9mg/100g)高于糙皮侧耳(8.86mg/100g)、黑木耳(11.83mg/100g)、猴头菌Hericium erinaceus(7.33mg/100g)等;锌含量(8.06mg/100g)高于毛头鬼伞 Coprinus comatus(4.43mg/100g)、糙皮侧耳(3.01mg/100g)、赭鳞蘑菇(3.62mg/100g)、长裙竹荪Dictyophora indusiata(5.55mg/100g)等(颜戊利和王林静 2010)。因此卵孢侧耳不仅是一种具有高蛋白的食用菌,而且相对于其他食用菌种类,拥有较高含量的矿物质元素,尤其是锌,因此是一个具有较高营养价值的食用菌物种。

2.2 鉴定结果

Ahmed S, Haider A, Nadeem M, 2014. Screening of white rot fungi for decolorization of pulp and paper industrial wastewater. International Journal of Biology and Biotechnology, 11(2/3): 445‐448

  

图1 野生卵孢侧耳Pleurotus placentodes A:HMAS279131;B:HMAS279132. 标尺=2cmFig. 1 Basidiomes of wild Pleurotus placentodes. A:HMAS279131; B: HMAS279132. Bars=2cm.

  

图2 人工栽培卵孢侧耳Pleurotus placentodes不同生长时期的形态 A–D:HMAS255159Fig. 2 Basidiome morphology of Pleurotus placentodes at different stages of growth. A–D: HMAS255159.

  

图3 卵孢侧耳Pleurotus placentodes的菌落及显微形态特征 A:培养性状;B:担孢子;C:担子(野生);D:担子(栽培)Fig. 3 The colony and microcosmic morphology of Pleurotus placentodes. A: Culture; B: Basidiospores; C: Basidia (from a wild collection); D: Basidia (from a cultivated strain).

2.2.2 分子系统学研究结果:来自野生标本(HMAS279131)、菌株CGMCC 13698及人工驯化的子实体(HMAS255159)的ITS序列均一致(GenBank收录号分别为KY967596、KY967597、KY967598),且根据构建的侧耳属系统发育图谱,它们与已报道的卵孢侧耳(Menolli et al. 2014)在一个系统发育分支里,并获得0.99的后验概率支持率,研究结果支持它们为同一物种,即卵孢侧耳(图4)。

式(5)中:和分别为交叉航道中单位时间内某种特定船舶交通流量,艘;和为交叉航道中船舶的航速,m/s;Vij为两船的相对航速,m/s;Dij为当交叉相遇中两船不做任何避让行动条件下碰撞区域直径;θ为航道交叉角度,(°)。

  

图4 基于 ITS1-5.8S-ITS2序列贝叶斯分析的侧耳属系统发育树 其中序列 KY967596来自野生标本 HMAS279131;序列KY967597来自野生标本的菌株CGMCC 13698;序列KY967598来自人工驯化后的菇体,标本号为HMAS255159Fig. 4 Phylogeny of Pleurotus species based on ITS1‐5.8S‐ITS2 sequence using Bayesian analysis. The sequences KY967596,KY967597 and KY967598 were generated respectively from the wild specimen HMAS279131, the wild strain CGMCC 13698, and the cultivated fruiting body (HMAS255159) respectively.

2.3 驯化栽培

菌丝在9cm培养皿上6–7d长满,原种在温度为24–26℃、相对湿度50%–60%条件下30d长满;栽培种在温度为 18–22℃、相对湿度 75%–80% 条件下32d左右长满袋;长满7d后将白天温度设置为18℃,夜晚温度为10℃,进行温差刺激3d;然后再将温度设置回白天温度22℃,夜晚温度18℃,同时将相对湿度设置在 85%–90%之间,3–8d后原基形成;形成菇蕾后加大通风和湿度管理,2–5d即可出菇进行采摘。驯化栽培研究表明,卵孢侧耳菌株可以在以棉籽壳为主料的培养料上正常生长发育,原种接种30d长满,栽培种接种约32d左右长满袋,长满后一周低温刺激原基分化,原基分化后1周开始出菇,从接种到出菇需要80–95d。

2.4 商品价值评价

2.4.1 毒性及风味:经验证将卵孢侧耳喂食给动物均无毒,试吃后确定该种为可食性侧耳。卵孢侧耳鲜菇清香,菌盖比市面上糙皮侧耳薄,光滑有韧性,炖汤、清炒均有海鲜味。菌柄表皮纤维多,菌肉比菌盖味道淡,可煎炸食用,有韧性,口感好。干菇香味浓更适宜煲汤,炖煮。

2.4.2 营养成分:卵孢侧耳鲜品含水量为89.8g/100g,干重状态下含水量为8.07g/100g,其营养成分含量均在干重状态下测量(表2)。卵孢侧耳含有18种氨基酸,氨基酸总量为19.24g/100g,包括人体所需 8种必需氨基酸,必需氨基酸总量7.07g/100g,还包括,婴儿所需必须氨基酸——组氨酸,含量为 0.40g/100g;蛋白质含量较高,为30.1g/100g;脂肪含量较低,为2.7g/100g。卵孢侧耳含有丰富的粗多糖、粗纤维和矿物质元素钙铁锌,铁含量17.9mg/100g、钙含量28.7mg/100g、锌含量为8.06g/100g。卵孢侧耳中含人体必需氨基酸的含量最高(表3),天冬氨酸、苏氨酸含量是香菇、糙皮侧耳、金针菇、柱状田头菇的2倍多,亮氨酸与苯丙氨酸的含量也都高于香菇、金针菇、杏鲍菇、柱状田头菇、双孢蘑菇等(张璐等 2017)。

 

表2 卵孢侧耳营养成分含量表Table 2 Nutrient content of Pleurotus placentodes

  

营养成分Nutrient content能量Energy (KJ/100g)含量Content 1255蛋白质Protein (g/100g)30.1脂肪Fat (g/100g) 2.7碳水化合物Carbohydrate (g/100g) 34粗纤维Coarse fiber (g/100g) 11.7可溶性膳食纤维Soluble dietary fiber (g/100g) 1.36不可溶性膳食纤维Insoluble dietary fiber (g/100g) 35.7水分Water (g/100g) 8.07灰分Ash (g/100g) 6.0粗多糖 Crude polysaccharide (g/100g) 7.45铁Fe (mg/100g) 17.9锌Zn (mg/100g) 8.06钙Ca (mg/100g) 28.7钠Na (mg/100g) 6.63氨基酸总量Total amino acids (g/100g) 19.24必需氨基酸总量The total essential amino acid (g/100g) 7.07

 

表3 卵孢侧耳和其他5种食用菌氨基酸含量表Table 3 Nutrient content of Pleurotus placentodes and other five edible fungi (g/100g dry weight)

  

注:T:氨基酸总量;E:必需氨基酸总量;N:非必需氨基酸总量Note: T: Total amino acids; E: The total essential amino acids; N: The total non‐essential amino acids.

 

营养成分Nutrient content卵孢侧耳Pleurotus placentodes糙皮侧耳Pleurotus ostreatus香菇Lentinus edodes金针菇Flammulina velutipes柱状田头菇Cyclocybe aegerita双孢蘑菇Agaricus bisporus天冬氨酸ASP 2.63 1.33 1.43 0.78 1.65 1.97苏氨酸THR 1.81 0.83 0.95 0.66 0.99 1.1丝氨酸SER 0.99 0.81 0.85 2.45 0.95 1.1谷氨酸GLU 3.13 3.49 5.47 2.11 2.9 4.25甘氨酸GLY 0.94 0.81 0.76 1.18 0.81 1.01丙氨酸ALA 1.26 1.58 0.74 1.24 1.28 2.27胱氨酸CYS 0.30 0.27 0.37 0.12 0.24 0.39缬氨酸VAL 0.95 0.9 1.08 0.77 0.96 1.09蛋氨酸MET 0.16 0.27 0.49 0.12 0.29 0.4异亮氨酸ILE 0.81 0.59 0.72 0.54 0.75 0.81亮氨酸LEU 1.43 1.15 1.06 0.9 1.42 1.69酪氨酸TYR 0.59 0.46 0.23 0.83 0.53 0.58苯丙氨酸PHE 0.79 0.45 0.6 0.71 0.39 0.51组氨酸HIS 0.40 0.37 0.42 0.35 0.36 0.5赖氨酸LYB 0.85 0.77 1.06 1.09 0.86 1.08精氨酸ARG 1.06 0.73 0.91 0.58 0.9 1.12脯氨酸PRO 0.87 0.88 0.57 0.64 1.07 2.22色氨酸 TRY 0.27 ‐ ‐ ‐ ‐ ‐T 19.24 15.7 17.71 15.07 16.4 22.1 E 7.07 4.96 5.96 4.79 5.66 6.68 N 12.17 10.74 11.75 10.28 10.74 15.42 E/T 0.37 0.32 0.34 0.32 0.35 0.30 E/N 0.58 0.46 0.51 0.47 0.53 0.43

2.4.3 重金属含量分析:食用菌重金属评价的临界值以 GB 2762‐2012《食品安全国家标准·食品中污染物限量》的相关限量标准值作为参照,对卵孢侧耳栽培子实体进行重金属检测,结果表明卵孢侧耳栽培子实体不含铅,镉、砷、汞含量均在标准限量范围内(表4)。

3 讨论

糙皮侧耳复合群 Pleurotus ostreatus species complex是我国栽培最为广泛且非常重要的食药用真菌,受到栽培环境的影响容易出现多种表型,使得侧耳复合群的分类较为复杂。在侧耳复合群最新研究中,使用了 4个基因片段(ITS、TEF1、RPB1和RPB2)进行测序和分析,结果表明目前我国广泛研究与栽培的侧耳复合群菌株属于7个物种,即冷杉侧耳P. abieticola、刺芹侧耳P. eryngii、佛罗里达侧耳近似种P. cf. floridanus、糙皮侧耳P. ostreatus、卵孢侧耳P. placentodes、肺形侧耳P. pulmonarius和白灵侧耳P. tuoliensis;建议将RPB2作为该复合群物种鉴定的DNA条形码(Li et al. 2017)。卵孢侧耳是 2016年报道的我国新记录种(Liu et al.2016),该研究中采用ITS序列及形态特征等,有效认定了卵孢侧耳。

 

表4 栽培食用菌中重金属最高允许限量标准Table 4 The maximum allowable limits of heavy metals in edible mushrooms

  

重金属元素Heavy metals食用菌类别Category of edible mushrooms最高允许限量Maximum allowable limits (mg/kg)卵孢侧耳栽培子实体含量The content in cultivated Pleurotus placentodes铅Pb 食用菌及其制品 Edible mushrooms and their products新鲜食用菌(香菇和赭鳞蘑菇除外)Fresh edible mushrooms (except for Lentinus edodes and Agaricus subrufescens)镉Cd 食用菌及其制品(赭鳞蘑菇除外)Edible mushrooms and their products (except for Agaricus subrufescens)砷As 食用菌及其制品Edible mushrooms and their products汞Hg 食用菌及其制品Edible mushrooms and their products 1.0未检出Undetected 0.2 0.5 0.01 0.5 0.084 0.1 0.026

例如,教师在幼儿教育中的工作内容不同,因此分工和责任也会有所区别,这一性质便决定了我们对各个教师不同的管理标准。在实际当中,我们要严格要求每一类教师将工作和责任明确到位,做到各尽其责。如教师自身该有的专业教育水准要时时进行考核和提升,该有的专业知识要严格进行标准化要求,该有的才艺技能也要时时进行补充和提高,从而促使教师能够在幼儿心目中成为一个合格的标杆人物,时时刻刻以自己的行为和魅力影响着幼儿的行为举止和思维习惯等,从而使幼儿园教育为幼儿的发展做出正确的引导。

[REFERENCES]

1.4.2 营养成分分析:对人工栽培卵孢侧耳子实体烘干后进行营养成分分析,氨基酸含量测定采用日立L 8900 型氨基酸自动分析仪,参照GB5009.124‐2016《食品中氨基酸的测定》,多糖含量测定采用硫酸苯酚法,参照NY/T 1676‐2008《食用菌中粗多糖含量的测定》,蛋白质含量测定采用凯氏定氮法,参照 GB5009.5‐2016《食品中蛋白质的测定》,灰分含量测定参照 GB5009.4‐2016《食品中灰分的测定》,膳食纤维含量测定参照GB5009.88‐2014《食品中膳食纤维的测定》,矿物质含量测定参照GB5009.268‐2016《食品中多元素的测定》,粗纤维含量测定参照GB/T5009.10‐2003《植物类食品中粗纤维的测定》,脂肪含量测定参照 GB5009.6‐2016《食品中脂肪的测定》,能量和碳水化合物测定参照GB/Z 21922‐2008《食品营养成分基本术语》。卵孢侧耳的各项营养成分和已发表的主要栽培种类营养成分进行对比分析,如:香菇Lentinula edodes(Berk.) Pegler、金针菇Flammulina velutipes (Curtis)Singer、刺芹侧耳 Pleurotus eryngii (DC.) Quél.、柱状田头菇(茶树菇)Cyclocybe aegerita (V. Brig.) Vizzini、双孢蘑菇Agaricus bisporus (J.E. Lange) Imbach. (张璐等 2017)。

2.2.1 形态学特征:野生担子果单生(图1),人工栽培条件下多簇生(图2),鲜菇有海鲜气味,菇蕾期菌盖小而菌柄粗,浅灰色(图2A),2–5d后菌盖圆盘形,扁平或凹,深灰色,直径1.3–3.5cm(图2B),担子果成熟过程中,菌盖中部或近中部逐渐下凹,形成杯状或扇形,中央浅黄褐色,边缘灰褐色,有波状起伏的卷边,直径为4–12cm(图2C、2D),湿度大时菌盖表面粘质状,空气干燥时,菌盖干、开裂。菌褶1–3mm,延生不等长,中等稀疏,白色至淡黄色,孢子印白色。菌柄棒状,近基部稍细 1.5–7.5×0.5–1.5cm,侧生,少中生,表面白色至浅棕色,有纵纹,菌柄基部有短绒毛,象牙白色,菌柄菌肉稍有韧性。在PDA培养基上,菌落白色(图3A)。担孢子 6.4–8.6×3.7–4.9μm,长宽比为1.5–2.0,椭圆形至卵圆形,无色(图3B)。担子 13–24×5.5–7.5μm,棒状,小梗 4 个,小梗长2–3.5μm(图3C、3D)。褶缘囊状体担子状,侧生囊体无。

[11]胡叠:《京剧的创新传统与当代立场》,《中国戏曲学院.京剧与现代中国社会——第三届京剧学国际学术研讨会论文集》,中国戏曲学院,2009年,第7页.

Akdogan HA, Canpolat M, 2014. Comparison of remazolbrillant blue removal from wastewater by two different organisms and analysis of metabolites by GC/MS. Journal of AOAC International, 97(5): 1416‐1420

Berkeley MJ, 1852. Decades of fungi, XXXVII, XXXVIII. Sikkim and Khassya fungi. Hooker’s Journal of Botany and Kew Garden Miscellany, 4: 97‐107

2) 在保留点中按照时间进行排序,选择站前距离最近数据点的时间作为到站时间,且该时间应早于第一位上车乘客的刷卡时间;

Dai YC, Yang ZL, 2008. A revised checklist of medicinal fungi in China. Mycosystema, 27(6): 801‐824 (in Chinese)

Dai YC, Zhou LW, Yang ZL, Wen HA, Bau T, Li TH, 2010.Chinese edible fungus list. Mycosystema, 29(1): 1‐21 (in Chinese)

Fries EM, 1821. Systema mycologicum, sistens fungorum ordines, genera et species, huc usque cognitas, quas ad normam methodi naturalis determinavit, volumen 1. Ex Officina Berlingiana, Lund & Greifswald. 520.http://dx.doi.org/10.5962/bhl.title.5378

Guzman G, 2000. Genus Pleurotus (Jacq.:Fr) P. Kumm(Agaricomycetideae): diversity, taxonomic problems, and cultural and traditional medicinal uses. International Journal of Medicinal Mushrooms, 2: 95‐123

获得的自测序列和从GenBank下载的相关序列构成分析数据库(表 1),首先使用 MAFFT软件(Katoh & Standley 2013)进行序列自动比对,然后进行手动调整,整理好的序列保存为.nex格式(Hall et al. 1999),用MrMTGui软件结合Paup软件和MrModeltest软件检验获得最佳替换模型为GTR+I+G,使用 MrBayes 软件构建系统发育树(Larget & Simon 1999;Ronquist et al. 2012),以4条马尔科夫链以随机树开始,使用蒙特卡洛算法,运算1 000 000代,每100代取样一次,当分裂频率标准差(average standard deviation of split frequencies)降低至0.01以下时确认运算达到稳态而结束运算,如分裂频率标准差大于0.01则继续运算 1 000 000代,计算后验概率(posterior probabilities)时去掉前 25%的树,分枝的后验概率>95%时为显著支持的分枝。

Huang CY, Chen Q, Gao S, Gao W, Zhang JX, 2010. Analysis of internal transcribed spacer regions of main species of the genus Pleurotus. Mycosystema, 29(3): 365‐372 (in Chinese)

【设计意图】从具体的例子出发求距离,相对来说,计算量更小,学生有更充裕的时间去发现解法的多样性,为后续求抽象的点线距离做好准备.

Hall TA, 1999. BioEdit: a user‐friendly biological sequence alignment editor and analysis program for Windows 95/98/NT. Nucleic Acids Symposium Series, 41: 95‐98

Im KH, Nguyen TK, Shin do B, Lee KR, Lee TS, 2014. Appraisal of antioxidant and anti‐inflammatory activities of various extracts from the fruiting bodies of Pleurotus florida. Molecules, 19(3): 3310‐3326

到目前,广东全省共组建水政监察队伍139支,其中省一级队伍5支(包括广东省水利厅水政监察局和4个流域水政分局),地级以上市水政监察队伍22支,县(区)水政监察队伍112支,2/3的队伍人员编制属于公务员编制的执法专项编制和参照公务员法管理编制。

Katoh K, Standley DM, 2013. Mafft multiple sequencealignment software version 7: improvements inperformance and usability. Molecular Biology and Evolution, 30(4): 772‐780

Kirk PM, Cannon PF, Minter DW, Stalpers JA (eds.), 2008.Ainsworth & Bisby’s dictionary of the fungi. 10th edition.CABI Bioscience, CAB International, CABI Europe, UK. 549

在经济发展新常态下,如何进一步贴近新型农业经营主体实际需求,充分发挥财政资金的引导作用,鼓励信贷资金和社会资本参与,财政部等《关于创新投融资模式加快推进高标准农田建设的通知》(财发〔2015〕26号、30号)(本研究简称“创投”项目)正是实施“藏粮于地、藏粮于技”战略,夯实农业发展基础的重要举措。

Larget B, Simon DL, 1999. Markov chain Monte Carlo algorithms for the Bayesian analysis of phylogenetic trees. Molecular Biology & Evolution, 16: 750‐759

Lin SL, Lai TC, Chen L, Kwok HF, Lau CBS, Cheung PCK, 2014.Antioxidant and antiangiogenic properties of phenolic extract from Pleurotus tuber-regium. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 62(39): 9488‐9498

Liu XB, Li J, Horak E, Yang ZL, 2016. Pleurotus placentodes,originally described from Sikkim, rediscovered after 164 years. Phytotaxa, 267: 137‐145

SEM拍照后,用X射线能谱仪(区域扫描)分别测量各组样本釉质表面的钙、磷含量,以获得能量分散谱图像,根据钙磷摩尔百分比计算钙磷比值。

Luo Y, Chen WH, Wang Y, Han YF, Liang ZQ, 2016. A new Geomyces species producing melanin in the medium.Mycosystema, 35(2): 123‐130 (in Chinese)

如图1将单用户数据分级为普通数据和机密数据,普通数据调制成大功率信号s(t),机密数据调制成功率较小的机密信号w(t),然后将大信号和小信号叠加发送,发送信号表示为

Li J, He X, Liu XB, Yang ZL, Zhao ZW, 2017. Species clarification of oyster mushrooms in China and their DNA barcoding. Mycological Progress, 16: 191‐203

Menolli N, Breternitz BS, Capelari M, 2014. The genus Pleurotus in Brazil: a molecular and taxonomic overview.Mycoscience, 55: 378‐389

Ronquist F, Teslenko M, van der Mark P, Ayres DL, Darling A,Höhna S, Larget B, Liu L, Suchard MA, Huelsenbeck JP,2012. MrBayes 3.2: efficient Bayesian phylogenetic inference and model choice across a large model space.Systematic Biology, 61(3): 9‐542

Tegli S, Cerboneschi M, Corsi M, Bonnanni M, 2014. Bianchini R. Water recycle as a must: decolorization of textile waste waters by Lant‐associated fungi. Journal of Basic Microbiology, 54(2): 120‐132

Xu WW, Li B, Lai ETC, Chen L, Huang JH, Cheung ALM,Cheung PCK, 2014. Water extract from Pleurotus pulmonarius with antioxidant activity exerts in vivo chemoprophylaxis and chemosensitization for livercancer. Nutrition and Cancer–an International Journal, 66(6): 989

1.3.1 培养基和栽培料的配制:综合PDA培养基:马铃薯200g、葡萄糖20g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g、维生素B1 10mg、琼脂25g,水1L。原种培养基:麦粒 85%、棉籽壳 10%、磷酸二氢钾 3%、石膏粉1.5%、碳酸钙0.5%,121℃下高压灭菌2h,500g/瓶。栽培料:棉籽壳43%、玉米芯43%、麦麸12%、石灰2%、pH自然,121℃下高压灭菌2h,2kg/袋。

Zhang L, Gong ZQ, Wang WL, Chao H, YU MM, Ge LL, 2017.Flavor material analysis and freshness evaluation of seven large edible fungus. Food Science, 42(3): 274‐278(in Chinese)

这一点在孟子对舜与象的关系建构中也能够得到印证[注]①与“瞽叟杀人”的“亲亲相隐”问题不同,此处的“受害者”为舜本人。因而此处的首要问题是对于暴力的认识,而非血缘亲情与法律的冲突。:“万章问曰:‘象日以杀舜为事,立为天子,则放之,何也?’孟子曰:‘封之也,或曰放焉。’”[4](P305)孟子与万章师生此处的讨论,显然是以承认“象至不仁”“日以杀舜为事”这一事实为前提的,然而即使面对杀身之祸,孟子仍勉力于维护舜至善而全能的形象,“仁人之于弟也……亲爱之而已矣”,而与基本人性本能、孟子自身强调的“舍生取义”等相冲突而显得十分生硬、无奈。

Zervakis GI, Moncalvo, JM, Vilgalys R, 2004. Molecular phylogeny, biogeography and speciation of the mushroom species Pleurotus cystidiosus and allied taxa.Microbiology, 150: 715‐726

曾几何时,白云艺术中学也是毛毛虫的世界:基础设施差,办学条件落后;地处城乡接合部,学校生源大部分来自周边城中村,属于广州市最后一组生源组,学生未能养成良好的学习习惯和行为习惯,文化基础比较薄弱;优秀师资流失,学校管理水平不见起色,教学质量差,学校社会声誉不好。简言之,这是一所典型的薄弱学校,从1956年秋建校起,一直薄弱到21世纪初。

Zhao MR, Zhang JX, Chen Q, Wu Xl, Gao W, Deng WQ, Huang CY, 2016. The famous cultivated mushroom Bailinggu is a separate species of the Pleurotus eryngii species complex. Scientific Reports, doi: 10.1038/srep33066

Zou YJ, Zhang MG, Qiu ZH, Lei M, Zhang JX, 2015. Research advances in economic utilization of Pleurotus spp.Mycosystema, 34(4): 541‐552 (in Chinese)

Zheng HY, Yuan TT, Xie YJ, Chu CQ, 2016. The nutrition analysis of 16 kinds of edible fungus and algae food.Edible Fungi of China, 35(6): 69‐72 (in Chinese)

[附中文参考文献]

戴玉成,杨祝良,2008. 中国药用真菌名录及部分名称的修订. 菌物学报,27: 801‐824

戴玉成,周丽伟,杨祝良,文华安,图力古尔,李泰辉,2010. 中国食用菌名录. 菌物学报,29(1): 1‐21

韩美玲,安琪,吴雪君,郑飞,司静,2017. 不同木质纤维素诱导对糙皮侧耳液体发酵产漆酶活性的影响. 菌物学报,36: 349‐357

黄晨阳,陈强,高山,高巍,张金霞,2010. 侧耳属主要种类ITS序列分析. 菌物学报,29(3): 365‐372

罗韵,陈万浩,王垚,韩燕峰,梁宗琦,2016. 一株产黑色素的地丝霉新种. 菌物学报,35(2): 123‐130

产业兴旺、生态宜居、乡风文明、治理有效、生活富裕是党的十九大报告着重指出的新时代乡村振兴战略的总体要求,是对我国乡村振兴建设思路前景的总体描绘,也是新时期广泛落实乡村振兴战略的指导方针。

颜戊利,王林静,2010. 食用菌矿物质含量测定和营养评价. 食品科技,35(7): 81‐84

张璐,弓志青,王文亮,曹晖,于漫漫,葛林丽,2017. 7种大宗食用菌的呈味物质分析及鲜味评价. 食品科技,42(3): 274‐278

邹亚杰,张美敬,仇志恒,雷敏,张金霞,2015. 侧耳属真菌经济利用的研究进展. 菌物学报,34(4): 541‐552

郑海阳,苑婷婷,谢艳姣,储成群,2016. 16种食用菌类及藻类食品的营养分析. 中国食用菌,35(6): 69‐72

 
王慧君,李国杰,赵瑞琳
《菌物学报》 2018年第05期
《菌物学报》2018年第05期文献

服务严谨可靠 7×14小时在线支持 支持宝特邀商家 不满意退款

本站非杂志社官网,上千家国家级期刊、省级期刊、北大核心、南大核心、专业的职称论文发表网站。
职称论文发表、杂志论文发表、期刊征稿、期刊投稿,论文发表指导正规机构。是您首选最可靠,最快速的期刊论文发表网站。
免责声明:本网站部分资源、信息来源于网络,完全免费共享,仅供学习和研究使用,版权和著作权归原作者所有
如有不愿意被转载的情况,请通知我们删除已转载的信息 粤ICP备2023046998号