聚甲基丙烯酸甲脂是可摘局部义齿的材料，用于修复牙列缺损，通过义齿基托材料恢复牙槽嵴、颌骨及其周围的软组织的缺损，所以要求其性能的长期稳定性，并且要求材料要具有一定的抗菌性等特点。本课题通过在义齿基托材料中添加不同质量比例的纳米CaCO3颗粒形成义齿基托复合材料，通过在不同质量比的纳米复合基托材料上涂抹白色念珠菌的菌液，测定哪一种质量添加比例的抗菌性最好，为临床的应用提供实验依据。

1　材料与方法

1.1　材料

口腔义齿型盒、石膏、红蜡片、分离剂、CaCO3纳米颗粒、义齿基托材料(PMMA)、低温水浴箱、改良液体培养基、实验菌株为白色念珠菌国际标准菌株。

1.2　实验方法

1.2.1　试件的制作

(1)模具的制作：制作一个红蜡块尺寸为60mm×12mm×4mm大小，在口腔义齿型盒中加入石膏，将红蜡块放入口腔义齿型盒内使其表面无石膏，然后在红蜡块上面涂分离剂，将口腔义齿型盒充满，保持室温，待石膏凝固后，按常规的方法烫盒，烫盒的水温勿高，烫盒取出大部分蜡后，用开水冲净，制作二十个阴模。

(2)将纳米CaCO3颗粒与义齿基托材料PMMA按0/100、1/99、2/98、3/97的质量比称重，每一种质量比的纳米CaCO3颗粒和PMMA共称重10g。

①1素填土：以黄褐色为主，稍湿，松散，土质不均匀，为新近回填的粘性土和碎石，场地北侧存在少量建筑垃圾，未完全固结。

样品的处理：无菌的情况下取30g的菌株，放入270mL的生理盐水中，配制成10%浓度的菌液。

增菌的培养：将10%浓度的菌液采用接种环从连续传代培养2次后的白色念株菌(24 h 内，37℃)培养基上培养。

随着观察天数的增加，死亡的细菌越来越多；随着 CaCO3纳米材料的添加，细菌生存率减小。见表2。

1.2.2　菌液的制作

孙叔宝：对全球农业而言，可持续发展仍然面临着诸多重大挑战，不断变化的气候，有限的自然资源和不断增长的人口。在我国，农业生产和粮食丰收仍然不稳固，还受制于消费升级、高质量发展，供给侧改革的深刻影响。

(3)用机械搅拌法将不同质量的纳米CaCO3粉体置于热凝牙托水中形成的混合液与相应质量比的义齿基托材料(PMMA)混合搅拌均匀，制成4组不同质量比的PMMA/CaCO3纳米复合材料。

它是对一个问题的指称，以及对一种不确定性的指称。这种不确定性既是对视觉机制(视觉艺术、视觉传媒、布展和观展的行为)与语言机制(文学、语言、话语、听、说、读写的行为)之间不规范、不固定的边界的描述。......

1.2.3　菌液的涂抹

随着观察天数的增加，死亡的细菌越来越多；随着 CaCO3纳米材料的添加，死亡概率细菌的值增加，生存概率值减小，生存率减小。见表1。

分离培养：挑取少量(刮1～2环)新鲜菌落，用液体沙氏培养基稀释成1.0×106 CFU·m L-1的菌悬液备用。

事实，并不像老鳜鱼想象的那样简单。四细狗不但没有吃枪子，蹲也没蹲，进去几天之后，就出来了。上级给他定性是通奸。不过，他的村长是干不成了。

1.3　统计学方法

采用生存分析的统计学方法，总体生存率的95%的可信区间为(0.0003,0.9870)，从而解决了总体生存率。95%的可信区间在(0,1)范围之外的问题。

2　结果

2.1　不同PMMA/CaCO3纳米复合材料的细菌生存率及其标准误的测定

使菌液均匀地涂抹在不同质量比的义齿基托复合材料上，然后用聚丙烯薄膜盖住，分别观察2d、10d、30d、60d，反复清洗样品和覆盖膜，充分摇匀后，将不同的细菌菌液的洗脱液10倍系列稀释至10～6倍，并取0.2mL接种于液体培养基上，在37℃下培养24h后，以平板上菌落数0-300的平板为准进行活菌计数，抗菌率%的计算公式为(空白对照试件平均回收菌数CFU/片—抗菌塑料试件平均回收菌数CFU/片)/空白对照试件平均回收菌数CFU/片。

 

表1　不同PMMA/CaCO3纳米复合材料的细菌生存率及其标准误

  

生存时间 ti-1(d) 质量比 死亡细菌di(个) 截尾细菌ci(个) 期初观察Li(个) 校正观察细菌Ni(个) 死亡概率细菌qi(%) 生存概率pi(%) 生存率S(ti)(个) 生存率的标准误SE 2100/0 10 4 296 294 0.0340 0.9660 0.9660 0.0106 99/ 1 92 5 295 292 0. 3150 0.6850 0.6850 0.0271 98/2 120 3 297 295 0.4068 0.5932 0.5932 0.0286 97/3 147 2 298 297 0.4949 0.5051 0.5051 0.0290 10100/0 14 5 295 292 0.0479 0.9521 0.9197 0.0293 99/ 1 140 5 295 292 0.4795 0.5205 0.3565 0.0245 98/2 182 4 296 294 0.6190 0.3910 0.2319 0.0204 97/3 205 3 297 295 0.6949 0.3 051 0.1541 0.016230100/0 18 7 293 289 0.0621 0.9379 0.8626 0.0197 99/ 1 187 7 293 289 0.6471 0.3529 0.1258 0.0132 98/2 210 5 295 292 0.7192 0.2808 0.0651 0.1284 97/3 247 4 296 294 0.8401 0.1596 0.0246 0.0042 60100/0 26 10 290 285 0.0912 0.9088 0.7839 0.0232 99/ 1 230 8 292 289 0.7958 0.2042 0.0257 0.0004 98/2 265 7 293 289 0.9169 0.0831 0.0054 0.0013 97/3 287 5 295 292 0.9829 0.0171 0.0004 0.0002

 

表2　不同PMMA/CaCO3纳米复合材料的细菌的生存率

  

生存时间 t(d) 不同质量比 N 死亡细菌d(个) 期初观察细胞数n(个) 条件死亡率 F(%) 条件生存率s(%) 生存率p(x>t) (%) 标准误Sp 2100/0 3 300 0.0100 0.9900 0.9900 0.0057 99/ 1 8 300 0. 0267 0.9733 0.9733 0.0093 98/2 12 300 0.0400 0.9600 0.9600 0.0113 97/3 23 300 0.0767 0.9233 0.9233 0.0154 10 100/0 10 290 0.0345 0.9655 0.9558 0.0120 99/ 1 17 285 0.0596 0.9404 0.9153 0.0163 98/2 25 264 0.0947 0.9053 0.8690 0.0203 97/3 40 251 0.1594 0.8406 0.7761 0.0253 30100/0 15 251 0.0598 0.9402 0.8986 0.0186 99/ 1 41 232 0.1767 0.8233 0.7536 0.0271 98/2 53 210 0.2524 0.7476 0.6497 0.0307 97/3 82 190 0.4316 0.5684 0.4411 0.0317 60 100/0 30 197 0.1523 0.8477 0.7617 0.0288 99/ 1 52 172 0.3023 0.6977 0.5258 0.0331 98/2 63 140 0.4500 0.5500 0.3573 0.0326 97/3 70 102 0.6863 0.3137 0.1384 0.0227

2.2　不同PMMA/CaCO3纳米复合材料的细菌生存率的测定

(4)按4组不同质量比的PMMA/CaCO3纳米复合材料将实验分为四组，每一种质量比的纳米复合材料制作五个试件，4组共制成二十个试件进行抗菌性实验。将4组不同质量比的PMMA/CaCO3纳米复合材料在面团期在二十个阴模模具里进行填胶，经低温水浴(恒温水浴箱中低温75℃)聚合法聚合，然后自然冷却后开盒，抛光机上打磨和抛光，制成60mmx20mmx4mm的含CaCO3纳米材料0%、1%、2%、3%的PMMA/CaCO3纳米复合材料规整树脂块，备用。

综上所述，给予慢性支气管炎患者阿奇霉素联合左氧氟沙星治疗方案，可明显提高治疗效果，使得临床症状得到缓解，值得在深入研讨的基础上进一步推广应用。

3　讨论

口腔中的常见菌是金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、链球菌、乳杆菌和螺旋体等。义齿基托材料在口腔中，长期接触食物和唾液，容易老化和黏附细菌，细菌会释放毒素，对人的身体产生害处，经过牙刷的清洁会磨损，浸泡在水中经假牙清洁片会使材料老化，都对义齿材料有损害，所以如何提高义齿基托的抗菌能力，成为临床医师急待解决的问题，有很多学者做过在义齿基托材料中加入抗菌剂和提高义齿基托材料表面的光滑度等研究使材料表面少粘附细菌，本实验采用将纳米CaCO3材料添加到义齿基托材料中，在义齿基托复合材料上涂抹白色念珠菌，观察不同的添加比例、随着天数的变化，义齿基托复合材料上细菌的存活率，比较哪一种纳米CaCO3材料的添加量的抗菌效果最好，提高其抗菌性。

本实验在义齿基托材料中加入了一定比例的纳米CaCO3材料，利用机械搅拌法使其均匀地分散在义齿基托材料中，有效地封闭了材料内部和表面的孔隙，阻止了细菌进入的通道，利于材料的清洁。同时采用低温聚合的方式，使其缓慢地升温和聚合，减少了材料内部出现的气泡，增加了团聚力，增加了材料的力学性能，但是纳米CaCO3材料不是加入越多越好，抗菌剂的添加量是抗菌应用于临床需确定的重要参数之一，增加抗菌剂的添加量有助于提高材料的抗菌性能，但过量会影响原材料性能,会改变义齿基托材料的性能和使其不能均匀地分散在义齿基托材料中，产生团聚现象，更不利于义齿基托的聚合，因此加入的最佳量还有待进一步的研究。

程序模块，按下倒计时启动按键，利用单片机内部时钟进行60s倒计时，无线电能开始传送能量。当计时结束，主控板外围的继电器1导通，信号发送端停止发送。在该系统中，继电器1就相当于一个自动开关。

在义齿基托复合材料上涂抹细菌法，能描述材料抗菌性能，具有简便易于掌握、结果重复性好的优点，是目前常用的抗菌性能检测方法之一. 浓度较低时，抗菌率也低；抗菌剂添加量增加时，抗菌率也随之提高。当添加量达到1.0%以上时即具有良好的抗菌性。本研究认为添加纳米CaCO3材料能有效地提高义齿基托材料的抗菌性，而且纳米CaCO3材料具有性能稳定、光泽度好、热性能稳定、对填充的材料具有增强增韧的作用、可以提高材料的强度和表面的光洁度、可以添加在牙膏成分中改善其挤出的性能，所以其无细胞毒性，可以安全地添加在义齿基托材料中，并且放入口腔中。本实验为纳米CaCO3材料的添加量为3.0%时抗菌性最佳，而且表面粗糙度也明显的改善。本实验仅证明添加纳米CaCO3材料后材料短期内具有抗菌性，随着时间的推移，纳米CaCO3材料是否会逐渐分解，从而降低义齿基托复合材料的抗菌浓度，进而影响其远期的抗菌性。关于这一点有一些研究生进行过相关研究，例如对添加Ag/Ti O2的抗菌基托进行自然老化和加速老化热处理，认为其抗菌效果持久稳定。本试验还需进一步观察随着时间的推移，纳米CaCO3材料的添加是否还会对义齿基托材料产生抗菌的性能不产生变化，其机械性能、物理性能是否有改变，也有待进一步的研究。

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