马铃薯枯萎病是我国马铃薯生产上的一种重要的真菌性土传病害，特别在我国北方马铃薯种植区，由于片面追求产量，随意加大化肥用量，导致土壤板结，盐渍化，为马铃薯枯萎病发生创造了条件。轮作倒茬不合理，导致土壤营养失衡、土壤恶化，马铃薯枯萎病逐年加重。据2015年在乌兰察布市马铃薯喷灌区、呼和浩特市武川县和包头市达茂旗滴灌区调查，种植马铃薯品种荷15地块马铃薯枯萎病平均发病率32%～65%，严重地块发病率可达84%，平均减产15%～33%。

马铃薯枯萎病是由镰刀菌侵染所致的病害，据Rakhimov等[1]报道，马铃薯枯萎病是由镰刀菌的5个不同种引起的，即茄类镰刀菌（Fusarium solani）、尖孢镰刀菌（F.oxysporum）、串珠镰刀菌（F.moniliforme）、雪腐镰刀菌（F.nivale）、接骨木镰刀菌（F.sambucinum）。据王玉琴等[2]对甘肃马铃薯枯萎病病原菌进行r DNA-ITS序列分析和形态学鉴定 ，首次确认了燕麦镰刀菌（F.avenaceum）在甘肃可引起马铃薯枯萎病。据2008年彭学文等[3]报道，马铃薯枯萎病在河北省是由茄病镰刀菌（F.solani）、串珠镰刀菌（F.moniliforme）以及尖孢镰刀菌（F.oxysporum）引起的。内蒙古地区马铃薯枯萎病的病原菌据薛玉凤[4]报道至少有3种，已分离、鉴定的有尖孢廉刀菌（F.oxysporum）、茄病镰刀菌（F.solani）、三线镰刀菌（F.tricinctum），尖孢镰刀菌是主要致病菌，其致病力最强。笔者在研究过程中又发现了木贼镰刀菌（F.equiseti）、接骨木镰刀菌（F.sambucinum）、芳香镰刀菌（F.redolens）、锐顶镰刀菌（F.sambucinum）、砖红镰刀菌（F.lateritium）、可引起马铃薯发生枯萎病。马铃薯枯萎病是一种土传兼种传的真菌性病害，病原菌以菌丝体或厚垣孢子在薯块或病残体上越冬，来年产生的分生孢子借雨水或灌溉水传播，由植株伤口侵入。田间湿度大、低洼地、重茬地、土温高于28℃的地块容易发病。在大田生产上防治难度较大，目前，尚未发现对枯萎病高抗或免疫的品种，生产上多采用传统防治马铃薯枯萎病的方法，如与禾本科作物等进行2～4年轮作，选用无病种薯进行种植，加强水肥管理，使用施腐熟有机肥，选择地势高、排水良好的地块种植，减少农事操作过程中对薯块的损伤等措施[5-6]，虽然可减轻发病却无法根治该病害。对于该病害的化学药剂防治方法研究的还较少，即使有一些药剂防治马铃薯枯萎病的试验研究[7-8]，也停留在常规药剂的研究基础上，实际防治效果难于满足生产需要。本试验选择了目前国内生产的防治其他作物枯萎病较好的6种杀菌剂对马铃薯枯萎病原菌进行室内毒力测定，为生产中进一步筛选有效防治马铃薯枯萎病化学制剂提供科学依据。

1 材料和方法

1.1 供试病菌及寄主

马铃薯枯萎病菌（Fusarium oxysporum）从内蒙古乌兰察布市商都县田间采集，通过常规方法进行组织分离和培养，然后经单孢纯化得到，通过形态学鉴定及科赫氏法则[9]确定为马铃薯枯萎病菌为尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）[1，10]。病原菌于 PDA 培养基上培养保存于4℃条件下，用于室内毒力测定。

2.1 一般资料 42例患者 CT 检查均提示存在明确的慢性硬膜下血肿（血肿最厚处超过 1 cm），脑室及中线受压，脑沟消失。42例患者中 36例为单侧慢性硬膜下血肿，6例为双侧慢性硬膜下血肿（3例行双侧钻孔引流术，3例仅行单侧钻孔引流术）。

营销界有句话很有名——品质就是营销！我们不从消费者导向和产品导向的不同上解读。因为这句话也说出了局部真理：没有品质的产品，任广告宣传做到极致，其营销效果一定赶不上品质与营销俱佳的产品。如最近火爆异常的“拼多多”上的产品，宣传、价格都有诱人之处，但最终山寨品牌、山寨质量必定行而不远。

1.2 供试农药

50%克菌丹可湿性粉剂（美国默赛技术公司）、99%噁霉灵原药（北京北农绿亨科技发展有限公司）、80%噁霉·福美双可湿性粉剂（北京北农绿亨科技发展有限公司）、70%甲基托布津可湿性粉剂（日本曹达株式会社）、25%氰烯菌酯悬浮剂（江苏省农药研究所股份有限公司）、30%甲霜噁霉灵水剂（北京北农绿亨科技发展有限公司）。

根据对照皿中菌丝的生长情况，采用十字交叉的方法测量各个处理的菌落生长直径，并通过公式计算抑菌率。

1.3 试验方法

本试验通过培养皿培养病原菌，室内检测不同药剂对病原菌的抑制程度，测定供试杀菌剂原药对尖孢镰刀菌菌丝生长的抑制效果。根据前期的预试验结果，将药品配制成试验用母液，按照系列稀释的方法，通过浓度初筛选试验确定适宜的浓度比范围，并以此浓度加入到融化好的PDA固体培养基中，药剂与培养基充分混匀后直接倒入直径为9 cm的培养皿中，制成含系列浓度药剂的 PDA平板（以加入等量无菌水的处理作为对照）。将活化后的待测菌株接种于PDA培养基培养7 d后，用打孔器沿其菌落边缘打取直径为5 cm的菌饼，接种于完全凝固不同处理浓度的含药PDA和空白平板中央，28℃人工气候箱恒温培养，每个处理5皿，3次重复。

用M9缓冲液将线虫冲洗三遍，离心弃上清，加入150 μL M9缓冲液超声破碎虫体提取甘油三酯，超声条件：超声功率为100 W，工作时间为20 s，暂停时间为60 s，重复8个循环；或者采用匀浆器进行研磨：加入M9缓冲液使得总体积为300 μL，进行研磨，最后在倒置显微镜下取20 μL虫液观察线虫是否都已经破碎（研磨过程需冰浴）。线虫研磨充分后，将各浓度组研磨管置于 4 ℃离心机中 5000 r/min离心 10 min，将离心后上清液转移到1.5 mL离心管中。根据试剂盒说明测定甘油三酯含量。

［5］王晓丽.马铃薯枯萎病发生特点及防治措施的初步研究［M］.呼和浩特：内蒙古农业大学，2012.

近年来，靖远县政府通过招商引资、资金扶持等方法相继建成了金杞福源、鼎鑫、同益药业、陇草堂等10多家中药材龙头企业和以金田野、雪山、高原宏、福唐为代表的中药材农民专业合作社160多家，其中3家通过了中药材GAP认证，研发了中药材保健养生等中药材系列产品。中药材产业的迅速发展，为靖远县广大农村富余劳动力拓宽了就业渠道，也带动了全县运输、餐饮、包装、农资经销等相关产业的发展，为地方经济的发展和壮大起到积极的推动作用，中药材产业已成为兴电灌区和贫困山区群众增收致富的重要支撑。

2 结果与分析

2.1 不同杀菌剂原药在相同稀释倍数下对尖孢镰刀菌的抑菌率

有研究表明，国内体育舞蹈研究紧紧围绕体育舞蹈价值和教学展开，研究偏向社会科学的属性；国外体育舞蹈研究则以“Exercise”(体育舞蹈运动) 为关键点展开，研究偏向自然科学的属性，且学科交叉性特征明显[15]。

表1 不同药剂原药在相同稀释倍数下对尖孢镰刀菌的抑菌率 %

药剂名称25%氰烯菌酯30%甲霜噁霉灵50%克菌丹99%噁霉灵60%噁霉·福美双70%甲基托布津不同药剂稀释后抑菌率5×106 78.44 B 38.20 E 61.58 D 61.44 D 65.18 C 88.86 A 1×107 78.13 B 37.76 F 54.51 D 51.10 E 58.79 C 81.37 A 2×107 73.84 B 35.34 E 35.47 E 40.64 D 49.29 C 76.94 A 3×107 68.84 B 27.35 F 35.32 D 29.39 E 42.17 C 75.02 A 4×107 57.88 A 26.29 D 7.51 E 28.98 C 25.71 D 48.48 B 5×107 44.35 A 19.12 B 7.23 D 13.90 C 19.37 B 12.22 C

2.2 6种杀菌剂对马铃薯尖胞镰刀菌的毒力测定

6种杀菌剂的室内毒力测定结果表明，以25%氰烯菌酯的毒力最高，EC50为0.044 1 mg/L（表2），其次为70%甲基托布津，其EC50为 0.112 7 mg/L。99%噁霉灵对马铃薯尖孢镰刀菌的毒力最低，EC50为0.388 2 mg/L。病菌对药剂的敏感性与回归方程的斜率性正相关。本次试验中，供试菌株对药剂50%克菌丹和70%甲基托布津较为敏感，其回归方程中对应的斜率分别为2.539 6和2.029 6。

表2 6种杀菌剂对马铃薯尖孢镰刀菌的毒力测定

农药50%克菌丹99%噁霉灵60%噁霉·福美双70%甲基托布津25%氰烯菌酯30%甲霜噁霉灵毒力回归方程y=2.539 6x+0.00 8 y=0.956x+0.128 8 y=1.279 6x+0.169 7 y=2.029 6x+0.271 1 y=0.281x+0.487 6 y=1.383 3x+0.199 5相关系数r 0.979 7 0.974 7 0.986 4 0.862 2 0.912 6 0.946 5 EC50/（mg/L）0.193 7 0.388 2 0.258 1 0.112 7 0.044 1 0.217 2

3 结论与讨论

本试验采用生长速率法测定了6种杀菌剂对马铃薯枯萎病病原菌菌丝生长的抑制作用，从测试结果可以看出，每个药剂随着稀释浓度的提高，抑菌效果均不同幅度的增加，在试验稀释浓度下抑菌率效果最好的是甲基托布津，依次为氰烯菌酯、噁霉·福美双、克菌丹、噁霉灵、甲霜噁霉灵。6种药剂毒力结果显示，氰烯菌酯和甲基托布津对马铃薯枯萎病菌的毒力最高，其EC50分别为 0.044 1 mg/L和0.112 7 mg/L，其次为克菌丹，其EC50为0.193 7 mg/L。病菌对药剂的敏感性与回归方程的斜率性正相关。本次试验中，供试菌株对药剂克菌丹和甲基托布津较为敏感，其回归方程中对应的斜率分别为2.539 6和2.029 6。

［3］彭学文，朱杰华.河北省马铃薯真菌病害种类及分布［J］.中国马铃薯，2008，22（1）：31-33.

参考文献：

［4］薛玉凤.马铃薯枯萎病病原菌学初步研究［M］.呼和浩特：内蒙古农业大学，2012.

［2］王玉琴，杨成德，陈秀蓉，等.甘肃省马铃薯枯萎病（Fusarium avenaceum）鉴定及其病原生物学特性［J］.植物保护，2014，40（1）：48-53.

本试验只采用菌丝生长速率法进行室内毒力测定，通过不同浓度药剂对马铃薯尖孢镰刀菌生长的抑制率做出标准曲线，研究马铃薯尖孢镰刀菌对不同药剂的敏感性。不同药剂对孢子萌发的影响没有做进一步的研究，而且试验中所使用的杀菌剂均从流通市场收集，多为商品制剂，制剂中的助剂或其他填充物对病菌可能会产生一定的影响，在田间防控马铃薯枯萎病时，根据枯萎病病原菌与寄主和周围环境之间的复杂关系，选用抗病品种或无病种薯，进行合理轮作，结合土壤改良、有机肥和生物菌肥的使用提高土壤中有益微生物数量，加强田间管理等措施，依据本试验室内毒力测定结果，反复开展大田试验进行药剂筛选研究，探索出对马铃薯枯萎病综合治理行之有效的一套方法，解决生产中马铃薯枯萎病对马铃薯产业发展的影响问题。

［1］KHAKIMOV A.Wilt of potatoes in Uzbekistan ［J］.Zashehital Karantin Rastenii，2000（3）：46.

将6种杀菌剂折合成原药稀释成相同浓度梯度后，观察其对马铃薯尖孢镰刀菌的抑制效果。结果表明，在稀释1×107到5×106倍的6个浓度梯度中，25%氰烯菌酯对尖孢镰刀菌的抑制作用在各个浓度表现均较好，抑菌率为44.35%～78.44%；30%甲霜噁霉灵对尖孢镰刀菌的抑制能力最差，抑菌率为19.12%～38.20%，在稀释5×106的试验最高浓度下对病原菌的抑菌率仅为38.20%。70%甲基托布津对马铃薯尖孢镰刀菌的抑菌率随浓度变化最大，在稀释5×107倍时抑菌率仅为12.22%，在稀释4×107倍时对病原菌抑菌率为48.48%，稀释3×107倍时对病原菌抑菌率增至75.02%，在稀释5×106倍时对镰刀菌抑菌率达到88.86%。对每个药剂不同稀释浓度下的抑菌率进行Duncan新复极差法方差分析后表明，6种药剂之间在5×106稀释浓度下，50%克菌丹和99%噁霉灵处理间无差异，与其他药剂之间均存在极显著差异，其他4个药剂处理之间存在极显著差异；在1×107稀释浓度下，6种药剂之间均存在极显著差异；在2×107稀释浓度下，30%甲霜噁霉灵和50%克菌丹之间无差异，与其他药剂之间均存在极显著差异，其他4个药剂处理之间存在极显著差异。其他3个稀释浓度下药剂间抑菌率的方差分析结果见表1。

将各药剂中的有效成分在PDA培养基中的浓度作为测试浓度，计算回归方程和抑制中浓度EC50。利用DPS统计软件和Excel软件对测定数据进行统计分析，得到毒力回归方程、EC50及相关系数等，比较这6种杀菌剂在试验室培养条件下对马铃薯尖孢镰刀菌的抑制作用。

［6］王晓丽，蒙美莲，薛玉凤，等.马铃薯枯萎病初侵染来源及栽培与发病的关系 ［J］.中国马铃薯，2012，26（3）：169-173.

［7］陈春艳，陈玉章，王朝贵，等.马铃薯枯萎病的防治药剂筛选［J］.贵州农业科学，2014，42（7）：43-45.

在试验点气候条件下的桑树物候期为2月上旬芽开始萌动，2月下旬芽明显松动，3月下旬至4月上旬开花，4月下旬桑果开始着色，5月上中旬桑果成熟，新梢一直生长到停止，其中头年夏伐条经过冬季短梢抽发新梢伸长生长从3月下旬开始，在采春蚕叶期间继续生长，即一般情况下在5月至6月上旬为春蚕采叶期，直至10月中下旬停止生长；而当年夏伐条抽新梢伸长生长从6月下旬开始，直至11月下旬才停止生长。且新梢的生长发育对桑叶产量有重要影响。由此，调查4月至6月上旬新梢生长发育情况对估计桑叶产量有一定指导意义。

［8］薛玉凤，蒙美莲，胡俊，等.6种杀虫剂对马铃薯枯萎病菌的室内毒力测定［J］.中国马铃薯，2012，26（4）：228-230.

［9］方中达.植病研究方法［M］.北京：农业出版社，1979：116.

［10］陈慧，薛玉凤.内蒙古马铃薯枯萎病病原菌鉴定及其生物学特性［J］.中国马铃薯，2016，30（4）：226-234.