植物组织培养也称离体培养，是指将植物体各部分组织，如叶肉组织、胚乳、薄壁组织等进行培养，从而获得再生植株。本试验以姬玉露幼嫩的新生叶片为材料，进行了不同浓度配比培养基的分化诱导及生根试验，得出了比较客观的结果，以供参考。

国内专家叶廷芳先生说：“熟悉卡夫卡的人大都有一个突出的感觉：他与父亲的关系始终十分紧张，而且在他的创作中有浓重的投影。”[5]87试图理解卡夫卡的世界也应该由他与父亲的关系谈起，或者更甚者，卡夫卡的生活、写作甚至于与女友的关系也同时溯源于他与父亲的关系，无论是书信，还是卡夫卡自身的作品，我们都可以看到在卡夫卡的生命中父亲的作用有多么巨大——其实正如卡夫卡在信中想要传达给父亲的消息一样，“你远远比你想象中的要对我影响深刻——我乐于夸大这种效果”[4]461-501。

1 材料与方法

1.1 试验材料

姬玉露幼嫩的新生叶片。

原发性输卵管癌肉瘤的转移途径与卵巢恶性肿瘤的转移途径相似。①盆腔及腹腔内扩散：癌细胞侵入并突破输卵管肌层蔓延到盆腔邻近器官，或癌细胞脱落至盆腹腔直接种植于盆腹腔各脏器表面；②淋巴结转移：盆腔内有极丰富的淋巴管，可以连通输卵管、卵巢及子宫，因此经常发生盆腔淋巴结及腹主动脉旁淋巴结的转移；③血行远处转移：在疾病晚期可经血液转移至肝脏、肺脏、骨骼等器官，转移灶含上皮或间质成分之一，而两种成分同时存在者少见。这可能与两种成分主要的转移途径有关，恶性上皮成分(癌)更易发生淋巴结转移，而恶性间叶成分(肉瘤)更易发生血行转移[10]。

1.2 试验方法

1.2.1 材料的选择与准备 选择幼嫩的姬玉露新生叶片，用自来水冲洗2～3 h，置于超净工作台下用75%的无水乙醇消毒10 min，然后用0.1%的升汞浸泡消毒7～8 min，滤掉升汞，再用无菌水清洗5次，吸干组织表面的水分，然后切成0.4 cm×0.4 cm的小块，接种于愈伤诱导培养基中。

1.2.2 诱导分化培养基的筛选 将MS培养基作为基本培养基，同时添加蔗糖30 g/mL和琼脂6 g/mL，然后根据试验添加不同浓度的激素。试验共设置9个处理，以6-BA和NAA两种激素的不同浓度配比为水平，设计正交试验。其中，因子1的3个水平为2 mg/L、3 mg/L、4 mg/L的6-BA，因子2的3个水平为 0.05 mg/L、0.10 mg/L、0.20 mg/L 的 NAA。各处理培养基配制好后，调节pH至5.8。

从2可以看出，当6-BA浓度为2 mg/L时，姬玉露愈伤组织不定芽的平均长度较低，外植体的平均不定芽个数也较少，其中NAA浓度为0.05 mg/L时，各指标性状最差；但随着NAA浓度的不断增大，不定芽的平均长度逐渐增长，外植体的不定芽数也逐渐增多。当6-BA浓度为3 mg/L时，姬玉露愈伤组织不定芽的个数较6-BA浓度为2 mg/L时有很大提高，且NAA浓度为0.1 mg/L时，外植体的不定芽个数最多，平均达10.80个。同时，在此浓度下，不定芽的长度也最长，平均达1.06 cm。当6-BA浓度为4 mg/L时，姬玉露外植体不定芽个数也较多，不定芽长度也较长，但均不及3 mg/L的6-BA浓度下对应的数值。整体来看，在MS培养基中添加3 mg/L的6-BA和0.1 mg/L的NAA时，姬玉露外植体不定芽个数最多，长度最长，说明该浓度配比最有利于促进不定芽的生长，这与姬玉露愈伤组织的诱导分化情况一致。方差分析显示：在不定芽平均长度上，处理5、处理8、处理7之间差异不显著，处理7、处理6、处理4、处理3之间差异不显著，处理5、处理8与其余处理相比，差异显著；在不定芽个数上，处理5与其他处理相比，差异均达显著水平。

不同浓度的生长激素对姬玉露愈伤组织的诱导分化有不同影响。从表1可以看出，当6-BA浓度为2 mg/L时，姬玉露愈伤组织分化的外植体数较少，其中NAA浓度为0.05 mg/L时，分化的外植体数最少，仅为16个；但随着NAA浓度的不断增大，分化的外植体数逐渐增多，诱导分化率也相应提高。当6-BA浓度为3 mg/L时，姬玉露愈伤组织分化的外植体数量均较多，且NAA浓度为0.1 mg/L时，分化的外植体数最多，达33个。当6-BA浓度为4 mg/L时，姬玉露愈伤组织分化的外植体数量明显减少，但随着NAA浓度的增大也不断增多。整体来看，在MS培养基中添加3 mg/L的6-BA和0.1 mg/L的NAA时，姬玉露愈伤组织分化率最高，说明该浓度配比最有利于促进其愈伤组织的分化，其次为3 mg/L的6-BA和0.2 mg/L的NAA，2 mg/L的6-BA和0.05 mg/L的NAA浓度配比下分化率最低。方差分析结果表明：3 mg/L的6-BA和0.1 mg/L的NAA配比下，姬玉露愈伤组织分化率与其他配比相比，均达显著水平。同时，在试验过程中，也出现了少数培养基污染的情况，污染情况以处理1、处理7最高，均污染了2瓶；处理2、处理4、处理6、处理8均污染了1瓶，其余处理未见培养基污染的情况。

1.2.5 数据处理 数据采用Execl2003和DPS3.01数据处理软件进行处理。

2 结果与分析

2.1 不同激素浓度配比对愈伤组织诱导分化的影响

1.2.4 生根培养基的筛选 生根培养基使用1/2MS培养基。在前期筛选好的诱导分化培养基基础上添加不同浓度的IBA筛选生根培养基。生根培养基共设4个处理，IBA浓度分别为0 mg/L、1 mg/L、2 mg/L、3 mg/L。将大于2 cm的芽苗转入生根培养基，培养条件同于诱导分化培养条件，每天观察并统计生根情况，3周后结束统计，并进行数据处理和分析。

2.2 不同激素浓度配比对芽增殖的影响

1.2.3 诱导分化的接种及培养 将切好的姬玉露小块接种至培养基中，每个培养基接种5个外植体，每个处理8个重复，接种好的培养基置于人工智能培养箱中，温度为25℃，湿度50%～60%，每天光照处理16 h，光照强度2 000 lx，黑暗处理8 h。每天观察并统计愈伤组织诱导情况，4周后结束统计，并进行数据处理和分析。

众所周知，轮滑运动是一项有益于人们全身性的运动项目，在玩轮滑的过程中，人们不但可以锻炼四肢的协调性、稳定性，还可以灵活的运用左右脑，以此来增强腿部、胸部、臂部肌肉，以及腰腹的运动能力。轮滑运动还有助于人们畅通血液循环，促进心脑血管系统与呼吸系统机能的改善，从而增强新陈代谢，对老年轮滑爱好者也有很大的帮助。与此同时，轮滑还是一项有氧运动，而人们合理的进行有氧运动可以强化人体的血管机能，能够使氧气充分与血液结合从而加速血液流动，减少血栓出现的可能性，并且轮滑运动能够起到燃烧脂肪，以此来达到减肥瘦身的作用。

 

表1 不同激素浓度配比下姬玉露愈伤组织的诱导分化情况

  

处理 6-BA(mg/L) NAA(mg/L) 分化的外植体个数(个) 芽诱导分化率(%) 污染培养基(瓶)1 2 0.05 16c 40.0 2 2 0.1 18c 45.0 1 3 2 0.2 25b 62.5 0 2 4 0.05 27b 67.5 1 5 3 0.1 33a 82.5 0 3 6 0.2 28b 70.0 1 7 4 0.05 17c 42.5 2 3 8 0.1 19c 47.5 1 9 4 0.2 21c 52.5 0 4

 

表2 不同激素浓度配比下姬玉露芽的增殖情况

  

处理 6-BA(mg/L) NAA(mg/L) 不定芽平均长度(cm) 外植体平均不定芽个数(个) 不定芽增殖率(%)1 2 0.05 0.52d 0.68e 145 2 0.1 0.59cd 2.15d 192 3 2 0.2 0.78b 2.82d 220 2 4 0.05 0.81b 4.55cd 160 5 3 0.1 1.06a 10.80a 368 3 6 0.2 0.82b 8.52b 325 7 4 0.05 0.95ab 4.61cd 267 3 8 0.1 1.04a 5.75c 288 9 4 0.2 0.65c 8.20b 259 4

2.3 不同IBA浓度对生根的影响

试验以2 cm以上的无根试管苗为材料，将其转接到不同IBA浓度的生根培养基中。以不加激素的1/2MS培养基为参照，对比添加不同浓度的IBA后，统计不定芽的生根率，得出最优配比。从表3可以看出，当培养基中IBA浓度为0 mg/L时，姬玉露愈伤芽也能生根，但生根数较少，且根长较短，幼苗平均根条数只有1.2条，平均根长仅为1.69 cm。当培养基中加入1 mg/L的IBA时，愈伤芽平均根条数有所增多，平均根长和生根率也有所提高。当培养基中IBA浓度为2 mg/L时，姬玉露愈伤芽的各项生根指标最优，因此得出该浓度最有利于愈伤芽生根。进一步增加IBA的浓度，当提高到3 mg/L时，姬玉露的根条数和根长均有所减少，生根率也降低。因此，综合得出：在1/2MS培养基中，添加2 mg/L的IBA最有利于姬玉露愈伤芽生根。

 

表3 不同IBA浓度配比下姬玉露愈伤芽的生根情况

  

处理 IBA浓度(mg/L)愈伤芽平均根条数(个)平均根长(cm)平均生根率(%)1 0 1.2d 1.69c 21.6 2 1 1.9c 2.52b 39.8 3 2 4.1a 3.87a 68.5 4 3 3.2b 2.83b 38.2

3 结论

适宜激素配比的培养基能促进愈伤组织的分化，诱导不定芽的生根。试验结果表明：MS培养基中添加3.0 mg/L的6-BA和0.1 mg/L的NAA，最有利于姬玉露愈伤组织分化；1/2MS的培养基中添加2 mg/L的IBA，最有利于姬玉露愈伤芽生根。因此，在姬玉露组织培养上，推荐该配比的培养基。