液基薄层细胞学技术应用于妇科宫颈细胞学检查技术已久，近年来，该项技术也被应用于非妇科领域，尤其是胸腹水及尿液、脑脊液等体液，以诊断体液中是否存在恶性肿瘤细胞。依靠液基细胞检查，仅能初步筛选出异型的核异质细胞，对于其来源的鉴定存在困难，尤其是对于一些早期转移性肿瘤原发灶的寻找。本研究在液基薄层细胞学检查的基础上，通过富集细胞，借助蛋清细胞蜡块技术，对可疑肿瘤细胞进行苏木素-伊红（HE）切片观察及免疫组织化学（IHC）技术，进一步加强了对肿瘤细胞形态学的观察及肿瘤细胞的分型，可判断恶性肿瘤细胞的来源，从而为临床查找恶性肿瘤的原发灶提供较为准确的信息及线索。

3.2.5 避免生理盐水冲洗气管插管 生理盐水滴注到气管插管造成管壁生物膜冲入肺内，易形成感染。研究认为，生理盐水冲洗气管插管没有起到稀释痰液的作用，反而使肺的氧合下降，血压及心率增快，颅内压增高及发生VAP风险增大［47］。

1 资料与方法

1.1 资料

收集我院2014-2015年体液液基细胞学检查阳性的病例20例，男性14例，女性 6例；年龄 34～88岁，平均（61±3）岁；胸水 15 例，腹水 5例。临床资料均完整。

提高自动化水平，实现减员增效。增效扩容改造大幅度提升了电站自动化程度，实现“无人值班，少人值守”，减员1211人，减员比例达23%，每年可减少支出3600万元，增强了电站发展后劲。

1.2 方法

1.2.1 0.1%蛋清盐水液体的制备 取新鲜鸡蛋1枚，用注射器抽吸0.5mL鸡蛋清，与0.9%的生理盐水500mL相混合，滴加10%甲醛溶液10mL，上下摇动混匀，置于冰箱中冷藏备用（有效使用期建议不超过3个月，以防变质）。

1.2.3 蛋清细胞蜡块的制作 将塑料管内离心沉淀后的体液弃去上清液，保留试管底部富集细胞部分，按1∶1配比加入0.1%蛋清盐水液体，混匀，再加5倍80%的乙醇液体，用吸管反复吸附混合均匀后复置入离心机中（1500r·min-1）离心25min，吸管吸去上清液，加入3倍4%中性福尔马林液体，挤压塑料软管底部，使细胞块与管壁分离，悬浮于固定液中，置于包埋盒中，经脱水机脱水、浸蜡，石蜡包埋，切片，HE染色，观察，定位后做免疫组化。

1.2.2 液基薄层细胞学制片 将所送检的新鲜体液（要求至少500mL以上）放置于离心管内，置于高速离心机3000r·min-1离心沉淀，离心10min，每次离心后，弃去离心管中上2/3液体，保留离心管底部1/3液体，继续将剩余体液倒入离心管中，直至全部液体离心完毕；弃去上清液，保留离心管内约10mL，将液基细胞检查学检查试剂瓶内保存液倾去约3/4，然后加入1支离心沉淀的体液备用制片。自动完成制片，HE染色；剩余3支离心管内体液归置于2支塑料试管内，置于离心机继续离心10min，进行蛋清细胞蜡块的制备。

1.2.4 IHC 选用抗体均购自福州迈新生物技术有限公司，操作按试剂说明书进行，DAB显色，苏木精复染，中性树胶封固。

体液细胞学检查技术在既往的病理检查中占有重要的地位，尤其对于未明确原发灶、出现浆膜腔积液的病例。本组病例通过利用蛋清制备细胞蜡块技术，代替了既往使用的凝胶制备技术，并且可以随时制备，方便、简单、经济、实用。恶性肿瘤细胞在形态上各有其特点，可以借助蛋清细胞蜡块技术，通过IHC鉴别转移性肿瘤。

2 结果

2.1 诊断结果

上文提到的减法设计技法当中的破损设计方法，实际上也是对于服装面料进行做旧，利用撕裂、腐蚀等方法，使服装面料呈现出复古风。钉结利用热压和黏合等方式在服装面料上添加丝带、羽毛、皮毛等材料，使服装面料的立体感得到提升。

 

表1 两种体液中恶性肿瘤的诊断结果［例（%）］

  

类别 阳性例数 肺腺癌 肺小细胞癌 恶性间皮瘤 乳腺癌 胆囊癌胸水 15 10（66.67） 2（13.33） 1（6.66） 2（13.33） 0腹水 5 0 0 2（40.00） 1（20.00） 2（40.00）

2.2 免疫组化结果

胸腹水转移性肺小细胞癌较多见，本组病例中占阳性病例数13.33%。癌细胞的特点是细胞小，核富含染色质，呈细颗粒状，核仁不明显，核膜薄，胞浆少而浅染，有时呈细颗粒状；细胞蜡块中肿瘤对部分酶的单抗或多抗呈阳性，如NSE、肽类激素降钙素、CgA呈阳性反应[1]。CD56定位于细胞膜，TTF-1定位于细胞核，二者联合使用有助于肺小细胞癌的诊断[2]。腺癌是比较常见的肺癌，本组病例中占66.66%。从细胞学角度观察，腺癌细胞由不同类型的肿瘤细胞构成：杯状细胞型，胞浆内充满黏液；支气管腺细胞型细胞呈立方状或多角形；Clara细胞型细胞呈鞋钉状或矮柱状；二型肺泡上皮细胞呈立方状或低柱状；细胞游离缘呈圆顶状，胞浆常有细小空泡[3]。肺腺细胞核大，畸形，染色质粗凝块状，核浆比明显增大，异型性明显。肺腺癌细胞在免疫组化中表达CK7、CK20；NapasinA是一种天冬氨酸蛋白酶，表达于Ⅱ型肺泡细胞，标记巨噬细胞[3]，CK7、NapsinA和TTF-1联合使用起到互补作用，能有效判断肺腺癌。

胸水中转移性肺腺癌10例（66.67%），转移性肺小细胞癌2例（13.33%）；恶性间皮瘤胸水中1例（6.66%），腹水中 2例（40.00%）；转移性乳腺癌胸水中2例（13.33%），腹水中 1例（20.00%）；腹水中检出转移性胆囊癌2例（40.00%），见表1。

3 讨论

1.2.5 阳性标记细胞学特征 各种细胞阳性表达均经过组织学最终确定，并追问患者是否有原发疾病史。结合液基薄层细胞学检查，配合蛋清细胞蜡块及IHC技术，鉴定各类肿瘤细胞。细胞必须在特定的抗原部位表达，在上述抗体着色部位出现均匀棕黄色，可判定阳性。同时将细胞蜡块HE切片与IHC联合诊断，依据不同肿瘤的抗原表达，判定肿瘤细胞的来源。

  

图1 浆膜腔积液中不同肿瘤细胞的阳性表达（■：阳性细胞）

蛋清细胞蜡块中，肿瘤细胞在免疫组化神经特异性烯醇化酶（NSE）、嗜铬素 A（CgA）、甲状腺转录因子1（TTF-1）表达阳性支持肺小细胞癌的诊断；细胞角蛋白7（CK7）、NapasinA在肺腺癌细胞中均表达阳性；3例恶性间皮瘤在CK5/6和MC细胞膜为阳性表达。20例阳性病例中，免疫组化结果显示 Pr、Er、P120、CerbB-2 等在转移性乳腺癌中可表达阳性；2例癌胚抗原（CEA）、CK7、EMA及Villin阳性者，结合病史确诊转移性胆囊癌，见图1。

在肿瘤性浆膜腔积液中，转移性肺腺癌和胸膜恶性间皮瘤细胞形态学十分相似，需要通过免疫组化才能明确诊断。高分化上皮性间皮瘤细胞胞浆内常出现单个或多个边界清楚的圆形空泡，显示胞浆内间隙。肿瘤细胞散在，较正常间皮细胞大，异型性明显，核仁明显，胞质丰富。在细胞蜡块中，细胞富集，丰富，但立体感不强，平铺，位于同一平面上，HE染色清晰。在蛋清细胞蜡块切片中，细胞表面的游离缘表面常可见一圈“刷状缘”，该特点在与腺癌的鉴别诊断中非常有用。免疫组化中多单抗在鉴别恶性间皮瘤与腺癌中有一定价值；在上皮性标志中最有用的CEA、单抗BerEP4和BG8（血型相关糖蛋白），再加上波形蛋白（Vimentin）和低分子量角蛋白组成一组鉴别诊断抗体。

乳腺癌转移至胸膜腔或腹腔内临床不是很常见，一般都有原肿瘤切除术后复发病史；HE形态学上细胞常呈多形性，核分裂像常见，免疫组化 Pr、Er、P120、CerbB-2、P53 等在转移性乳腺癌中可表达。CEA、CK7、EMA及Villin阳性，结合病史可确诊转移性胆囊癌。

有文献[4]显示，原发灶未明的转移性恶性肿瘤占癌症患者发病率的4%，在某些系统的恶性肿瘤中占发病排序第8位。本研究在薄层液基细胞学制片、HE染色观察中，异型性较大的肿瘤细胞可以做出恶性肿瘤细胞的诊断。但还不能凭借HE明确分辨恶性肿瘤细胞的分化程度。细胞蜡块可以在形态学基础上，进一步通过IHC技术或者特殊染色技术，对这些细胞进行性质判定，为临床寻找原发病灶提供有价值的线索，并为临床决定治疗的方式或判断患者预后提供直接证据。

图10为电压补偿后各变流器输出电压的仿真结果。由图10可以看出,小扰动发生后,各变流器输出电压动态响应过程中超调量较小,响应较快,上下波动范围不超过5 V,且输出电压稳定在额定电压,满足了负荷可靠供电的要求,保证了系统的稳定性,验证了本文控制方法的有效性。

参考文献：

［1］ Brasch F，Ochs M，Kahne T，et al.Involvement of napsin A in the C-and N-terminal processing of surfactant protein B in type-Ⅱ pneumocytes of the human lung［J］.J Biol Chen，2003，278（49）：49006-49014.

［2］ 罗巧明，邵少尉，梁少姬，细胞块辅助支气管刷检液基细胞学在肺癌分型诊断的应用［J］.诊断病理学杂志，2015，22（11）：667.

［3］ Stephen S Sternberg.诊断外科病理学［M］.第3版.北京：北京大学医学出版社，2003.

［4］ 陈学敬，周丽娟，曲杨.沉渣包埋联合免疫组化在胸水转移性肺腺癌与胸膜恶性间皮瘤鉴别诊断中的应用［J］.诊断病理学杂志，2014，2（5）:263-266.