糖尿病心肌病（diabetic cardiomyopathy，DCM）是糖尿病重要的并发症之一，目前西药对本病的预防和症状缓解收效甚微。梓醇是地黄的提取物，有研究[1-2]表明梓醇可以加强骨骼肌对葡萄糖的吸收，促进肝糖原的生成，抑制糖异生来降低血糖，但对心肌保护方面鲜有报道，因此本研究旨在观察梓醇对糖尿病心肌病的保护作用，为临床应用提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 动物造模及分组 动物造模及分组方法同本课题组前期动物实验[3]。

与飞机制造、大型能源装备制造业不同，印刷行业的集中度还不够高，是一个以中小企业为主力军的行业。“长尾理论告诉我们，任何不方便都可以成为商业机会。未来，多种印刷方式的并存是必然。”徐建国理事长解释说，协会需要扮演的角色是，把行业可能遇到的情况、影响，发生的改变，可参考路径等告诉大家，做称职的“天气预报员”。至于具体怎么去做，还是要由企业自己做出判断。

1.2 心功能E/A、E/E'的测量 应用多普勒超声心动图检测E/A及E/E'评估心肌舒张功能：测定二尖瓣舒张早期血流速度峰值（E）、二尖瓣瓣环舒张早期运动速度（E'）、二尖瓣舒张晚期血流速度峰值（A）。

从表5中可以看出，除了成长满意度、上司满意度较低外，其他满意度都比较高，说明知识型员工对工作感受基本满意，这与该企业发展环境良好有关。量表各个因素之间以及和总绩效之间相关系数皆通过了P<0.01的显著检验，说明满意度的因素方向一致，都对整体满意度起作用。笔者又对量表的实际测量信度进行分析(表6)。

1.3 组织标本采集与处理 灌胃12周后禁食12 h，以2%戊巴比妥钠（45 µg/g）腹腔给药麻醉，将大鼠呈仰卧位展开固定于手术架上，沿腹正中线切开皮肤，迅速打开胸腔取出心脏，冰盐水冲洗并剔除血管、被膜，滤纸吸干后沿室间隔分离左心室置于4%多聚甲醛溶液中固定24 h，待免疫组化染色分析。

依据《现代汉语词典》的解释，公信力即是公众信任的力量。公信力是指在社会生活中，公共权力面对时间差序、公共交往以及利益交换表现出的一种公平、正义、效率、民主、人道、责任的信任力。地方政府官员微博的公信力可以理解为地方政府官员微博具有的使公众信任的力量。官员微博公信力的影响因素主要包括信息的真实、全面、及时，内容的思想高度，官员个人的素质修养等方面。官员微博的公信力对其发展和作用的有效实现具有重要的意义。

1.4 免疫组织化学 按试剂说明书进行操作，应用Image-pro-plus6.0图像分析软件，从每组随机选取5张切片，测定阳性染色物质的平均光密度（mean optical density，MOD），用积分光密度的平均值，来反映免疫反应物的表达强度。

2.1 梓醇对大鼠心功能E/A及E/E'的影响 与正常组相比，模型组及各干预组E/A均减低，同时E/E'均增高，差异有统计学意义（P＜0.05）；与模型组相比，各干预组均可改善大鼠心功能E/A、E/E'，以高剂量组效果最佳（P＜0.05）。对照组与高、中剂量组E/A比较差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。

2 结果

1.5 统计学分析 实验数据用统计软件SPSS 22.0进行统计分析，计量资料以均数±标准差（±s ）表示，干预前后数据比较采用t检验分析，组间数据比较采用单因素方差分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2.2 梓醇对大鼠心肌组织TGF-β1的影响 由切片可看出TGF-β1的表达主要在心肌细胞胞浆内黄褐色为阳性信号。正常组仅可见少量散在分布于细胞膜，纤维结构完整，其余各组TGF-β1表达升高（P＜0.05）。与模型组比较，其他各组TGF-β1染色降低明显，差异有统计学意义（P＜0.05）；高剂量组胞浆内黄褐色颗粒沉积较少，呈弱阳性，心肌纹理较整齐，与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05），见图1。

 

表1 梓醇对大鼠心功能E/A、E/E'的影响（±s ）

  

注：与正常组相比，# P＜0.05；与模型组相比，△P＜0.05；与对照组相比，▲P＜0.05

 

组 别 n E/A E/E’正常组 10 1.44±0.01 9.91±2.04模型组 7 0.48±0.12# 20.35±1.33#对照组 9 1.17±0.25#△ 13.37±1.11#△高剂量组 8 1.25±0.21△ 11.96±1.13#△▲中剂量组 8 1.07±0.13#△▲ 13.41±1.26#△▲低剂量组 7 0.96±0.09#△ 14.91±1.61#△

  

图1 梓醇对大鼠心肌TGF-β1表达的影响（±s ）

 

注：与正常组相比，# P＜0.05；与模型组相比，△P＜0.05，；与对照组相比，▲P＜0.05

3 讨论

地黄为玄参科植物地黄Rehmannia glutinosa Libosch.的新鲜或干燥块根，最早记载于《神农本草经》被列为上品，又被称为“四大消渴圣药”之一。梓醇是从地黄中提取以环烯醚萜类为主的活性成分，2010版《中国药典》将梓醇作为地黄质量评价的重要指标，其中鲜地黄中梓醇含量最高。现代药理研究发现梓醇具有利尿、降血糖、抗感染、抗肿瘤、神经保护[4-5]、有助于脑缺血后神经修复[6-7]、抗抑郁[8-11]、促进细胞增殖[12-13]、抑制氧化应激[14]等作用。

DCM病理学上主要表现为心肌细胞肥大和心肌间质纤维化，在以往的研究中普遍认为DCM是以心肌细胞肥大为主，但随着研究的不断深入，学者们逐渐注意到心肌纤维化（myocardial fi brosis，MF）在DCM的发生和发展中同样起着不容忽视的作用，同时被认为是DCM特征性的病理改变[15-16]。 MF是多种心脏疾病发展到终末期的共同病理特征，发病机制复杂，受多种因素调控，其中转化生长因子-β（transforming growth factor-β，TGF-β）是MF重要的促发因子，已成为治疗新靶标。TGF-β在心肌细胞中主要表达的亚型是TGF-β1，在高糖状态下，TGF-β1会持续增加，促使肌性成纤维细胞的增殖、分化，当其含量超过终止信号时会介导相应蛋白转录，从而使细胞外基质（extracellular matrix，ECM）中胶原蛋白、纤维连接蛋白和蛋白多糖含量大幅增加，加剧胶原成分的累积，并减少胶原酶、弹性蛋白酶的分泌而抑制ECM降解[17-19]，胶原网络发生改变，使心肌顺应性下降，增加心肌僵硬度，影响心脏正常的收缩与舒张，造成MF的发生。TGF-β1还可调控下游蛋白信号传导、介导炎症因子使胶原蛋白的合成增多和抑制ECM降解，共同促成纤维化的发展[20-22]。但其若未被激活则不会发挥生物学效应，因此也可通过抑制其受体或与蛋白结合阻碍其致纤维化作用。

在本实验中随着用药时间的延长，大鼠心功能指标有不同程度的改善，且呈剂量依赖性，相比模型组而言梓醇高剂量组可显著升高E/A比值并降低E/E′比值，提示梓醇可明显改善模型大鼠心功能及保护受损心肌。由此认为梓醇可能通过下调TGF-β1的表达从而达到对于受损心肌的保护作用，改善心肌舒张能力，调整心肌顺应性，保证了心脏结构和功能的完整和协调性，对于延缓MF发生具有积极治疗作用。

参考文献：

[1]Huang W J, Niu H S, Lin M H, et al. Antihyperglycemic effect of catalpol in streptozotocin-induced diabetic rats[J]. Journal of Natural Products, 2010, 73(6):1170-1172.

[2]王祥,李长运,曾秋棠,等.大鼠2型糖尿病心肌病模型的建立方法[J].中国病理生理杂志, 2006, 22(9):1868-1870.

[3]邹国良,仲维莉,许瑞,等.梓醇对2型糖尿病大鼠胰岛细胞的保护作用[J].中西医结合心脑血管病杂志, 2016,14(15):1727-1729.

[4]董炤,陈长勋.梓醇药理作用的研究进展[J].中成药,2013, 35(5):1047-1051.

[5]万东,祝慧凤,罗勇,等.梓醇对大鼠梗死灶周围大脑皮质神经元树突生长及突触素表达的影响[J].中国药理学通报,2012, 28(11):1515-1521.

[6]刘江月.梓醇抑制AGEs诱导的EA.hy926细胞炎症反应及RAGE表达[J].中国病理生理杂志, 2015, 31(9):1693-1698.

[7]王君明,冯卫生,崔瑛,等.地黄醇提物及其药渣水提物抗抑郁作用的比较研究[J].中国药学杂志, 2014, 49(23):2073-2076.

[8]傅淑平,杨丽,洪浩,等.梓醇促进大鼠骨髓间充质干细胞增殖过程中Wnt信号通路的变化[J].中国病理生理杂志,2014, 30(9):1656-1660.

[9] Miao J X, Zhang X L, Ji X N. Anti-depressant effect of fresh Rehmann- ia glutinosa Libosch powder on mice[J].China J Chin Med, 2011, 26(7):813-815.

[10]Huang Yee, Jiang Chunmao, Hu Yuanliang, et al.Immunoenhancement effect of rehmannia glutinosa polysaccharide on lymphocyte proliferation and dendritic cell[J]. Carbohydrate Polymers, 2013, 96(2):516-521.

[11] Liu C L, Cheng Ling, Ko C H, et al. Bioassay-guided isolation of anti-inflammatory components from the root of Rehmannia glutinosa and its underlying mechanism via inhibition of iNOS pathway[J]. Journal of Ethnopharmacology, 2012, 143(3):867-875.

[12]赖满香,杨丽,张荣华.梓醇对OB-OC共育体系中OB、OC活性及OBERα、βmRNA表达的影响[J].中国病理生理杂志, 2015, 31(7):1242-1246.

[13]刘江月.梓醇对糖尿病大鼠主动脉的保护作用与抗氧化机制研究[J].中国病理生理杂志,2014,30(6):1023-1028.

[14]王静欢,邹利,万东.梓醇多效性相关信号通路研究进展[J].中国药理学进展, 2015, 31(9):1189-1194.

[15]Chaturvedi R R, Herron T, Simmons R, et al. Passive stiffness of myocardium from congenital heart disease and implications for diastole[J]. Circulation, 2010, 121(8):979-988.

[16] Vadla G P, Vellaichamy E. Anti-fibrotic cardio protective efficacy of aminoguanidine against streptozotocin induced cardiac fibrosis and high glucose induced collagen up regulation in cardiac fibroblasts[J].Chemico-Biological Interactions, 2012, 197(2/3):119-128.

[17]肖一佳,沈祥春,李杰平,等.心肌纤维化与TGF-β-Smad信号系统[J].中国新药杂志, 2016, 25(2):182-186, 192.

[18]杨锦龙,范忠才.转化生长因子β1与心肌纤维化的研究进展[J].医学理论与实践, 2014, 27(8):1007-1008,990.

[19] Driesen R B, Nagaraju C K, Abi-char J, et al. Reversible and irreversible differentiation of cardiac fibroblasts[J].Cardiovascular Research, 2014, 101(3):411-422.

[20] Jiang Fan, Liu G S, Dusting G J, et al. NADPH oxidasedependent redox signaling in TGF-β-mediated fibrotic responses[J]. Redox Biology, 2014, 2(2):267-272.

[21]Samarakoon R, Overstreet J M, Higgins P J. TGF-β signaling in tissue fi brosis: redox controls, target genes and therapeutic opportunities[J]. Cellular Signalling, 2013, 25(1): 264-268.

[22] Ma F, Li Y, Jia L, et al. Macrophage-Stimulated Cardiac Fibroblast Production of IL-6 Is Essential for TGF-β/Smad Activation and Cardiac Fibrosis Induced by AngiotensinⅡ[J]. Plos One, 2012, 7(5):35144.