紫花苜蓿(Medicago sativa)是奶牛等草食动物的重要优质饲草，被誉为“牧草之王”。发展苜蓿产业，对于调整种植业结构，推进农牧结合，提升草产品和畜产品市场竞争力具有重要意义。2015年，全国苜蓿年末保留面积471.13万hm2，产量3 217万t，其中优质苜蓿种植面积21.33万hm2，平均单产37.47 kg/hm2，产量180万t，粗蛋白平均含量18.1%。但是这些尚且满足不了需求，每年我国仍需大量进口苜蓿。我国土壤普遍缺磷，施用磷肥能够显著提高紫花苜蓿产量[1]，因此，如何在减少化肥使用的农业发展策略下，提高苜蓿生产，是亟需解决的问题。

丛枝菌根(arbuscular mycorrhizae，AM)真菌是陆地生态系统的重要组成部分，AM真菌侵染植物根系后形成菌根，可增加宿主植物对磷、锌、铜等营养元素的吸收，促进植物生长，提高植物耐旱[2]、耐盐碱[3-4]、耐重金属污染[5]等的能力，减少黄瓜(Cucumis sativus)枯萎病(Fusarium oxysporum sp.cucumerinum)、立枯病(Rhizoctonia solani)和菌核病(Sclerotinia sclerotiorum)等土传病害[6]，加快矿区废弃地的复垦。宿主植物和AM真菌共生关系的建立具有一定选择性，同种植物对不同真菌形成的菌根依赖性也存在差异。其间的相互作用决定着菌根与宿主植物二者之间的亲和力、共生体的建立及菌根发育速度和功能的发挥[7]。迪丽努尔等[8]对新疆伊犁地区8种野生植物的AM真菌进行分离鉴定，并对其生态分布进行研究，发现同一菌种在不同宿主上的种群频度存在差异，表现出较强的AM真菌与宿主植物之间的选择性。对构树(Broussonetia papyrifera)的研究也发现，宿主植物对不同AM真菌处理下侵染响应不一致[9]。同种植物接种不同菌种或不同植物接种同一菌种，形成丛枝菌根的能力不同[10]，对植物生长的影响也有所不同[11-14]。我国土壤普遍缺磷，筛选出宿主植物-AM真菌的良好共生组合体，在缺磷土壤中推广应用，可获得巨大的生态效益和经济效益。紫花苜蓿多栽培于土壤贫瘠地区，为此，试验拟通过在温室条件下接种不同AM真菌，探究其对紫花苜蓿生长和养分吸收的影响,筛选出紫花苜蓿的高效菌种，以期为生物菌肥的研制提供理论依据。

晚上陶小西的爸妈见到温衡都很高兴，特意买了周老五家的老鸭汤，四个人坐在客厅像家人一样有说有笑，但老鸭汤的香味却熏得陶小西眼眶泛红。从前，她跟爸爸也很喜欢吃这家老鸭汤，每周爸爸不出海的日子，他们都会去买一锅来，父女二人跟奶奶围着一锅汤吃得很酣畅淋漓。那样的幸福和温暖，已经离她好远好远了。

1 材料和方法

1.1 试验材料

1.1.1 供试植物与AM真菌 供试植物为紫花苜蓿，种子由甘肃出入境检验检疫局提供。

细凹无梗囊霉(Acaulospora scrobiculata，简写为A.s)、脆无梗囊霉(Acaulospora delicata，简写为A.d)和副冠球囊霉(Glomus coronatum，简写为G.c)，由中国农业科学院提供，以三叶草扩繁所得的孢子、菌根根段、根外菌丝及培养基质作为接种物。

后期设计是对前期设计内容进行审核、检查的重要环节。通过BIM技术的应用能够及时检测桥梁模型设计的相关内容，并上报和调整其中存在的问题，满足桥梁建设的基本要求。同时，在后期设计中，通过BIM技术的应用能够对前期设计的模型实施深化处理，确保图纸无任何问题。

在招远城以南，断裂带沿玲珑花岗岩与胶东群地层的接触带延伸，招城以北断裂是玲珑岩体和栾家河岩体的分界线。主断裂两侧发育不同规模的与其平行或微有交角的次级断裂构造[12]。在构造带转弯地段的丁家庄子附近，沿岩体与栖霞序列岩石的接触带，产生一个大的分支断裂，走向40°～68°，倾向SN，倾角37°～52°，宽150m左右，出露长度9.6km，其构造特征与主干断裂相近，均显示压扭性特征。

1.2 试验方法

1.2.1 试验设计 盆栽试验于2016年9～11月在兰州大学草地农业科技学院智能温室中进行，所用塑料盆规格为17 cm×11 cm×15 cm。试验设8个处理，分别为单接种细凹无梗囊霉，单接种脆无梗囊霉，单接种副冠球囊霉，同时接种细凹无梗囊霉和脆无梗囊霉(简写A.s+A.d)，同时接种细凹无梗囊霉和副冠球囊霉(简写A.s+G.c)，再接种脆无梗囊霉和副冠球囊霉(简写A.d+G.c)，同时接种细凹无梗囊霉、脆无梗囊霉和副冠球囊霉(简写为A.s+A.d+G.c)，每个处理5个重复，共40盆随机摆放。

第三方移动支付交易总额持续不断增大。根据中商产业研究院数据，智能手机的普及和二维码支付市场的爆发加快了电脑到手机的消费者的迁移速度,预计2018年中国第三方移动支付交易总额,超过150万亿元，增至171.5万亿元,增长率为68.0%。

试验将AM真菌接种物50 g/盆平铺于1.8 kg灭菌的土壤上，然后再覆盖土200 g，对照组(CK)则加等量灭菌接种物和接种物滤液，以保持微生物区系一致。接种方法为层播，接种量为每盆50 g菌剂，菌剂为含有孢子、菌丝和根段混合物的土壤，未接种的处理加入50 g灭菌的沙子作为对照。

播种前用10% H2O2对紫花苜蓿种子进行表面消毒10 min，而后用无菌水(蒸馏水置于高压蒸汽灭菌锅121 ℃灭菌20 min)清洗干净，置于25 ℃恒温培养箱中培养，至种子露白即可播种。每盆播种5粒，生长7 d后每盆留4 株长势一致的健康幼苗。

植物地上、地下组织氮含量，均以单接种副冠球囊霉的效果最好，脆无梗囊霉次之，细凹无梗囊霉的效果最小，其中，植物地上部分组织N含量较对照分别增加，1285%，1243%和808%，除混合接种细凹无梗囊霉和副冠球囊霉的处理外，其余接种处理均与对照差异显著，植物地上、地下组织各接种处理间差异不显著(P<0.05)。

1.1.2 供试土壤 试验主要基质为沙土。采用高压蒸汽灭菌法将草炭土在121℃下灭菌1 h，隔天再灭菌1 h；将河沙过2 mm筛，180℃下干热灭菌6 h，然后与草炭土2∶5混匀，风干备用。

全N、全P含量：将研磨好的植物干样过2 mm筛，称取0.25 g过筛后的植物样，加入2.0 g催化剂(K2SO4和CuSO4研磨后10∶1混合)和5 mL浓硫酸放置0.5 h进行预消化。消化管放置到预加热至420 ℃的消煮炉上，进行消化至溶液澄清(溶液呈淡蓝绿色)，并继续消化30 min。待溶液冷却后，定容至50 mL，采用流动注射仪(FIAstar 5000 Analyzer,FOSS,Sweden)测定。

在互联网和信息技术快速发展的今天，人们可以方便的获取各种信息，同时也为个人隐私的泄露埋下隐患。如何保障个人隐私安全，需要公民自身增强意识，行业进行自身行为规范、加强技术措施的改进，同时也需要国家在立法司法方面发挥作用，国家政府规范政务公开行为。

总氮N(%)=(C×0.001×0.1)/w×100

式中：C为FLAstar获得的被测液浓度，w为样品质量。

接种AM真菌后紫花苜蓿的根冠比显著降低了(P<0.05)，而且，不同AM真菌接种间无显著差异(P>0.05)。对照组的根冠比大于1，说明根系生长占优势，这是由于对照条件下，紫花苜蓿的营养条件受到限制，所以要先满足根部的生长，使得根冠比增大。

地上磷含量，单接种处理，以副冠球囊霉的效果最显著，混合接种处理，以副冠球囊霉和脆无梗囊霉效果最好。不同AM真菌接种处理间差异不显著(P>0.05)。地下磷含量，单接种处理以细凹无梗囊霉效果最显著。混合接种处理，以脆无梗囊霉和副冠球囊霉效果最好。同样，不同接种处理间差异不显著。与对照组相比，单接种细凹无梗囊霉、脆无梗囊霉和副冠球囊霉的地下部含磷量分别提高，1 288%，1 050%和1 033%。

式中：C为FLAstar获得的被测液浓度，w为样品质量。

1.3 数据分析

使用SPSS 22.0统计软件对试验数据进行统计分析，采用JMP IN 4对各指标进行交互效应以及方差分析，使用Excel 2013进行作图。

2 结果与分析

2.1 菌根侵染率

单接种处理下，植物菌根侵染率以副冠球囊霉最高，细凹无梗囊霉最低，单接种副冠球囊霉和脆无梗囊霉的侵染率间差异不显著(P>0.05)，但均显著高于细凹无梗囊霉(P<0.05)；混合接种处理，以细凹无梗囊霉和脆无梗囊霉组合的菌根侵染率最高，脆无梗囊霉和副冠球囊霉最低(图1)。而不接种AM真菌的处理未观察到菌根侵染，说明本试验AM真菌接种是成功的。

2.2 生物量

2.2.1 地上生物量 接种AM真菌显著提高了紫花苜蓿的地上生物量(除A.s+G.c外)。其中，接种细凹无梗囊霉、脆无梗囊霉和副冠球囊霉的生物量分别是对照的9倍，11.6倍和12.3倍；混合接种脆无梗囊霉和副冠球囊霉的紫花苜蓿生物量是对照组生物量的14.7倍。不同AM真菌接种处理间，除混合接种脆无梗囊霉和副冠球囊霉外，其余差异不显著。但是混合接种细凹无梗囊霉和副冠球囊霉处理的紫花苜蓿生物量是对照组生物量的6.5倍，较其他的处理低(图2)。

图1 3种AM真菌组合处理下紫花苜蓿菌根侵染率 Fig.1 The AM colonization of alfalfa colonized by three AM fungi and their combinations 注：图中数据为平均值±标准误差(n=4)，不同小写字母表示不同处理间差异显著(P<0.05)，下同

图2 3种AM真菌组合处理下紫花苜蓿地上生物量 Fig.2 The aboveground biomass of alfalfa colonized by three AM fungi and their combinations

2.2.3 总生物量 不同AM真菌接种处理均提高紫花苜蓿的总生物量，增长率均在300%。混合接种脆无梗囊霉和副冠球囊霉处理的促进作用最显著，总生物量较对照增加941%，而混合接种效果细凹无梗囊霉和副冠球囊霉的促进作用最小，总生物量较对照增加338%。单接种处理中，副冠球囊霉的促进作用最大，总生物量较对照增加744%，其次是脆无梗囊霉，总生物量较对照增加677%，细凹无梗囊霉促进作用最小，总生物量较对照增加545%，各单接种处理间紫花苜蓿总生物量差异不显著(P>0.05)(图4)。

图3 3种AM真菌组合处理下紫花苜蓿地下生物量 Fig.3 The belowground biomass of alfalfa colonized by three AM fungi and their combinations

2.2.2 地下生物量 接种AM真菌处理显著提高了紫花苜蓿地下生物量，较对照提高地下生物量100%。混合接种脆无梗囊霉和副冠球囊霉处理下，植物地下生物量显著高于其他处理，较对照组高543%。接种AM真菌的处理间差异皆不显著(图3)。

图4 3种AM真菌组合处理下紫花苜蓿总生物量 Fig.4 The total biomass of alfalfa colonized by three AM fungi and their combinations

2.3 根冠比

The work on this review has been supported by funds from NIH to Olga Stenina-Adognravi (RO1 HL117216 and RO1 CA177771) and from the American Heart Association to Jasmine Gajeton/Olga Stenina-Adognravi (17PRE33660475).

图5 3种AM真菌组合处理下紫花苜蓿根冠比 Fig.5 The root/shoot ratio of alfalfa colonized by three AM fungi and their combinations

接种AM真菌后，可能是AM真菌促进紫花苜蓿对养分的吸收，植物营养状况得到改善，地上部分生长优于地下部分生长，导致根冠比降低(图5)。

2.4 氮含量

菌根的功能就是改善植物对矿质元素的吸收，被称为“生物肥料”。不同AM真菌接种处理下紫花苜蓿地上、地下部分氮含量均高于对照组。接种AM真菌后地上部含氮量增长率在688%，地下部增长率在100%(图6，7)。

1.2.2 指标测定 生物量采用文献[14]烘干法测定：菌根侵染率的测定采用根段法，将称好的0.1 g的根剪成约0.1 cm的小段，放入15 mL离心管中，加入适量10% KOH溶液，在80℃水浴条件下水浴20 min；取出后倒掉KOH，用1% HCl洗涤后用水冲洗干净；再用0.065%苯胺蓝染液在80℃水浴中染色10 min，洗净后保存于甘油中，并在解剖镜下镜检[14]。

图6 3种AM真菌组合处理下紫花苜蓿地上部氮含量 Fig.6 The shoot N content of alfalfa under three AM fungi and their combinations

图7 3种AM真菌组合处理下紫花苜蓿地下部氮含量 Fig.7 The root N content of alfalfa under three AM fungi and their combinations

2.5 磷含量

接种处理增加了紫花苜蓿地上和地下的含磷量。除混合接种细凹无梗囊霉和副冠球囊霉的处理外，其余接种处理的地上、地下部含磷量均与对照组差异显著(P<0.05)。混合接种细凹无梗囊霉和副冠球囊霉的处理虽与对照差异不显著，但是其地上、地下部含磷量较对照组的平均增长为1 854%、638%(图8，9)。

Job 1网格划分阶段。Job1的主要任务为对问题空间进行网格划分，然后采用改进算法提升网格划分质量，最后输出划分结果。其中每次计算都需要调用多个Map和Reduce函数，Map函数负责计算数据点所属网格的编号，将网格的编号和其中包含的数据点作为中间值输出；Reduce函数负责汇集各个网格中的数据点并计算各网格的网格密度，将网格密度与给定的密度阈值进行比较，若大于密度阈值则将网格标记为稠密网格，否则使用第2章所述方法进行调整，最后输出最终的网格划分结果。

总磷P(%)=(C×0.001×0.1)/w×100

图8 3种AM真菌组合处理下紫花苜蓿地上部磷含量 Fig.8 The shoot P content of alfalfa under three AM fungi and their combinations

图9 3种AM真菌组合处理下紫花苜蓿地下部磷含量 Fig.9 The root P content of alfalfa under three AM fungi and their combinations

3 讨论

3.1 AM真菌对紫花苜蓿菌根侵染率的影响

AM真菌只有侵入植物体内并与之建立共生关系才能发挥作用，菌根侵染率是评价AM真菌与植物建立共生关系与否的重要指标。菌根的生长发育及其功能的发挥依赖于AM真菌与宿主植物的根系亲和力以及二者之间的相互选择性[7]。紫花苜蓿接种不同AM真菌后其菌根侵染率差异显著，表明不同AM真菌和紫花苜蓿的亲和性不同，副冠球囊霉的菌根侵染率最高，表明3种AM真菌中副冠球囊霉与紫花苜蓿的亲和性最好。

3.2 AM真菌对紫花苜蓿生长的影响

产量是衡量植物生长状况良好与否的重要指标[17-18]。菌根能够扩大根际范围，提高养分的空间有效性，改善根际环境，增加根系的吸收能力，植株的水分和养分条件得到改善，生长速率加快，株高、分枝数也得到促进，最终导致生物量的增加。接种3种AM真菌使植株的地上部分和根系部分协调发展，地上、地下生物量和总生物量都显著提高，都对紫花苜蓿的生长产生促进作用，与在羊草(Leymus chinensis)[19]、紫花苜蓿[1]、油蒿(Artemisia ordosica)[20]上接种AM真菌提高植物生物量的结果一致。

不同AM真菌的作用存在差异，从总生物量分析，单接种中，副冠球囊霉的促生效果最好，脆无梗囊霉次之，细凹无梗囊霉最差。原因可能是不同菌种与寄主植物的亲和性不同，促进作物生长的作用机制也不同。混合接种中，作用效果依次为，脆无梗囊霉和副冠球囊霉>细凹无梗囊霉和脆无梗囊霉>细凹无梗囊霉、脆无梗囊霉和副冠球囊霉>细凹无梗囊霉和副冠球囊霉，可能原因是不同AM真菌之间的亲和性也不同，侵染植物后菌根之间的相互作用会削弱或增强对植物生长的促进作用，具体原因有待进一步研究。

接种AM真菌后紫花苜蓿的根冠比显著降低，是由于对照条件下，紫花苜蓿的营养条件受到限制，所以要先满足根部的生长，使得根冠比增大。接种AM真菌后，可能AM真菌促进紫花苜蓿的养分吸收，植物的营养状况得到改善，地上部分的生长优于地下部分的生长，导致根冠比降低。

床式下肢康复训练机器人主要是用于帮助下肢运动障碍者进行下肢康复训练，增加肌肉力量，恢复正常行走能力。其机械结构由康复床床体和多连杆式下肢康复训练器组成，其独特的康复训练床设计使得患者可以进行平躺、斜躺和直立3种不同体位的康复训练，每种训练模式又可进行被动训练、主动辅助训练和抗阻训练。康复训练主要机械结构为多连杆式下肢康复训练器，通过伺服电机带动人体下肢运动，其三维结构图如图1所示。

3.3 AM真菌对紫花苜蓿养分吸收的影响

磷作为大量元素，对植物的生长必不可少，而我国大部分地区土壤有效磷含量低，磷已经成为限制作物产量的重要因素。接种AM真菌显著提高植株地上和地下部分的磷含量，说明AM真菌能够改善紫花苜蓿的磷营养，提高植物紫花苜蓿对磷素的吸收利用[19]。AM真菌侵染植物根系后，促进根系生长，使根系分泌物和脱落物数量增加，土壤微生物活性增强，酸性或碱性磷酸酶的活性增强，将植物难以利用的磷活化成可被植物吸收利用的磷，改善植株的磷营养[20-22]。氮是植物生长的必需元素之一。试验表明AM真菌通过改善植物的磷营养状况提高根瘤菌的固氮活性，促进豆科植物生长，增加固氮量[23]，同时试验结果也证明接种AM真菌也能够提高植株的氮含量。

4 结论

不同AM真菌对植物生长的作用不尽相同，其组合对植物生长亦会有差异。因此，试验利用3种不同AM真菌研究其对紫花苜蓿生长和养分吸收的影响。结果表明单接种3种AM真菌，副冠球囊霉对紫花苜蓿的株高促进作用最大；混合接种副冠球囊霉和脆无梗囊霉对紫花苜蓿株高的促进作用最大。3种AM真菌均提高紫花苜蓿植株N、P含量，促进N、P吸收。3种AM真菌均提高紫花苜蓿生物量，单接种副冠球囊霉的促生效果最好，混合接种副冠球囊霉和脆无梗囊霉的促生效果最好，具有应用成为菌肥的潜力。

“S绞尽脑汁，终于灵光一闪，解铃还须系铃人，他跟Y相爱时，谁最有找人盯梢的动机或嫌疑呢？当然是前妻曲。他拿着那帧照片去找Y，Y大惊失色，没想过在床上大显身手时会被镜头捕捉。Y也想到了曲。Y现在很幸福。她再婚了，还生了孩子。她将前夫及其负面影响像大扫除从脑海和内心清理得一干二净。她发现远离了S，新生活才真正开始。但她仍对曲恨得牙痒痒的，认为曲是造成那几年她差点崩溃的根源，而不是她给对方带来了不幸。她始终认为，曲是一个滑头，S上了曲的当。S摇了摇头。也许没有人能做到真正的公允或客观。”

参考文献:

[1] 任爱天,鲁为华,杨洁晶,等.不同磷水平下AM真菌对紫花苜蓿生长和磷利用的影响[J].中国草地学报,2014,36(6):72-78.

[2] 李少朋,毕银丽,陈拙圳,等.干旱胁迫下AM真菌对矿区土壤改良与玉米生长的影响[J].生态学报,2013,33(13):4181-4188.

[3] 杨海霞,徐萌,刘宁,等.丛枝菌根真菌对两种草坪草耐盐性的影响[J].草业科学,2014,31(7):1261-1268.

[4] 赵琦,包玉英.混合盐碱胁迫下丛枝菌根真菌对紫花苜蓿生长及2种酚酸含量的影响[J].西北植物学报,2015,35(9):1829-1836.

[5] 张旭红,高艳玲,林爱军,等.重金属污染土壤接种丛枝菌根真菌对蚕豆毒性的影响[J].环境工程学报,2008,2(2):274-278.

[6] 吕恒,牛永春,邓晖,等.根际真菌对黄瓜土传病害的抑制作用[J].应用生态学报,2015,26(12):3759-3765.

[7] 王幼珊,张美庆.VA菌根真菌与宿主植物间的相互选择性[J].北京农业科学,1989,6:4-7.

[8] 迪丽努尔,唐明,王亚军.新疆伊犁野生植物VA菌根真菌及其生态分布[J].西北农林科技大学学报(自然科学版),2006,34(6):96-100.

[9] 何跃军,钟章成,刘济明,等.构树幼苗对接种丛枝菌根真菌的生长响应[J].应用生态学报,2007,18(10):2209-2213.

[10] 曹少奇,任爱天,鲁为华.4种牧草接种AM真菌效应分析[J].草原与草坪,2015,35(2):43-46.

[11] 刘文科,冯固,李晓林.三种土壤上六种丛枝菌根真菌生长特征和接种效应[J].植物营养与肥料学报,2006,12(4):530-536.

[12] 何跃军,钟章成,刘济明,等.VA真菌对构树(Broussonetia papyrifera)幼苗物质代谢的影响[J].生态学报,2007,27(12) :5455-5462.

[13] 盖京苹,冯固,李晓林.接种丛枝菌根真菌对甘薯生长的影响研究[J].中国生态农业学报,2004,12(1):111-113.

[14] 范继红,杨国亭,李佳伶.接种VA菌根对黄檗幼苗生长的影响[J].东北林业大学学报,2006,34(2):18-19.

[15] Phillips J M,Hayman D S.Improved procedures for clearing roots and staining parasitic and vesicular-arbuscular mycorrhizal fungi for rapid assessment of infection[J].Transactions of the British Mycological Society,1970,55(1):158.

[16] Koske R E,Gemma J N.A modified procedure for staining roots to detect VA mycorrhizas[J].Mycological Research,1989,92(4):486-488.

[17] 马文彬,姚拓,王国基，等.根际促生菌筛选及其接种剂对箭筈豌豆生长影响的研究[J].草业学报，2014，20(5):241-248.

[18] 荣良燕,姚拓,刘青海,等.复合菌肥代替部分化肥对玉米生长的影响[J].草原与草坪,2012,32(3):65-69.

[19] 刘慧,陈薇,周勇,等.内生真菌和丛枝菌根真菌对羊草生长的影响[J].植物生态学报,2015,39(5):477-485.

[20] 苏友波,林春,王三根.AM菌根磷酸酶对玉米菌根际土壤磷的影响及其细胞化学定位[J].西南农业大学学报,2005,25(2):115-119.

[21] 宋勇春,冯固,李晓林.泡囊丛枝菌根对红三叶草根际土壤磷酸酶活性的影响[J].应用与环境生物学报,2000,6(2):171-175.

[22] 苏友波,林春,张福锁,等.不同AM菌根菌分泌的磷酸酶对根际土壤有机磷的影响[J].土壤,2003,35(4)：334-338.

[23] Ibijbijen J,Urquiaga S,Ismaili M,et al.Effect of arbuscular mycorrhizal fungi on growth,mineral nutrition and nitrogen fixation of three varieties of common beans(Phaseolus vulgaris)[J].New Phytologist,1999,134(2):353-360.