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高效液相色谱法同时测定染发剂中10种染料组分

更新时间:2016-07-05

随着社会生活水平的不断提高,人们开始注重自己的仪容仪表,染发作为美容的方式之一,染发人数逐年增多,同时中老年人群中染发者比例也呈上升趋势. 永久性染发剂多为氧化型染发剂,是由多种芳香族类化合物组成,而这些芳香族化合物的一些衍生物或者异构体具有一定的致敏性和致突变性[1]. 近年来因使用染发剂后出现接触性皮炎的报道越来越多,症状包括:头皮瘙痒、水肿、糜烂、低热、腹部肿大,甚至全身毛发脱落,其潜在的健康效应日益受到人们的关注. 我国《化妆品安全技术规范》(2015年版)对染发剂中多种染料的使用进行了严格的规定.

优质护理注重在术前、术中、术后、出院后做好各项手术准备,规范手术操作,科学管理,预防不良事件的发生。术前将护理方案的确定建立在明确的病情评估基础上,且兼顾患者身心状况,努力让患者身心处于最佳状态。术中规范管理及配合,保证手术质量[6]。术后保证无菌换药、加强生活管理,以促进康复,降低并发症发生风险。出院后,继续为患者提供所需的护理服务,以保证护理的延续性,巩固护理质量,优化预后。在优质护理作用下,患者获得愉悦的医疗服务,手术质量提升,手术时间短,视力恢复好,并发症发生率低,患者的满意度高。

目前染料的测定方法包括气相色谱法[2-3]、液相色谱法[4-7]、气相色谱-质谱法[8-9] 、液相色谱-质谱法[10-11] 和薄层色谱法等. 这些方法中,能够同时对多种组分进行定性定量分析,且具有较好分离效果的较少. 欧盟指令82/434/EEC推荐的薄层色谱法虽能较好的分离和鉴别各组分,但对其进行准确的定量分析具有一定的难度. 我国《化妆品安全技术规范》(2015版)7.2中采用高效液相色谱法检测了对苯二胺等32种组分,此方法使用不同的流动相,分为三组进行测定. 7.1 中采用高效液相色谱法检测对苯二胺等8种组分,此法分离效果不佳,存在峰型差等问题. SN/T 3829-2014 标准方法仅对2-硝基-p-苯二胺及其盐单一物质进行测定. 与其它仪器方法比较,采用气相色谱法和气相色谱-质谱联用法测定时,对毛细管柱和仪器的污染比较严重,采用液相色谱-质谱法的仪器成本较高,不具备普遍推广意义. 因此,有必要开发一种新的检测方法,既能满足多种染料组分的同时测定及定性、定量分析,且兼顾检测成本和普遍使用等要求.

例:浙教版八上《3.3一元一次不等式》课时1。A班学习过程:先复习引入一元一次方程,利用类比的数学思想,让学生自主探索新知识。比较一元一次不等式与方程的差别,引出如何求解不等式,与方程求解过程有什么相同点,有什么不同点。合作探究:例:尝试解下列不等式,并把解集在数轴上表示出来(1)4x<10(2)-2x≥1.2。引导学生利用数轴去解决如何解不等式,体现了数形结合的数学思想,又可以让学生直观看到不等式解与方程解的区别。

1 试验部分

1.1 仪器与试剂

高效液相色谱仪(Agilent 1260),配有DAD检测器(美国安捷伦公司).

乙腈(色谱纯,安普),无水乙醇(优级纯,沪试),亚硫酸氢钠(分析纯,国药),乙酸铵(分析纯,沪试),标准品物质(Dr. Ehrenstorfer GmbH)

但是,本条款至少对从事服务或贸易类的企业具有一定指导意义。这些企业可以在过渡期截止前,通过不可抗力条款或其他合同终止条款,终止合同,然后继续催收相关款项。对于以货币进行的收款行为,如果符合上述“继续收款例外”3个要件,则不会存在被美国制裁的风险。但目前伊朗外汇储备十分紧缺,能源领域付款很可能通过实物(石油)进行,这就有必要向美国政府进行澄清和通报,获得美国政府认可。这样做既可避免“以原油方式收款的行为”被误认为“从伊朗获取石油的行为”而受到美国制裁,也方便其他公司为这些原油的获取提供正常的销售、运输、银行、保险等流转渠道。

1.2 试样前处理

称取试样0.500 g于25 mL容量瓶中,加入无水乙醇和水(体积比为1∶1)并定容至刻度,涡旋,超声提取15 min(超声温度控制在20 ℃以下,减少染发剂中测定各染料组分的氧化),取10 mL溶液于5 000 r/min条件下离心5 min,取上层清液,经0.45 μm滤膜过滤,滤液经液相色谱仪分析测定.

郭店楚简全浊与次浊声母字通假的例证仅有7例。由我们的统计可知,除去同音字组之外,通假字与本字之间,同发音部位清:清跟浊:浊字例共有27组,占近22%;而同发音部位清浊通用之例有97组,占78%,清浊通用与清浊分明的比例为4∶1。

1.3 标准溶液的配制

分别称取100.00 mg标准品物质于10 mL容量瓶中,用2 g/L亚硫酸氢钠和无水乙醇(体积比为1∶1)溶解并定容,摇匀,配置成质量浓度为10 mg/mL的标准储备液,用无水乙醇配置成质量浓度为0.01、0.025、0.05、0.1、0.25、0.50 mg/mL混合标准工作溶液.

1.4 色谱条件

色谱柱:Poroshell 120 Bonus-RP(100 mm×3.0 mm×2.7 μm);流动相: 10 mmol/L乙酸铵-乙腈(洗脱条件如表1所列);流速:0.5 mL/min;检测波长:280 nm;进样量:5 μL;柱温:25 ℃.

表1 洗脱条件 Table 1 Elution conditions

时间/min流动相A(10mmol/L乙酸铵)/%B(乙腈)/%09552.09558.0802010.0109012.5109013.095516.0955

2 结果与讨论

2.1 色谱柱的选择

[3] 李海涛,吴平谷. 气相色谱法测定氧化型染发剂中染料[J].中国卫生检验杂志,2002,12(4):435.[LI Hai-tao, WU Ping-gu. Determination of dye in oxidation hair dyes by gas chromatography spectrometry[J]. Chinese Health Laboratory Technology, 2002,12(4):435.]

2.2 流动相的选择

[1] 刘丽,李英,刘志红,等. 超声波抽提气相色谱-质谱法测定氧化型染发剂中16种染料[J].分析化学,2004, 32(10):1333-1336. [LIU Li, LI Ying, LIU Zhi-hong, et al. Determination of colorants in oxidation hair dyes by gas chromatography-mass spectrometry[J]. Chinese Journal of Analytical Chemistry, 2004,32(10):1333-1336.]

2.3 色谱分析

以空白样品基质配制一系列不同质量浓度的混合标准工作溶液(0.01、0.025、0.05、0.1、0.25、0.50 mg/mL),以染料组分的峰面积Y为纵坐标,浓度值X为横坐标,绘制标准曲线并进行线性回归,结果表明各染料组分在10~0.5 mg/mL范围内具有良好线性关系和相关系数,同时,以实际检测时的信噪比RSN≥3,得出方法检出限,结果如表2所列.

图1 染料标准溶液液相色谱图 (1) 对苯二胺,(2) 间苯二酚,(3) 对氨基苯酚,(4) 间氨基苯酚,(5) 4-氨基间甲酚,(6) 氢醌,(7) 4-氨基-2-羟基甲苯,(8) 2-硝基对苯二胺,(9) 甲苯-2,5-二胺硫酸盐,(10) 6-羟基吲哚 Fig.1 Liquid chromatogram of dye standard soloution (1) p-phenylenediamine,(2) Resorcine,(3) p-Aminophenol,(4) m-Aminophenol,(5) 4-Amino-m-cresol,(6) Hydroquinone,(7) 4-Amino-2-hydroxytoluene,(8) p-Diamino-2-nitrobenzene, (9) 2,5-Diaminotoluene sulfate,(10) 6-Hydroxyindole

图2 某样品染发剂中液相色谱图 Fig.2 Liquid chromatogram of Some sample hair dye

2.4 线性关系与检出限

根据对色谱柱和流动相优化后确定的仪器条件进行染发剂中多种染料组分的分析测定,得到如图1、2所示的液相色谱图. 其中,图1是根据每个单一标准品的保留时间和紫外光谱图进行定性分析,然后一一对应记录其编号. 定量分析则依据光谱图峰面积进行. 从图1、2可以看出,色谱图中各组分具有较好的分离效果.

参考文献:

表2 线性方程相关系数与检出限 Table 2 Liner equations, correlation coefficients and detection limits

染料组分线性方程线性相关系数(R)检出限/(mg/L)对苯二胺Y=4.07X-0.600.999918.0间苯二酚Y=2.27X+0.990.999905.0对氨基苯酚Y=6.44X=2.410.999868.0间氨基苯酚Y=3.98X+1.710.999905.04-氨基间甲酚Y=4.06X+0.040.999928.0氢醌Y=4.59X+1.160.999936.04-氨基-2-羟基甲苯Y=2.60X+0.240.999926.02-硝基对苯二胺Y=6.26X+2.290.9999410.0甲苯-2,5-二胺硫酸盐Y=4.55X-0.350.999913.06-羟基吲哚Y=3.28X+1.240.999964.0

[5] 廖军海,何孟杭,欧阳立群,等. 高效液相色谱法同时测定染发剂中10种酸性染料[J].福建分析测试,2015, 24(1):11-15.[LIAO Jun-hai, HE Meng-hang, OUYANG Li-qun, et al. Determination of ten acid dyes in hair dyes by high performance liquid chromatography [J]. Fujian Analysis & Testing, 2015,24(1):11-15.]

习惯的养成对于孩子的一生很重要。而一个农村小学生要养成好习惯不容易,因为受学生家长的文化水平影响很大,那么学校班集体这个家庭的任务自然就很重。俗话说“严是爱,松是害,不管不教会变坏”班主任应努力当好一个有爱心的班主任,了解班风,学风,了解每个学生,无论知识上还是心灵上,班主任就是孩子心目中最信任的人。在各项活动中班主任该肯定的就肯定,该否定的就旁敲侧击的否定,在全班形成一种能伸张正义,制止错误思想现象的集体舆论。按照学校《行为规范》的要求对学生进行德育量化打分,把它作为年终评优的重要条件,促进学生行为习惯的养成,提高学生思想品德素质。

2.5 回收率

采用标准加入法,在已知染料组分含量的某品牌染发剂中进行3水平(625.0、1 250.0、2 500.0 μg)6个平行的添加回收试验,按上述样品处理方法提取检测,计算各染料组分回收率和相对标准偏差. 在试验条件下,3个添加水平下各染料的平均回收率范围为87.3%~119.6%,相对标准偏差为0.87%~5.91%,如表3所列, 表明该方法回收率较高且稳定.

表3 染发剂中染料3个添加水平下染料组分加标回收率和相对标准偏差(n=6) Table 3 Spiked recoveries and RSDs of dye components in hair dye(n=6)

染料组分加标质量/μg本底质量/μg回收质量/μg回收率/%RSD/%对苯二胺625.01250.02500.01705.0667.51252.52442.5106.7100.297.72.211.465.05间苯二酚625.01250.02500.01453.0560.01180.02490.089.694.399.63.241.051.13对氨基苯酚625.01250.02500.0/572.51100.02340.091.687.993.65.912.333.64间氨基苯酚625.01250.02500.0/642.51192.52435.0102.895.397.41.061.162.694-氨基间甲酚625.01250.02500.0/612.51322.52217.597.9105.888.71.442.091.12氢醌625.01250.02500.0/577.51182.52260.092.594.690.42.940.871.08

续表3

染料组分加标质量/μg本底质量/μg回收质量/μg回收率/%RSD/%4-氨基-2-羟基甲苯625.01250.02500.0/617.51195.02407.598.995.696.31.413.182.942-硝基对苯二胺625.01250.02500.0/545.01145.02367.587.291.694.72.903.811.13甲苯-2,5-二胺硫酸盐625.01250.02500.02925.0579.51120.02330.095.489.693.21.572.673.126-羟基吲哚625.01250.02500.0/590.01140.02537.594.591.2101.52.833.712.67

3 结论

试验表明,本文使用色谱柱Poroshell 120 Bonus-RP,通过液相色谱法可以同时测定染发剂中10种对苯二胺等染料组分,而且具有较好的分离效果和回收率.该法具有分析速度快、分析效果好等特点,可以快速完成大量大量的染料检验工作,这对染发剂中染料的测定具有较好的应用价值,对第三方检测具有一定的指导作用.

现代医院管理制度在宏观层面的政府治理制度的建立上,主要是正确处理政府与医院关系,实施政事分开和管办分离,明确和界定医院与政府、市场之间的权责关系,制订相应的制度安排,包括医院所有权或出资人制度、资源配置与组织结构、筹资补偿与支付制度、监管机制与行为规范等。

在选择流动相时,应避免很多标准方法中使用的相对复杂的磷酸盐混合缓冲溶液. 通过试验发现,采用乙腈和水按一定比例作为流动相分析时,流动相配制过程虽然方便快捷,但在出峰时间上具有重叠效应,分离效果相对较差,而采用乙腈+乙酸铵溶液作为流动相,分析过程能达到好的分离效果,因此最终确认采用乙腈和乙酸铵溶液梯度洗脱分析测定染发剂中染料组分.

[2] 李艳松,徐静. 气相色谱法测定染发剂中的对苯二胺[J].分析与检测,2008, 90(6):92-93. [LI Yan-song, XU Jing. Determination of p-p henylenediamine in hair dyes by gas chromatography spectrometry[J]. Analysis and Detection, 2008,90(6):92-93.]

《化妆品安全技术规范》2015版中,染发剂的两种检验方法分别使用了C18 柱(250 mm×4.6 mm×10 μm)和RP-AMIDE C16 柱(250 mm×4.6 mm×5 μm)及保护柱: RP-AMIDE CAMIDE C16 (20 mm×4 mm×5 μm). 使用C18 柱测定对苯二胺等8种组分时,存在峰型有拖尾和分离效果差等现象;RP-AMIDE C16 柱对苯二胺等32种组分测定过程中,将32种组分分成了3组,使用不同的检测方法进行测定,对一个样品进行不同组别的组分进行测定时,要使用不同的检测方法分开测定,大大增加了检测周期和检测成本. 色谱柱Poroshell 120 Bonus-RP具有较强的耐水性,可直接用水相进行冲洗,测定染发剂中多种染料组分,具有峰型、分离效果好的特点,而且可以一次完成多种组分的同时测定.

[4] 朱会卷,杨艳伟,张卫强,等. 高效液相色谱法测定染发剂中的22种染料成分[J].色谱,2008, 26(5):554-558. [ZHU Hui-jiuan, YANG Yan-wei, ZHANG Wei-qiang, et al. Determination of 22 components in hair dyes by high performance liquid chromatography [J]. Chinese Jourmal of Chromatography, 2008,26(5):554-558.]

为检验方法的稳定性和重复性,对相同浓度的标准溶液进行10次重复进样,计算变异系数为0.65%~4.3%,表明本方法的重复性和稳定性良好.

[6] 陈希,张国文. 高效液相色谱法测定染发剂中的12种有机胺类染料[J].南昌大学学报,2014,38(2):143.[CHEN Xi, ZHANG Guo-wen. Determination of 12 kinds of organic amine dyes in hair dyes by HPLC method[J]. Journal of Nanchang University, 2014,38(2):143.]

[7] 冯靓,王立媛,应英,等. 高效液相色谱法同时测定染发剂中13种染料[J].中国卫生检疫杂志,2011, 21(6):1352-1354.[FENG Liang, WANG Li-yuan, YING Ying, et al. Simultaneous determination of 12 colorants in hair dyes by HPLC [J]. Chinese Journal of Health Laboratory Technology, 2011,21(6):1352-1354.]

[8] 朱英,杨艳伟,李静,等. 气相色谱-质谱法同时测定氧化型染发剂中多种染料中间体[J].色谱,2005, 25(5):566.[ZHU Ying, YANG Yan-wei, LI Jing, et al. Simultaneous determination of variety dye intermediate in oxidation hair dyes by gas chromatography-mass spectrometry[J]. Chinese Jourmal of Chromatography, 2005,25(5):566.]

[9] 赖莺,陈和秀,林睿,等. 气相色谱-质谱法同时测定氧化型染发剂中的17种染料[J].高等学校化学学报,2011, 32(10):2286-2292. [LAI Ying, CHEN He-xiu, LIN Rui, et al. Simultaneous determination of 17 components in oxidative hair dyes by gas chromatography-mass spectrometry[J].Chemical Journal of Chinese Universites,2011,32(10):2286-2292.]

[10] 邵超英,秦婷,孙多志,等. 高效液相色谱-串联质谱法测定染发剂中11种苯胺和苯酚类染料[J].分析化学,2014, 42(5):781-782.[SHAO Chao-ying, QIN Ting, SUN Duo-zhi, et al. Determination of 11 kinds of phenol and amine dyes in oxidative hair dyes by high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry [J]. Chinese Journal of Analytical Chemisty,2014,42(5):781-782.]

例2 (2016.烟台中考)美国心理学家桑代克通过对动物行为的大量观察和实验提出了“尝试与错误”学习理论。下列观点是在对动物行为研究基础上形成的,其中应用归纳法获得的结论是( )

[11] 陈梦,胡磊,许立,等. 高效液相色谱-质谱法同时测定染发剂中33种禁限用染料[J].日用化学工业,2016, 46(6):359-364.[CHEN Meng, HU Lei, XU Li, et al. Simultaneous determination of 33 kinds of banned and/or restricted component in hair dyes by high performance liquid chromatography-mass spectrometry[J]. China Surfactant Delergent & Cosmetics,2016,46(6):359-364.]

王海瑞,陈少波,徐振东
《分析测试技术与仪器》2018年第01期文献

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