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转移因子对SPF鸡巨噬细胞吞噬指数的影响

更新时间:2016-07-05

转移因子(Transfer Factor,TF)是具有免疫活性T淋巴细胞所释放可透析的一类小分子物质,能够将供体细胞所具有的细胞免疫功能传给受体细胞,非特异性地增强细胞免疫,提高受体免疫应答功能[1-5],并且安全无毒、无残留,没有种属特异性,是一种非常有应用潜力的生物免疫调节剂[6-7]

首先,教师要对课前预习进行引导,帮助学生初步了解课程内容的重难点和疑点分布,以便在课堂学习时做到有的放矢;其次,在预习过程中启发学生自主思考,自主梳理知识结构,甚至自主探究问题解疑,拓展学生思维深度;再者,启发学生将预习掌握的知识点与课后小实验等实践操作活动相结合、相印证,提高学生的动手和判断能力。

试验按照已授权发明专利制备TF[8-10],通过饮用和肌肉注射两种途径研究TF对SPF鸡巨噬细胞吞噬指数的影响,揭示TF发挥免疫增强作用的一些机理,为TF应用提供相关试验依据。

1 材料和方法

1.1 仪器与试剂 岛津紫外分光光度计UVmini-1240;动物饲养隔离器购自苏州市冯氏实验动物设备有限公司;SPF种蛋由福州大北农生物技术有限公司提供;Na2CO3购自国药集团药业股份有限公司;印度墨汁购自上海如吉生物科技发展有限公司。1.2 试验动物 30枚SPF种蛋于动物饲养隔离器内孵化,雏鸡7日龄时随机分为3组,分别为:第1组、第2组和第3组,隔离饲养,每组各10羽。

从指标体系运行方式来讲,指标预警是全过程即时监控与评价,指标评价是阶段性的“打分项目”。课堂教学质量预警指标更多聚焦过程性数据,而评价指标更多关注的是阶段性结果。比如,在评价课堂教学效果时,往往是通过师生打分学生是否注意集中、学生是否积极参与、互动反馈是否有效等项目来实现。而在设计课堂教学质量预警指标时,不仅仅需要考虑上述“打分项目”,更多还要考虑课堂数据之间的关联性,比如结合课堂教学设计设定参考阀值,监测课堂教学过程中学生参与程度与内容设计、知识点模块、讲授技巧等教师授课要素的关联度。此类预警结果可作为教师之后改进课堂教学方式、优化课程标准的重要参考。

关于TF对禽类巨噬细胞吞噬能力这一方面的研究报道相对较少,大部分报道主要研究其对哺乳动物巨噬细胞的影响。陈德坤等[11]在研究TF对小鼠吞噬细胞吞噬功能影响中,通过口服和肌肉注射方式给予TF,结果表明口服和肌肉注射均能提高巨噬细胞吞噬能力。在付绍兰等[12]的研究中,通过对小鼠肌肉注射TF方式,也得到相同结果。同样地,本研究结果发现,SPF鸡饮用和肌肉注射TF,使用TF后第7 d和第21 d时SPF鸡巨噬细胞吞噬能力差异不明显。

[1]马凤龙,傅兴伦,贾世玉,等.鸡转移因子的制备及其对鸡免疫应答影响的研究[J].山东畜牧兽医,1999(5):5-6.

[4]凌红丽,陆承平,孙海新,等.鸡脾转移因子对肉鸡免疫应答及防病效果的研究[J].中国兽医科学,2006,36(7):556-560.

K 为 碳 廓 清 率 ,K=(lgOD1-lgOD2)/T2-T1;OD1、OD2分别为2 min、10 min时采血所得待测血液的光密度值;T1、T2为注射印度墨汁后的采血时间。

2 结 果

结果显示,使用TF后第7 d,第1组(9.23)和第2组(9.62)的巨噬细胞吞噬指数分别比对照组增加了2.78和3.17,且此时第1组与第2组的巨噬细胞吞噬指数差异不明显;使用TF后第21 d,第1组(11.96)和第2组(12.15)的巨噬细胞吞噬指数分别比对照组增加了3.89和4.08,且此时第1组和第2组的巨噬细胞吞噬指数差异不明显,见表1。

结果表明,TF能够提高鸡巨噬细胞吞噬能力,且28日龄SPF鸡巨噬细胞吞噬能力比14日龄时强。饮用和肌肉注射两种途径不影响TF对巨噬细胞吞噬能力的提高作用。

表1 巨噬细胞吞噬指数结果

注:增加值=第1组或第2组吞噬指数-第3组吞噬指数。

分组 使用TF后第7 d 使用TF后第21 d吞噬指数 增加值 吞噬指数 增加值第1组第2组第3组9.23 9.62 6.45 2.78 3.17-11.96 12.15 8.07 3.89 4.08-

3 讨 论

1.3 TF制备 按照已授权的发明专利制备TF[8-10]:以健康猪脾脏为原料,经匀浆、细胞破碎、灭活、微滤、超滤后精制而成。经检验,所制备TF的pH值为7.1, 多 肽 含 量 为3.2 mg/mL, 核 糖 含 量 为92.0 μg/mL,脱E受体法效力检验活力为16%,细菌内毒素含量小于10 EU/mL,在251 nm波长处有最大吸收,OD260nm/OD280nm的比值为2.22,蛋白质定性检验、无菌检验、支原体检验、外源病毒检验、热原检验、异常毒性检查、过敏反应检查、安全检验均合格。1.4 试验设计 SPF鸡7日龄时,第1组饮用经灭菌注射用水50倍稀释的TF 1.0 mL/羽,即每羽鸡饮用了TF 0.02 mL/羽;第2组肌肉注射经灭菌注射用水50倍稀释的TF 1.0 mL/羽,即每羽鸡肌肉注射了TF 0.02 mL/羽;第3组作为空白对照组,不使用TF。各组均于使用TF后第7 d和21 d(即14日龄和28日龄)时,每组随机挑选3羽翅静脉注入1:3稀释的印度墨汁0.2 mL,并立即计时,注入墨汁后2 min、10 min分别从心脏采血0.2 mL,加入20 mL 0.1%Na2CO3溶液中摇匀,用岛津紫外分光光度计UVmini-1240在600 nm波长处测定光密度值,以Na2CO3溶液作空白对照。将鸡颈动脉放血致死,取肝脏、脾脏称重,计算吞噬指数。

TF可非特异性地增强细胞免疫,提高机体免疫功能[1-7]。在本试验中,使用TF后第7 d和第21 d时SPF鸡巨噬细胞吞噬指数比不使用TF的SPF鸡巨噬细胞吞噬指数提高了2.78~4.08。

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总氮含量测定方法为凯氏定氮法,氨基酸态氮含量测定采用甲醛滴定法,使用自动电位滴定仪进行测定,参考GB 18186—2000。

[5]Bravo-blas R,Téllez S,Uribe A,et al.Transfer factor acting as IFN-γ and IL-2 mRNA expression inductor in chicken vaccinated against avian influenza[J].Arch Med Vet,2010,42(1):67-71.

试验按照已授权发明专利制备TF[8-10],通过饮用和肌肉注射两种途径研究TF对SPF鸡巨噬细胞吞噬指数的影响,饮用或肌肉注射TF均可提高鸡巨噬细胞吞噬指数。

吞噬指数=体重÷(肝重+脾重)×K1/3

[2]Lawrence H S,Borkowsky W.Transfer factor-current status and future prospects[J].Biotherapy,1996,9(1/3):1-5.

[3]Holeva O H,Paster I P,Liubchenko T A,et al.The immune reactivity transfer factor as a modulator of lymphocyte functional activity in rats[J].Fiziolohichny Zhurnal,2000,46(4):58-65.

中秋节到了。晚上,月亮爬上了杨柳梢,此时,小两口便双双来到南平房顶上赏月。杨力生带着胡琴,一时兴起,心想:中秋节属于团圆节,借此良宵美景,我何不拉一段曲子让媳妇开开心呢!于是,便盘腿坐在蒲团上,用心调好琴弦,歪着脑袋有滋有味地拉起《小姑贤》选段。他正盼着媳妇夸他拉得好,而恰恰就在这天,杨秋香偏偏就心烦起来,她的脸一下子便拉长了,“快别拉了!拉得压碾声,烦死人!”

参考文献:

(3)日照软件是建筑设计必须使用的软件,用于检查建筑设计是否满足日照要求,是建筑设计必须满足的基本条件。

[6]Ramaekers J C.Enhancement of immune response by transfer factor:WO2012044960A1[P].2015-04-05.

[7]Wang R N,Wang Y B,Geng J W,et al.Enhancing immune responses to inactivated porcine parvovirus oil emulsion vaccine by co-inoculating porcine transfer factor in mice[J].Vaccine,2012,30(35):5246-5252.

[8]徐磊,刘友霖.猪疫苗特异性猪脾脏转移因子的制备方法及用途:201310506686.7[P].2015-05-13.

[9]徐磊.禽疫苗特异性猪脾脏转移因子的制备方法及用途:201310507478.9[P].2015-07-08.

此模块包括学校人事档案信息管理、教学档案信息管理、科研项目与成果档案信息管理、各职能部门相关政策文件档案信息管理等子系统。各类档案数据信息都以相对独立又可通过关联字段相互关联的关系数据库文件形式存在,其数据库结构由前述各职能部门的管理信息系统结构设计时一并形成,其库中数据多由前述各子系统运行中自动归档而成,也有部分由本模块管理员依据实情审核后上传。

[10]徐磊.猪疫苗特异性牛脾脏转移因子的制备方法及用途:201310506701.8[P].2015-12-09.

[11]陈德坤,覃勇,吴辉,等.猪脾转移因子对小鼠吞噬细胞吞噬功能的影响[J].动物医学进展,2001(3):77-84.

[12]付绍兰,郭宝福,杨学海.转移因子对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响和E玫瑰花形成的作用 [J].生物技术,1991(4):25-27.

叶建良
《福建畜牧兽医》 2018年第02期
《福建畜牧兽医》2018年第02期文献

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