在池塘养殖中，高密度放养及饲料的过量投喂易破坏池塘的生态系统，造成水体亚硝酸盐含量升高［1－3］。高浓度亚硝酸盐会影响鱼类摄食、活动及生长［4－5］，长期胁迫会降低鱼类的免疫力，增加致病菌的易感性，严重胁迫甚至会引起死亡［6－7］。鱼体为应对胁迫因子的影响，会产生一系列的生理生化响应，直接反应在其代谢率的变化，另一方面鱼体的活动能力亦会受到影响［8］，监测胁迫下鱼类的代谢率可以反应其在不同水环境中的活动规律、生理代谢水平、能量需求水平［9－11］。

“互联网+教育”与少数民族基础数学教育的结合对于民族教育工作者而言是一次开创性的尝试，明确这种结合所能解决的实际问题，少数民族基础数学教育的质量才能得以提升。在“互联网+”背景下的少数民族基础数学教育能够联系少数民族学生的日常生活，解决少数民族数学脱离实际的问题；能够构造一个良好的数学学习和沟通的平台，解决少数民族基础数学教师能力不足的问题；能够实现少数民族数学与民族文化的融合，解决少数民族学生对数学缺乏兴趣的问题。

标准代谢率 （standard metabolic rate，SMR）是满足鱼体的最低能量需求［12－13］，能反应鱼类的生态习性［14］，预测其能量分配［12］。鱼体在应对不同环境因子胁迫时，均会启用相应的调节机制，SMR 发 生 显 著 变 化［8，15］。最 大 代 谢 率（maximum metabolic rate，MMR）是鱼体力竭运动后的最大耗氧率，与鱼体的行为和活动能力有密切关系，越活跃的鱼类越能维持更高水平的耗氧量［16］，能反映出一些鱼类特殊的代谢模式［14，17］。有氧代谢范围（aerobic scope，AS）是MMR与SMR的差值，反映环境因子对鱼体生理代谢的影响，通常用来评价满足鱼类基本生理代谢需求外，完成其它有氧代谢活动的能力。AS的下降会破坏鱼体的代谢平衡，引起能量需求冲突，不利于鱼体的健康生长［16，18］。亚硝酸盐在鱼体内会将血红蛋白氧化成高铁血红蛋白，导致鱼体载氧能力下降，从而影响代谢［19－21］。

②对于固态发酵551H，确定各种因素的最高与最低水平为发酵时间12～32 h、固态培养基组成/固液比值1.5～4、发酵温度25～30 ℃、接种量3%～10%；对于固态发酵552H，确定各种因素的最高与最低水平为发酵时间12～48 h，固态培养基组成/固液比值1.5～4，发酵温度25～30℃，接种量3%～10%。

异育银鲫（Carassius auratus gibelio）是我国淡水养殖的主要种类之一，具有营养丰富、肉味鲜美、适应性强、生长快等特点［22－23］。本实验旨在探索异育银鲫在不同浓度亚硝酸盐水环境下SMR、MMR、AS、MHb／Hb的变化规律，以期进一步揭示亚硝酸盐对异育银鲫呼吸生理、有氧代谢及运动能力的潜在生态毒性，为异育银鲫的健康养殖、生长模型构建提供基础数据。

1 材料与方法

1.1 实验材料

实验于2016年6－8月在光明渔业有限公司进行，实验用的异育银鲫幼鱼取自光明食品集团上海市海丰标准化养殖池塘，放入体积为300 L、直径为2 m的圆形鱼缸中暂养2周，暂养期间水温 （25.5±0.5）°C，pH 7.84±0.12，总氨氮浓度 （0.12 ±0.01）mg·L－1，亚硝酸盐浓度（0.07±0.01）mg·L－1，溶氧水平不低于5 mg·L－1，每天投喂饲料1次，投喂量约为体重的5%，投饵后2 h吸走残饵粪便，日换水量为30%。选取规格均匀、健壮的个体作为实验对象。实验用水采用过滤的河水加入一定量NaNO2（AR）配制而成，亚硝酸盐浓度测定采用重氮-偶氮光度法［24］。

1.2 实验方法

1.2.1 实验设计

参照陈家长等［6］、谭树华等［25］、单娜［26］的研究结果及预实验的结果，呼吸代谢实验的鱼体质量为 （15.31±2.28）g、体长为 （9.03±0.55）cm，亚硝酸盐设置3个浓度梯度，分别为0.5、1、1.5 mg·L－1，每组实验设3个重复，每个重复放3尾异育银鲫；MHb／Hb实验的鱼体质量为（58.79±4.94）g、体长为 （12.03±0.87）cm，亚硝酸盐设置4个浓度梯度，分别为0.5、1、2、3 mg·L－1，每组实验设3个重复，每个重复20尾异育银鲫。以过滤的河水作为对照组，每隔6 h测定并调节亚硝酸盐浓度，实验期间不进行投喂，其它实验条件与暂养期间一致。

1.2.2 呼吸代谢测定

通过对月亮湾的使用性质、交通组织、公共空间和建筑四大类指标在实施前后的对比研究（见表1）发现，土地的使用性质和各类功能的比例是刚性规划，不可改变，而交通组织与公共空间则会发生改变。对于具体指标而言，交通组织中有无停车场、地块整体面向市政道路的出入口位置和数量是刚性规划，而停车场的位置和地下停车场出入口的具体位置是弹性规划。公共空间中的后退红线是刚性规划，具体景观风格，绿化带位置、宽度等是弹性规划。建筑中塔楼与裙房的限制高度、骑楼和永久性建筑的有无是刚性规划，具体位置、景观带位置和空间营造方式是弹性规划。

为排除摄食对鱼体代谢率的影响，实验开始前48 h停止投喂［27］；实验开始前及结束后均测定对照呼吸室（空白对照）中的溶氧变化，排除实验水体中微生物耗氧对代谢率的影响［13，28］。

1.2.2.1 标准代谢率 （SMR）的测定

实验采用鱼类流水式呼吸室测定异育银鲫的SMR，实验水体为2 L，将实验鱼放入含有不同浓度亚硝酸盐的呼吸室中胁迫96 h后，连续24 h每隔1 h监测呼吸室中溶氧的变化，整个实验过程保证水中溶氧水平不低于饱和溶氧的80%，每次测定时间为5 min。为保证呼吸室中水体充分混合并减少对鱼体的惊扰，测定期间关闭呼吸室的外循环，打开内循环；未测定时打开外循环，关闭内循环。溶氧采用多参数水质测量仪 （YSI 6600，USA）监测。整个实验过程在黑暗环境中进行，根据代谢率公式计算相关数值，最小10%数据的平均值作为 SMR［12，29］。

代谢率MO2＝△O2·V／（t· m）

其中，△O2为实验呼吸室中溶氧变化量与对照呼吸室（空白对照）溶氧变化量之差，V为呼吸室的体积，t为测定的总时间，m为实验鱼的体质量［8，30］。

1.2.2.2 最大代谢率 （MMR）的测定

将实验鱼放入不同浓度的亚硝酸盐水环境中，实验水体为100 L，胁迫96 h后将实验鱼放入环形水道内，参照JEROEN等［28］的方法，人工驱赶实验鱼5～10 min，使之力竭，力竭判断标准为实验鱼不再游泳前进，在20 s内立刻将实验鱼转移到呼吸室中，测定水中溶氧的变化，根据代谢率公式计算相关数值，以测量值的最大值作为MMR［16，29］。

1.2.2.3 有氧代谢范围（AS）的测定

防患未然 全面提升防灾减灾救灾能力 ...............................................................................................................5-1

高光谱遥感图像具有光谱分辨率高、图谱合一和光谱波段数目多等特点[1]，能够提供丰富的地表信息，能够探测出在宽波段成像遥感中不可识别的地物，进而为实现定量化和精细化的高光谱分辨率对地观测提供可能[2]。因此被广泛应用于土地利用、资源调查和自然灾害监测等领域[3]。这项新技术极大地扩大了传统遥感在光谱探测方面的优势，目前已经发展成为遥感领域的前沿科学。

有氧代谢范围 AS值为 MMR与 SMR之差［31］。

参考文献：

将实验鱼放入不同浓度的亚硝酸盐水环境中胁迫，实验水体为200 L，分别于胁迫 24、48、72、96 h后采样，每次每组随机采样5 ind。MS-222进行麻醉，湿纱布裹住鱼体，露尾部，用浸润肝素钠的2 mL注射器从实验鱼尾静脉采集血液1 mL左右，时间不超过1 min，置于洁净的2 mL离心管中，血样保存于 -80℃ 冰箱中备用。MHb／Hb采用江苏省南京建成生物工程研究所有限公司试剂盒进行测定，具体操作参照说明书，用Synergy H1酶标仪 （Bio-tek，USA）检测其吸光值。

1.3 数据处理

实验数据均为平均值±标准差（x±SD）。数据处理使用SPSS 18.0统计软件，所有实验结果用单因素方差分析 （one-way ANOVA）进行显著性检测，若方差分析差异显著，则再用 Duncan进行多重比较，显著水平 P为0.05；采用曲线模型进行回归分析，显著水平P为0.05。

2 结果与分析

2.1 亚硝酸盐胁迫下异育银鲫呼吸代谢的变化

2.1.1 亚硝酸盐胁迫下标准代谢率（SMR）的变化

斯芬克斯出的问题是：什么东西早晨用四只脚走路，中午用两只脚走路，傍晚用三只脚走路？俄狄浦斯回答：是人。在生命的早晨，他是个孩子，用两条腿和两只手爬行；到了生命的中午，他变成壮年，只用两条腿走路；到了生命的傍晚，他年老体衰，必须借助拐杖走路，所以被称为三只脚。俄狄浦斯答对了。斯芬克斯羞愧坠崖而死。“

与对照组（182.14±6.67）mg·（kg·h）－1相比，异育银鲫SMR随水环境亚硝酸盐浓度的升高而显著升高 （P＜0.05），当水环境亚硝酸盐浓度为 0.5、1、1.5 mg·L－1时，SMR分别增加了16%、28%和40% （图1）。通过回归分析，SMR与水环境亚硝酸盐浓度呈二次方回归关系：y＝181．995＋67．237x－12．577x2，R2＝1．000，P＜0.05。

［15］ 吕 富，潘鲁青，王爱民，等.盐度对异育银鲫呼吸和氨氮排泄生理的影响［J］.水生生物学报，2010，34（1）：184－189.LV F，PAN L Q，WANG A M，et al.Effects of salinity on oxygen consumption rate and ammonia excretion rate of allogynogemetic crucian carp［J］.Acta Hydrobiologica Sinica，2010，34（1）：184－189.

  

图1 亚硝酸盐胁迫下异育银鲫标准代谢率的变化Fig.1 Changes of standard metabolic rate of C．auratus gibelio under nitrite stress注：“*”表示试验组与对照组具有显著差异（P＜0.05）Note：“*” represents significant differences between the experiment group and control group（P＜0.05）

［9］ 陈松波，陈伟兴，范兆廷.鱼类呼吸代谢研究进展［J］.水产学杂志，2004，17（1）：82－89.CHEN S B，CHEN W X，FAN Z T.Advances in research on fish respiration metabolism［J］.Chinese Journal of Fisheries，2004，17（1）：82－89.

与对照组（549.52 ±14.81）mg·（kg·h）－1相比，异育银鲫MMR随水环境亚硝酸盐浓度的升高而显著降低（P＜0.05），当水环境亚硝酸盐浓度为 0.5、1、1.5 mg·L－1时，MMR分别减少了12%、16%和18% （图2）。通过回归分析，MMR与水环境亚硝酸盐浓度呈二次方回归关系：y＝548．662－143．193x－54．502x2，R2＝0．997，P＜0.05。

  

图2 亚硝酸盐胁迫下异育银鲫最大代谢率的变化Fig.2 Changes of the maximum metabolic rate of C．auratus gibelio under nitrite stress注：“*”表示试验组与对照组具有显著差异（P＜0.05）Note：“*” represents significant differences between the experiment group and control group（P＜0.05）

2.1.3 亚硝酸盐胁迫下有氧代谢范围 （AS）的变化

与对照组（367.38±4.78）mg·（kg·h）－1相比，异育银鲫AS随水环境亚硝酸盐浓度的升高而显著降低（P＜0.05），当水环境亚硝酸盐浓度为 0.5、1、1.5 mg·L－1时，AS分别减少了25%、39%和45% （图3）。通过回归分析，AS和水环境亚硝酸盐浓度呈二次方回归关系：y＝366．668－210．431x＋67．079x2，R2＝0.999，P＜0.05。

  

图3 亚硝酸盐胁迫下异育银鲫有氧代谢范围的变化Fig.3 Changes of aerobic scope of C．auratus gibelio under nitrite stress注：“*”表示试验组与对照组具有显著差异（P＜0.05）Note：“*” represents significant differences between the experiment group and control group（P＜0.05）

2.2 亚硝酸盐胁迫下异育银鲫高铁血红蛋白比例 （MHb／Hb）的变化

随水环境亚硝酸盐浓度的升高，异育银鲫MHb／Hb显著升高 （P＜0.05）。异育银鲫在亚硝酸盐浓度为0.5 mg·L－1及3 mg·L－1的水环境中96 h后MHb／Hb分别为0.05±0.00和0.23±0.01，是对照组的2.2和10倍 （图4）。通过回归分析，MHb／Hb和水环境亚硝酸盐浓度存在三次方回归关系：y＝0．017＋0．072x－0．05x2＋0．015x3，R2＝0.998，P＜0.05。在本实验范围内，异育银鲫MHb／Hb在48 h内趋于稳定。

在本实验范围内，异育银鲫的AS与水环境亚硝酸盐浓度呈负相关，即在高浓度亚硝酸盐水环境中完成有氧代谢活动的范围变窄，包括摄食、生长及繁殖等［18］。当生存环境恶化时，鱼体需要更多的能量应对胁迫，而可提供的有氧代谢能量减少，CLAIREAUX等［30］的研究结果表明，低AS不能满足鱼类摄食消化的能量需求，易造成生理与活动过程对能量需求的冲突，尤其不利于幼鱼的生长并且会降低鱼体应对环境变化的能力，导致死亡率显著升高［37－38］。JEROEN等［29］发现欧洲鲈 （Perca fluviatilis Linneaus）在临近致死温度（CT max）的水环境中，通过增加溶氧水平能增加AS，在高亚硝酸盐水环境中能否通过升高溶氧水平来增加异育银鲫的AS，以增强鱼体应对胁迫的能力，有待进一步研究。

  

图4 亚硝酸盐胁迫下异育银鲫高铁血红蛋白比例的变化Fig.4 Methemoglobin proportion of C．auratus gibelio exposed to nitrite stress注：“*”表示试验组与对照组具有显著差异（P＜0.05）Note：“*” represents significant differences between the experiment group and control group（P＜0.05）

3 讨论

3.1 亚硝酸盐胁迫下异育银鲫标准代谢率（SMR）及最大代谢率（MMR）的变化规律

在本实验范围内，异育银鲫SMR与水环境亚硝酸盐浓度呈正相关，MMR则与之呈负相关，MMR和SMR反映了生物体有氧能量代谢的上限和下限［16］。结果表明，在高亚硝酸盐胁迫下，维持异育银鲫基本生存的能量需求升高，可提供的有氧代谢总能量降低。根据陈家长等［6］、单娜［26］、TONI等［32］的研究，在高亚硝酸盐水环境中，鱼体血液中溶菌酶、碱性磷酸酶、补体 C3、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶的活性均显著降低，导致机体免疫力下降，增加了对致病菌的易感性，因此异育银鲫所需能量增加，用于修复自身机能并维持基本生理功能［8，33］。INSEOK等［34］的研究表明，在高亚硝酸盐水环境中，葡萄糖和总蛋白含量显著下降，证明了鱼体内大量能量物质的损耗；STORMER等［35］发现鱼体乳酸含量随亚硝酸盐含量的升高而显著升高，说明鱼体无氧代谢能力增强，间接说明了鱼体有氧代谢能力下降，导致游泳能力下降，逃逸、捕食及繁殖等行为均受到限制［36－37］。

3.2 亚硝酸盐胁迫下异育银鲫有氧代谢范围（AS）的变化规律

康川司法所采取“周闻其声，月见其人”的工作原则，要求社区服刑人员每月参加8小时的集中学习，内容一般为思想教育和法制宣传。社区服刑人员每月必须参加不少于8小时的公益劳动，劳动内容一般是打扫社区卫生、完善社区绿化工作等。康川司法所要求社区服刑人员每月上交思想汇报材料，如果确有特殊情况无法按期到所报到或上交思想汇报，社区服刑人员可以申请延缓。如有假期需求，经服刑人员申请后，司法所可以批准最长不超过7天的假期。

3.3 亚硝酸盐胁迫下异育银鲫高铁血红蛋白比例 （MHb／Hb）变化规律

在高亚硝酸盐水环境下，异育银鲫血液中MHb／Hb显著升高，说明其载氧能力下降。高亚硝酸盐使亚铁血红蛋白（Fe2＋）迅速转化成高铁血红蛋白（Fe3＋），同时失去携氧功能，导致鱼体载氧能力显著下降，造成鱼体组织缺氧，有氧代谢能力下降［35］，因此推测高亚硝酸盐环境中的异育银鲫AS下降应与MHb／Hb密切相关。此外，在本实验中MHb／Hb与水环境亚硝酸盐浓度呈三次方回归关系，亚硝酸盐浓度由2 mg·L－1上升至3 mg·L－1时，MHb／Hb快速升高，说明在此范围异育银鲫对亚硝酸盐胁迫有敏感点，这与陈家长等［6］对尼罗罗非鱼（Oreochromis niloticus）的研究结果相似，亚硝酸盐浓度小于1.5 mg·L－1时，尼罗罗非鱼血清非特异性免疫酶（溶菌酶、碱性磷酸酶、补体C3）活性与对照组相比无显著性差异，高于3 mg·L－1的胁迫会显著降低鱼体血清非特异性免疫酶的活性。

4 小结

本研究结果显示在高浓度亚硝酸盐胁迫下，异育银鲫一方面通过各项生理活动来应对胁迫的影响，导致SMR升高，另一方面由于 MHb／Hb上升导致鱼体载氧能力的下降，MMR下降，AS减小，因此从有氧代谢角度考虑，可以探索在高亚硝酸盐水环境中通过增加溶氧量缓解高亚硝酸盐对鱼体的胁迫。

1.2.3 高铁血红蛋白比例 （MHb／Hb）测定

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只收不发，信冷淡。只发不收，信搔扰。传不出去，信功能障碍。看微信大笑者，基本已达到信高潮。一会儿用微信一会儿又删除的，信功能痉挛。用微信交友的，信交。用微信谈工作的，信工作者。每天微信频发的，信生活过度。

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2.1.2 亚硝酸盐胁迫下最大代谢率 （MMR）的变化

［10］ PECK M A，MOYANO M.Measuring respiration rates in marine fish larvae：challenges and advances［J］.Journal of Fish Biology，2016（88）：173－205.

银行在区块链技术的应用上应注重从内部管理流程优化入手，再拓展至具体的业务领域，建立合规、详细的操作流程，明确各方职责。例如，在区块链票链业务中，节点银行必须进行基础的业务操作：验票、保管、电票系统操作、托收、依照协议划转票据款项，所有验票流程必须仍然遵循原帖先办理验票操作要求，业务信息方录入通过客户和银行双重操作；平台技术支持方则需要建立互联网票源入口，以及平台业务流程设计及IT系统开发，对数据进行定期维护分析，对各节点银行的工作量进行监控。如首个与简称区块链金服合作，联合建立票链全国监控运营管理中心的地方城市商业银行——赣州银行，即选择有实力的公司合作联合把控操作风险。

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随着种植密度的不断增加会导致玉米兴玉101的叶绿素A与叶绿素B的含量逐渐减少，同时也会对净光合速率与净同化率造成较为严重的影响，光合作用中的关键酶PEPcase与RuBPCase活性逐渐降低。与此同时，随着种植密度的不断在增加会导致叶肉细胞膜结构出现破裂或损坏的情况，细胞内的叶绿体数量也会逐渐减少。通常情况下叶绿体的结构属于梭形，但由于种植密度的增加对玉米兴玉101光合作用产生影响导致叶绿体的形状变为椭圆形，最终导致叶绿体膜结构出现不完整的情况。除此之外，由于种植密度的增加导致玉米兴玉101的光合作用受到影响最终会导致玉米成熟期被延长，整体光合作用下降导致玉米的产量降低。

［16］ NORIN T，CLARK T D.Measurement and relevance of maximum metabolic rate in fishes［J］.Journal of Fish Biology，2016（88）：122－151.

1.4.4 肺组织病理学检测 将大鼠左肺用4 % 多聚甲醛充盈，结扎左侧主支气管后放入4 ℃的4 % 多聚甲醛中固定，3 d后进行包埋、切片和苏木精-伊红(H-E)染色，在200倍视野下观察、拍照。由未参与实验的病理科医师分别在低倍和高倍视野下进行观察和炎症程度评分，参考文献[9-10]。

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1.2.4 隔离区 主要是兽医室（含尸体解剖室）、隔离畜舍、病死畜和粪污处理设施。隔离区和生产区之间应有适当的卫生间距和绿化带。

［5］ XU Z X，LI E C，XU C，et al.Response of AMP-activated protein kinase and energy metabolism to acute nitrite exposure in the Nile tilapia Oreochromis niloticus［J］.Aquatic Toxicology，2016（177）：86－97.

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为了更好的探索教、康、保整合服务模式，爱心庄园以蒲主任、伍书记为主要召集人，各科室领导作为行政支持，集合各科室骨干力量，组建了一个教、康、保整合的专业科研团队[5]。

［28］ RODGERS G G，TENZING P，CLARK T D.Experimental methods in aquatic respirometry：the importance of mixing devices and accounting for background respiration［J］.Journal of Fish Biology，2016（88）：65－80.

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