凤尾七又名：凤尾草、凤凰草。为景天科植物小丛红景天的根(学名：Rhodiola dumulosa (Franch.))，全年都可以采。为多年生草本。生在山坡及石缝中。性味甘涩微苦，温。功效有补肾，益精，养心，安神，调经，活血化瘀，明目。主治虚劳失眠，骨蒸劳热，月经不调，头晕目眩，干血劳，蛇咬等病症[1～3]。凤尾七根含有挥发油，大黄素，毒蛋白，苷类等成分，其中的挥发油对多种细菌有抑制效果[4～6]。

当人体细胞受自由基攻击时，体内代谢中的氧化还原反应立即向氧化增强方向变化，就会生成过氧化物，而过氧化物中不稳定的活性氧，自由基离子会对细胞中的各大分子物质发生氧化反应[7～10]，如脂质类、糖类、蛋白质、核酸等均可悲自由基进行氧化，从而引起这些大分子物质的的改变，如变性、交链、断裂等，致细胞结构与生理功能的破坏[11，12]。

本实验通过测定还原能力，羟基自由基的清除作用，超氧阴离子的清除作用三个方面来探究凤尾七提取物的抗氧化活性。

1 实验部分

1.1 主要仪器和试剂

GZX-GF101-1-BS-Ⅱ远红外快速恒温干燥箱(上海跃进医疗器械有限公司)；722型可见分光光度计(上海精密科学仪器有限公司)。

铁氰化钾(化学试剂(西安)有限公司)；三氯乙酸(科龙化工试剂(成都)有限公司)，三氯化铁(天津市科密欧化学试剂有限公司)，1,10-邻菲罗啉(天津市博迪化工有限公司)，FeSO4(西安化学试剂厂)，邻苯三酚溶液(贵州遵义佳宏精细化工厂),30%过氧化氢(焦作鑫安科技股份有限公司试剂厂)，磷酸氢二钠(西安韦伯力扬化工有限责任公司)，磷酸二氢钠(西安韦伯力扬化工有限责任公司)，95%无水乙醇(济南世纪通达化工有限公司)，三(羟甲基)氨基甲烷(上海分析化工科技有限公司)，凤尾七甲醇提取物(由本实验室制备)，凤尾七乙醇提取物(由本实验室制备)。

1.2 溶液的配制

由图1可以看出当溶液浓度为0.0625 mg/mL时，测得吸光度为0.103；当浓度为0.5 mg/mL时，测得吸光度为0.254，图中从0.0625 mg/mL至0.5 mg/mL所得曲线的斜率大，说明浓度从0.0625 mg/mL到0.5 mg/mL时还原力增大的幅度较大。当凤尾七提取物浓度为1 mg/mL时，测得吸光度值为0.287；当浓度为8 mg/mL时，测得吸光度为0.401。图中从1 mg/mL至8 mg/mL所得曲线的斜率小，表明浓度在1 mg/mL到8 mg/mL的还原力增长幅度较小。随着凤尾七甲醇提取物浓度的变化而不同。

式中：A样为加入水提取物后反应体系的吸光度值；A损为不加水提取物时反应体系的吸光度值；A未为不加水提取物和双氧水时反应体系的吸光度值。

取10 mL试管若干只，分别准确量取0.075 mmoL/L邻二氮菲溶液1 mL于试管中，依次向试管中再加入PBS缓冲溶液(pH为7.4)2 mL，蒸馏水1 mL，0.75 mmoL/LFeSO4溶液1 mL，0.3%H2O21 mL，边加上述溶液边摇匀，然后把所加溶液的试管置于37 ℃水浴锅中反应60 min后，取出试管，用蒸馏水作参比，在536 nm波长下测它的吸光度A损，根据损伤管的反应溶液，同上步骤，使用等量蒸馏水代替0.3%H2O2，测得吸光度A未，用等量不同浓度的样品溶液代替蒸馏水，测得吸光度A样，然后记录数据。每组都要进行三次平行实验，最后计算清除率。

清除率I%=[(A样-A损)/(A未-A损)]×100%

1.3 凤尾七提取物还原力的测定

取10 mL试管若干，分别加入事先配好的不同浓度凤尾七甲醇提取物溶液1 mL,pH6.6磷酸盐缓冲液1 mL，1%铁氰化钾溶液1 mL,振荡试管使之反应物充分混匀，然后将所有试管先后均放置于水浴锅调节50 ℃反应20 min后，取出所有试管于试管架上，再按之前先后顺序依次向试管中加入10%三氯乙酸2 mL，将所加试剂试管对称放置在离心机中，打开开关以3 000 r.min离心10 min，迅速从离心机中取出离心后试管中，得试管中上清液2.5 mL于小烧杯中，再倒入去离子水2.5 mL，0.1%三氯化铁0.5mL，摇晃烧杯使之完全混匀，室温静置5 min，用水做参比，在700 nm波长下测定吸光度。每个样品平行做3份，计算时取平均值。凤尾七乙醇提取物同上。

1.4 凤尾七提取物清除超氧阴离子自由基的测定

取pH8.2的0.1 mol·L-1 Tris-HCL缓冲溶液3.6 mL和双蒸水4 mL摇晃使溶液均匀，在25 ℃水浴中保温20 min后，立即加入25 ℃事先预热好的3 mol/L邻苯三酚溶液0.2 mL，迅速摇匀后倒入比色皿中，在345 nm以Tris-HCl缓冲溶液和蒸馏水作参比测吸光度值。

按上述步骤在加入邻苯三酚之前，分别加入1 mL不同浓度的样品溶液，相应减少双蒸水的量，以Tris-HCL缓冲溶液和蒸馏水作参比，在345 nm波长下测吸光度值，用吸光度对时间作图表示邻苯三酚自氧的抑制率。根据式1计算抑制率。

图书馆面临新一轮的转型。这场转型不仅要求图书馆保管好已有的资源，而且要增强大局意识，融汇本地资源与全球资源，共同建设可持续的全球型知识共享空间；要加强服务意识，增强加值服务能力；并积极与出版机构合作，有力推动知识资源的开放获取化。为此，图书馆应充分发挥自身在资源管理、编目技能以及项目策划方面的专业优势，在开放获取、开放数据和开放科学的发展中扮演更为重要的角色。

抑制率=(A0-A)/A0*100%

由图2可得，在凤尾七甲醇提取物浓度为0.062 5 mg/mL时，对超氧阴离子的抑制率为7.9%，当浓度为0.5 mg/mL时，抑制率为46.4%，图中从0.0625 mg/mL至0.5 mg/mL所得曲线的斜率大，表明凤尾七甲醇提取物对超氧阴离子清除作用增大的快。当凤尾七甲醇提取物浓度为1 mg/mL时，抑制率为53.9%，当浓度为8 mg/mL时，对超氧阴离子的抑制率为81.4%,图中从1 mg/mL至8 mg/mL所得曲线的斜率小，表明风尾七甲醇提取物对超氧阴离子清除作用增大的慢。

1.5 凤尾七提取物清除羟基自由基的测定

注射用七叶皂苷钠治疗术后肿胀疗效和安全性的Meta分析…………………………………………………… 赵新才等（14）：1983

分别配制1%铁氰化钾溶液，10 %三氯乙酸溶液，pH=6.6磷酸盐缓冲液，0.2 %FeSO4溶液，0.3 %邻二氮菲乙醇溶液， 3 mol/L邻苯三酚溶液，0.75 mmol/L邻二氮菲溶液，0.75 mmol/LFeSO4溶液，0.1 mol/L Tris-HCl缓冲溶液，pH=6.6和pH=6.0的磷酸缓冲液。

1.4 数据处理 采用Excel 2003 和DPS v7.05 软件对试验数据进行处理。X1表示密度，X2表示N，X3表示P2O5，X4表示K2O。通过回归分析建立4因素与豇豆产量之间的回归方程，因通用旋转设计的常数项与二次项系数、二次项系数之间都具有相关性，为方便对模型分析讨论，保留不显著的各项。将4个因素中的3个固定在零水平，对数学模型进行降维分析，得到以其中1个因素的偏回归模型，并根据该模型做出单因素变化趋势图；在固定其他2个因子为零水平时，求另外2因子之间的交互作用；对所建模型进行非线性求解得出最大值。

2 结果与讨论

2.1 凤尾七甲醇提取物还原力大小的测定及分析

各浓度样品溶液的配制(0.0625，0.125，0.25，0.5，1， 2，4，8 mg/mL)：分别称取凤尾七甲醇提取物和乙醇提取物0.4 g于烧杯中，加少量蒸馏水用玻璃棒搅拌溶解并移至容量瓶定容至100.0 mL。再稀释配置成上述浓度的溶液。

  

图1 风尾七甲醇还原性Fig 1 Methanol reducibility of Rhodiola dumulosa franch

2.2 凤尾七甲醇与乙醇提取物对清除超氧阴离子的分析

  

图2 凤尾七甲醇提取物对于超氧阴离子的抑制作用Fig 2 Inhibition of superoxide anions by eethanol extract from Rhodiola dumulosa franch

1.3.2 松弛疗法 指通过一定的肌肉松弛训练程序，有意识地控制自身的生理心理活动，降低唤醒水平，改善躯体及心理功能紊乱状态，达到治疗疾病的作用［10］。

  

图3 凤尾七乙醇提取物对于超氧阴离子的抑制作用Fig 3 Inhibition of superoxide anions by ethanol extract from Rhodiola dumulosa franch

由图3可以看出在风尾七乙醇浓度为0.062 5 mg/mL时，对超氧阴离子抑制率为1.3%；当浓度为0.5 mg/mL时，抑制率为38.9%；图中从0.062 5 mg/mL至0.5 mg/mL所得曲线的斜率大，说明凤尾七乙醇提取物对超氧阴离子的清除作用增强的快。浓度为2 mg/mL时，抑制率为67.2%。图中从0.5 mg/mL至2 mg/mL所得曲线的斜率小，看出随着溶液浓度的增大，凤尾七乙醇对超氧阴离子的抑制逐渐增大的较慢。

在V-M控制系统中，开环放大系数K值对系统的稳定性有很大影响，K值越大，系统的静态特性越硬，稳态速度下降越小，稳态性能越好，所以在一定的静态差要求下速度调节的范围也就越宽。然而，只要系统使用的放大器是一个简单的比例放大器，则稳态速度差只能无限降低，不能完全消除，因为闭环系统的稳态速度下降公式为：

2.3 凤尾七甲醇与乙醇提取物对清除羟基自由基的实验分析

  

图4 凤尾七甲醇提取物对于羟基自由基的抑制作用Fig 4 Inhibition of hydroxyl radicals by eethanol extract from Rhodiola dumulosa franch

由图4看出，当凤尾七甲醇提取物为0.062 5 mg/mL时，对羟基自由基的清除率为26.1 %，浓度为0.5 mg/mL时，清除率为61.5%，图中从0.062 5 mg/mL至0.5 mg/mL所得曲线的斜率最大，增长幅度最为明显。当凤尾七甲醇提取物浓度为1 mg/mL时，对羟基自由基的清除率为73.3%，当浓度为4 mg/mL时，清除率为90.7 %，图中从1 mg/mL至4 mg/mL所得曲线的斜率小，清除作用增长的较为缓慢。综上得出随着凤尾七乙醇提取物的浓度的增大，对羟基自由基的清除作用也在增大。

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图5 凤尾七乙醇提取物对于羟基自由基的抑制作用Fig 5 Inhibition of hydroxyl radicals by ethanol extract from Rhodiola dumulosa franch

由图5得当凤尾七乙醇提取物浓度为0.062 5 mg/mL时，清除率为36.6%,当浓度为0.25 mg/mL时，清除率为56.2%，图中从0.062 5 mg/mL至0.25 mg/mL所得曲线的斜率大，对羟基自由基的清除作用快速增强。当浓度为0.5 mg/mL时，清除率为67%，当浓度为2 mg/mL时，清除率为88.2%，这一段增长较为缓慢，当浓度为8 mg/mL时，清除率为115%，所以凤尾七乙醇提取物也是随着浓度增大，对羟基自由基的清除作用逐渐增强。

3 结 论

通过对凤尾七甲醇及乙醇提取物是否具有抗氧化能力展开研究，本实验中随着凤尾七甲醇提取物及乙醇提取物浓度的增大，还原力也在增大。从凤尾七甲醇及乙醇与羟自由基反应计算出的清除率中得出凤尾七提取物对羟自由基具有一定的清除作用且浓度越大清除作用越强。凤尾七提取物与超氧阴离子清除率线性关系良好，清除率一般在90%以下，因此本实验可以很好地反应凤尾七提取物的抗氧化活性，风尾七提取物有抗氧化作用浓度越大抗氧化作用越强。

参考文献

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