随着居民生活水平的日益提高，牛奶已经成为人们日常生活中的重要食品之一，牛奶质量安全也逐渐成为全社会普遍关注的焦点问题。菌落总数是牛奶质量安全的风险因子之一，在挤奶、储存、运输、生产、销售等各个环节中都有污染的风险，一旦污染可能导致食源性感染甚至中毒。

目前，生鲜乳中菌落总数检测方法主要包括国标法和测试片法。国标法具有良好的准确度和灵敏度，但操作繁琐；测试片法所需的器材体积小、重量轻，方便运输携带，且不需要灭菌，具有操作方便和快捷的特点。该研究旨在通过采用统计学方法比较Peelplate 3M测试片法和国标法对生鲜乳样品菌落总数测定结果的差异，探讨测试片法替代国标法的可行性；在该基础上，对Peelplate 3M测试片法中样本不同培养时间对检测结果的影响进行分析，以期为生产实践中科学选取生鲜乳菌落总数的测定方法提供科学依据。

以某大桥为例进行模板的选型。该桥位于某江下游末端，河床平坦、开阔、稳定，枯水期主河槽湾流偏南岸，出现在每年2～3月，枯水期约5个月。按设计要求墩身高49m，采用薄壁空心结构，双向控制墩身垂直度及各部位尺寸较为困难。

作者简介：叶秀华，女，汉族，福建漳浦人，福建省漳浦县深土小学，教师，二级教师，本科学历，研究方向：小学数学教育。

1 材料与方法

1.1 样品及来源

奶罐奶样品分别采集自内蒙古呼伦贝尔市（37 个批次）、通辽市（35 个批次）、呼和浩特市（30个批次），主要取自运输环节；乳头奶：45批次。

表1 呼伦贝尔市生鲜乳样品中菌落总数不同检测方法的测定结果分析 份，万个CFU/mL

注：P＞0.05表示差异不显著，P＜0.05表示差异显著。下表同。

P值检测方法国标法Peelplate 3M测试片法样本量37 37最小值0.08 0.03最大值26.5 16.0平均值4.51 2.670.1521

表2 通辽市生鲜乳样品中菌落总数不同检测方法的测定结果分析 份，万个CFU/mL

P值检测方法国标法Peelplate 3M测试片法样本量35 35最小值0.05 0.05最大值91.0 95.0平均值4.67 4.740.9745

1.2 仪器设备

激素在临床应用中往往需要长期使用才能达到效果，这样就容易给患者带来一些不良反应。如果把激素与维生素类药合理搭配使用，就会减轻和防止激素的副作用。

1.3 培养基

平板计数琼脂培养基、无菌生理盐水均购自北京陆桥技术股份有限公司，Peelplate 3M测试片由美国3M微生物公司提供。

1.4 采样方法

对于生鲜乳收购站的储奶罐，采样前先开动机械式搅拌器搅拌5 min；对于没有配备机械式搅拌设备的储奶罐，采样前先用人工搅拌器探入灌底，采取从下至上的方式搅拌30次以上。样品充分混匀后，用液态乳铲斗从表面、中部、底部3点采样，将采集到的样品混合至4 L塑料容器中，充分混匀后，用采样瓶分装，根据检测内容和指标要求，每份样品不少于100 mL。

1.5 生鲜乳中菌落总数检测方法

1.5.1 国标法：参照GB 4789.2—2016《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》［1］，具体步骤如下：在无菌操作下，对生鲜乳样品进行稀释：用10 mL灭菌吸管吸取样品25 mL，缓慢注入225 mL的生理盐水中，样品稀释液记为10-1液体。吸取10-1样品液1 mL，沿管壁缓慢注入9 mL稀释液中，依次制成3个稀释度的样品液。从制备最初的稀释液至倾倒培养时间不宜超过15 min。

从表1可以看出，国标法检测结果为0.08万个CFU/mL～26.5万个CFU/mL，平均值为4.51万个 CFU/mL；Peelplate 3M测试片法检测结果为0.03万个CFU/mL～16.0万个CFU/mL，平均值为2.67万个CFU/mL；方差分析结果表明，2种方法的检测结果差异不显著（P＞0.05）。

大数据所带来的便利令人惊异，但前提是提取大量个人信息，在某些情况下还需识别个人身份，并不可避免地共享信息，即一种以牺牲个人身份信息为代价的方式。由于大数据的技术力量来自于二次使用的数据集产生无限多样的对未来情势的预判和见解，因而随着越来越多的政府、企业或其他机构应用大数据技术，人们的身份将越来越受到各种预测和推断的影响。更令人担忧的是，这些预测和推断不一定都是正确的。

1.6 数据处理

试验数据利用Excel软件进行初步整理。应用SPSS软件中的方差分析法对Peelplate 3M测试片法和国标法的菌落总数测定结果进行比较，同时比较Peelplate 3M测试片法中样品培养24 h和48 h的菌落总数测定结果。

2 结果与分析

2.1 呼伦贝尔市生鲜乳样品中菌落总数不同检测方法的测定结果比较

分别取 10-3、10-4、10-5稀释度的样品液1 mL倾注接种。每个梯度每种培养基做2个平板，同时做空白对照。待琼脂凝固后倒置培养37℃，48 h后进行菌落计数。

2.2 通辽市生鲜乳样品中菌落总数不同检测方法的测定结果比较

从呼伦贝尔市、通辽市、呼和浩特市共102批次奶罐生鲜乳样品菌落总数检测结果来看：中东部地区生鲜乳的菌落总数平均值为0.78万个CFU/mL～4.74万个CFU/mL，小于美国和欧盟平均水平（10万个/mL），达到了我国优质乳菌落总数的标准（10 万个/mL）。 许振伟等［2］研究报道，上海地区生鲜乳菌落总数为0.011万个CFU/mL～110万个CFU/mL，而该研究中测定结果的最大平均值为4.74万个CFU/mL，低于上海地区；达列亚·阿合买提［3］研究报道，乌鲁木齐地区生鲜乳中菌落总数为0.1万个CFU/mL～160万个CFU/mL，最大值也高于该研究结果的最大平均值；比尔来西肯·赛都力等［4］的研究结果表明，伊宁地区生鲜乳中菌落总数为23万个CFU/mL～64万个CFU/mL，最大值也高于该研究结果；黑龙江省兽药饲料监察所2011年发布的检测报告表明，黑龙江地区运输车生鲜乳中菌落总数为0.36万个CFU/mL～460万个CFU/mL［5］，最大值也高于该研究结果。综上提示，内蒙古中东部地区生鲜乳卫生状况良好。

2.3 呼和浩特市生鲜乳样品中菌落总数不同检测方法的测定结果比较

表3 呼和浩特市生鲜乳样品中菌落总数不同检测方法的测定结果分析 份，万个CFU/mL

检测方法国标法Peelplate 3M测试片法P值样本量30 30最小值0.21 0.07最大值2.5 4.2平均值1.03 0.780.2539

表4 测试片法不同培养时间牛奶中菌落总数测定结果分析 份，万个CFU/mL

P值培养时间24 h 48 h样本量45 45最小值0.35 0.30最大值183.0 188.0平均值102.99 115.120.8161

从表3可以看出，国标法检测结果为0.21万个CFU/mL～2.5万个CFU/mL，平均值为1.03万个CFU/mL；Peelplate 3M测试片法检测结果为0.07万个CFU/mL～4.2万个CFU/mL，平均值为0.78万个CFU/mL；方差分析结果表明，2种方法的检测结果差异不显著（P＞0.05）。

2.4 Peelplate 3M测试片法不同培养时间牛奶中菌落总数测定结果比较

从表4可以看出，Peelplate 3M测试片法样品培养24 h时，菌落总数测定结果为0.35万个CFU/mL～183.0万个 CFU/mL，平均值为102.99万个CFU/mL；培养48 h时，菌落总数测定结果为0.30万个CFU/mL～188.0万个CFU/mL，平均值为115.12万个CFU/mL；方差分析结果表明，样品培养24 h和48 h测定结果差异不显著（P＞0.05）。

3 讨论

从表2可以看出，国标法检测结果为0.05万个CFU/mL～91.0万个CFU/mL，平均值为4.67万个 CFU/mL；Peelplate 3M测试片法检测结果为0.05万个CFU/mL～95.0万个CFU/mL，平均值为4.74万个CFU/mL；方差分析结果表明，2种方法的检测结果差异不显著（P＞0.05）。

［1］中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会，国家食品药品监督管理总局.食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定：GB 4789.2—2016［S］.北京：中国标准出版社，2016.

4 结论

内蒙古中东部地区生鲜乳中细菌污染风险小；国标法和Peelplate 3M测试片法测定生鲜乳中菌落总数结果没有显著性差异，建议实践生产中推广应用测试片法；应用Peelplate 3M测试片法测定生鲜乳中菌落总数时，样品培养24 h即可获得可靠的测定结果。

参考文献：

无菌均质器（SCIENI-11L）购自宁波新芝生物科技有限公司；调速振荡器（HY-8）购自常州国华电器有限公司；生化培养箱（SHP-150型）购自上海精密实验设备有限公司；超净工作台（YJ-875）购自苏州净化设备公司；高压灭菌锅（MY-54A）购自上海新诺仪器设备有限公司。

该研究结果表明，生鲜乳菌落总数检测国标法和Peelplate 3M测试片法的菌落总数测定结果差异不显著（P＞0.05）。国标法操作烦琐、费时，测试片法检出率高，操作简便，占用空间小，特别适用于实验空间较小的实验室及野外操作。以采集的45份乳头奶稀释液为样本，对培养24 h和48 h后的测定结果进行比较，方差分析结果表明，2个培养时间的测定结果差异不显著（P＞0.05），提示在使用Peelplate 3M测试片法时，培养24 h即可对样品进行菌落计数。

1.5.2 Peelplate 3M测试片法：采用无菌操作方法，按照国标法制备稀释梯度溶液。将测试片置于平坦表面处，揭开上层膜。使用吸管将1 mL梯度稀释溶液垂直滴加于测试片中央，用模板压下，切勿扭转压板。缓慢落下上层膜，静置至少1 min以使培养基凝固。底部向上36℃分别培养24 h和48 h，对不同培养时间下各平板的菌落进行计数。

［2］许振伟，韩奕奕，郑小平，等.生鲜乳中硫氰酸钠和菌落总数的风险评估研究［J］.中国畜牧兽医，2013，40（S1）：18-22.

［3］达列亚·阿合买提.新疆生鲜乳菌落总数和部分理化指标检测［J］.中国畜牧兽医文摘，2013，29（10）：52-53.

［4］比尔来西肯·赛都力，王一明，阿曼土尔，等.伊宁市区生鲜牛乳中微生物污染程度检测与分析［J］.黑龙江畜牧兽医，2014（13）：209-211.

宝宝咳嗽、喉中有痰和痰液黏稠不易咳出时，要适当交换体位，呼吸困难者采取半卧位，并经常更换体位，以减轻肺部淤血，有利于炎症消散吸收。

［5］黑龙江省兽药饲料监察所.2011年黑龙江省生鲜乳中菌落总数监测情况［J］.黑龙江畜牧兽医，2011（12）：53-54.

印尼桂是樟属另一种植物，与中国肉桂和越南肉桂较相似，但仍有一定区别。在香气成分组成上，印尼桂精油含有样本中最高的桂皮醛(67.862%)和较低的α-可巴烯(2.556%)，闻香可感知其强烈的辛辣气味。