海鲜菇(Hypsizygus marmoreus(Peck)H.E.Bigelow)又名斑玉蕈、真姬菇、蟹味菇等，隶属于担子菌门层菌纲伞菌目白蘑科玉蕈属[1～3]。作为一种营养丰富的真菌类食品，不仅富含蛋白质、氨基酸、维生素、酚类、多糖、微量元素如K、Mg、Na、P、Ca等，还具有清除自由基、抗预防动脉硬化、调节血糖、改善肠道循环等功效[4-8]。海鲜菇属于药食两用食品，深受中国、日本等亚洲国家消费者的欢迎。

试验设在青海省海南州共和县塘格木镇东格村，平均海拔3050m，高位水浇地，冬灌地。试验区属典型的高原大陆性气候，日照时间长，辐射强，昼夜温差大，降雨相对少而集中，气候干燥，大风日数多，该地区的年平均气温为2.3℃，全年极端最高气温32.1℃，极端最低气温-30℃;日平均≥0℃的天数为200d，积温1700-2100℃，日平均≥5℃的天数为150d，积温1600-2000℃;日平均≥10℃的日数为80d，积温900-600℃：平均降水量274.7mm，年平均日照时数为2670-3036h，年太阳辐射量632.3KJ/cm2[2]。

蔬菜中农药残留的检测方法主要有气相色谱法[9]，气相色谱质谱法[10]，气相色谱-串联质谱法[11]，液相色谱法[12]，液相色谱-串联质谱法[13]等。但是关于海鲜菇的农药残留的报道鲜见，本文以金华农产品企业生产的海鲜菇为研究对象，建立了气相色谱技术(GC)检测海鲜菇中有机磷农药和拟除虫菊酯农残残留的方法，该方法灵敏度较高，能满足农残限量要求的测定，且方法简便快速，适合金华蔬菜中农药残留的检测和确证分析，对推进蔬菜农残检测技术的提高，保障人们健康具有重要作用。

铱星系统可提供语音、数据和短消息业务。目前，铱星公司正在开发第2代“铱星”星座(Iridium-NEXT)，该项目已于2015年启动。新一代“铱星”包括66颗在轨卫星，6～9颗备份卫星，可提供L频段1.5 Mbit/s和Ka频段8 Mbit/s的高速服务。[20]铱星系统单星采用48个L频段相控阵阵列天线，覆盖地球表面直径达4 700 km。

1 实验部分

1.1 试剂与仪器 Agilent 7890B气相色谱仪(气相色谱-火焰光度(FPD)检测器和气相色谱电子捕获(ECD)检测器)(美国安捷伦(上海)科技公司)；N-EVAP氮吹仪(美国Organomation公司)；C18固相萃取管(Agilent)，滤膜(0.2μm 有机溶剂膜)。

阿拉善地区最常见的山羊体内外寄生虫有线虫、吸虫、体虱等。农牧民多年来连续使用一种驱虫药，形成耐药性，效果普遍不理想。阿左旗动物疫病预防控制中心与西北农林科技大学寄生虫专家合作，对阿左旗地区的寄生虫和驱虫药使用情况进行调查后，联合开展了新型驱虫药虫力黑威囊和地克珠利威囊的驱虫效果试验。

实验用海鲜菇来自金华地区蔬菜基地企业送检。

1.4 前处理

20种有机磷农药分为：

以“百分数”为例，教师要注重课堂教学联系日常生活，利用生活化中的“百分数”实例，设置生活化“百分数”问题，将“百分数”知识具体化。在讲解课题内容中，教师要联系学生数学水平以及熟悉的生活化元素，巧设基于“百分数”的生活化问题，比如，超市中一副乒乓球拍要50元，但小明只有35元，请问超市乒乓球拍打几折，小明才能获得喜欢的乒乓球拍，用“百分数”该如何表示？提出问题后，教师可以在引领学生自主思考的同时进行合作学习，在利用“百分数”知识中进行解答，在思考、探究过程中提升数学实际问题解决能力，达到融会贯通、学以致用的目的，在生活化数学教学中发展数学综合素质，实时上好小学数学课。

敌敌畏(6.65min)、乙酰甲胺磷(12.08min)、二嗪磷(14.33min)、久效磷(15.77min)甲基嘧啶磷(16.55min)、甲基对硫磷(17.06min)、马拉硫磷(17.517min)、甲基异柳磷(18.25min)、喹硫磷(18.49min)、丙溴磷(19.74min)。

B组：甲胺磷、甲拌磷、氧化乐果、毒死蜱、倍硫磷、杀螟硫磷、对硫磷、水胺硫磷、三唑磷等20种有机磷农药。

15种拟除虫菊酯：六六六、五氯硝基苯、百菌清、乙烯菌核利、三唑酮、腐霉利、三氯杀螨醇、异菌脲，联苯菊酯、甲氰菊酯、氯氟氰菊酯、氟氯氰菊酯，氰戊菊酯、溴氰菊酯。

乙腈、丙酮、无水硫酸镁、醋酸钠、(分析纯,国药集团)。农药标准品：敌敌畏、乙酰甲胺磷、二嗪磷、久效磷、甲基嘧啶磷、甲基对硫磷、马拉硫磷、甲基异硫磷、喹硫磷、丙溴磷；甲胺磷、甲拌磷、氧化乐果、毒死蜱、倍硫磷、杀螟硫磷、对硫磷、水胺硫磷、三唑磷等20种有机磷农药标准品；六六六、五氯硝基苯、百菌清、乙烯菌核利、三唑酮、腐霉利、三氯杀螨醇、异菌脲，联苯菊酯、甲氰菊酯、氯氟氰菊酯、氟氯氰菊酯，氰戊菊酯、溴氰菊酯等15种拟除虫菊酯农药标准品。农药标样购于天津思亿浩远科技有限公司，浓度均为100μg/kg。实验室用水为超纯水。

根据农药在检测器上的响应值，逐一准确吸取一定体积的同组别的单个农药标准储备液，分别注入10mL容量瓶中，用丙酮稀释，至刻度，配制成所需的混合农药标准储备液，使用时用丙酮稀释成所需质量浓度的标准工作液。

1.4.2 FPD检测器测定的样品 将待测液经氮吹至近干，用丙酮定容至5mL，漩涡混匀；静置10min，取上清液经0.2μm有机滤膜过滤后上机进样检测。

就民事诉讼法中的异议、复议程序而言，民事诉讼法并未规定审判机关处理当事人提出异议、申请复议的部门和人员，如若由作出原决定的部门、人员处理异议、复议事项，则有违回避原则也可能使异议、复议流于形式，不利于当事人利益的保护。如若由审判监督部门的审判监督人员处理异议、复议事项，似乎更符合回避要求。这种处理方式在当事人按照法律规定向人民法院提出异议、申请复议时并无问题。

测定拟除虫菊酯农药，检测器：ECD；色谱柱：DB-1色谱柱(30m×320μm，0.25μm)进样口温度：220℃；检测器温度：250℃；流量：2.8mL/min；分流进样：不分流；进样量：1.0μL。柱升温程序：初始温度100℃，保持2min，然后以6℃/min速率升至230℃，保持10min。

1.2 农药混合标准溶液 根据农药的性质、保留时间和分离度不同，对待测农药进行分组

1.4.1 提取 称取粉碎后的海鲜菇样品25g，用乙腈50mL匀浆提取2min，过滤，滤液中加入5～7g氯化钠的具塞量筒中，振荡后静置30min后分层，移取10mL上层液于10mL试管中。

1．需要在文中表达“作者简介”或“通讯作者简介”的，请提供作者的相关信息，一般格式为“姓名（出生年月-），性别，籍贯，最高学位，职称，研究方向或者工作方向等”；若在科研工作中取得了突出成绩，可适当详细介绍，一般不超过100字。对于缺乏实质内容介绍的，如仅表达了工作单位的，将不予在刊出时标明。

1.3 气相色谱条件 测定有机磷农药，检测器：FPD；色谱柱：DB-1701(30m×320μm，0.25μm)进样口温度：220℃；检测器温度：250℃；流量：2.8mL/min；分流进样：不分流；进样量：1.0μL。柱升温程序：初始温度100℃，保持2min，然后以6℃/min速率升至230℃，保持10min。

1.4.3 ECD检测器测定的样品 将待测液经氮吹全干，用正己烷定容到2mL，漩涡混匀；静置10min，经固相萃取柱净化，先用5mL正己烷：丙酮(9：1)活化，再用5mL正己烷平衡，活化液和平衡液弃去，样品经SPE小柱过滤(10mL的正己烷：丙酮(9：1)滤液)，用具塞量筒收集。再次氮吹至5mL以下，用正己烷定容至5mL，取上清液经0.2μm有机滤膜后上机进样检测。

2 结果与讨论

2.1 海鲜菇基质色谱图 按照1.3的色谱条件和1.4实验方法实验，有机磷农药A组标准溶液的色谱图(图1)；有机磷农药B组标准溶液的色谱图(图2)；除虫菊酯类农药标准溶液色谱图(图3)；GC-FPD检测器条件下海鲜菇色谱图(图4)；GC-ECD检测器条件下海鲜菇色谱图(图5)。由图可见，海鲜菇的化学成分对本方法的农药残留分析基本没有影响且农药标准溶液峰形较好，因此该实验条件可准确定性、定量。

  

图1 有机磷农药A组分标准溶液的色谱图

A组：敌敌畏、乙酰甲胺磷、二嗪磷、久效磷、甲基嘧啶磷、甲基对硫磷、马拉硫磷、甲基异硫磷、喹硫磷、丙溴磷。

  

图2.有机磷农药B组标准色谱图

甲胺磷(8.33min)、甲拌磷(13.14min)、氧乐果(14.21min)、乐果(15.91min)、毒死蜱(16.96min)、倍硫磷(17.41min)、杀螟硫磷(17.61min)、对硫磷(18.08min)、水胺硫磷(18.58min)、三唑磷(24.37min)。

在软件设计时采用C语言，需要一个高级语言开发平台，Atmel公司为开发使用AVR单片机提供了一套免费的集成开发平台AVR Studio，在本设计中主要利用HP info Tech的Codevision AVR编译器作为设计的开发软件。在温度控制算法中主要采用PID算法，将现场的各种扰动进行分析并补偿，达到温度控制的目的。

  

图3.除虫菊酯农药标准色谱图

六六六-1(6.03min)、六六六-2(6.62)、五氯硝基苯(6.87min)、百菌清(7.13min)、乙烯菌核利(8.63min)三唑酮(10.25min)腐霉利(11.52min)、三氯杀螨醇(12.99min)、异菌脲(16.52)、联苯菊酯、甲氰菊酯(17.29min)、三氟氯氰菊酯-1(18.54min)、三氟氯氰菊酯-2(18.86min)、氟氯氰菊酯(21.09min)、氯氰菊酯(21.63min)氰戊菊酯-1(22.91min)氰戊菊酯-2(23.32min)溴氰菊酯-1(23.94min)、溴氰菊酯-2(24.39min)。

  

图4.GC-FPD检测器条件下海鲜菇空白基质色谱图

  

图5.GC-ECD检测器条件下海鲜菇空白基质色谱图

2.2 标准曲线 有机磷检测：取农药混合标准溶液配成质量浓度为0.05、0.25、0.1、0.5、1.0mg/L的混合标准使用溶液。

王老师：当然也思考，但我不会把这种思考叫作“经验研究”“行动研究”。经验是有，但背后缺乏真正的研究；行动也有，但背后也只有总结。什么都叫研究的话，反而拉低了研究的层次。如果教师上完一堂课之后反思一下教学就叫研究，班会课后写一份总结报告也能变成论文，那就失去研究的意义了。我并不反对思考、总结，但我反对把教师的思考和总结包装成“学术论文”，甚至以指标的形式强迫教师发表。

菊酯检测：取农药混合标准溶液配成质量浓度为0.005、0.01、0.1、1.0、2.0mg/L的混合标准使用溶液。

按色谱条件对混合标准使用溶液系列进行测定，以各农药的质量浓度与相应的峰面积绘制标准曲线，其线性范围均为0.01～5.0mg/L，线性回归方程、相关系数(表1)。

从表1可以得出有机磷农药和菊酯类农药线性较好，相关系数R2处于0.990～0.999之间，方法检出限较低，符合国家的蔬菜农残检测的标准。

 

表1 有机磷农药和菊酯类农药线性方程，相关系数R2

  

农药回归方程相关系数R2敌敌畏y=6 376.738 67x-0.000 981 8430.994 32乙酰甲胺磷y=4 887.524 433x+0.001 471 3150.997 23二嗪磷y=4 981.349 727x-0.003 177 5830.997 42久效磷y=4 671.404 279x-0.003 104 0810.993 49甲基嘧啶磷y=5 081.459 382x+0.001 717 0240.996 70甲基对硫磷y=5 027.941 064x+0.002 418 1730.997 90马拉硫磷y=3 818.012 409x-0.000 216 1990.994 86甲基异柳磷y=4 399.213 232x+0.000 874 6010.998 39

 

续表

  

农药回归方程相关系数R2喹硫磷y=5 215.374 29x-0.001 698 3440.996 63丙溴磷y=2 704.775 392x+0.001 196 5330.994 33甲胺磷y=7 554.561 657x-0.003 675 070.991 24甲拌磷y=5 465.981 519x+0.003 551 8090.996 59氧乐果y=3 373.277 435x+0.000 641 2380.992 30乐果y=5 364.536 969x-0.000 864 7020.994 32毒死蜱y=4 351.806 908x-0.002 124 250.991 23倍硫磷y=5 030.381 15x+0.001 049 3330.998 76杀螟硫磷y=4 863.407 068x-0.003 074 9220.999 23对硫磷y=5 182.127 182x+0.001 193 1260.999 33水胺硫磷y=4 535.370 252x+0.000 466 0210.992 32三唑磷y=5 199.024 667x-0.000 875 1260.992 19六六六y=1 740 251.97x-4 129.867 5820.999 73五氯硝基苯y=664 009.540 5x-4 913.688 3380.994 51百菌清y=702 302.206 8x-1 404.065 0780.998 42乙烯菌核利y=287 450.435x-2 878.298 6530.999 63三唑酮y=270 121.021 4x-3 278.583 3610.991 23腐霉利y=134 803.861 4x-1 272.1442 330.992 42三氯杀螨醇y=24 548.663 97x-83.583 658 90.997 19异菌脲y=166 484.638x-4 242.566 8480.993 90联苯菊酯y=347 082.273 8x-6 540.546 2010.992 90三氟氯氰菊酯y=388 685.013 9x-4 583.317 4060.994 86氟氯氰菊酯y=325 454.215 6x-6 813.316 8030.995 39氯氰菊酯y=263 258.659 2x-4 048.940 5990.990 16氰戊菊酯y=208 011.451x-3 517.843 3230.995 30溴氰菊酯y=218 489.064 7x-3 750.628 1650.998 02

2.3 精密度和回收试验 称取经粉碎均匀后的海鲜菇25.00g，分别添加0.08、0.12、0.16mg/kg 3个浓度水平的混合标准溶液，静置30min，按试验方法提取后进行回收试验，平行测定9次，结果(表2)。

 

表2 海鲜菇中35种农药的3个浓度水平标准测定回收率(ARR)和相对标准偏差(RSD)

  

农药添加浓度(mg/kg)0.080.120.16ARR(%)RSD(%)ARR(%)RSD(%)ARR(%)RSD(%)次数敌敌畏948.169214.8910617.059乙酰甲胺磷10816.921129.899918.009二嗪磷10310.979115.119816.959

 

续表

  

农药添加浓度(mg/kg)0.080.120.16ARR(%)RSD(%)ARR(%)RSD(%)ARR(%)RSD(%)次数久效磷10011.0311314.12948.939甲基嘧啶磷10018.129111.9711513.999甲基对硫磷937.0611213.9910713.159马拉硫磷10617.909020.91897.049甲基异柳磷1099.089110.0811019.999喹硫磷11216.0610521.0110010.969丙溴磷11013.0810316.0010410.069甲胺磷10716.069612.9511410.009甲拌磷11317.9711620.08907.039氧乐果9316.909120.149910.119乐果9713.9010317.8910017.989毒死蜱8919.0711317.939716.169倍硫磷956.9210915.018913.919杀螟硫磷10913.9910714.099019.919对硫磷9914.931067.0311619.939水胺硫磷9816.169311.9210412.929三唑磷10415.071088.989819.129六六六9013.0110720.0910314.159五氯硝基苯10815.9310815.1411315.099百菌清9010.1410910.039817.069乙烯菌核利9819.14948.029421.139三唑酮9913.129712.0710012.099腐霉利11317.039918.039020.119三氯杀螨醇9320.1411510.1411614.099异菌脲9611.0810217.951006.939联苯菊酯10015.958919.041069.909三氟氯氰菊酯9114.0011216.031168.029氟氯氰菊酯9919.06948.159310.159氯氰菊酯9320.898917.0910719.909氰戊菊酯9112.0610014.9010117.969溴氰菊酯11516.0010016.1510210.019

海鲜菇中农药的测定回收率在89%～116%之间，RSD在5.61%～20.91%之间。

2.4 样品检测 基于本研究建立的检测方法，对金华地区蔬菜基地企业送检的24份海鲜菇样品进行了上述35种农药残留的检测，检测结果显示未检出上述农药残留。

3 结论

本实验基于气相色谱技术，利用火焰光度(FPD)检测器和电子捕获(ECD)检测器建立了金华蔬菜基地海鲜菇中35种农药残留同时检测的方法。结果显示35种农药在海鲜菇中添加回收率为89%～116%，相对标准偏差在5.61%～20.91%之间；蔬菜自身差异对检测结果并没有明显差异。该方法与以往文献报道的方法比具有较高选择性、灵敏度和较宽的线性范围的特点，在25min内将被测成分达到完全分离，操作简单、快速，可用于金华蔬菜基地生产的海鲜菇的质量评价。

参考文献

[1][1]Ainsworth，G. C. Ainsworth & Bisby'sdictionary of the fungi.[M]. 10 th Ed. Wallingford：CAB International，2008：254-257

[2]Zanabaatar P C U D. Analysis of Nutritional Characteristics and Physiological Functionality of Hypsizygus marmoreus (Brown cultivar)[J]. Korean Journal of Mycology，2012，40(2)：104-108

[3]Kaneko T，Chihara T，Shimpo K，et al. Inhibition of Azoxymethane-induced Colorectal Aberrant Crypt Foci in Mice Fed a High-fat Diet by Pleurotus eryngii (Eringi) and Hypsizygus marmoreus (Bunashimeji)[J]. Asian Pacific Journal of Cancer Prevention Apjcp，2015，16(9)：3881-5.

[4]Tsai P F，Ma C Y，Wu J S. A novel glycoprotein from mushroom Hypsizygus marmoreus (Peck) Bigelow with growth inhibitory effect against human leukemic U937 cells.[J]. Food Chemistry，2013，141(2)：1252.

[5]Zanabaatar P C U D. Analysis of Nutritional Characteristics and Physiological Functionality of Hypsizygus marmoreus (Brown cultivar)[J]. Korean Journal of Mycology，2012，40(2).

[6]Mori K，Kobayashi C，Tomita T，et al. Antiatherosclerotic effect of the edible mushrooms Pleurotus eryngii (Eringi)，Grifola frondosa (Maitake)，and Hypsizygus marmoreus (Bunashimeji) in apolipoprotein E-deficient mice[J]. Nutrition Research，2008，28(5)：335-342.

[7]李淑荣，王丽，倪淑君,等. 海鲜菇营养成分分析[J]. 食品工业，2018(2).

[8]王丽，罗红霞，李淑荣,等. 海鲜菇氨基酸组成分析及营养评价[J]. 食品工业科技，2016，37(21)：338-341.

[9]徐国锋，聂继云，李海飞,等. QuEChERS/气相色谱法测定水果中31种有机磷农药残留[J]. 分析测试学报，2016，35(8)：1021-1025.

[10]韩梅，侯雪，郭灵安. 气相色谱-串联质谱法测定葵花籽中28种农药残留[J]. 农药学学报，2016，18(1)：93-100.

[11]王峰恩，邓立刚，李霞,等. QuEChERS-气相色谱-串联质谱法同时测定饲草中10种农药残留[J]. 农药学学报，2017，19(1)：68-75.

[12]王建芳，李斌，赵彤,等. QuEChERS-高效液相色谱法同时检测茶鲜叶和乌龙茶中4种农药残留[J]. 食品科技，2017(8)：306-313.

[13]张爱芝，王全林，曹丽丽,等. QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法测定蔬菜中250种农药残留[J]. 色谱，2016，34(2)：158-164.