β-激动剂类药物，又名β-兴奋剂类药物，俗称瘦肉精，因具有吸收快的特性，可提高胴体瘦肉率，被广泛用于饲料中。人食用含有“瘦肉精”的肉或内脏，15～20min起作用且维持时间持久，会造成群体性的恶性食物中毒，严重的可致人死亡。因此，国家规定通过酶联免疫法检测猪肉中β-激动剂类药物为不得检出。

4.统计结果的解释和表达：当P<0.05(或P<0.01)时，应说明对比组之间的差异有统计学意义，而不应说对比组之间具有显著性(或非常显著性)的差别；应写明所用统计分析方法的具体名称(如：成组设计资料的t检验、两因素析因设计资料的方差分析、多个均数之间两两比较的q检验等)，统计量的具体值(如t=3.45,χ2=4.68,F=6.79等)，应尽可能给出具体P值(如P=0.0238)；当涉及到总体参数(如总体均数、总体率等)时，在给出显著性检验结果的同时，再给出95%可信区间。

本文用酶联免疫试剂盒检测猪肉中β-激动剂类药物的含量，其原理是待测样品中的β-激动剂类药物残留与微孔包被的抗原共同竞争特异性抗体，当样品中β-激动剂类药物含量少时，更多的抗体就会与酶标板微孔上的抗原结合而被固定在酶标板上，通过酶催化底物显色反应，颜色为深蓝色；样品中β-激动剂类药物含量多时，颜色为浅蓝色。

1 实验材料

1.1 样品前处理 在我县辖区内屠宰厂随机抽取代表性样品（猪肉）40批次，每个样品抽取猪肉200g，精确秤取1±0.01g均质后的样品于50mL离心管中；加入3mL 0.5%三氯乙酸高速涡动1min，4000g以上离心5min；取1mL中间层清液于新的离心管中；加40μL 0.5M 氢氧化钠溶液，涡动10s混匀，4000g以上离心5min；立即取40μL检测。

系统由控制中心AT89S52单片机元件模块,GSM移动通信模块,传感器模块(此处包括红外传感器和烟雾传感器模块)，报警模块,按键输入模块,数码管显示模块以及遥控撤防模块等六部分模块组成。系统组成如图2所示。

洋桔梗适合肥沃、疏松且排水性良好的土壤，pH值6.0～7.5为宜，最佳为6.5～7.0[2]。土壤pH过低会导致叶片枯焦，生长不良，甚至不长花蕾，可通过生石灰调整。不宜连作。

1.2 试剂盒 β-激动剂类酶联免疫试剂盒（96孔）。购自北京维德维康生物技术有限公司。

揭开盖板膜，倒掉孔中液体，每个酶标板微孔中加入260μL洗涤工作液，充分洗涤4次，每次浸泡15min立即加入底物AB混合液100μL（等比例充分混合，5min内使用，液体盛装、搅拌不能使用金属物质）。

1.4 添加阳性对照 根据标准曲线确定阳性对照浓度为2ppb，取浓度8.1ppb标准品247.0μL添加到1g空白样品中，成为浓度2ppb阳性对照品，计算阳性对照回收率。处理同前。

2 检测步骤

盖好盖板膜，轻轻振荡10s，充分混匀，室温（23～27℃）下避光反应15～20min。

二是鼓励金融创新，充分发挥金融市场风险管理的优势，提高金融对技术进步的支持。鼓励期货、互换、期权等多样化风险管理工具的稳健发展，健全定价机制，既有利于企业的风险管理和市场系统性风险分散，也有利于帮助高风险创新项目的研发和产业化。

盖好盖板膜，轻轻振荡10s使之充分混匀，室温（23～27℃）避光反应30min。

按照烟厂测量要求，每次取样30支烟进行测量，测出30支烟的平均重量、标准差以及变异系数。共测量10组数据，测量仪器为北京欧美利华科技有限公司的OM-VL型综合测试台。设定重量为550mg，平均重量允许范围是550mg±0.075mg，具体数据如下表所示：

终止后5min内用酶标仪在双波长450nm、630nm下读取酶标板吸光度值，并将数值打印出来。

在96孔酶标板微孔中依次加入标准品工作液、阳性对照品、阴性对照品和其它待测样品均为40μL。添加不同样品时更换枪头，防止交叉污染。

1.3 试剂盒回温 将试剂盒内各组份取出置于23～27℃室温下30min。

取出酶标板，每个样品都做双孔平行，记录标准品、阳性对照品和样品位置。

揭开盖板膜，每孔中加入终止液50μL，轻轻振荡酶标板10s，充分混匀。

再每孔分别加入酶标记物工作液60μL。酶标记物工作液应轻柔混匀后立即用，不能存放。

对于进入灌浆期的作物而言，其存在较大可能将会感染青枯病。农作物一旦感染青枯病会呈现灰绿色的叶片，以至于突然枯萎甚至死亡，原因是镰刀菌或者腐霉菌侵入了整个植株。与此同时，青枯病还有传染性，因而会迅速波及特定区域内的成片田间作物，作物很可能迅速呈现减产与萎蔫的趋势。

3 计算阳性对照回收率

利用电脑数据分析软件r-biopharm，手动录入测得的数值，软件自动对检测结果进行分析，同时绘制标准曲线并得出所有检测样品中β-激动剂类药物的含量。回收率（%）=（实测阳性对照浓度—实测阴性对照浓度）÷添加浓度（2ppb）×100%，本次检测回收率为95%，在75%～105%，说明此次检测和结果准确性高。

4 讨论

试剂盒贮存温度为2～8℃，酶标记物常温下易变性。待测样品原则上必须马上检测，如不能及时检测，要将样品冷冻保存。

加样时移液枪应垂直于板孔，防止将液体加在孔壁上部；加同种等量液体时应选用多道移液枪，可提高速度，节省实验操作时间，确保检测结果的准确度。

实验中应严格按照避光反应温度和时间，因为抗原与抗体结合的机会不均等，需要一定的时间和温度。优先与贴近孔壁的一层溶液中的抗原反应，是逐步平衡的过程。

洗板主要靠洗涤使游离的与结合的酶标记物的达到分离目的。如果洗涤次数不够、注入的洗涤液量不足或洗板间隔太久会直接影响检测的结果，甚至使实验失败。另外，洗板后要在亮光处观察微孔底部是否有气泡，气泡可用干净的枪头戳破，戳不同孔底的气泡应更换枪头。

酶联免疫法具有快速、灵敏、方便等特点，适用于大批量样品筛查。而其他检测药物残留的方法也在逐步完善并应用于县区检测中。