牛结核病是一种人畜共患传染病，被我国列为二类动物疫病，给牛业生产特别是奶牛养殖业造成巨大危害，并对人类的健康也造成了严重的威胁。为加强奶牛养殖场结核病的高效监测，我实验室人员严格按照农业部发布的动物疫病监测计划，每年定期对辖区内的奶牛进行结核病检疫监控。近年来，随着全球科技的高速发展，牛结核病的检测方法也逐步完善，现行的检测方法包括结核分枝杆菌PPD皮内变态反应试验和γ-干扰素检测试验。其中皮内变态反应是我国标准（GB/T 18645-2002）规定的牛结核病检测方法，而γ-干扰素检测试验是OIE规定的国际贸易指定使用的检测方法，为了验证此两种方法在实际工作中的检测效果，我实验室运用两种检测方法对辖区内A,B奶牛养殖场的12月龄以上奶牛进行了检测比对试验。

1 牛型结核分枝杆菌PPD皮内变态反应试验

1.1 试验材料

（1）试验对象：来自A养殖场的131头奶牛，B养殖场的1505头奶牛。

计量模型中每个主要解释变量间有可能隐含多重共线性问题，本文采用Pearson方法逐次计算了每个主要解释变量的相关系数，所有主要解释变量的相关系数均小于0.4，可知每个主要解释变量间不具有严重的多重共线性问题。

（2）试验试剂：提纯牛型结核菌素，购于哈药集团生物疫苗有限公司；75%酒精。

（3）试验器材：一次性5mL的注射器，卡尺，酒精棉。

经营进度指标与经营进度奖励共同构成了ERP沙盘模拟的时间控制器。通过每个经营年度对该指标的考核，一方面激励学生快速完成决策，避免在决策过程中过度博弈，另一方面为学生模拟了一个高压环境，进一步还原市场竞争中分秒必争的竞争环境，培养学生在众多选择中快速找到最优策略的能力。

1.2 试验过程

（4）血浆样品的收获。每孔吸取400μL上层血浆转移至1.5mL离心管中。

用卡尺测量中央皮皱厚度，作好记录。

黑水虻幼虫在水产饲料方面也有较多的应用研究。胡俊茹等采用等氮等脂方法，将黑水虻幼虫粉按照不同的比例替代黄颡鱼幼鱼日粮中的鱼粉，结果发现：当替代量小于30%时，黄颡鱼幼鱼增重量与对照组无显著差异，而且血清中谷丙转氨酶、谷草转氨酶、尿素和三酰甘油的含量均得到一定程度的降低。林启训等为了代替鱼粉，将黑水虻幼虫粉用于泥鳅饲料中，研究发现，当添加9%～11%的黑水虻幼虫粉，泥鳅的摄食状态和成活率与对照组相近[17]。

（2）注射剂量：用生理盐水将提纯牛型结核菌素冻干粉稀释成0.1mL/头（含20000IU）使用，一律皮内注射。

阳性=牛PPD的OD值-PBS的OD值≥0.1且牛PPD的OD值-禽PPD的OD值≥0.1

（4）试验结果的观察：皮内注射后经72h判定，观察局部有无热痛、肿胀等炎性反应，后用卡尺测量每头牛皮皱厚度，做好记录。

1.3 结果判定

（2）牛结核γ-干扰素检测试验结果。

2 牛结核γ-干扰素检测试验

2.1 试验材料

（1）血液分装。将采集的抗凝血加入24孔组织培养液，每头动物加三孔，每孔1.5mL。

试剂盒。牛结核γ-干扰素ELISA检测试剂盒，购于青岛瑞尔生物技术有限公司。

试验耗材及主要设备。微量移液枪、无菌24孔组织培养板、酶标仪、37℃培养箱试验过程。

要想有效地解决法庭口译中由于文化差异导致的交流障碍而又能最大限度地保证准确性和中立性，法庭口译员在进行文化调解时至少要知道什么样的调解策略是在其职责范围之内的。笔者认为，口译员要遵守以下几个原则：在必要时添加信息；促进双方直接交流；澄清之前先获得法庭许可；不作随意改述；不向任何一方提供建议。

【症状】该病在鱼类种苗生产阶段多发。被寄生的种苗食欲显著下降。寄生刺激引起黏液分泌导致鱼体体表白浊，鳍条基部可见出血。也曾发生过大量寄生这种寄生虫导致牙鲆种苗约40%的死亡病例。这种寄生虫也寄生在采卵用成鱼和未成年鱼，随着病程的进展鱼体体色变黑，体表的一部分发生溃疡伴随出血。鳃被虫体寄生后，出现上皮细胞增生，鳃小片相互粘连的病症。

牛全血。用一次性肝锂素真空管收集牛血，每管至少5mL，轻轻颠倒几次混合全血，使肝素溶解。

（2）加入刺刺激抗原。无菌加入100μL牛PPD、禽PPD、PBS液至相应的孔。

（3）孵育。将组织培养板放置37℃湿温培养箱中孵育16～24h。

（1）注射部位及术前处理：在牛只编号后在颈侧中部上1/3处剪毛，直径约为10cm。

2.2 牛γ-干扰素免疫试验

试验前将所有试剂恢复至室温，用0.5mL去离子水溶解阴阳性冻干粉，并平衡15min。加入样品：加入100μL待测样品及对照品至相应孔中。封板：室温孵育1h。洗涤4次。加入酶标结合物：每孔加入50倍浓缩酶标结合物。再次封板：室温孵育1h。洗涤4次。加入底物：每孔加入100mL底物液充分混匀。封板：室温避光孵育15min。加入终止液：每孔加入50μL终止液。终止后5min内读出OD450nm的值。

3 结果判定

（1）结果的读取及判定标准。读取每孔的OD值（注意：当进行重复孔时，OD值的计算需取平均值）

（3）注射方法：以75%酒精消毒术部，后皮内注射定量的牛型结核分枝杆菌PPD，注射后局部应出现小疱

GF Machining Solutions（又名“GF加工方案”）是一家为工模具和精密零件加工行业提供机床和自动化解决方案的世界领先的系统供应商。其产品范围从放电加工机床、高速铣床和高性能铣床、夹具和托盘系统、三维激光纹理机，到提供客户服务、备品备件、易损件、耗品以及自动化的解决方案。作为一个全球化的集团，GF Machining Solutions隶属于Georg Fischer集团（瑞士），管理着全球范围内50个自己的组织架构。

阴性=牛PPD的OD值-PBS的OD值＜0.1或牛PPD的OD值-禽PPD的OD值＜0.1

（2）结果的有效性。只有当阳性对照OD值大于0.700，阴性对照OD值小于0.150时该试验才有效。

由表2可知，40种食用菌料酒的整体感官水平较好。由于0.5%的添加量过少，使料酒色泽呈淡黄色、口感淡薄；10%的添加量虽然营养成分含量较高，但是由于添加量过多，食用菌的菌香味浓厚，掩盖了料酒本身的醇香味；整体来说，添加量为2.5%、5%和7.5%的料酒其色泽纯正、酒体澄清、口感醇厚，酒香和食用菌香气融为一体。其中，猴头菇料酒的感官评价得分均较高，可能是猴头菇中的有效成分更容易溶于酒体，灰树花料酒的感官得分较低。

4 试验结果

（1）牛型结核分枝杆菌PPD皮内变态反应试验结果

A养殖场的2头奶牛呈阳性，其余均为阴性；B养殖场的8头奶牛呈阳性，其余均呈阴性。

计算出每头奶牛的皮厚差（皮厚差=反应后皮厚-原皮厚度）。阳性：局部有明显的炎性反应，皮厚差大于或等于4.0mm；疑似：局部炎性反应不不明显，皮厚差大于或等于2.0mm，小于4.0mm；阴性：无炎性反应，皮厚差在2.0mm以下。

针对A,B场牛型结核分枝杆菌PPD皮内变态反应呈阳性的10头奶牛进行该实验。A养殖场的1头奶牛呈阳性，其余均为阴性；B养殖场的5头奶牛呈阳性，其余均呈阴性。

试验结果比对，见表1。

表1 试验结果比对

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5 结果分析

从表1中可知，对经初检皮内变态反应的试验筛选出的阳性牛进行牛结核γ-干扰素检测试验和皮内变态反应复检试验，两试验检测符合率较低。

（1）牛型结核分枝杆菌PPD皮内变态反应试验

初检有2头结果呈现阳性的牛，不排除受禽型结核分枝杆菌等引起非特异性假阳性的影响；复检结果呈现0头阳性牛的情况，不排除主观肉眼观察皮皱差出现误差的影响。

综上所述：只靠皮内变态反应实验就确诊牛结核病是不科学合理理的。

引入政府购买第三方参与船舶垃圾、油污水治理服务是杭州首创的模式。在杭州的通航水域内（除千岛湖），鸦雀漾水上服务公司负责回收船舶含油污水和生活垃圾。2017年鸦雀漾水上服务公司共回收油污水1700余吨，接收生活垃圾100余吨。

（2）牛结核γ-干扰素检测试验

牛结核γ-干扰素检测试验通过用牛PPD和禽PPD分别刺刺激全血，检测各全血样品中释放的γ-干扰素的差异来判断牛结核病的阴阳性，排除了禽型结核杆菌引起的非特异性反应的情况。试验结果表明：γ-干扰素检测试验的阳性率比皮内变态反应的阳性率高，可能与皮内变态反应存在假阳性情况有关。

随着机械钟表市场的复苏，两大防震器公司的生产量逐渐恢复。随后在90年代，Incabloc SA公司为著名机心供应商ETA公司开始提供更为廉价的防震器：Etashoc防震器，又称三角防震器（见图5）。该防震器因为外形貌似梅花，又被称为梅花形防震器或者三叶防震器。这是依照Novodiac防震器所重新改良的设计，同样是具有三支点的弹簧片，不过簧片的弯曲程度与细致明显与Novodiac防震器不同。由于价格较低廉，被广泛用于ETA公司的各种机心上。

6 讨论

现行国家标准有关牛结核病检测方法只有结核分枝杆菌PPD皮内变态反应，但此法需肉眼观察皮皱差，主观性太强，而且受其他型结核杆菌的干扰极大，假阳性率较高。若实际检疫工作中用此法判定牛结核病，可能会有误判，会直接导致养殖场的经济利益受损。γ-干扰素检测试验，匹配相应试剂盒标准说明，当前实验室检测牛结核工作大多使用国外成熟产品，且该产品灵敏度高，具有较高的特异性，在现实操作中更简便，结果判定更直接。鉴于以上优点，γ-干扰素检测试验用于检测牛结核病较现行国标方法具有更为广阔的应用前景。