猪血豆腐是一种营养价值很高的血液凝胶食品，富含多种维生素、氨基酸以及钴、锰、铬等微量元素，具有防癌抗癌、消除尘毒等功效;且猪血资源丰富，具有广阔的市场前景[1-3]。在血豆腐制品中，人们偏好鸭血而非猪血，主要原因是鸭血豆腐口感细腻，而猪血豆腐的口感则较为粗糙，咀嚼时有不舒服的黏滞感。近年来媒体多次报道不少不法商贩利用化工原料甲醛处理猪血后冒充鸭血，对社会造成了很坏的影响[4-6]。目前国内有不少改善猪血豆腐质构品质的研究，常见的技术措施包括控制血液加水量、添加盐量、加热温度、加热时间、添加保水剂等外源性控制方法[7-9]。有些研究通过添加外源性食用胶来改变猪血豆腐的质构品质。食用胶具有凝胶保水、增强分散体系的稳定性以及防止蛋白质在高温条件下过分变性的作用，但这种产品往往过多表现出胶体自身的质构特点，失去了猪血豆腐的天然口感[10-11]。动物血液主要由血浆和血细胞组成，通常起到主要凝胶作用的是血浆中的蛋白质，血细胞中的主要成分血红蛋白由于未进入血浆而起不到凝胶作用。陈菲等[12]考察了超声波破壁处理使鸭血红蛋白进入血浆对鸭血凝胶特性的影响，经破壁处理后，鸭血豆腐的保水性、可移动水的比例、凝胶速率和凝胶强度都增加，且鸭血蛋白更易变性。本研究采用溶胀法对细胞破壁，并以质构仪分析结合感官评定的方法，探讨细胞破壁对猪血豆腐质构品质的影响。

1 材料与方法

1.1 材料与设备

1.1.1 材料与试剂 新鲜猪血采自万州区屠宰场。柠檬酸钠、氯化钠、氯化钙，均购自重庆市万州区，分析纯。

1.1.2 主要的仪器设备 KW-1000DC数显恒温水浴锅(上海江星仪器有限公司)；TG16-WS离心机(上海沪奥明科学仪器有限公司)；B-150 OPTIKA生物光学显微镜(上海仪蒙公司)；XB-K-25血球计数板(上海仪蒙公司)；TA3质构仪(CT3 25K，广州和竺生物科技有限公司)；XMTD-231恒温磁力搅拌器(金坛市科析仪器有限公司)；DZF-6020真空干燥箱(上海齐欣科学仪器有限公司)；CP 214分析天平(奥豪斯仪器上海有限公司)。

1.2 试验方法

1.2.1 样品制备

1.2.1.1 抗凝血制备 用塑料桶接鲜猪血，以30目不锈钢滤网过滤，精确量取猪血，以V(猪血)∶ m(柠檬酸钠)=100∶ 0.5添加柠檬酸钠，充分混合后制成抗凝血于4 ℃保藏备用。

1.2.1.2 猪血豆腐制作流程 抗凝血→血细胞浓度调整处理→倒入装有氯化钠溶液的塑料方盒中→加入氯化钙溶液→凝血→蒸煮→冷却→切分→检测。

[6] 彭升友，邬一鸣，刘颖. 宁波市流通、消费领域“血豆腐”监测结果分析[J].中国农村卫生事业管理，2011，31(5)：519.

称取氯化钠24 g，以适量的水完全溶解后，置于塑料方盒容器中，将上述制备的血液样品加入塑料方盒中的氯化钠溶液中，搅拌均匀后加水至样品总体积为2 000 mL，开盖置于真空干燥箱抽真空(真空度0.09 MPa，时间20 min)。然后按V(血样)∶ V(氯化钙溶液)=15∶ 1的比例加入1%的氯化钙溶液激活凝血酶使样品生成生血凝胶，置入60 ℃水浴锅中，以每min升温2 ℃升温至85 ℃，保温55 min后形成热凝胶。冷却至室温，切分待测。

1.2.1.4 破壁率的计算 采用血球计数法测定破壁前后样品中的细胞个数。

破壁率

(1)

1.2.2 机械检验方法 将猪血豆腐样品切成20 mm×20 mm×20 mm的方块，室温(25 ℃)下用TA3质构仪对样品进行测定，采用美国Brookfiled公司质构仪分析，样本数n=7，分为TPA模式、穿刺模式和剪切模式，具体参数如表1所示。TPA模式的测试类型为TPA质构分析，测定指标为硬度(Hardness，H)、弹性(Springiness，S)、内聚性(Cohesiveness，C)、胶着性(Gumminess，G)、咀嚼性(Chewiness，CH)、可恢复功(Recoverable Work Done，R)；穿刺模式和剪切模式的测试类型为压缩，2种模式的硬度值分别定义为破裂力(Breaking force，B)和剪切力(Shearing force，SF)；发生断裂性时样品发生第一断裂时的力值，分别记为破裂断裂性(1st Fracture for breaking force，1st FB)和剪切断裂性(1st Fracture for shearing force，1st FS)；断裂形变是发生第一断裂时探头从样品表面下行的距离, 分别记为破裂断裂形变(1st Fracture distance for breaking force，1st FDB)和剪切断裂形变(1st Fracture distance for shearing force，1st FDS)。其中，断裂性和断裂形变为CT3 Brookfiled质构仪专用测试软件中固有可供选择的检测结果中的参数。

1.2.3 感官评定方法 采用王鹏[11]的方法并加以改进。邀请10位师生组成评定小组，先明确本试验的目的和意义以及感官评定的指标和注意事项。为了减少从测定到形成概念之间的许多因素如嗜好与偏爱、经验、广告、价格等对检验结果的影响，采用双盲法进行检验，对样品进行密码编号，检验样品也随机化。评定分数采用 1～5 分制，每次评定由每个评定成员单独进行，相互不接触交流，样品评定之间用清水漱口。感官评定指标的定义：

 

表1 血豆腐机械测定的参数Table 1 Parameter of mechanical test of blood tofu

  

模式参数ModeparameterTPATPA穿刺Puncture剪切Shear测前速度/(mm·s-1)Speedbeforetest222测试速度/(mm·s-1)Speedintest221测后速度/(mm·s-1)Speedaftertest224．5下压距离/mmDownpressuredistance88252次下压间隔时间/sTimebetweentwocompressions0--探头类型ProbetypeTA25/1000TA39TA7数据收集率/(点·s-1)Datacollectionrate505050样品规格/(长mm×宽mm×高mm)Samplesize/(length×width×height)20×20×2020×20×2020×20×20

嫩度(Tenderness，T)：臼齿第一口咬开样品所施加的力(5=嫩度适中，1=过软/过硬);

多汁性(Juiciness，J)：样品被咀嚼时在口腔中产生的汁液数量的多少(5=汁液丰富，1=干涩);

参考文献：

细腻度(Exquisiteness，E)：对样品进行观察以及在口中或下咽时感受到的细腻程度(5=细腻，无颗粒感纤维感；1=粗糙，颗粒感、纤维感明显);

总体接受性(Overall Acceptability，O)：对样品质构性质的总体接受程度(5=非常乐于接受，1=不能接受)。

1.2.4 感官得分的回归拟合方程计算 对机械指标与感官指标进行相关性分析，以及逐步回归法分析，得到以机械指标拟合感官指标的方程如下[15]：

T=5.266-0.026B

(2)

J=12.5-0.348R-6.822C+0.055CH

(3)

lnE=4.572-0.529×lnSF+0.118×ln1st FDS

(4)

lnO=4.279-0.752×lnSF+0.12× ln1st FDS+0.473×lnB

(5)

在进行感官评定后，采用本方法对各项感官指标得分进行验证。

[4] 余芯. 猪血豆腐制作黑幕：添加甲醛使快速凝结[J].科普天地(资讯版)，2009，5(9)：7.

1.2.5 统计分析 机械指标每个测定7次，去掉最大值和最小值，试验结果采用平均值±标准偏差的形式，并应用SPSS17.0进行方差分析和多重比较，方差分析采用ANOVA分析，多重比较采用LSD法。感官指标每个测定去掉最大分值和最小分值，试验结果取平均值。

2 结果与分析

2.1 不同破壁率对猪血豆腐机械指标的影响

2.1.1 破壁率对猪血豆腐TPA模式下机械指标的影响 由图1可知，在6个机械指标中，随着破壁率的增大，可恢复功、硬度、胶着性和咀嚼性变化趋势一致，为先显著增大，后减小，再增大，但均显著大于未破壁时的数值，表明破壁后血液凝胶强度增大，这与陈菲等[12]的研究结论是一致的；在破壁率为18.76%时，4个指标均呈现最大值；内聚性随着破壁率的变化不显著；弹性则在3个破壁的样品中无显著性差异，但较未破壁的样品增大，说明经细胞破壁后的猪血豆腐可增大弹性。

量子计算的概念最早在20世纪80年代初由Benioff和Feynman提出，是物理学中的量子力学和计算机科学相结合的产物，是一种新兴的计算理论。量子计算利用量子叠加(superposition)，纠缠(entangle)和干涉(interference)等量子态所特有的特性，并通过量子并行计算(quantum parallelism)求解问题。Han在2000～2004年间，提出了一系列基于量子位、电子叠加态等量子机制的量子进化算法(Quantum Evolutionary Algorithm, QEA)方面的新想法[18-20]。

上式中x(t)为理想无失真信号，h(t)为信号通道传输函数，*为卷积运算，以模型输出和系统输出的偏差的方差为准则函数，通过最小二乘法可求解出通道函数的向量表达式h为：

2.1.3 破壁率对猪血豆腐穿刺模式下机械指标的影响 由图3可知，穿刺模式的3个机械指标在开始破壁后均呈显著增大的趋势，在破壁率为52%的时候又显著减小，这是由于破壁后，血浆中蛋白浓度增大，增大了凝胶强度；随着破壁率增大至52%以后，破裂力又下降，这是由于细胞浓度降低引起的。

1.1.1 患者入选标准 ①首发或复发急性心力衰竭/慢性心力衰竭急性发作期心功能NYHA分级：Ⅲ～Ⅳ级；②休克诊断根据《实用内科学》第十四版标准[1]；同时符合以上2项。本研究经本院伦理委员会论证同意开展，所有入组患者均签署知情同意书。

 

  

注：不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。下同。 Note：The different superscript lowercase letters mean significant difference (P<0.05). The same as below. 图1 不同破壁率下TPA模式检测结果Fig.1 Results of TPA tests of different rate of breaking cell wall

  

图2 不同破壁率破壁血细胞下剪切模式检测结果Fig.2 Results of the mode of shear tests of different rate of breaking cell-wall

  

图3 不同破壁率破壁血细胞下穿刺模式检测结果Fig.3 Results of the mode of puncture tests of different rate of breaking cell-wall

2.2 不同破壁率对猪血豆腐感官品质的影响 由表2可知，感官测定得出的感官评分与方程拟合计算出的分值基本一致，同时随着破壁率的增大，评分的变化趋势一致，说明本次感官评分的值具有一定的可信度。

从感官评定结果来看，对于嫩度和细腻度，破壁后样品比未破壁样品分值反而降低，说明破壁处理对样品的嫩度和细腻度并没有正向的作用；多汁性和总体接受性的分值在破壁率为33.33%时最大，破壁率继续增大时分值降低，多汁性和总体接受性变化趋势较为一致，这说明总体接受性和多汁性之间可能有较大的相关性。

 

表2 不同破壁率下猪血质构感官评定结果Table 2 Results of sensory tests of blood tofu at different rate of breaking cell-wall

  

破壁率/%Rateofbreakingcell⁃wall嫩度Tenderness感官测定sensoryinspection方程拟合Equationfitting多汁性Juiciness感官测定Sensoryinspection方程拟合Equationfitting细腻度Exquisiteness感官测定Sensoryinspection方程拟合Equationfitting总体接收性OverallAcceptability感官测定Sensoryinspection方程拟合Equationfitting0．004．594．693．743．833．743．524．214．2918．763．904．003．503．533．142．694．274．4333．334．114．024．374．413．243．284．385．6852．004．434．453．573．373．493．114．194．33

3 结论与讨论

[3] 杨桂有，蔡克周，程榆茗. 浅谈我国猪血资源的开发与利用现状[J]. 肉类工业，2009，30(12)：10-11.

从感官分析的结果来看，总体接受性在破壁率达到33.33%时最佳，但是此时嫩度和细腻度得分较低，可能是由于细胞破壁释放了血细胞中的蛋白质，增大血浆蛋白浓度而使凝胶嫩度和细腻度下降。而多汁性和总体接受性得分随破壁率增加有所上升，这有可能是由于血细胞浓度下降原因所致。因此，血液凝胶质构品质的影响关键因素有可能是血细胞浓度，而不是破壁率。下一步试验计划采用分离部分血细胞来调整血细胞浓度，考察其对血液凝胶质构品质的影响。

综上所述，加味桂枝茯苓丸在促进急性脑梗死患者功能恢复中具有明显疗效，且未发现明显副作用，具有临床推广意义。

[1] 穆国春，李志钊，葛玲，等. 亟待开发利用的家畜血液资源[J].食品研究与开发，1999，20(6)：38-40.

[2] 任艳，万德光，国锦琳. 猪血的本草考证[J]. 时珍国医国药，2010，21(2)：256.

研究结果表明，血细胞破壁对大部分机械指标影响显著，相对于未破壁样品，破壁后血液凝胶强度显著增大。但并不是简单地随破壁率的增大而增大，在破壁率为18.76%时有最大值。豆腐类产品质构指标与其感官有一定的相关性[14]。由前期试验相关性分析和逐步回归分析结果可知[15]，感官指标的嫩度、细腻度和总体接受性和穿刺检测模式和剪切检测模式的参数相关，而与TPA检测模式的参数无关。

由表1看出，4个样品的浓度相差不大，一段浓缩机溢流和一段浓缩机底流的浓度仅相差40.9 g/L，一段浓缩机溢流的浓度也接近300 g/L，说明这两段浓缩机未起到浓缩作用，溢流浓度相当高，不能作为循环水使用。

[5] 张卫. 真假鸭血豆腐[J].中国食品，2012，35(12)：20-21.

2.1.2 破壁率对猪血豆腐剪切模式下机械指标的影响 由图2可知，剪切模式下的3个机械指标中，剪切力、剪切断裂性与TPA模式下的硬度等指标显现的趋势相同，剪切断裂形变随破壁率的变化无显著变化。

1.2.1.3 工艺要点 细胞破壁采用溶胀法破壁[13]，其操作步骤为：将800 mL抗凝血(以全血量计)用离心机离心，设定离心转速4 000 r·min-1，离心时间10 min，分离血细胞与血浆，准确量取血细胞体积，在血细胞中分别加入0、1、1.5、2倍体积的水，并在磁力搅拌器上分别搅拌60 min，使血细胞溶胀破壁后，再与血浆混合并搅拌均匀。

[7] 程学勋，甘泉，王院华，等. 猪血豆腐的工业化生产[J].江苏食品与发酵，2008，36(4)：37-38.

[8] 郝学宁，党斌. 盒装羊血豆腐的研制[J].食品工业，2012，33(2)：32-34.

[9] 陈振林，石忠志，肖华党，等. 影响猪血豆腐品质的主要因素探讨[J].肉类工业，2010，31(5)：21-25.

②农业种植结构的确定。种植结构依据《中国（宁夏）贺兰山东麓葡萄文化长廊发展规划》及项目可行性研究报告的发展要求，项目区总灌溉面积 18 584 亩（1238.9 hm2），其中 葡 萄灌溉面积 16 314 亩 （1087.6 hm2），防护林 2 270 亩（151.33 hm2）。

[10] 苏宇静，李瑜. 猪血豆腐制作工艺的研究[J].安徽农业科学，2011，39(30)：18760-18761;18770.

林孟站起来，把我推到椅子前，让我在刚才的椅子上坐下，他继续和萍萍讨论分家的事，他说：“衣服原先属于谁的，就由谁带走。家具也是这样，一人一半，当然这需要合理分配，不能把床和桌子劈成两半……这所房子就不分了，结婚以前这房子是属于你的，所以这房子应该归你。”

[11] 王鹏. 血液蛋白的凝胶性质及其对肌原纤维蛋白凝胶的影响[D].南京：南京农业大学，2010.

[12] 陈菲，王道营，诸永志，等. 超声波破壁工艺对鸭血凝胶特性的影响[J].江苏农业学报，2012，28(1)：181-185.

[13] 李翔.亚硝基血红蛋白的合成及性质研究[D]. 重庆：西南大学，2008.

[14] 宋莲军，周宇锋，乔明武，等.大豆组分对豆腐感官及质构的影响[J]. 河南农业大学学报，2013，47(1)：98-103.

1.1.4 灭菌情况：组织培养是一种常规无菌操作，利用细胞的全能性外加给予适宜生长的外界培养条件，通过植物组织获得整个植株的过程。而在操作过程中所使用的培养皿、接种用具、实验药剂都需要严格灭菌，否则也会造成大量污染。

相比单模光纤，少模光纤(Few Mode Fiber, FMF)是一种纤芯面积足够大、能够利用几个独立的空间模式传输并行数据的光纤.其模场半径通常为18～50 μm，模场面积为单模光纤的4～25倍，比起单模光纤对工作环境容差更高，有望在激光通信系统中降低空间光到光纤的对准难度.因此，近年来以少模光纤为基础的光通信技术得到了快速发展，少模光纤放大器已实现应用并逐步推向商用市场，使得基于少模光纤接收的空间光通信系统硬件条件已基本具备[9-11].因此建立空间光到少模光纤的耦合效率模型，为基于少模光纤的空间光通信系统设计和优化提供理论支撑变得十分迫切.

当暖机时间达到时，转速控制系统自动向下一转速设定点升速，即最小操作转速3 782 r/min。在升速过程中可通过Halt暂停按钮停止升速，通过Continue按钮继续升速，但在临界转速范围内Halt命令将不起作用。

[15] 李翔.血豆腐质构感官评定与机械测定的相关性分析[J]. 食品研究与开发，2016，37(7)：145-149.

阿东说：“你看，姆妈闭着眼睛，睡得蛮好。我们让姆妈睡一下。姆妈休息好了，才会喜欢你。你说了要听我的话，是不是？”