核磁共振(NMR)是一种无损分析检测技术，1H-NMR可以提供丰富的化合物结构信息，但在实际应用中，若采用 1H-NMR技术检测，样品基质背景干扰太大，掩盖目标化合物信号峰，对化合物的鉴定存在干扰；而 31P{1H}-NMR技术可以在复杂基质干扰下，只对含磷化合物产生信号响应[1]，并且其化学位移谱宽一般为-30～200 ppm，比氢谱化学位移宽的多，同时在对氢去偶的条件下，其谱峰信号为单峰，方便对化合物的指认[2 - 3]。奎宁醇、硫二甘醇、甲基二乙醇胺、三乙醇胺、二异丙胺基乙醇是一类在制药工业和化学毒剂合成中具有广泛用途的化合物，是禁止化学武器公约组织(OPCW)实施核查检测的目标化合物[4]。

Martin等[5]报道了利用氨基磷酸单酯作为磷酰化试剂通过SN2机理反应衍生醇形成磷酸二酯。陈茹玉等[6]报道了磷脂的不对称合成，其中运用了POCl3在水中作为磷酰化试剂磷酰化醇。Avik等[7]利用2-氯-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁磷杂戊环(CTMP)磷酰化衍生非含磷化武相关化合物，并通过 31P{1H}-NMR确认。丁贻祥等[8]等报道了利用二乙基磷酰氯作为磷酰化试剂与苯基丙酮反应生成两个O-磷酰化产物。本文以二苯基次膦酰氯[9]、POCl3[10]、CTMP[11]为磷酰化试剂，以31P{1H}-NMR为检测手段，研究了奎宁醇、硫二甘醇、甲基二乙醇胺、三乙醇胺和二异丙胺基乙醇转化为含磷化合物的衍生条件。进而通过 31P{1H}-NMR间接鉴定这些醇类化合物。考察了衍生产物的稳定性、方法检出限及回收率。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

Varian NMR System 600超导核磁共振仪(美国，Varian公司)，600 MHz 5 mm脉冲梯度场双通道宽带多核共振探头，工作站软件VnmrJ 2.1B和VnmrJ 4.0；移液枪(德国，Eppendorf公司)。

二苯基次膦酰氯(分析纯，美国Sigma-Aldrich公司)；POCl3(分析纯，美国Sigma-Aldrich公司)；2-氯-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁磷杂戊环(CTMP)(分析纯,美国Sigma-Aldrich公司)；氘代氯仿(CDCl3，99.8%氘代度，含0.03%TMS，CIL公司)；其他试剂均为分析纯。奎宁醇、硫二甘醇、甲基二乙醇胺、三乙醇胺、二异丙胺基乙醇由本院提供。

1.2 磷谱检测条件

图1 磷酰化衍生反应式 Fig.1 The phosphorylation reactions for alcohol compounds

31P{1H}-NMR检测条件：31P核共振频率：242.812 MHz；谱宽sw=59523.8 Hz；射频功率：tpwr=54 dB；90度脉冲宽度：pw90=9.75 μs；检测脉冲宽度：pw=3.25 μs；脉冲延迟时间：d1=0.3 ms；采样时间：at=1 ms；氢去偶射频功率：dpwr=42 dB；去偶方式：dm=’yyy’；接收机增益：gain=autogain；检测温度：25 ℃。

1.3 磷酰化衍生反应

[3] MA R.Characteriaztion of Phosphorus Forms in Environmental Materials and their Transformation in Soils by 31Phosphorus Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy.Nanjing:Nanjing Agricultural University(马瑞.利用 31P-NMR技术研究环境样品中磷形态特征及其在土壤中形态转换.南京:南京农业大学),2009.

2 结果与讨论

2.1 磷酰化试剂的选择

实验以二异丙胺基乙醇作为醇类化合物的代表，以CDCl3为衍生溶剂，考察三种磷酰化试剂衍生效果。取0.5 mL×1 μmol/mL 二异丙胺基乙醇/CDCl3溶液于核磁管中，加5 μL磷酰化试剂反应1 h；同时取0.5 mL CDCl3、5 μL磷酰化试剂混合作为空白对照样品进行 31P{1H}-NMR检测。结果发现，磷酰化试剂CTMP与二苯基次膦酰氯的衍生效果最好，可以明确分辨出衍生产物峰，而三氯氧磷过于活泼，在反应5 min监测就有四个产物峰，无法具体指认三氯氧磷与二异丙胺基乙醇的反应产物。综上考虑，磷酰化试剂选用CTMP与二苯基次膦酰氯。

2.2 磷酰化衍生产物磷谱化学位移的确定

将醇类化合物溶解于CDCl3后，取0.5 mL于核磁管中，加入5 μL磷酰化试剂，摇匀，室温下放置1 h，同时取0.5 mL CDCl3、5 μL磷酰化试剂混合作为空白对照样品进行 31P{1H}-NMR检测。结果如表1所示。

表1 醇类化合物磷酰化衍生产物31P{1H}-NMR化学位移

Table 1 The 31P{1H}-NMR chemical shift of phosphorylation products of alcohols

SterolsThestructureandchemicalshiftofCTMPphosphorylationproductsThestructureandchemicalshiftofdiphenylphosphinylchloridephosphorylationproducts147.031ppm30.697ppm147.529ppm29.762ppm148.042ppm31.786ppm147.304ppm31.011ppm147.353ppm32.179ppm

2.3 衍生条件的选择优化

2.3.1 衍生溶剂的选择 磷酰化试剂对水比较敏感，因此衍生反应需在非质子化溶剂中进行。实验考察了以CH2Cl2、CDCl3和DMF作为衍生溶剂。取0.5 mL×1 μmol/mL 奎宁醇/衍生溶剂溶液于核磁管中，加5 μL磷酰化试剂室温反应1 h；0.5 mL 衍生溶剂、5 μL磷酰化试剂混合作为空白对照样品进行检测，以产物峰信噪比作为监测指标。结果奎宁醇在CH2Cl2、CDCl3与DMF与CTMP反应并无大的区别，信噪比依次为33、39、34；而奎宁醇在CH2Cl2与CDCl3中与二苯基次膦酰氯的反应没有衍生产物生成。以DMF为溶剂时，奎宁醇与二苯基次膦酰氯的反应产物信噪比为8，有少量目标产物生成，可能原因为奎宁醇与二苯基次膦酰氯反应因存在空间位阻，反应较困难，当使用DMF做溶剂，可以起到缚酸剂的作用，促使反应正向进行，因此衍生溶剂选择DMF。

目前，应用型民办本科高校是培养“双师型”教师队伍的主要途径，这些高校自发组织教师参加各种实践培训。虽然很多教师都提高了专业技能，但也同样会给应用型民办本科高校带来经济负担。由于缺少“双师型”教师队伍建设资金，从而导致教师培养规划失去连贯性，这不利于应用型民办本科高校“双师型”教师队伍的建设。

2.3.2 吡啶对衍生反应的影响 以0.5 mL×10 μmol/mL 甲基二乙醇胺/DMF溶液与10 μL二苯基次膦酰氯为研究对象，考察缚酸剂吡啶对衍生反应的影响。实验结果表明，加缚酸剂可以明显提高反应速率，因此该衍生反应选择加10 μL吡啶作为缚酸剂。

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图2 不同时间CTMP对醇类化合物的衍生效率 Fig.2 The derivatization efficiency at different time using the derivatization reagent CTMP

图3 不同时间二苯基次膦酰氯对醇类化合物衍生效率 Fig.3 The derivatization efficiency at different time using the derivatization reagent diphenyl phosphinyl chloride

2.3.3 时间对衍生结果的影响 选择以多元醇全部羟基与磷酰化试剂衍生的产物作为监测对象。取0.5 mL×10 μmol/mL醇类化合物/DMF溶液于核磁管中，加过量磷酰化试剂反应，考察时间对衍生结果的影响，如图2、图3所示。使用CTMP作为衍生试剂时，其反应活性特别高，但衍生产物随着时间的增长在减少，说明由CTMP作为衍生试剂衍生醇类化合物产物稳定性不是很好；并且发现衍生产物最终降解的产物大约在16.54 ppm，而CTMP与水反应的产物也是16.54 ppm，说明水解是导致衍生产物不稳定的原因。由二苯基次膦酰氯作为磷酰化试剂衍生醇类化合物，其反应活性虽没有CTMP反应活性高，但随着时间的推移，衍生产物量逐渐增多，且最后衍生产物稳定；而利用二苯基次膦酰氯衍生奎宁醇在常温下反应量极少，无法积分检测，因此在50 ℃水浴条件下加热1 h，结果发现其衍生产物明显增多，采用归一化积分方法，其衍生效率约为89%。

2.3.4 温度对衍生结果的影响 考虑到常温下CTMP对醇类化合物的衍生结果不稳定，因此不考察温度对CTMP衍生醇类化合物结果的影响。以0.5 mL×1 μmol/mL甲基二乙醇胺为研究对象，二苯基次膦酰氯为磷酰化试剂，考察了不同温度(25 ℃、50 ℃和75 ℃)对衍生结果的影响。加热可以促进反应速率，但使用50 ℃与75 ℃作为反应温度差别并不是很大，因此选择反应温度为50 ℃，反应时间为1 h。

2.4 衍生产物的稳定性

在 31P{1H}-NMR检测条件下，以二苯基次膦酰氯为衍生试剂，DMF为衍生溶剂，奎宁醇、硫二甘醇、甲基二乙醇胺、三乙醇胺、二异丙胺基乙醇的检出限，考察结果依次为9、7、6、6、10 μg/mL。

2.5 衍生方法的检出限

实验考察了CTMP衍生0.5 mL×1 μmol/mL醇类化合物的稳定性，结果显示反应5 min，5种化合物的CTMP衍生产物信噪比基本大于3，但随着时间的推移，信噪比依次降低，到30 min后就检测不到了,即CTMP衍生醇类化合物的产物不稳定。利用二苯基次膦酰氯对1 μmol/mL的醇类化合物衍生，衍生温度采用50 ℃，衍生时间1 h，10 μL吡啶作为缚酸剂，考察了其日间稳定性，结果表明，由二苯基次磷酰氯衍生醇类化合物产物具有良好的稳定性。

[4] Convention on the Prohibition of the Development,Production,Stockpiling and Use of Chemical Weapons and their Destruction(1997) Technical Secretariat of the Organization for Prohibition of Chemical Weapons.The Hague,The Netherlands.http://www.opcw.org.

2.6 水样基质中方法的应用

采用二苯基次膦酰氯为衍生试剂，DMF为溶剂，在核磁管内原位衍生醇类化合物测定磷谱的分析方法，为解决复杂背景下非磷化学毒剂前体的1H谱无法满足鉴定要求的问题，提供了一种简便的解决途径。所建立方法具有反应专一、产物稳定、方法简便的特点。

3 结论

以二异丙胺基乙醇为醇类代表，取0.5 mL×50 μmol/mL和5 μmol/mL水溶液，用1 mol/L的HCl调pH值为1，旋蒸至干，用0.5 mL DMF复溶，加20 μL吡啶以除去酸，加40 μL二苯基次磷酰氯以保证衍生化试剂过量，50 ℃水浴加热反应1 h，31P{1H}-NMR检测。归一化法得到两种浓度下回收率依次为69%和53%。

参考文献：

[1] Messilakso M.Chemical Weapons Convention Chemicals Analysis,Sample Collection,Preparation and Analytical Methods.Chichester:John Wiley & Sons Ltd：2005，322.

资金计划的落实是企业资金管理工作中的重要步骤，年度资金计划是根据行业的市场行情和企业的经济状况，结合企业内部资金要求，对资金各方面的支出和收入情况做好协调。将资金安排统一的管理方案，全方位的将资金进行调整，按照规定对资金进行调动和整理，避免资金的恶性应用。制定资金的申请方案，相关工作人员向上级财务部门提出资金申请方案，并按照资金计划落实。

在地铁施工的过程中，为了有效的保障施工人员的生命安全，不断的对地铁安全工程风险进行充分的研究，有效的规避地铁施工出现的安全事故，最大程度的保障人们日常出行的安全。细致的排查地铁施工中各个施工环节，并且对地铁建筑进行科学性的管理。

磷酰化衍生反应见图1。醇类化合物溶解于衍生溶剂，取0.5 mL转移入核磁管中，先后加入10 μL等体积的吡啶和磷酰化试剂，摇匀，室温或水浴加热反应，进行 31P{1H}-NMR检测。

知识整合是指受审核企业将其原有知识及从认证机构接受的新知识分解成较小的知识模块，并将这些模块进行重组的过程。通过知识整合，受审核企业原有的知识结构得到更新，实现了进一步的集成。知识整合在知识转移、知识获取和知识应用之间承上启下，是认证机构对企业ISO14001实施影响的关键环节，这也是企业ISO14001实施的准备阶段，为知识应用进行铺垫。

2.1 两组安全性评价 结果(表2)表明：两组患者发病90 d各有2例死亡；两组患者间出血性脑梗死、其他重要脏器出血、发病90 d死亡率及发病90 d mRS(0～2分)差异均无统计学意义。

[2] YE R H.Study and Application of NMR Spectra of Phosphorus-containing Compounds.Guangzhou:Guangdong University of Technology(叶汝汉.含磷化合物的核磁共振谱图研究与应用.广州:广东工业大学),2011.

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在经历上述发展历程以后，很多院校探讨出合理的理论和实践的课时比例，满足了学生的岗位既要求有一定的技术含量，又要求具备很强的动手能力。然而，目前很多院校人才培养的普遍特点是“窄口径”，专业分得过细，和学生后期的职业发展极不相称。因此，传统的机械制造类专业的人才培养模式亟待变革。

[9] Naoyoshi M,Akemi F,Yuki H,et al.Tetrahedron,2002,58:3493.

[10] YUAN C Y,LONG H Y,SHEN D Z,et al.Scientia Sinica(袁承业，龙海燕，沈定璋，等.中国科学),1984,12：1088.

如山西某工程，可研审定的厂址总体规划将厂区位于城市道路中，需将城市道路改道长约1.5KM，出线朝南转向东北，厂址南侧有村庄，主厂房地基需打桩，初设方案优化时，项目单位，根据城市规划部门提出，道路不能改道出线不能向南朝村庄，为此需将厂址北移300∽400m，避开城市道路，煤气站及村庄，以降低工程投资。

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