摘要：广西梧州市某散养户猪场育肥猪近期暴发疫情，主要表现为发病猪咳嗽、喘气、发烧，腹部、臀部和耳朵发绀，呈现急性死亡症状，且死前口鼻流出泡沫状黏液。经实验室检测最终确诊为急性猪肺疫。药敏试验结果显示所分离菌株对氧氟沙星、环丙沙星和恩诺沙星等药物高度敏感，使用敏感药物对猪群进行治疗之后，猪场基本稳定下来。

猪肺疫是由多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida，Pm)引起的一种传染性呼吸道疾病，该病最急性型常不见明显症状即死亡。急性型在临床上主要表现为感染猪只发烧、咳嗽、腹式呼吸；腹部皮肤、耳朵和臀部等部位发绀。慢性型猪肺疫主要引起猪的间歇性咳嗽、不发热或轻微发热，导致猪群饲料转化率降低，影响猪场经济效益[1]。该病常见于散养户猪场。笔者近期诊断了一例育肥猪感染急性猪肺疫的病例，现将诊疗过程汇报如下。

1 发病情况

广西梧州市某散养户猪场存栏一千多头育肥猪。2017年5月初开始出现部分猪咳嗽、发烧等症状，发病2天后个别症状严重的猪出现死亡。笔者从散养户陆某处了解到，该猪场在发病后两天曾请当地兽医帮忙会诊，注射过阿莫西林和庆大霉素等药物，但是效果甚微，疫情继续扩大。发病猪群主要表现为呼吸困难、咳嗽、发烧，皮肤发绀等症状，一般在出现明显症状后24h左右死亡，而且死前鼻孔流出泡沫样黏液(图1A)，部分黏液混有血丝。发病后10天左右，猪场已累计死亡15头育肥猪。因此，陆某采集发病猪的肺、肝、脾和淋巴结等组织样品到本实验室进行病原检测。

2 剖检病变

发病猪大约4月龄左右，胸腔积液。肺脏严重充血肿大，表面散在出血斑点(图1B)，横切肺脏流出血样液体。喉气管内积聚大量泡沫样黏液。心耳以及心脏被膜分布大量出血点。肝脏出血，局部出现灰白色针尖大小的坏死点。肾脏表面以及肾盂有出血点。

首先根据工程实际情况，将已选用的各级分布式电源、储能和负荷的种类、容量等信息对应填入基础设备表；然后将该系统所具有的几种运行模式填入第一维度表；将所需进行能量管理的时间点进行排列并填入第二维度表；将电源负荷的时空分布情况填入第三维度表；将各类影响因子按优先考虑的顺序填入第四维度表；最后得到对分布式电源、储能和负荷的优化控制策略，形成四维能量管理空间模型。

  

 

图1 病猪典型病变照片

A病猪死前鼻孔流出泡沫样黏液；B肺充血肿大，表面散在出血斑点。

3 实验室检测

3.1 细菌的分离鉴定

分别用无菌接种环采集病死猪肺脏、喉气管和肝脏接种于血液琼脂平板上，37℃培养24h，观察到灰白色、光滑、湿润的露珠状菌落，无溶血现象。挑取单个菌落进行革兰氏染色观察到红色的小杆菌，进行瑞氏染色后在显微镜下看到两级浓染的细菌。同时参考Townsend等[2]建立的猪巴氏杆菌检测方法对所分离的细菌进行PCR检测，结果显示猪巴氏杆菌阳性。(图2)

  

 

图2 猪巴氏杆菌PCR鉴定结果

 

M：DL5000 Marker；1.阳性对照；2.阴性对照；3.待检样品

3.2 病毒检测

无菌采集病死猪的肺脏、肝脏、脾脏和淋巴结等部位的少量组织，加入适量的PBS后置于组织碾磨器进行充分碾磨，反复冻融三次后离心取上清进行样品的病毒检测。参考罗廷荣等[3]建立的猪瘟检测方法、韦莹等[4]建立的蓝耳病检测方法、王香玲等[5]建立的猪伪狂犬病检测方法以及李莹莹等[6]建立的猪圆环病毒2型检测方法分别对待检样品进行猪瘟、蓝耳病、伪狂犬病和猪圆环病毒2型进行实验室检测，结果显示这四种病原PCR扩增均为阴性。(图3、图4)

结合猪场发病情况以及实验室检测结果最终确诊该病例是由猪多杀性巴氏杆菌引起的。猪多杀性巴氏杆菌是猪群上呼吸道的常在菌，可以分为产毒素多杀性巴氏杆菌和非产毒素多杀性巴氏杆菌，而猪肺疫是由非产毒素多杀性巴氏杆菌引起的。该菌在正常情况下一般不引起猪只发病，只有与其他病原如蓝耳病病毒、伪狂犬病毒等协同感染，或猪场饲养管理不善、猪群受到应激时才会引起严重的临床症状[9]。笔者从散养户中了解到，该猪场并不采取自繁自养的模式，而是从本地的小规模猪场外购仔猪进行饲养。仔猪进场前没有经过隔离检疫，并且整个饲养过程中只免疫过猪喘气病疫苗，其他重大疫病均未进行免疫。本次疫情发生在5月初，而5月刚好是立夏时节，广西大部分地区出现闷热、多雨天气，极有利于细菌生长，加上环境应激等因素导致猪群抵抗力下降，病菌趁机侵入机体，最终导致猪肺疫的暴发。

3.3 药敏试验

将分离得到的猪源巴氏杆菌接种到营养琼脂平板进行纯培养，同时参考美国临床实验室标准委员会(CLSI)的标准[7]，采用Kirby-Bauer纸片扩散法[8]对分离细菌进行药物的敏感性试验。结果显示，分离所得细菌对氧氟沙星、环丙沙星、林可霉素、恩诺沙星、诺氟沙星、头孢噻肟、氨曲南高度敏感；对复方新诺明、庆大霉素、头孢唑啉、阿米卡星、强力霉素等中度敏感，对其他药物出现不同程度的耐药。见表1。

  

 

图3 猪瘟RT-PCR鉴定结果

 

M：DL5000 Marker；1.阳性对照；2和3.阴性对照；4.待检样品

  

 

图4 PRV、PCV2和PRRSV的PCR检测结果

M：DL2000 Marker；1.PRV阳性对照；2和3.PRV阴性对照；5.PCV2阳性对照；6和7.PCV2阴性对照；9.PRRSV阳性对照；10和11.PRRSV阴性对照；4、8、12.待检样品

 

表1 分离细菌的药敏试验

  

药物种类抑菌圈直径(mm)结果判定氧氟沙星31．0高度敏感万古霉素7．0耐药红霉素6．0耐药复方新诺明14．0中度敏感庆大霉素16．0中度敏感环丙沙星28．0高度敏感头孢唑啉19．0中度敏感阿米卡星16．0中度敏感恩诺沙星30．0高度敏感四环素6．0耐药林可霉素20．0高度敏感链霉素6．0耐药卡那霉素16．0中度敏感诺氟沙星28．0高度敏感头孢噻肟24．0高度敏感米诺环素17．2中度敏感哌拉西林14．0中度敏感氨曲南25．0高度敏感妥布霉素13．0中度敏感氨苄西林8．5耐药青霉素6．0耐药强力霉素17．0中度敏感

4 讨论

利用SPSS 19.0统计软件分析数据，每个标本独立重复三次，所有细胞实验独立重复三次，计量数据以均数±标准差表示，若满足正态性和方差齐性，两样本均数比较采用独立t检验和配对t检验，相关性分析采用Spearman秩相关性分析，P<0.05为差异有统计学意义。

目前，猪肺疫在规模化猪场较为少见，常见于一些饲养管理不善的猪场。因此，要防控该病首先要做好猪场的生物安全措施，坚持自繁自养，全进全出的养殖模式，需要引种时也必须要做好隔离检疫工作。猪场平时要有计划地进行场内消毒，并且减少外来人员和车辆的进出。同时根据猪场的实际情况，对蓝耳病、猪瘟、口蹄疫、伪狂犬病和圆环病毒2型等重大疫病进行合理免疫。暴发猪肺疫后要尽快送检实验室进行确诊，同时将分离的菌株进行药物敏感性试验，筛选出敏感药物进行治疗。发病猪一般采取肌肉注射的方式给药，，同时对其他猪群进行口服给药，疗程5～7天。在药物治疗的同时对猪场环境、饲养工具等进行彻底消毒。养户陆某按照笔者的方案对猪群进行一周的治疗之后，猪场基本稳定下来，没有再出现新病例。

参考文献

[1]毛红兵.猪场暴发猪肺疫的诊治体会[J].中国动物保健,2016,18(12)：49-50.

[2]Townsend K M, Frost A J, Lee C W, et al. Development of PCR assays for species-and type-specific identification of Pasteurella multocidaisolates[J]. Journal of clinical microbiology, 1998, 36(4): 1096-1100.

[3]罗廷荣,波丹,黄宪高,等.RT-PCR检测猪瘟病毒初探[J].广西农业生物科学,2001,20(1)：17-20.

[4]韦莹,洪绍锋,覃艳然,等.一株Nsp2蛋白自然缺失123个氨基酸的PRRSV分离和鉴定[J].动物医学进展,2015,36(10)：34-38.

[5]王香玲,沈诗源,焦连国,等.猪伪狂犬病毒PCR检测方法的建立及应用[J].中国兽药杂志,2014,48(11)：5-9.

[6]李莹莹.广西陆川猪呼吸道疾病综合征的流行病学调查及猪圆环病毒2型的分离鉴定[D].广西大学,2014.

[7]Watts J L, Clinical and Laboratory Standards Institute. Performance standards for antimicrobial disk and dilution susceptibility tests for bacteria isolated from animals: approved standard[M]. National Committee for Clinical Laboratory Standards, 2008.

[8]姚火春.兽医微生物学实验指导[M].北京：中国农业出版社，2005.

[9]唐先春,吴 斌,索绪峰,等.猪多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及生物学特性研究[J].畜牧兽医学报,2005,36(6)：590-595.