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外周注射Ghrelin对非洲雏鸵鸟大肠中纤维素酶活性的影响

更新时间:2009-03-28

非洲鸵鸟(African ostrich)原产于非洲草原和阿拉伯沙漠地带,属鸟纲鸵鸟目的食草性鸟类,也是目前现存鸟类中的惟一的二趾鸟类。人工饲养的鸵鸟主要有3种类型:红颈鸵鸟、蓝颈鸵鸟、黑颈鸵鸟,其中黑颈鸵鸟即南非选育的非洲鸵鸟[1]。非洲鸵鸟的消化道具有很强的酵解作用,特别是对粗纤维具有极强的消化分解能力,因此本研究通过采用颈部皮下注射不同浓度Ghrelin后,检测其盲肠和结肠肠中纤维素酶的活性变化,探明Ghrelin对非洲雏鸵鸟消化能力的影响,从而为非洲雏鸵鸟的生长发育及饲养管理提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 试验动物 选取健康的45 d非洲雏鸵鸟16羽,平均体重(5.5±0.8) kg,随机分为 4 组,每组 4羽,雌雄不限,均来自于长江大学鸵鸟研究所。

9月11日下午3点30分,著名评书表演艺术家单田芳因病去世,享年84岁。上世纪八十年代以前出生的人,许多人是听着单田芳的评书长大的。单田芳推出过《三侠五义》《白眉大侠》《隋唐演义》《水浒外传》等许多优秀的评书,先后“录制和播出100余部、共计15000余集广播、电视评书作品,整理编著17套28种传统评书文字书稿”。

4.4中的数据及分析表明,CM教科书有理数例题的背景素材比RJ版教科书丰富.RJ版教科书可以参考CM教科书在每小节设立“现实世界举例”模块的方法(如图12),设立相关模块列举与学生日常生活相关联的例题吸引学生的直接兴趣,或通过列举与其它学科相关的例题使学生认识到学好数学知识的重要性,从而激发其求知欲,培养学生的间接兴趣.通过对有理数例题的背景素材的丰富,使学生体会到数学的生活价值和文化价值[19].

1.1.2 试验基础日粮 试验过程使用自配育雏料,主要是由青菜配合肉用仔鸡前期配合饲料,饲料使用荆州海大饲料有限公司的产品。

1.2.1 试验设计 颈部皮下注射不同浓度外源性Ghrelin,其浓度分别为 0(对照组)、10、50、100 μg/kg,用生理盐水稀释,注射剂量为1 μL/羽,注射时间为每天上午8:00,连续注射6d,于第7天上午8:00取材。

1.2 试验方法

1.1.3 试 剂 非 洲 鸵 鸟 Ghrelin,GSS (Octanoyl)FLSPEYKKIQKQKDPKKPTTKLHC由上海强耀生物科技有限公司合成。

1.2.2 饲养管理 整个饲养阶段在长江大学鸵鸟研究所进行,为避免影响试验效果,雏鸵鸟采用分栏饲养。 每天定时给料,具体时间为 8:00、11:00、14:00、17:00四个时间段各喂一次,记录每天总采食量。在试验开始前,对鸵鸟舍全场进行全面彻底喷雾式消毒,在饲喂试验期间,严格按照长江大学鸵鸟研究所消毒程序进行消毒。

1.2.3 样品的采集与处理 饲养至第7天的非洲雏鸵鸟称重。经跖静脉注射10%的乌拉坦(1 g/kg)稀释液进行全身麻醉,打开腹腔迅速取部分盲肠和结肠食糜放入10 mL带盖离心管中,立即放入液氮罐中速冻20 min后取出放入-80℃冰箱中冷冻保存,供测定酶活性用。

获得的全部数据用SAS数据处理软件进行统计分析。所得数据以平均数±标准差表示,通过t检验法比较各组间的差异显著性。P<0.05为差异显著,P>0.05 为差异不显著。

1.3 统计分析

1.2.4 纤维素酶活的测定 准确称取食糜质量,按质量(g)∶试剂一(mL)=1∶9 的比例加入 9 倍体积的试剂一,冰水浴匀浆,4 000 r/min常温离心10 min,取匀浆上清液一部分待测,另一部分沸水浴5 min(使酶失活)后取出冷却,制成煮沸的匀浆上清液。向测定管加入匀浆上清液50 μL,对照管加入煮沸的匀浆上清液50 μL。再分别向上述测定管、对照管加入试剂一 50 μL、试剂二 200 μL、蒸馏水 50 μL,混匀,37℃孵育30 min后,立即取出放入沸水浴中煮沸15 min,取出流水冷却,4 000 r/min 常温离心 10 min,制备糖化液上清液。另取两支试管,作为测定管和对照管。分别向测定管和对照管加入糖化液上清液50μL,空白管加入蒸馏水50 μL,标准管加入2 mg/mL葡萄糖标准液50 μL,再向上述测定管、对照管、空白管及标准管分别加入试剂三150 μL,混匀,沸水浴反应15min,取出流水冷却。再向上述各管加入蒸馏水1 000 μL,混匀,波长 550 nm,1 cm 光径,去离子水调零,测定各管OD值(南京建成,货号:A138)。

2 结果与分析

从表1中可以看出,当Ghrelin浓度为10 μg/kg时,雏鸵鸟盲肠中纤维素酶的活性增加,且与对照相比差异显著(P<0.05),结肠中纤维素酶的活性虽然有所降低,但与对照相比差异不显著 (P<0.05);当Ghrelin浓度为50 μg/kg时,盲肠和结肠中纤维素酶的活性都降低,且与对照相比差异均显著(P<0.05);当Ghrelin浓度为100 μg/kg时,盲肠和结肠中纤维素酶的活性都增加,且与各组差异均达显著水平(P<0.05)。以上结果说明,一定剂量的Ghrelin能够促进雏鸵鸟大肠中纤维素酶的活性,从而增强其消化吸收能力,促进雏鸵鸟的生长。

 

表1 Ghrelin对雏鸵鸟大肠纤维素酶活性的影响

  

注:同列数据后不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。

 

Ghrelin 剂量//μg/kg 0(对照)10 50 100盲肠//U/mg prot 16.96±1.23 c 20.07±1.58 b 5.19±0.23 d 27.34±2.47 a结肠//U/mgprot 5.42±0.93 b 4.59±0.31 bc 4.32±0.45 c 11.58±2.49 a

3 小结与讨论

纤维素酶是起协同作用的多组分酶系,有研究认为该酶系中的组分可分为两类,I类水解可溶性纤维素较水解不溶性纤维素更为容易,Ⅱ类则相反[2]。鸡、鸭、鹅等动物的粗纤维几乎全部是在盲肠内被消化的,这种消化依赖于盲肠微生物产生的纤维素酶,并且纤维素底物对酶解的敏感度受其结构的影响很大,包括纤维中木质素的含量、比表面积、结晶度及聚合度等[3]。已有研究表明不同品种的鸡盲肠纤维素酶活力不同[4],本研究结果表明,鸵鸟的纤维素酶在结肠和盲肠中都存在,盲肠中的活性远远大于结肠,这就从理论上解释了为什么鸵鸟能够消化纤维素,且进一步说明鸵鸟的粗纤维除在盲肠内被消化外,在结肠中也有部分被消化,且高剂量的Ghrelin能够增加盲肠和结肠中纤维素酶的活性,从而提高雏鸵鸟的消化能力。

1 000 MW二次再热机组建设无油电厂的技术经济性分析 吴阿峰,谭灿燊,范永春,张翔宇,石韬,徐金苗(122)

参考文献:

[1]王益民,任战军,石芳萍.非洲黑颈鸵鸟原种繁殖性能研究[J].西北农业学报,2007,16(1):43-44.

[2]王 璋.食品酶学[M].北京:轻工业出版社,1990.

[3]那 安,崔福绵,马建华,等.康氏木霉AS3.4001纤维素酶系的研究[J].微生物学报,1985,25(1):31-37.

[4]王 娟,臧素敏,元 娜,等.太行鸡、海兰灰蛋鸡生长期消化道主要酶系变化规律比较[J].西北农业学报,2010,19(6):38-43.

 
陈迪杰,杨杰,王家乡
《湖北畜牧兽医》 2018年第05期
《湖北畜牧兽医》2018年第05期文献

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