1 引言

中国是世界稀土资源最为丰富的国家。同时也承担着世界90% 以上的市场需求。近年来，由于稀土不合理开采、冶炼及稀土微肥的广泛使用，导致土壤中稀土元素含量不断提高，稀土污染日益严重，蔬菜中稀土元素的积累量也有上升趋势[1，2]。Liang[3]等研究显示，我国稀土矿区水、土壤环境中稀土含量较高，导致蔬菜等作物稀土含量大于国家食物限量标准的10～20倍。李小飞[4]等研究也发现，福建省长汀县稀土矿区芋头与空心菜稀土元素的含量分别可达3.68 mg/kg 和0.92 mg/kg，超过了蔬菜卫生标准限值(0.7 mg/kg)。

本研究以芥菜为材料，研究了铈胁迫下芥菜的生理效应及其土壤酶活性变化规律，旨在为受污区特别是稀土矿区的蔬菜食用安全提供科学依据。

2 材料与方法

2.1 实验材料

本实验所采用的蔬菜包括油麦菜、芥菜等在内的17种蔬菜。种子购于江门市利隆种业有限公司。种植前，选取优良种子于水中浸泡24 h，之后用纱布包好放入培育箱控温催芽，待种子露出白牙尖后均匀的播种于施足基肥的土壤里，待长大2～3片真叶后用于盆栽实验。供试土壤取自广东省江门市东湖公园园林土，土壤经风干、压碎过5 mm筛。

2.2 试验设计与方法

2.2.1 筛选实验

选取苗期约15 d，生长基本一致的供试植物的植株培养于1/4 Hoagland营养液中，每盆种植3株，pH值保持在6～6.5，每3天更换一次营养液，保持连续通气，等到菜苗适应了盆中营养液环境后，按浓度加入CeCl3·7H2O，质量浓度设置为50 mg/L(以Ce3+计)。每处理重复3次，自然条件下培养22 d后收获。并将其分可食部分与不可食部分进行采样分析，测定Ce元素含量。

(一)减刑理由。任何罪名都会根据罪犯的恶意程度量刑，并看是否有减刑的事由，借以修正法律的残酷性。维多利亚时代的英国，法定减刑理由包括年龄、良好行为、精神状况等理由。苔丝也存在着法定诸多减刑理由，她年纪轻、无前科、初犯；同时，苔丝纯洁善良，为了家庭牺牲自己，从小就主动担当起抚养弟妹的责任；她在丈夫离开后，依靠自己的能力养活自己，从未伤害过任何的人；她有精神迷乱的家族遗传，且是被亚力克所激怒。但是，所有这些可辩事由，都没有得到有效辩护。这些都使她失去了减刑的机会。

2.2.2 浓度梯度实验

全省不动产登记窗口作风问题专项整治工作取得阶段性成效（陈幸德等） ..................................................11-19

摩洛哥“爱乐乐团国际钢琴比赛”将于2019年3月8至17日在卡萨布兰卡/拉巴特举行。该比赛每年举行一次，年龄限制：16至30岁。比赛一等奖奖金为5000欧元。比赛共分为三轮，预赛轮：DVD/视频；第一轮：独奏9至12分钟，协奏曲；决赛轮：协奏曲。比赛曲目与详情请关注网站。

叶绿素含量高低与叶片的衰老氧化紧密相关，叶片组织内产生的氧自由基会对叶绿素结构产生破坏[9]，各种环境胁迫也可导致植物体内叶绿素破坏与降解。从图1中可以看出，随着Ce处理浓度的增加，芥菜叶片中的叶绿素含量变化呈先上升后下降的趋势。在Ce浓度为600 mg/kg时，达到其最大值3.47 mg/g，高于对照组91.7%，超过600 mg/kg时，叶绿素含量明显下降，直至低于对照水平。由此可见，低浓度Ce处理促进了芥菜对光能的吸收、传递和转化，刺激了植物体叶绿素的合成，对芥菜光合作用具有促进作用；高浓度Ce处理对芥菜光合作用起阻碍作用，严重影响芥菜的生长，此结果同Ce对其生物量的影响趋势相似，与陈祖义等[10]研究结果相似。

2.3 样品处理与测定方法

2.3.1 样品的预处理

注：Ce处理浓度为 50 mg/L

土壤样品：取出土样，自然风干，压碎后进行研磨并过100目尼龙筛，封装并贴好标签置于阴凉处，以备后期测定。

(1)矿区农田稀土污染情况日趋严峻，使蔬菜受稀土污染的情况也愈发严重。如何有效利用污染土壤意义重大，筛选重金属高低积累植物被认为是一种有效的方法。在本实验中，通过对17种蔬菜进行实验后分析可得出芥菜可食部分稀土金属含量为98.21 mg/kg，是17种蔬菜中可食部分稀土金属含量最高的蔬菜，故选择芥菜作为接下来的供试植物。

叶绿素含量：采用乙醇提取法；根系活力采用TTC法，具体操作参照李合生主编植物生理生化实验原理和技术测定方法[6]；SOD活性：NBT光化还原法；CAT 活性：高锰酸钾滴定法；POD：愈创木酚法；土壤过氧化氢酶活性：高锰酸钾滴定法；磷酸酶活性：苯磷酸二钠法；脲酶活性：奈氏比色法；土壤转化酶：比色法；土壤纤维素酶活性：3，5- 二硝基水杨酸比色法。具体操作参照关松萌等主编土壤酶及其研究中测定方法[7]。

3 结果与分析

3.1 筛选实验

一般来说，某种植物对某种元素的吸收特点，常用富集系数和转运系数来描述。富集系数为植物地上部重金属含量与介质中重金属含量的比值，在一定程度上标志着介质一植物系统中元素迁移的难易程度[8]；转运系数为植物地上部重金属含量与植物地下部重金属含量的比值。17种蔬菜对稀土元素铈的累积吸收情况详见表1。

 

表1 17种蔬菜对稀土元素Ce的累积情况

  

序号蔬菜种类Ce含量/(mg/kg)不可食部分可食部分富集系数转运系数备注1空心菜199.9553.901.080.27茎叶可食,根不可食2生菜357.2176.161.520.21茎叶可食,根不可食3苋菜35.2732.910.660.04茎叶可食,根不可食4芹菜37.0616.400.330.44茎叶可食,根不可食5红菜935.6282.551.650.09茎叶可食,根不可食6葱87.3319.170.380.22茎叶可食,根不可食7芥菜643.9898.211.960.15茎叶可食,根不可食8胡萝卜27.8124.780.500.89茎叶可食,根不可食9菜心699.1241.090.820.06茎叶可食,根不可食10茼蒿107.4817.760.360.17茎叶可食,根不可食11小白菜489.2747.050.940.10茎叶可食,根不可食12油麦41.966.640.130.16茎叶可食,根不可食13菜162.6315.340.310.09茎叶可食,根不可食14香菜264.4517.470.350.07茎叶可食,根不可食15韭菜539.3669.311.380.13茎叶可食,根不可食16西洋菜210.8739.570.790.19茎叶可食,根不可食17大白菜196.5141.550.830.21茎叶可食,根不可食

植物样品：用电子天平称取一定量的样品于干净的瓷坩埚中，用电热板低温炭化2～3 h，之后用坩埚钳将瓷坩埚转置马弗炉内，以每升温100 ℃停半小时直至600 ℃，5～6 h 即可灰化完毕[8]。冷却至室温后，向瓷坩锅内加入5 mL 10%的 HNO3，置电热板上进行低温消化，直到埚内快蒸干时，加入3 mL 1% 的稀硝酸，溶解并转入容量瓶中，摇匀定容，以备测定。

由于建筑楼的供电区域用电由变电所引来，故接地方式采用TN-S环路式。此种方法是将接地体环绕建筑物四周与地面土壤相连接，使得地面等电位分布。同时还升高了地面电位，更为安全可靠。

从表1可以看出，不同种类蔬菜对稀土元素铈的吸收不同，17种蔬菜对铈的富集系数和转运系数存在着较大的差异。从富集系数来说，芥菜的富集系数最大，可达1.96，而17种蔬菜的转运系数都较小，其转运能力普遍较低。结合本实验目的，故选取铈高积累蔬菜芥菜作为下面实验的供试植物。

3.2 Ce胁迫对芥菜叶绿素含量的影响

供试植物为芥菜，Ce3+设6个质量浓度(单位为mg/L)：100、300、600、900、1200、1500，以CeCl3·7H2O形态加入。

  

图1 不同Ce处理下芥菜叶绿素的含量

3.3 Ce胁迫对芥菜根系活力的影响

根系是植物吸收水分与养分的重要器官，它生长发育状况的好坏将直接影响到整个植株的生命活力，因此，根系活力可以直接反映根系的发育状况和植物的生长情况。

从图2可看出，随着Ce浓度的增加，芥菜的根系活力呈先上升后下降的趋势。在芥菜根系中，Ce处理浓度为600 mg/kg时其根系活力达到最大值，为6.77 mg/(g/h)，高于对照的213.4%，当Ce处理浓度大于600 mg/kg时，根系活力上升速度下降，直至根系开始失活，1500 mg/kg时芥菜叶子边缘已发黄，植株已出现轻度中毒现象，根系几乎失活。因此，低浓度Ce能增强芥菜的根系活力，当超过允许的浓度后对芥菜根系活力呈毒害作用，抑制其根系活力增强。

  

图2 不同Ce处理下芥菜的根系活力

3.4 Ce胁迫对芥菜体内抗氧化酶系统的影响

抗氧化酶是指超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)，它们是植物活性氧清除系统中重要的酶，能维持活性氧自由基产生与清除系统的平衡[11]，其活性被看作重金属胁迫下植物能耐受的指标之一。

创客空间(Maker Space)起源于美国，近几年在国内“大众创业，万众创新”的氛围下，开始在国内各大城市发展，比较知名的有深圳柴火创客空间、上海新车间。高等院校创办创客空间，比较知名的有清华大学创客空间，西南交通大学创客空间。本科高校创客空间多利用工程训练中心现有的场地、师资、技术创办，有其独特的机制体制优势。浙江大学工程训练中心就以培养学生综合能力和创新能力为主线，并成立了大学生创新实践基地，强化学生的工程意识、工程实践能力和创新意识、创新能力。

由图3可知，随着Ce浓度逐渐增加，芥菜体内SOD活性、POD活性、CAT活性总体上都呈现先上升后下降的趋势，当Ce浓度在0～600 mg/kg范围内，SOD活性、POD活性、CAT活性都呈上升的趋势；并在600 mg/kg时达到最大值，分别为367.64 u/g、218.3 U/(g/min)、349.47 mg/(g/min)；当Ce浓度大于600 mg kg-1时，SOD活性、POD活性、CAT活性均下降，其中POD活性和SOD活性低于对照组。

  

图3 不同Ce处理下芥芥菜抗氧化酶活性的影响

宁杞1号枸杞是宁夏农林科学院于1987年培育出的枸杞新品种，宁杞1号是宁夏枸杞主栽品种[9]。蒙杞1号由内蒙古农科院园艺所于2005年通过单株选优法选育而成，其抗性和宁杞1号相当，其果实鲜红透亮，形状为长圆茄形，与宁杞1号相比果实体积增大1倍以上，果肉厚度增大28%、果实千粒重增加994.9g，总糖含量增加1.9% [10]。有关宁杞1号和 蒙杞1号枸杞蛋白质含量比较还未见报道。本研究采用不同的pH值提取枸杞蛋白，再用不同硫酸铵分段沉淀蛋白，用考马斯亮蓝G-250染色法来进行含量测定。探讨枸杞蛋白提取与硫酸铵分段沉淀的最佳方案，并比较宁杞1号和 蒙杞1号枸杞蛋白质含量。

实验表明，在较低Ce浓度处理下，由于稀土作为微量元素能促进植物生长发育，对植物生长副作用不明显，抗氧化酶活性保持较低的水平，但浓度超过一定范围后，植物受到迫害，刺激芥菜抗氧化酶的活性，增强了芥菜抵御活性氧伤害的能力，减轻了高浓度Ce给植物带来的伤害，直至防御系统被破坏。

3.5 Ce胁迫对土壤酶活性的影响

土壤酶是具有高度催化作用的生物催化剂，土壤中的一切生物化学过程都是在土壤酶的作用下进行的。土壤酶在土壤有机质转化和养分循环中起着非常重要的作用，它作为土壤的重要组成部分，与土壤理化性质之间具有较好的关联性[12]。可以反映土壤中生物代谢和物质转化状况[13]，能较好地反映土壤的表观肥力[14]。此外，许多研究者认为，土壤酶活性对重金属的激活或抑制作用非常的敏感，且某些酶的活性与重金属的污染程度存在着一定的相关性，可作为反映重金属污染程度的有效指标[15]。

本研究是在稀土污染的影响下，探讨酶活性变化的情况，并通过加入外源稀土金属Ce，达到实验预设的土壤稀土浓度值，再测定根际土壤中过氧化氢酶、磷酸酶、脲酶、转化酶和纤维素酶的活性。然后分析稀土Ce对土壤酶的影响，为稀土农用过程中对生态环境的效应评价提供科学依据，同时进一步为受污染区特别是稀土矿区的蔬菜食用安全提供科学依据。

  

图4 不同根际土壤中Ce对土壤酶活性的影响

(3)植物的旺盛生长离不开一个强大的根系系统，根系活力作为反映根系代谢和植物生长的指标就显得尤为重要。研究表明，在稀土Ce处理下，芥菜的根系活力呈先上升后下降的趋势。且在Ce浓度为600 mg/kg时达到最大，为5.02 mg/(g/min)。当Ce浓度小于600 m/kg时，此时稀土Ce对芥菜根系活力起促进作用，根系活力随着稀土Ce浓度升高而增大；当Ce浓度大于600 mg/kg时，稀土Ce对芥菜根系活力的促进作用降低，当芥菜根系活力低于对照组根系活力时，表明高浓度的稀土Ce处理会抑制植物的根系活力。可能的原因是根部细胞结构遭到破坏,从而致使植物根活力下降深知失活。

4 讨论与分析

通过在含稀土Ce六个水平浓度梯度的土壤中盆栽筛选的蔬菜芥菜，待其成熟收割后，取其植株与根际土壤测定植物生理指标和5种常见的土壤酶活性，结果如下：

2.3.2 测定方法

教师善于挖掘教材中的“兴趣”因素，结合学生熟悉的事例，创设出富有一定趣味的教学情境，运用启发式教学，使学生学习心理达到一种“欲罢不能”的兴奋状态，从而产生浓厚的学习兴趣。如播放不同风格的音乐让学生聆听，用简洁的词语描述自己的感受，根据自己的感受创造一个小故事，通过画笔将故事表现出来。

(2)叶绿素是一类与光合作用有关的最重要的色素。实验表明，芥菜叶片中叶绿素含量先上升后下降,且在Ce浓度为600 mg/kg时达到最大，为3.47 mg/g。当Ce浓度小于600 mg/kg时，此时稀土Ce对芥菜叶绿素含量起促进作用，叶绿素含量随着稀土Ce浓度升高而增加；当Ce浓度大于600 mg/kg时，稀土Ce对芥菜叶绿素含量的促进作用降低，当芥菜叶绿素含量低于对照组叶绿素含量时，表明高浓度的稀土Ce处理会抑制植物叶绿素的合成，从而影响植物的光合作用，进而影响植物的生长，与陈祖义等人研究结果相似。

由图4可知，随着土壤Ce质量浓度的逐渐增加，土壤酶活性总体上都呈现先上升后下降的趋势。在芥菜根际土壤中，当Ce浓度为600 mg/kg时，过氧化氢酶活性和磷酸酶活性达到最大值，分别为1.67 mL/g 和0.86 mg/g；当Ce浓度为900 mg/kg时，脲酶、纤维素酶和转化酶活性达到最大值，分别为0.22 mg/kg，3.67 mg/g，1.01 mg/g。在实验范围内Ce对土壤酶的活性有一定的刺激作用，并且随着浓度的逐渐增加，刺激作用由强变弱，此研究结果与褚海燕等人[16,17]研究结果变化趋势相符。

(4)生物体在生命活动中不断地产生自由基，正常情况下，机体内存在的SOD、POD、CAT通过形成一个自由基清除系统使自由基水平处于一种相对的动态平衡状态[18]。而当植物体受到外界环境的胁迫时有可能会破坏这种平衡。此次研究表明，随着土壤Ce含量的增加，芥菜叶片SOD、POD、CAT活性均呈现先上升后下降的趋势；可能的原因是低浓度的Ce处理虽然对芥菜的生长起促进作用，但植物体内活性氧(ROS)增幅不大，其叶片内抗氧化防御系统未完全启动来清除过量的ROS，所以SOD、POD、CAT活性增幅不大；随着Ce处理浓度的增加，植物体内ROS增幅较大，需增加大量的SOD、POD、CAT来清除过多的ROS。但抗氧化防御系统这种保护作用是有限的，当Ce质量浓度继续上升时，植物体内防御系统功能紊乱，清除ROS能力减弱，ROS在细胞内过量积累，进而导致细胞膜脂过氧化加强[19]，高浓度的Ce处理使SOD、POD、CAT活性降低，直至低于对照组。

(4)土壤酶活性不仅受到根际土壤环境的影响，而且不同种类的酶受到根际土壤影响的效应也不相同。由土壤酶活性变化规律表明：芥菜根际土壤中过氧化氢酶先被激活再被抑制，脲酶、磷酸酶、纤维素酶、转化酶对Ce的敏感性影响趋势相似，均表现为激活效应，激活作用先增强后减弱。当Ce浓度为600 mg/kg时，为过氧化氢酶，磷酸酶活性值大小的分界点；当Ce浓度为900 mg/kg时，为脲酶、纤维素酶和转化酶活性值大小的分界点。可能的原因是：土壤酶对稀土元素有一定的耐性，在浓度允许的范围内对土壤酶活性呈增强作用，而当超过允许浓度后土壤酶活性有减弱的趋势，直至出现抑制作用。在芥菜根际土壤中，脲酶对铈的敏感性相对于过氧化氢酶来说差异性更大，脲酶活性最大相差0.14 mg/g。

5 结论

研究中选取常见蔬菜芥菜在Ce浓度水平为50 mg/L条件下水培，然后进一步对芥菜进行盆栽土培试验，通过土培实验分析了稀土Ce对芥菜的叶绿素含量、根系活力、抗氧化酶和土壤酶活性的影响得到以下主要结论。

(1)本研究中，芥菜的富集系数最大，可达1.96，说明芥菜对Ce有较强的富集能力。再结合蔬菜的实际生长情况，认为芥菜可食部分对Ce有较高的富集，因此选择高Ce积累芥菜作为下面实验的供试植物。

(2)芥菜叶片中叶绿素含量先上升后下降,且在Ce浓度为600 mg/kg时达到最大，为3.47 mg/g。当Ce浓度小于600 mg/kg时，此时稀土Ce对芥菜叶绿素含量起促进作用，叶绿素含量随着稀土Ce浓度升高而增加；当Ce浓度大于600 mg/kg时，稀土Ce对芥菜叶绿素含量的促进作用降低，直至低于对照组并对植物产生毒害作用。

联系人：臧建成医生：13261797099（微信同号） 办公室王一岚：010-58122956，13167579442

我国大多数美术院校的油画教学模式依然是传统的具象写实手法的油画教学模式，教师大多也以讲授油画理论及技法、让学生临摹经典作品与课堂写生练习为主，而往往忽略了对学生主动创作的精神与创新意识的培养。而又在基础阶段，缺乏对“看”的理解，往往带着各种先入为主的视觉经验，失去了对事物对象本身的原初性的感受。跨越技术与审美意识的认识却是十分重要的，因为油画创作归根结底是讲究创新的，它需要艺术家具有独创精神和对美的独特视角，而在创作初期对创新意识的忽视却容易使学生陷入模式化的绘画程序中，在今后的绘画创作中重视内容和题材，轻视形式风格。

(3)在稀土Ce处理下，芥菜的根系活力呈先上升后下降的趋势。且在Ce浓度为600 mg/kg时达到最大，为5.02 mg/(g/min)。当Ce浓度小于600 mg/kg时，此时稀土Ce对芥菜根系活力起促进作用，根系活力随着稀土Ce浓度升高而增大；当Ce浓度大于600 mg/kg时，稀土Ce对芥菜根系活力的促进作用降低，直至植物根系失活。

(4)研究表明，植物的生理效应能很好的反映植株的健康情况，随着土壤Ce含量增加，芥菜中SOD活性、POD活性、CAT活性总体上均呈现先上升后下降的趋势。当超过某一浓度后，Ce对芥菜的抑制作用随Ce浓度增加而增强。

本文试图回答以下问题：(1)“do/does/did+v.”构式中的V槽位吸引的词素有哪些？(2)“do/does/did+v.”构式中的V槽位的语义聚类是什么？(3)“do/does/did+v.”构式搭配关联强度分析对外语教学有何启示？

(5)实验结果显示，土壤酶活性不仅受到根际土壤环境的影响，而且不同种类的酶受到根际土壤影响的效应也不相同。芥菜根际土壤中，土壤脲酶、磷酸酶、纤维素酶、转化酶对Ce的敏感性影响趋势相似，均表现为激活效应，激活作用先增强后减弱。而过氧化氢酶则表现为先激活后抑制，表明过氧化氢酶对Ce更敏感。总之，稀土元素Ce是影响酶活性的重要因素之一。

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