植物的雄性不育现象通常是指产生的花粉没有正常的生活力，雄性不育的表现形式有多种，如雄蕊的畸形或缺失，花药无法正常开裂，无法形成花粉等。一般烟草雄性不育的表现形式为雄蕊的缺失。烟草雄性不育多为细胞质雄性不育类型。烟草从形成雄蕊原基到形成成熟具有生活力的花粉，在此过程中要经历一系列的生理生化与形态特征等各个方面的变化。对于植物来说这是一个复杂的过程，在此过程中出现任何影响，不管是内因或外因，植株都不能形成正常的花粉，从而导致雄性不育。植物雄性不育性状是植物杂种优势利用的重要工具，具有巨大的生产利用价值。烟草的胞质不育现象在烟草的育种应用方面有着重要的意义。

烟草雄性胞质雄性不育系的形成过程，包括一系列的物质和能量代谢，涉及各种复杂的生理生化反应，对烟草胞质雄性不育系及其相应保持系的生化指标进行比较研究，有助于了解烟草胞质雄性不育系发生机制和有关代谢过程。物质代谢是植物生命活动的基础，植株间的生理生化差异，必然反映在物质代谢的差异上，而植物对物质和能量的代谢和生长发育均要通过体内的内源激素的调节来实现。鉴于此，笔者研究了烟草包质雄性不育系与其保持系生长期内源植物激素含量的变化规律和激素水平差异，为更好地应用烟草的雄性不育现象提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料 以烟草雄性不育系及其保持系为供试材料，共设3个处理，即MSK326与K326(处理①)、MSK394与K394(处理②)、MS云烟87与云烟87(处理③)。

1.2 试验方法 采用大田试验，前茬作物为水稻，土壤肥力均匀，地势平坦，有较好的灌溉条件。采用漂浮育苗的方式。株行距50 cm×120 cm种植。试验设3次重复，四周设保护行。基肥中氮肥全部为硝基磷酸铵，磷肥为普钙，钾肥为硫酸钾，硝酸钾用于追肥，基肥∶追肥=60∶40，追肥分2次施用，其他田间管理同当地优质烟叶开发生产技术规范。分别在苗期、团棵期与旺长后10 d、现蕾期和中心花开放期取样，每个小区选取5株有代表性的高频样品，苗期取整株幼苗的地上部分，团棵期与旺长后10 d用直径为1.5 cm的打孔器取烟株所有功能叶片(需烟样20.0 g)，现蕾期和中心花开放期取花蕾和所有功能叶片。用超纯水洗净，滤纸吸干，立即放入-80 ℃冰箱保存待测。

在开展小学语文教学中，运用合作学习方法以后，要对学习的效果进行总结。对于教师而言，要及时与学生进行谈话，并对作业进行批改，同时注意课堂观察，以取得更好的实施该学习方法的效果。在教学过程中，要注意经验的积累。对于存在的问题，要及时进行反思，并从中获取一些经验。在各个小组学习中，教师要对学生的合作技能进行指导，进而不断提升其学习能力。

(1)保持系与不育系的IAA含量比值在各时期叶片中均大于1，而花蕾中小于1。在所测的生长期中，保持系叶片中的IAA水平均高于不育系，花蕾和叶片中则相反，不育系花蕾中表现为IAA的积累。但一般在植株中IAA含量高的部位是营养物质输入的“库”。大量研究表明，许多雄性不育植物种类都是由于IAA的亏缺导致营养物质的输入不足，花药的发育不良，从而导致雄性不育。如CMS玉米[2]、水稻[3]、柑橘[4]、榨菜[5]、小麦[6]等植物都有相同的研究结果，这些植物的不育系花药中的IAA水平明显低于可育植株。但也有些植物的研究结果相反，如番茄雄性不育突变体sl2以及GMS和CMS油菜的不育系雄蕊中生长素的含量高于相应可育系[7-8]，这表明生长素的积累也与雄性不育的发生相关联，这可能与生长素诱导乙烯产生有关，而乙烯是公认的杀雄剂。但在烟草雄性不育系花蕾中，IAA的积累和育性的表现是否与生长素诱导乙烯产生有关还要作进一步的研究。

(2)各生育期保持系和不育系的ABA含量比值在叶片和花蕾中均大于1。不育系与保持系在现蕾期ABA含量差别最大，现蕾期过后有缩小的趋势。当植物受到环境胁迫时，体内的ABA会急剧上升，ABA的积累与抗逆性的增强存在显著正相关[9]。烟草雄性不育系的ABA含量要明显低于保持系，而相应的烟草雄性不育系的抗逆性比保持系低。在生长发育的过程遇到复杂的环境，低水平的ABA可能导致不育系的抗逆性差，这可能是导致其雄性器官发育不良的原因之一。

表1 梯度洗脱程序

Table 1 Gradient elution program

时间Time∥minA%B%09551085153070303595540955

2.4 不同处理保持系与雄性不育系各时期iPAs含量的比值比较 由表5可看出，不同处理现蕾期和中心花开放期的花蕾中保持系与不育系iPAs的含量比均大于1，中心花开放期的花蕾中K326与MSK326、K394与MSK394的iPAs含量比值均大于10。除少数的几个时期外，不同处理叶片比值均小于1。在现蕾期与中心花开放期，烟草花蕾中的iPAs含量不育系比保持系低。

2 结果与讨论

2.1 不同时期烟草雄性不育系与其保持系内源激素含量变化 由表2可知，苗期IAA的含量明显低于其他时期。保持系K326叶片中IAA的含量从苗期到中心花开放期逐渐升高，而K394与云烟87则逐渐下降。各不育系材料叶片中的IAA含量变化不大。K326叶片从苗期到中心花开放期的ABA含量有较明显的上升趋势，但其他处理没有明显的上升或下降的趋势。各处理在现蕾期和中心花开放期的叶片和花蕾中的ABA含量差别较大，花蕾中的ABA含量明显高于叶片。各不育系材料叶片中ZRs含量总体表现为先上升后下降的趋势，现蕾期叶片中ZRs含量最高。不育系与保持系苗期与团棵期ZRs含量均较低。花蕾中的ZRs含量也较低，不育系和保持系同一时期的叶与花蕾中，叶片的ZRs要明显高于花蕾。各处理不同生育期iPAs与GA含量无明显的规律性变化。

随着互联网技术日新月异，企业需要朝着大数据分析方向迈进，创造出精准成本管理模式。在企业的成本管理中，可利用大数据进行成本的实时动态管理，并提高企业的成本管理水平。现如今，有很多企业已经利用大数据时代下的信息化管理模式，企业可以利用大量信息，对企业的成本管理方式带来了巨大的变革。

表2 烟草雄性不育系与保持系各时期内源激素含量差异的比较

Table 2 Comparison of the endogenous hormone contents in tobacco male sterile lines and maintainer lines at different growth periods μg/g

项目Item处理编号Treatmentcode材料Material苗期Seedlingstage团棵期Rosettestage旺长10dProsperousgrowthfor10d现蕾期Squaringstage叶Leaf蕾Bud中心花开放期Centralfloweropeningstage叶Leaf蕾BudIAA①MSK32633.608198.215705.135255.531070.586703.215454.41K32674.628949.848903.5710794.38976.2611764.674565.90②MSK39499.109893.537860.547057.905004.827589.764319.16K394154.3514066.7610469.8310215.473029.748127.863800.92③MS云烟87129.755260.746372.695285.633502.385043.978891.88云烟87136.2213321.208143.037950.521163.617538.656847.07ABA①MSK3260.392.743.041.3918.892.7922.88K3261.033.165.5413.5041.609.2335.77②MSK3947.244.205.095.7712.965.9724.77K3949.226.197.349.9067.215.1228.19③MS云烟877.391.025.595.6239.705.0926.84云烟8710.322.538.068.91104.719.8939.51ZRs①MSK32620.3192.22335.67759.0612.50417.4346.68K32635.2653.28463.78196.528.28760.8712.39②MSK39415.0416.86380.84659.0440.90475.2143.23K39418.4620.47478.23476.6429.66543.2323.52③MS云烟8741.8897.16247.61248.42121.42189.4315.09云烟8799.7424.06287.59358.1421.71308.7627.31iPAs①MSK3266.888.2135.6634.533.6343.552.88K3260.281.1033.4730.724.8239.5629.90②MSK39410.691.2838.6035.5624.0932.214.11K39413.473.1625.0314.6428.1028.0643.08③MS云烟8717.4241.1735.9131.9521.6736.775.76云烟871.9714.8240.7233.8625.6636.899.50GA①MSK3262213.0217815.6613647.9112462.043864.1914369.2433986.79K3262341.5413047.6423793.3833986.793898.8422378.4242462.04②MSK3942018.5716253.4716603.7316083.184274.5116982.0716996.23K3942628.3621569.7820991.5426996.233221.2616741.6216083.18③MS云烟873849.131780.335403.446671.939262.407015.466671.93云烟874994.243422.987710.4111971.471687.468253.7811971.47

2.2 不同处理保持系与雄性不育系各时期IAA含量的比值比较 从表3可以看出，苗期到中心花开放期叶片中保持系IAA的含量与不育系的比值均大于1，云烟87与MS云烟87在团棵期的IAA含量比达到2.53。各时期保持系与不育系的IAA含量比值变化差异不大。而在现蕾期与中心花开放期的花蕾中，保持系与不育系的IAA含量比值与其同一时期的叶片中IAA含量比值相反，保持系与不育系的IAA含量比值小于1。其中，云烟87与MS云烟87中心花开放期的花蕾中的IAA含量比值只有0.33。可以看出烟草保持系与其不育系从苗期到中心花开放期叶片中保持系的IAA 含量高于不育系，而在花蕾中不育系的IAA含量高于保持系。

表3 不同处理保持系与雄性不育系各时期IAA含量的比值比较

Table 3 Comparison of the ratio of IAA contents of maintainer line and male sterile line in different growth stages

处理编号Treatmentcode项目Item苗期Seedlingstage团棵期Rosettestage旺长10dProsperousgrowthfor10d现蕾期Squaringstage叶Leaf蕾Bud中心花开放期Centralfloweropeningstage叶Leaf蕾Bud①K326/MSK3262.221.091.562.050.911.760.84②K394/MSK3941.561.421.331.450.611.070.88③云烟87/MS云烟871.052.531.281.50.331.490.77

2.3 不同处理保持系与雄性不育系各时期ABA含量的比值比较 从表 4可以看出，除K394与MSK394中心花开放期叶片中ABA的值小于1外，其他材料保持系各时期部位的ABA含量与不育系的比值均大于1。现蕾期的花蕾中各保持系的ABA含量均是不育系ABA含量的2倍以上，其中K394现蕾期花蕾中的ABA含量是MSK394的5.18倍。各处理进入中心花开放期后，保持系与不育系的ABA比值缩小。烟草保持系与不育系在生长过程中，叶片和花蕾中的ABA含量保持系均要高于不育系。

表4 不同处理保持系与雄性不育系各时期ABA含量的比值比较

Table 4 Comparison of the ratio of ABA contents of maintainer line and male sterile line in different growth stages

处理编号Treatmentcode项目Item苗期Seedlingstage团棵期Rosettestage旺长10dProsperousgrowthfor10d现蕾期Squaringstage叶Leaf蕾Bud中心花开放期Centralfloweropeningstage叶Leaf蕾Bud①K326/MSK3262.651.151.829.682.203.311.56②K394/MSK3941.271.481.441.725.180.861.14③云烟87/MS云烟871.402.481.441.592.641.941.47

1.4 数据处理 采用Excel软件进行测定值和平均值的计算。

表5 不同处理保持系与雄性不育系各时期iPAs含量的比值比较

Table 5 Comparison of the ratio of iPAs contents of maintainer line and male sterile line in different growth stages

处理编号Treatmentcode项目Item苗期Seedlingstage团棵期Rosettestage旺长10dProsperousgrowthfor10d现蕾期Squaringstage叶Leaf蕾Bud中心花开放期Centralfloweropeningstage叶Leaf蕾Bud①K326/MSK3260.040.130.940.891.330.9110.38②K394/MSK3941.262.480.650.411.170.8710.49③云烟87/MS云烟870.110.361.131.061.181.001.65

采用高效液相色谱法测定了3个处理烟草不育系与保持系材料5种内源植物激素的含量，结果表明内源植物激素在不育系与保持系中有较大差异。

城市林业具有双重属性，即社会属性和自然属性。社会属性将社会学、园林学、经济学、生态学等理论知识结合起来，提高城市管理水平，建设可持续发展、和谐、健康的城市，这也是生态城市建设规划的内容。自然属性就是将城市林业划分为生态系统的一部分，城市可以通过自然环境的改善，建设生态城市。

表6 不同处理保持系与雄性不育系各时期ZRs含量的比值比较

Table 6 Comparison of the ratio of ZRs contents of maintainer line and male sterile line in different growth stages

处理编号Treatmentcode项目Item苗期Seedlingstage团棵期Rosettestage旺长10dProsperousgrowthfor10d现蕾期Squaringstage叶Leaf蕾Bud中心花开放期Centralfloweropeningstage叶Leaf蕾Bud①K326/MSK3261.740.581.380.260.661.820.27②K394/MSK3941.231.211.260.720.731.140.54③云烟87/MS云烟872.380.251.161.440.181.631.81

2.6 不同处理保持系与雄性不育系各时期ZRs+iPAs含量的比值比较 表7表明，从苗期到中心花开放期的叶片中，3个处理保持系与雄性不育系各时期ZRs+iPAs含量的比值多数时期大于1，有时小于1。在现蕾期的花蕾中，除云烟87与MS云烟87的比值大于1外，另外2个处理小于1。在中心花开放时期的花蕾中，K326与MSK326的比值小于1，其他2个处理均大于1。

表7 不同处理保持系与雄性不育系各时期ZRs+iPAs含量的比值比较

Table 7 Comparison of the ratio of ZRs+iPAs contents of maintainer line and male sterile line in different growth stages

处理编号Treatmentcode项目Item苗期Seedlingstage团棵期Rosettestage旺长10dProsperousgrowthfor10d现蕾期Squaringstage叶Leaf蕾Bud中心花开放期Centralfloweropeningstage叶Leaf蕾Bud①K326/MSK3261.310.541.340.290.811.740.85②K394/MSK3941.241.301.200.710.891.131.41③云烟87/MS云烟870.952.410.902.471.090.651.65

2.7 不同处理保持系与雄性不育系各时期GA含量的比值比较 从表8可以看出，除K326/MSK326团棵期与K394/MSK394中心花开放期GA含量的比值小于1外，各处理其他时期保持系与不育系叶片中GA含量的比值均大于1。K326与MSK326现蕾期叶片中的GA比值最高，达2.73。K326与MSK326团棵期叶片中的GA比值最低，为0.73。花蕾中保持系与不育系GA含量的比值，K326与MSK326的比值均大于1，而K394与MSK394的比值均小于1，云烟87与MS云烟87的比值现蕾期小于1，而中心花开放期大于1。3个处理保持系与不育系在现蕾期花蕾中GA的比值，K326与MSK326的比值为1.01，其他2个处理小于1。中心花开放期的花蕾中，K394与MSK394的比值为0.95，其他2个处理大于1。

表8 不同处理保持系与雄性不育系各时期GA含量的比值比较

Table 8 Comparison of the ratio of GA contents of maintainer line and male sterile line in different growth stages

处理编号Treatmentcode项目Item苗期Seedlingstage团棵期Rosettestage旺长10dProsperousgrowthfor10d现蕾期Squaringstage叶Leaf蕾Bud中心花开放期Centralfloweropeningstage叶Leaf蕾Bud①K326/MSK3261.060.731.742.731.011.561.25②K394/MSK3941.301.331.261.680.750.990.95③云烟87/MS云烟871.301.921.431.790.181.181.79

3 结论与讨论

2.5 不同处理保持系与雄性不育系各时期ZRs含量的比值比较 从表6可以看出，保持系与不育系在苗期、旺长10 d、中心花开放期(叶)的ZRs比值均大于1。保持系与不育系在现蕾期花蕾中ZRs比值均小于1。中心花开放期的花蕾除云烟87与MS云烟87的比值大于1外，其他2个处理的比值小于1，因此可以看出在烟草花蕾中不育系的ZRs含量高于保持系。

1.3 内源激素的提取、纯化、测定 样品的提取、纯化和检测参考王若仲等[1]的方法进行。称取20.0 g新鲜烟样，迅速放入液氮处理2～3 min，遮光条件下将样品进行真空冷冻干燥。称取冻干样品0.50 g左右(精确至0.000 1 g)，样品中加入预冷的提取液甲醇∶水∶乙酸(V∶V∶V=15∶4∶1)8 mL，摇匀，-20 ℃避光浸提。将过夜浸提的样品4 ℃低温离心20 min，取上清液。残渣中加入5 mL预冷的提取液再次提取，振荡离心20 min，2次重复，合并上清液，再进行真空冷冻离心，去甲醇，待溶液浓缩至3 mL，加入醋酸铵8 mL进行复溶，4 ℃高速离心，取上清液。上清液过SEP-C18小柱，过柱前，小柱先用5 mL甲醇活化，然后用5 mL 1 mol/L乙酸平衡固相萃取柱，平衡后上样，收集样品中内源激素，先后以6 mL 50%甲醇、5 mL 0.35 mol/L NH4OH的60%甲醇洗脱，合并洗脱液，真空冷冻离心浓缩至干。最后样品用500 μL的80%甲醇复溶后高速离心待测。

测定色谱条件如下：流动相为A(泵)0.27%三乙胺溶液，pH=3.0，B(泵)乙腈。流速为1 mL/min，柱温为35 ℃，波长254 nm。用Zorbax SB-C18(4.6 mm × 150 mm，5 μm)色谱柱按表1梯度洗脱。5种激素按照ZRs(反玉米素核苷)、GA(赤霉素)、iPAs(N6-异戊烯腺嘌呤)、IAA(吲哚乙酸)及ABA(脱落酸)的顺序出峰，设定高效液相色谱仪(Agilent 1290，美国)测定波长为254 nm，采用紫外可见检测器进行检测。

(3)ZRs与iPAs都属于细胞分裂素类。细胞分裂素的主要生理效应是促进细胞的分裂。不同作物种类雄性的育性与细胞分裂素含量的关系不一致。如番茄[7]、榨菜[10]雄性不育株中细胞分裂素含量低于可育株；而CMS玉米[1]、辣椒[11]以及K、T型CMS小麦[6]的不育系花药组织或者花蕾与可育系相比，却表现为内源细胞分裂素类物质的积累。该试验测得数据显示，在烟草不育系与保持系的生长发育的过程中，叶片中的ZRs含量多表现为保持系高于不育系，而在花蕾中则表现为不育系低于保持系，在烟草不育系与保持系生长发育的过程中，叶和花蕾的ZRs含量表现出不同的规律。而iPAs则与ZRs大致呈相反的变化规律。在叶片中多数时期保持系要低于不育系，而在花蕾中则反之。iPAs在不育系烟株中的积累与ZRs在烟草不育系中的亏缺，特别是在花蕾中，可能与不育系植株的不育表现有关。

(4)不育系与保持系的GA含量比较显示，在生育期内

李兰芬是典型的彝族传统妇女，在家庭教育中，重视以身作则。“我父母很多时候都不说，他们都是做给你看。”张伦说。

不育系GA含量表现出无规律的升高或降低，3个处理多数时期不育系GA含量低于保持系，低浓度的GA可能是与烟草的雄性不育有关，具体机制可作进一步的研究讨论。

是一棵树，确切地说，是一棵千年古樟，在它突然闯入我手机屏幕的那一刻，我的眼睛被定住了，我用大拇指和食指不停地划拉着屏幕，将图片放大，再放大，不想放过其中任何一片树叶，就像不想放过某部精彩小说里的任何一个细节。

此外，尝试权衡农技推广岗位的公益性与市场化之间的关系，鼓励基层农技人员扶持并参与专业大户、家庭农场、农民合作社、农业产业化龙头企业等多种新型农业经营主体的产业活动的开展。在农业科技体制改革中，既要避免“一刀切”地引进市场激励机制影响农业科技公益性服务的社会公平性，又要避免过度扩大社会公平影响盈利性农业科技服务市场的公平性和市场机制激励的有效性［5］。通过制度的推进，一方面农业经营主体有专业人员的引领，另一方面使农技人员工资构成体系更加多元化，有浮动性，刺激其工作积极性、职业幸福感和获得感，取得双赢的效果。

参考文献

[1] 王若仲，萧浪涛，蔺万煌，等.亚种间杂交稻内源激素的高效液相色谱测定法[J].色谱，2002，20(2)：148-150.

[2] 夏涛，刘纪麟.生长素和玉米素与玉米细胞质雄性不育性关系的研究[J].作物学报，1994，20(1)：26-32.

[3] 黄少白，周燮.水稻细胞质雄性不育与内源GA1+4和IAA的关系[J].华北农学报，1994，9(3)：16-20.

[4] KOJIMA K.Changes of ABA，IAA and GAs levels in reproductive organs of citrus[J].Japan agricultural research quarterly，1997，31(4)：271-280.

[5] 陈竹君，张明方，汪炳良，等.榨菜胞质雄性不育及其农艺性状的研究[J].园艺学报，1995，22 (1)：40-46.

[6] 李英贤，张爱民，黄铁城.小麦细胞质雄性不育与花药组织内源激素的关系[J].农业生物技术学报，1996，4(4)：307-313.

[7] SINGH S，SAWHNEY V K，PEARCE D W.Temperature effects on endogenous indole-3-acetic acid levels in leaves and stamens of normal and male sterile“stamenless-2”mutant of tomato(Lycopersicon esculentum Mill.)[J].Plant， cell and environment，2006，15(3)：373-377.

[8] SHUKLA A，SAWHNEY V K.Metaolism of dihydrozeatin in floral buds of wild-type and a genic male line of rapeseed(Brassica napus L.)[J].Journal of experimental botany，1993，44(9)：1497-1505.

[9] 汪良驹，周燮.高等植物的脱落酸生物合成及其调节[J].植物生理学通讯，1989(2)：7-12.

[10] 陈竹君，张明方，汪炳良，等.榨菜胞质雄性不育及其农艺性状的研究[J].园艺学报，1995，22(1)：40-46.

[11] 高夕全，张子学，夏凯，等.雄性不育辣椒中几种内源植物激素的含量变化简报[J].植物生理学通讯，2001，37(1)：31-32.