猪大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌感染引起的一种常见病和多发病，主要危害仔猪，发病急，发病范围广，呈散发性或地方流行性，一年四季均可发病，常导致动物出现严重的腹泻和败血症，甚至造成死亡，对养猪业的危害极大。目前，控制本病的主要措施是使用抗菌药，然而随着抗菌药的长期和广泛使用，细菌耐药性问题日益严重，不仅给该病的防治带来了困难，且导致药物残留，危害消费者健康[1]。因此，开发抗菌药物替代品是当前新药研发的热点之一。中药具有资源丰富，价廉易得，安全无残留，不易产生耐药性等优点，成为当前寻找抗生素替代品的重要来源。大量研究表明，许多中药具有抗菌作用，部分中药还可逆转细菌耐药性，提高耐药菌对抗菌药的敏感性[2-5]。为筛选出抗猪源大肠杆菌的中药制剂，笔者于2016年3-11月进行不同中药对猪源致病性大肠杆菌的体外抗菌效果试验，以期为养猪生产上中药复方制剂和发酵制剂的研制及应用提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 中药及对照标准品 板蓝根、五倍子、鱼腥草、穿心莲、黄连、黄芩、连翘和金银花均购自泰州市国泰大药房连锁有限公司，经鉴定均符合生药质量标准；环丙沙星标准品(含量为98.9%)购自上海君瑞生物技术有限公司，环丙沙星药敏纸片(5 μg/片)购自杭州微生物试剂有限公司。

1.1.2 培养基及主要试剂 营养琼脂培养基、肉汤培养基和麦氏比浊管均购自温州市康泰生物科技有限公司。

1.1.3 菌株 试验用猪源大肠杆菌为TXH11-1、TXH5-2和MAZW7-3，由江苏农牧科技职业学院动物疫病防治实验室于2016年3-8月从泰州不同猪场发病猪粪便中分离、鉴定并保存。

计算机资源对于高校体育信息平台的多种信息资源是非常重要的。通过构建信息平台的基础构建。针对高校信息平台方面的计算机资源的虚拟化设计，主要是虚拟化物理服务器的设计，通过抽象化计算机资源，形成逻辑化的资源。之后构建独立虚拟机，在网络服务器形成隔离的虚拟服务器。先进行整理和分类现有的物理服务器，然后进行配电室虚拟化。可以让高校体育信息服务平台在计算机程序中呈现出来。

1.2 方法

1.2.1 中药提取物的制备 采用水煎法[6]。称取单味中药50 g，加水500 mL浸泡过夜，武火煎煮至沸腾，改用文火煎煮1 h，4层纱布过滤；药渣再加水400 mL煎煮1 h，过滤。合并两次滤液用文火浓缩至50 mL，使药液浓度相当于1 g/mL生药。2 500 r/min离心5 min，取上清液，高压蒸汽灭菌15 min后4℃保存，备用。

回归分析结果见表5.在建成区绿化覆盖率和人均公园绿地面积对旅游经济有显著影响(P<0.05,且回归系数>0)的城市中，依据回归系数的大小将其分为3类(显著、极显著、特别显著)，以揭示绿地对旅游经济影响的强弱,如图1和图2所示.

1.2.2 菌液制备 将菌种接种于普通营养琼脂培养基上，37℃培养24 h，挑取典型菌落接种于普通肉汤培养基中，37℃培养16～18 h，用灭菌生理盐水调整菌液浊度相当于0.5麦氏单位(菌浓度为1×108～10×108 CFU/mL)[7]，备用。

1.2.3 体外药敏试验 以TXH11-1为试验菌采用纸片法[8]和牛津杯法[9]同时对8种中药进行体外药敏试验，比较抑菌圈大小，抑菌圈直径>20 mm为高度敏感，15～20 mm为中度敏感，10～15 mm为低度敏感，<10 mm为不敏感[10]。因中药提取物有颜色，影响抑菌圈的透明度，因此试验中采用灭菌接种环挑取抑菌圈内培养物在普通琼脂培养基上划线，37℃培养24 h，确认无细菌生长才可判定为抑菌圈。选择最佳方法作为后期中药筛选的方法。

以上低压设备的选型依据《工业与民用配电设计手册》，且均为目前市场上比较流通的型号。综上所述，低压电气设备选型如表5所示。

2 结果与分析

2) 牛津杯法。取稀释后的菌悬液0.1 mL于营养琼脂培养基内均匀涂布，待培养基表面干燥后放置灭菌牛津杯，每个平皿放4个，使其中心距离不小于24 mm，牛津杯距培养皿边缘的距离不小于15 mm。牛津杯中分别加满各种单味中药煎液。同时以灭菌生理盐水和环丙沙星溶液(15 g/mL)作为对照，每个处理设3次重复。做好标记，盖上陶瓦盖，于37℃培养24 h，用游标卡尺测量抑菌圈直径，判断各种中药水提物对大肠杆菌的抑菌效果。

认知因素主要包括儿童对社会性行为的认识和对情景信息的识别等。近年来，国外的一系列研究揭示了儿童的社会认知特别是对突然行为意图的认知对儿童攻击性行为的调节作用。当儿童把自己所面临的消极后果知觉为同伴有意造成的时候，一般倾向于对同伴做出报复性攻击；反之，如果认为同伴是由于意外或出于善意的动机而给他造成了消极后果时，一般倾向于消释其恶意认定。同时，攻击性与非攻击性儿童对他人行为意图认知存在着差异，攻击性儿童在他人行为意图不明时倾向于做出敌意性归因。

[9] 陈希文，赖守勋，尹 苗，等.22种中药多糖对猪源金黄色葡萄球菌的体外抑菌活性[J].江苏农业科学，2016，44(9):264-267.

1.2.5 最小杀菌浓度(MBC)测定 在MIC试验基础上，分别挑取眼观澄清疑似无菌生长的肉汤培养物接种于灭菌琼脂培养基，于37℃培养24 h。培养基上菌落数低于5个且含药液最少的一管药液浓度即为最低杀菌浓度(MBC)。3次重复，取3次MBC的平均值作为最终结果。

1) 纸片法。取新华1号定性滤纸，用打孔器制成直径为6 mm的圆形纸片，取50片置于西林瓶中，高压蒸汽灭菌后，向西林瓶中加入1 mL中药提取液，使纸片完全吸附药液后，60℃干燥后密封保存，制成含不同中药提取物的药敏纸片。用无菌棉拭子蘸取调整好的菌液于管壁挤去多余液体，均匀涂布于营养琼脂平板，待培养基表面干燥后，选取制作的药敏纸片紧贴培养基表面，每皿4片，纸片间的中心距离不小于24 mm，纸片距培养皿边缘的距离不小于15 mm。同时以购买的环丙沙星药敏纸片作对照。每个处理设3次重复。于37℃倒置培养24 h后，用游标卡尺量取抑菌圈直径，取平均值为最终结果。

2.1 纸片法与牛津杯法测定结果比较

以TXH11-1为试验菌，对8种中药煎液采用纸片法和牛津杯法进行体外药敏试验，其中有抑菌作用的有5种中药，包括对照环丙沙星在内，牛津杯法测定的抑菌圈均较纸片法大(图)。因此，选用牛津杯法进行中药提取物的体外药敏试验。

  

图示 纸片法与牛津杯法测定结果比较

Fig. Result comparison between disk diffusion and Oxford Cup method

2.2 中药煎液体外抑菌敏感性

[10] 张赛奇，王 米，雷 娜，等.中药对猪源大肠杆菌O8体外抑菌试验研究[J].家畜生态学报，2015，36(8):62-65.

2.3 中药煎液的MIC和MBC

根据体外药敏试验选出5种具有敏感性的中药煎液进行MIC和MBC测定。从表2看出，五倍子煎液的抑菌效果最好，对3株猪大肠杆菌的MIC均为31.25 mg/mL；其次是黄连，平均MIC为62.50 mg/mL；平均MIC穿心莲为104.17 mg/mL，黄芩平均为208.33 mg/mL。板蓝根抑菌效果最差，仅对TXH11-1和TXH5-2有抑制作用(MIC≥250.00 mg/mL)，对MAZW7-3无抑制作用。

五倍子煎液的杀菌效果最好，对3株大肠杆菌的MBC为62.50～125.00 mg/mL，平均为104.17 mg/mL；其次是黄连，对TXH5-2和MAZW7-3的MBC均为62.50 mg/mL，对TXH11-1的MBC为500.00 mg/mL，对3株菌的平均MBC为208.33 mg/mL；穿心莲的MBC平均为291.67 mg/mL；黄芩对TXH11-1和MAZW7-3具有杀菌作用，MBC分别为500.00 mg/mL和250.00 mg/mL，对TXH5-2无杀菌作用；板蓝根的杀菌效果最差，仅对TXH11-1有杀菌作用，MBC为500.00 mg/mL，对其余2株菌无杀菌作用。

 

表1 大肠杆菌对8种中药的敏感性

 

Table 1 Sensitivity of three swine E. coli strains to eight Chinese traditional medicines

  

中药ChinesetraditionalmedicineTXH11⁃1抑菌圈直径(mm)敏感性TXH5⁃2抑菌圈直径(mm)敏感性MAZW7⁃3抑菌圈直径(mm)敏感性板蓝根I．tinctoria18中度敏感19中度敏感-不敏感五倍子R．chinensis21高度敏感24高度敏感22高度敏感金银花L．japonica-不敏感-不敏感11低度敏感连翘F．suspensa-不敏感14低度敏感-不敏感鱼腥草H．cordata-不敏感-不敏感-不敏感穿心莲A．paniculata19中度敏感22高度敏感18中度敏感黄连C．chinensis16中度敏感24高度敏感24高度敏感黄芩S．baicalensis16中度敏感15中度敏感19中度敏感

注:-表示未见明显抑菌圈。

Note: -means no obvious inhibition zone.

 

表2 单味中药煎液对大肠杆菌的MIC和MBC

 

Table 2 MIC and MBC of different single Chinese traditional medicine decoction on three swine E. coli strains mg/mL

  

中药ChinesetraditionalmedicineMICTXH11⁃1TXH5⁃2MAZW7⁃3平均MBCTXH11⁃1TXH5⁃2MAZW7⁃3平均板蓝根I．tinctoria250．00500．00>500．00≥250．00500．00>500．00>500．00≥500．00五倍子R．chinensis31．2531．2531．2531．25125．0062．50125．00104．17穿心莲A．paniculata125．0062．50125．00104．17250．00125．00500．00291．67黄连C．chinensis125．0031．2531．2562．50500．0062．5062．50208．33黄芩S．baicalensis250．00250．00125．00208．33500．00>500．00250．00≥250．00

3 结论与讨论

3.1 体外药敏性测定方法的选择

体外药敏试验常用方法有打孔法、纸片扩散法和牛津杯法等，不同方法的测定结果可能存在差异。打孔法因药物在琼脂内扩散慢，对某些快速生长的病原菌抑制不完全，导致抑菌圈内菌苔乱、薄或不生成抑菌圈，影响结果判定。试验对纸片扩散法和牛津杯法进行比较发现，牛津杯法测得的抑菌圈普遍大于纸片法，其原因可能是牛津杯法较纸片法载药量多，抗菌成分溶解更充分，有利于在琼脂培养基中的扩散。因此，选定牛津杯法作为抗菌中药初步筛选的最佳方法。

3.2 中药煎液的体外抑菌作用

选取五倍子等8种中药煎液对猪源大肠杆菌TXH11-1、TXH5-2和MAZW7-3进行体外抗菌试验，其中，五倍子、黄连、黄芩、穿心莲和板蓝根均具抗菌作用，与李淑红等[3，12]的研究结果一致，但MIC和MBC存在差异，可能与所用中药材的产地、采集时间、提取工艺、大肠杆菌来源及血清型等有关。中药成分复杂，不同有效成分溶于不同溶剂，有些抗菌成分可能不溶于水。因此，采用中药煎液进行体外抗菌试验，可能导致MIC和MBC偏高，或煎液虽无抑菌作用但其他溶剂提取物可能具有抑菌活性；高温煎煮、浓缩和高压蒸汽灭菌对药效可能产生一定影响。因此，有必要进一步比较不同提取工艺、浓缩和灭菌方法对中药抗菌效果的影响，以最大限度发挥中药的抗菌活性。中药的抑菌作用可能是单一成分，也可能是多种成分共同作用的结果。试验中五倍子的抗菌效果最好，其主要抗菌成分为没食子酸，其次是槲皮素[13]。黄连具有抗菌、抗炎、增强免疫和抑制肠道平滑肌自主收缩等作用[14]，是治疗腹泻的常用中草药，富含小檗碱、药根碱和巴马汀等多种活性成分，共同发挥抗菌作用[15]。黄芩素是黄芩抗菌的主要活性成分，抑制大肠杆菌的作用可能与其对ATP合成酶的抑制作用有关[16]。穿心莲内酯是穿心莲的主要活性成分之一，具有广谱抗菌作用，对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、甲型链球菌、乙型链球菌和白酵母等具有较强的抑菌活性[17]。鱼腥草、金银花和连翘对3株试验菌基本无抑制作用，与陆霄鹤等[18-19]的研究结果不一致，可能是因大肠杆菌来源不同，对药物敏感性表现不一；或中药提取工艺不同，提取液中有效成分及其浓度不同，导致抑菌试验结果亦不同。

体外抗菌试验仅提示中药是否含有直接抑杀病原菌的有效成分及其抗菌活性，但其有效成分进入体内可能发生化学结构的改变，导致抗菌活性与体外试验不完全一致。因此，中药的临床抗菌效果必须通过动物体内试验进行验证。此外，临床上中药极少单用，以复方为主，但不同中药组合后其抗菌活性可能增强或减弱，还需通过联合抑菌试验来筛选中药复方。

[参 考 文 献]

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（38）a.虽然遭到父亲的强烈反对，她还是义无反顾地走上模特之路。不过Kitty也曾因为不注意控制饮食，身材一度胖到不可收拾……看上去完全无法将她和硬照上的形象联系在一起。（新浪时尚2018-09-25）

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语文写作素材的积累和运用是提高学生写作水平的关键因素，一篇优秀的议论文不仅需要学生有丰富的语文素材积累，更需要学生能够对素材进行正确的选择、运用，达到既突出中心思想，也增强作文文采的效果。

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此次人事变动的另一个重要变化，是华夏幸福将确立南北双总部的运营模式，即原有业务及其管理团队总部仍在北京，由包括俞建在内的“新高管团队”管理的业务总部设于深圳。从更高战略层面看，南北双总部加上吴向东+俞建的组合，将有利于华夏幸福实现新的突破。

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会计电算化通俗来讲就是利用计算机进行会计工作，在会计工作中应用了电子计算机技术。具体的说，就是利用电子计算机完成会计工作过程，完成在人很难完美进行的会计工作。以电子计算机为主，运用当代电子技术，运用当代信息技术，这是会计电算化的核心构成，会计电算化是一个使用电子计算机为核心工具实现的会计工作的信息系统。对于自动处理数据是一大进步，会计电算化也能改变传统的手工会计信息系统。会计电算化是会计发展的必然结果。

1.2.4 最小抑菌浓度(MIC)测定 根据体外药敏试验结果，选取有抑菌作用的中药提取物采用试管二倍稀释法[11]按无菌规程操作测定MIC。取灭菌试管13支，编号。每管先加入灭菌营养肉汤2.0 mL，向第1管中加入中药煎液(相当于1 g/mL生药)2.0 mL，混匀后取出2.0 mL放入第2管，依此类推，直到第10管，弃去2.0 mL，第11管加入2.0 mL环丙沙星(15 μg/mL)作阳性对照，第12管不加任何药物，第13管为肉汤培养基对照。除第13管外，其余每管中再加入稀释为0.5个麦氏浊度的菌悬液25 μL，于37℃培养24 h，观察结果。经培养后肉汤为澄清，振摇后仍为澄清的视为无菌生长；若培养管中浑浊则表明有菌生长。无菌生长且含药最少的一管药液浓度即为MIC。为减少误差，每种药3次重复，取3次MIC的平均值作为最终结果。

目前，全球100多个国家和国际组织积极支持和参与“一带一路”建设，联合国大会、联合国安理会等重要决议也纳入“一带一路”建设内容。为了更好地推进“一带一路”建设，搭建“民心相通”的桥梁，必然要求推进志愿服务国际化。目前志愿服务国际化有三种形式载体：政府间交往、企业志愿服务、个人志愿服务，志愿者们通过这三种形式为各国家地区的交流活动、教育、医疗、社会管理等提供国际化的志愿服务。“一带一路”倡议的发展无疑是一个强大的助推器，助推了参与“一带一路”沿线各国家在科学、教育、文化、卫生、民间交往等各领域的广泛合作，为中国志愿服务国际化发展赢得新机遇。

采用牛津杯法测定8种中药煎液对3株猪源大肠杆菌的敏感性(表1)，其中五倍子对3株大肠杆菌的抑菌作用最强，均为高度敏感；其次是黄连，TXH5-2和MAZW7-3对其高度敏感，TXH11-1中度敏感；穿心莲作用较黄连弱，仅TXH5-2对其高度敏感，另2株中度敏感；3株大肠杆菌均对黄芩中度敏感；试验菌对板蓝根敏感性表现不一，TXH11-1和TXH5-2表现中度敏感，MAZW7-3不敏感；MAZW7-3对金银花、TXH5-2对连翘均表现低度敏感，2种药均对其余菌不敏感；鱼腥草对3株试验菌株均无抑菌作用。

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第二个问题是对情境的创设过于单一，许多教师在创设情境的过程中习惯采用多媒体设备，虽然多媒体设备是一种很好的情境创设手段，但是如果无论什么情况下都采用多媒体就会导致教师教学内容单一，同时会影响到教师讲课的积极性，影响了教师的责任心。另外，对于学生来说，采用多媒体技术虽然让学生更好的理解教师所创设的情境，但是却很难开发与提高学生的思维能力与想象力，也限制了学生自主思考能力的提高，长此以往会限制学生的个人发展。

实践证明，国家的大政方针政策，在基层的贯彻落实是至关重要的。我们作为文化工作者，有责任有义务，把党和国家的文化惠民政策，贯彻落实到广大人民群众中去。我们作为文化工作者，奋斗在一线，就要用我们的智慧和汗水，把文化这块阵地守护好，培植好，浇灌好百花园中的每一朵健康美丽的花朵，为广大人民群众提供精神的芬芳，让每个人都能够享受到改革开放给我们带来的物质和精神成果。