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五味子化学成分的分离和结构鉴定*

更新时间:2009-03-28

五味子为木兰科五味子Schisandra chinensis(Turcz.)Baill.的干燥成熟果实,最早记录在《神农本草经》中,资源丰富,主要产地位于我国东北三省。五味子能够收敛固涩,益气生津,补肾宁心[1]。能够改善记忆力、促进睡眠、保护肝脏、增强免疫,同时还具有抗疲劳、抗衰老、抗肿瘤等多种生理活性[2]

女警官戴上警帽,倾身何良诸,低声道:“别指望再摸到好牌,要把手中的牌打好。”见何良诸迷惑不解,她说:“我没有见过你。”女警官站起身,一只手抚住臀部,上身后仰,凝视何良诸,又垂下浓密的眼睫毛,推开椅子,扭身走了。

1 实验部分

1.1 实验材料

实验用药材采自黑龙江省清河育林林场,经黑龙江中医药大学药学院中药鉴定教研室鉴定为北五味子S.chinensis的干燥果实,标本保存在黑龙江中医药大学中医药研究院;

二氯甲烷、乙酸乙酯(天津市富宇精细化工有限公司);色谱甲醇(北京百灵威科技有限公司);分析甲醇(西陇化工股份有限公司)。

超导核磁共振光谱仪器选用Bruker-400光谱仪,TMS为内标,δ表示化学位移值,s表示单峰,d表示二重峰,t表示三重峰,q表示四重峰,m表示多重峰信号,偶合常数的单位为Hz;2695-2998型分析型 HPLC(Waters公司);2489-2545型制备型HPLC(Waters公司);分析型色谱柱Waters Symmetry C18(4.6×150mm,5μm);制备型色谱柱 Waters SunFire Prep C18(19×150mm,3.5μm);EYELA型旋转蒸发仪(上海爱朗仪器有限公司)。

1H NMR(CD3OD)δ:3.60(each3H,s,2×CH3),2.88(1H,d,J=15.4Hz,H-2),2.76(1H,d,J=15.4Hz,H-4);

1.2 药材的提取、分离与纯化

将五味子药材用70%乙醇加热回流提取3次,每次2h,滤过,合并乙醇液,减压回收乙醇,得到乙醇提取物,以适量水混悬,用乙酸乙酯进行萃取。

选取有效组分样品190g,用适量甲醇溶解,按1∶1比例加入80~100目硅胶拌样,水浴挥干甲醇,放入干燥器中备用。选取200~300目硅胶,干法装柱、干法上样进行柱色谱分离。依次以二氯甲烷~甲醇从 70∶1、50∶1、20∶1、10∶1、5∶1、3∶1、1∶1、0∶1进行梯度洗脱,每300mL收集一个流分,回收溶剂。根据TLC检验结果,合并相同组分后得到5个部分,记为Fr.I~V。分别对这5个部分采用ODS柱层析的分离方法进行进一步分离纯化,最后在Fr.I部分中得到化合物2(6.79mg),在Fr.II部分中得到化合物 4(12.41mg)和化合物 5(6.73mg),Fr.III中得到化合物 1(22.43mg)和化合物 3(5.34mg),Fr.IV中得到化合物6(5.11mg)和化合物8(40.15mg),Fr.V中得到化合物7(3.38mg)。

“人工智能+医疗”产业快速发展,大量的创新方案随之涌现,现行专利制度能否对这些创新方案提供有效的保护?专利审查及司法实践中尚存哪些争议及难点问题?专利授权、确权及维权阶段,判断标准和把握尺度能否统一?这些话题已成为业界关注的热点。

项目区主要建设工程内容:香乐和宁固片对输水渠道采用混凝土梯形防渗;新庄片区新建提水泵站1处,并采用管道输水;新营更新机井1眼,采用高效节水的滴管灌溉。主要工程包括:新建输水防渗渠42 210 m,铺设PVC塑料输水管道4 330 m,更新配套水泵3台,渠系建筑物848处。新增节水灌溉面积466.67 hm2。

  

图1 从五味子中分离得到的化合物Fig.1 Structures of compounds 1~8 isolated from Schisandra chinensis

2 结构鉴定数据

化合物1无色结晶(MeOH),UV光谱(MeOH):λ max 215.5nm;1H NMR (CD3OD):δ6.68(1H,s,H-4),6.63 (1H,s,H-11),2.51 (1H,d,J=13.6Hz,H-9),2.79(1H,dd,J=14.3,2.2Hz,H-9),0.76(3H,d,J=7.2Hz,8-CH3),1.16 (3H,s,7-CH3),1.76(1H,t,J=7.6Hz,H-8),2.34 (2H,m,H-6),3.77×2,3.40×2,3.84,3.81(6×OCH3);

使用AMOS进行结构方程建模及分析,以找出船员疲劳与疲劳影响因子之间的联系,船员的负荷矩阵见表5,基本研究方法见图2。

(1)固定资产投资。本工程建设期为1年,正常运行期30年,社会折现率8%。其固定资产总投资2504.78万元。根据规定,需对工程投资概算进行调整,主要剔除属于国民经济内部转移支付的计划利润、三税税金和设备储备贷款利息等,调整后的总投资为2253万元。

化合物2淡黄色油状物(MeOH),UV光谱(Me OH):λmax(nm)203.7、226.1、274.7;

1H NMR (CDCl3)δ:7.72(1H,dd,J=5.7,3.3Hz,H-2),7.53 (1H,dd,J=5.7,3.3Hz,H-3),4.31(2H,t,J=6.7Hz,H-6),1.72(2H,m,H-7),1.44(2H,m,H-8),0.96(3H,t,J=7.4Hz,H-9);

13CNMR(CDCl3)δ:133.01(C-1),129.53(C-2),131.60(C-3),168.41(C-4),66.26(C-6),31.26(C-7),19.88(C-8),14.42(C-9)。将 1H NMR 和 13CNMR 波谱数据与已知文献对照[4],数据基本一致,故鉴定化合物2为邻苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate)。该化合物为首次在五味子中分离得到,曾有研究人员在当归药材中分离得到该化合物。

化合物3 白色粉末(MeOH),UV光谱(MeOH):λmax 197.8nm;

其下所录的“《嵇中散集》一册”不知何本。从黄本衍生而出的有:汪士贤《二十一名家集本》十卷本,张溥《汉魏六朝百三名家集》一卷本,张燮所刻六卷本。若是张薄一卷本,它不可能不着录《汉魏六朝百三名家集》。因而它应当不属于黄本系统,而是因承叶盛一册本《嵇康文集》而来,或者是因仍吴宽《嵇康集》钞校本。

《明报》之后,他的江湖早只剩下了武侠的江湖,曾经纵横论政、夜半文章的政论世界早已消失。但如果靠着他的武侠小说,他建造的这个江湖世界也许真的可做到以一人敌一国,那是母语的力量,是他用母语造出来的一个世界。可以说,他创造了一个人的江湖,这里有水深浪阔、风波不息,也曾有侠骨柔情、剑胆琴心,哪怕如今只留下浑浑噩噩、苟苟且且。

1H NMR(CD3OD)δ:2.76(each1H,d,J=15.4Hz,H-2),2.88 (each1H,d,J=15.4Hz,H-4),3.60(3H,s,H-7);

13C NMR(CD3OD)δ:152.63(C-1),141.43(C-2),154.48 (C-3),108.83 (C-4),140.88(C-5),36.36(C-6),42.33(C-7),35.18(C-8),40.04(C-9),135.64(C-10),112.23(C-11),153.19(C-12),141.08(C-13),152.48(C-14),124.70(C-15),123.62(C-16),12.91(C-17),22.08(C-18),61.40,61.39,60.99×2,56.49,56.45(6×OCH3)。将化合物 3 的 1H NMR和13CNMR波谱数据与已知文献[5]进行对照,数据基本一致,因此,推定化合物3为五味子甲素(Deoxyschizandrin)。

化合物5 无色结晶(MeOH),UV光谱(MeOH):λmax 195.4nm;

通过理化鉴别、UV、1H NMR和13C-NMR等波谱学手段,确定出8个单体化合物的化学结构,8个化合物结构式如图1所示。

本文综合考虑了运输成本、运输时间及服务水平,研究了基于成本价值的深圳港水上“巴士”经济性问题,并分析了运输需求量及运价对路径经济性的影响,结果表明:1) 当集装箱量较小时,集装箱拖车因其灵活性而更占优势,随着集装箱量的增加,驳船的规模运输带来的优势更加明显;2) 运价对水上“巴士”经济性的影响作用显著,随着运价的增加其经济性减弱.结合实际及研究结果提出的适当降低中转节点服务价格、推行单航线多支线港运营等对策可以有效降低客户与航运公司双方成本,提高驳船满载率,提高港口竞争力.本文研究不仅可为货主选择路径提供依据,为深圳港相关部门管理与决策提供方向,也可为路径选择的理论研究提供思路.

13C NMR(CD3OD)δ:152.65(C-1),141.52(C-2),153.28(C-3),112.31(C-4),134.97(C-5),42.27(C-6),73.58(C-7),42.56(C-8),36.02(C-9),136.24 (C-10),112.07 (C-11),153.41(C-12),141.44(C-13),152.49(C-14),124.55(C-15),124.78 (C-16),16.34 (C-17),29.78(C-18),56.49,56.39,61.02,61.06,61.37,61.42(6×OCH3)。将1H-NMR和13CNMR等波谱数据与已知文献对照[3],数据基本一致,故鉴定化合物1为五味子醇甲(Schisandrin)。

13C NMR (CD3OD)δ:44.01(C-2,C-6),52.16(C-7,C-8),74.22(C-3),171.84(C-1,C-5),176.38(C-6)。将1H NMR和13CNMR等波谱数据与已知文献对照[6],数据基本一致,故鉴定化合物4为柠檬酸双甲酯(1,5-dimethyl citrate)。

化合物4 无色结晶(MeOH),UV光谱(MeOH):λmax 194.3nm;

1H NMR(CD3OD)δ:6.63(2H,d,J=7.4Hz,H-4,H-11),3.82,3.78,3.77,3.41 (6×OCH3),2.60(dd,1H,J=13.6,7.6Hz,H-6),2.41(dd,1H,J=13.6,1.7Hz,H-6),2.20(dd,1H,J=13.2,9.5Hz,H-4),2.05(1H,d,J=13.0Hz,H-8),1.87 (1H,dd,J=13.1,6.3Hz,H-9),1.73(1H,d,J=6.8Hz,H-9),0.96(3H,d,J=7.2Hz,18-CH3),0.69(3H,d,J=7.1Hz,17-CH3);

13C NMR(CD3OD)δ:44.02(C-2,C-4),52.16(C-7),74.24(C-3),171.85(C-1,C-5)。将 1H-NMR和13C-NMR等波谱数据与已知文献对照[7],数据基本一致,故鉴定化合物5为柠檬酸单甲酯(2-methyl citrate)。

化合物6 无色结晶(MeOH),UV光谱(MeOH):λmax 216.7nm;

1H NMR(CD3OD)δ:6.77(1H,s,H-4),6.47(1H,s,H-11),5.50(1H,s,H-6),1.84(1H,dq,J=14.5,7.3Hz,H-8),2.47 (1H,ddd,J=13.9,9.7Hz,H-9),2.05(1H,d,J=13.9Hz,H-9),1.20 (3H,s,H-17),5.89(1H,s,H-22),5.79(1H,s,H-22),5.96(1H,qd,J=7.0,1.4Hz,H-26),1.62(3H,d,J=7.1Hz,H-27),1.48(3H,s,H-28),3.62,3.38,3.86,3.77(4×OCH3);

13CNMR(CD3OD)δ:152.72(C-1),142.68(C-2),152.81(C-3),112.91(C-4),138.95(C-5),86.29(C-6),73.26 (C-7),43.91 (C-8),37.30(C-9),133.63(C-10),103.51(C-11),135.70(C-12),150.22(C-13),141.83(C-14),123.38(C-15),122.85(C-16),28.97(C-17),19.20(C-18),61.01(C-19),56.48(C-20),61.25(C-21),101.90(C-22),59.37(C-23),167.82(C-24),128.74(C-25),137.33(C-26),14.36(C-27),11.67(C-28)。将1H NMR和13CNMR等波谱数据与已知文献[8]进行比对,数据基本一致,故鉴定化合物6为五味子酯丙(Schisanthe-rin C)。

化合物7 无色结晶(MeOH),UV光谱(MeOH):λmax 211.9nm;

1H NMR(CD3OD)δ:6.69(1H,s,H-4),2.56(1H,d,J=13.7Hz,H-6),2.35(1H,dd,J=13.7,7.5Hz,H-6),1.86(1H,m,H-8),2.81(1H,dd,J=14.3,2.2Hz,H-9),2.28(1H,d,J=13.8Hz,H-9),6.65(1H,s,H-11),0.80(3H,d,J=7.2Hz,H-17),1.16(3H,s,H-18),5.95(1H,m,H-3'),1.70(3H,s,H-4'),1.65(3H,m,H-5'),5.96(1H,d,J=1.2Hz,OCH2O),5.94(1H,d,J=1.2Hz,OCH2O),3.82,3.72,3.34(3×OCH3);

13CNMR(CD3OD)δ:141.30(C-1),140.26(C-2),152.48(C-3),112.71(C-4),132.64(C-5),42.26(C-6),73.40(C-7),42.49(C-8),35.66(C-9),134.36(C-10),109.94 (C-11),149.19 (C-12),136.03(C-13),153.61(C-14),123.37(C-15),125.22(C-16),16.27(C-17),29.98 (C-18),165.93 (C-1'),128.36(C-2'),138.98(C-3'),15.82(C-4'),20.55(C-5'),61.24(OCH3-14),60.94(OCH3-2),56.40(OCH3-3),103.24(OCH2O-12,13)。将化合物7的1H NMR和13CNMR等波谱数据与已知文献[9]进行对比,数据基本一致,鉴定化合物7为Schinlignan E。

供给情况:国产钾方面,盐湖装置正常运作,厂家库存维持低位;青海盐湖上调11月报价,基准产品60%晶粉到站价上调50元/吨至2400元/吨,恢复返利政策50元/吨。进口钾方面,到船量仍较少,大合同货源预计11月中下旬开始到货;港口钾库存降至160万吨左右,62%俄白钾主流报价降至2480-2500元/吨。边贸钾方面,库存一般,到货量略增,但可售现货仍较少,62%俄白钾报价维持在2250-2300元/吨。

化合物8 透明无定形结晶(MeOH),UV光谱(MeOH):λmax 214.3nm;

1H NMR(CD3OD)δ:6.80(1H,s,H-4),2.57(1H,d,J=13.7Hz,H-6),2.40(1H,dd,J=14.4,8.4Hz,H-6),1.97(1H,m,H-7),2.85(1H,dd,J=14.4,2.4Hz,H-9),2.27(1H,d,J=13.9Hz,H-9),6.63(1H,s,H-11),0.80(3H,d,J=7.1Hz,H-18),1.15(3H,s,H-17),5.92(1H,m,H-3'),1.76(3H,s,H-4'),1.67(3H,m,H-5'),3.29,3.38,3.73,3.81,3.86(5×OCH3);

13CNMR(CD3OD)δ:152.43(C-1),140.65(C-2),153.09 (C-3),114.04 (C-4),135.93(C-5),42.65(C-6),73.67(C-7),42.23(C-8),37.49(C-9),136.26(C-10),112.37(C-11),153.63(C-12),141.22(C-13),143.39(C-14),123.49(C-15),124.66(C-16),16.36(C-17),29.07(C-18),167.35(C-1'),128.85(C-2'),138.72(C-3'),20.56(C-4'),15.68(C-5'),61.29,61.22,61.06,56.55,56.39(5×OCH3)。将化合物 8 的 1H NMR和13CNMR等波谱数据与已知文献[10]进行对比,数据基本一致,鉴定化合物8为当归酰戈米辛H(Angeloylgomisin H)。

3 结论

本文应用正相硅胶柱色谱、ODS柱色谱、制备型和分析型HPLC及重结晶等方法对五味子提取物的乙酸乙酯部位的化学成分进行了系统研究,从五味子乙酸乙酯部位中分离得到了8个化合物,并应用理化性质、核磁共振氢谱、核磁共振碳谱对其进行结构确证。

阿尔茨海默病(AD)是一种以进行性认知功能障碍和记忆力损害为主的中枢神经系统退行性疾病,随着世界人口的老龄化日趋加剧,AD已成为严重影响老年人健康的社会问题。本文通过对传统中药材五味子有效萃取部位的化学成分研究为五味子有效化学成分的体内抗AD研究奠定了基础。

参考文献

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于浩然,高翔,田振坤,吴伦
《化学工程师》 2018年第04期
《化学工程师》2018年第04期文献

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