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尿液有形成分分析联合血清降钙素原检测在尿路感染诊断中的应用价值

更新时间:2009-03-28

尿路感染是医院获得性感染和社区获得性感染中最常见的一种类型,是由各种病原微生物在尿路中生长、繁殖所引起的炎症性疾病。非复杂性尿路感染、无症状性尿路感染与首次发生的尿路感染常由大肠埃希菌引起,医院获得性、复杂性与复发性尿路感染多由肠球菌、克雷伯杆菌、变形杆菌和铜绿假单胞菌等所致[1]。目前,尿液细菌培养仍然是诊断尿路感染的金标准[2],但其缺点是耗时,从培养到鉴定至少需要2~3 d,这大大影响了对患者的早期诊断与治疗,不利于患者的预后。另外,并不是所有尿液细菌培养都会得到阳性结果,盲目对所有标本进行培养会造成时间和资源的浪费。因此,需找到一种简便、快速、准确的方法,以满足临床的需求。本研究运用UF-1000i全自动尿有形成分分析仪(简称UF-1000i),探讨尿液有形成分分析联合血清降钙素原(procalcitonin,PCT)检测在尿路感染诊断中的应用价值。

1 材料和方法

1.1 标本来源

收集2015年7月—2016年12月苏州大学附属第二医院门诊以及住院疑似尿路感染患者的尿液标本1 372例,其中男性患者标本754例、女性患者标本618例。按无菌操作要求,留取患者中段尿于无菌尿杯中。所有标本均及时送检,标本转运时间均符合要求,并在2 h内完成检测。

1.2 仪器和材料

UF-1000i及配套试剂(日本Sysmex公司),血平板(上海科玛嘉微生物技术有限公司),接种环(江苏姜堰市康达实验器材厂),高压灭菌器(天津开发区合普工贸有限公司),培养箱(美国Thermo公司),Phoenix-100全自动细菌鉴定/药敏系统(美国BD公司),一次性无菌尿杯及无菌试管(浙江拱东医疗器械股份有限公司),cobas e411全自动电化学发光免疫分析系统(瑞士Roche公司)。

在最近由上海市商务委员会和上海市外商投资协会联合召开的“辉煌外资四十年 风雨同舟再出发”——上海市外资企业表彰、双优百强发布会上,上海卡博特公司作为在上海深耕30年以上的外资企业代表获得了“基业长青”荣誉证书。这是上海市政府为表彰外商投资企业对上海经济、社会发展的突出贡献,集中展现改革开放40年来上海利用外资领域取得的成就,并对有突出贡献的企业和个人予以表彰。

1.3 方法

1.3.1 尿液细菌培养 接收标本后,先将标本充分混匀,用移液枪吸取10 μL标本至血平板上,用经高压灭菌的接种环以连续划线方式进行接种。将接种后的血平板放置于(35±1)℃的二氧化碳培养箱内进行孵育,孵育时间为18~24 h。观察孵育后的血平板,对尿液细菌培养结果为阳性的血平板进行菌落计数。以革兰阴性杆菌的菌落计数>105 CFU/mL、革兰阳性球菌的菌落计数>104 CFU/mL为有临床意义 [3-4]。对菌落进行菌种鉴定,鉴定到种。若同一份标本中培养出3种及以上的病原微生物,这可能与标本收集或处理不当有关,则判定该标本为污染标本。连续孵育48 h后,血平板上无细菌生长,则尿液细菌培养结果为阴性。

UF-1000i阳性组的PCT水平与UF-1000i阴性组和正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),与尿液细菌培养阳性组比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表5。

以尿液细菌培养结果为金标准,根据UF-1000i白细胞计数和细菌计数结果绘制ROC曲线。白细胞计数的曲线下面积(area under curve,AUC)为0.723,最佳临界值为27.5/ μL。细菌计数的AUC为0.916,最佳临界值为143.5/ μL。见图1、图2、表1。

1 372例标本中有34例尿液细菌培养结果包含3种及以上的病原微生物,判定为污染标本。1 338例合格标本中结果阳性有341例,阳性率为25.5%,其中男性患者标本124例,女性患者标本217例。革兰阳性球菌102株,革兰阴性杆菌222株(126株为大肠埃希菌),其余为酵母菌。

1.4 统计学方法

将尿液细菌培养结果与UF-1000i尿液有形成分分析结果进行比较,结果表明尿液细菌培养结果与UF-1000i细菌散点图信息的符合率为57%(194/341)。见表4。

到了第三阶段,随着“社会养老服务”的概念正式出现在官方话语中并从此成为我国养老事业的核心概念,对于“社会”的用法更加清晰、逐渐定型。将“社会养老为补充”更改为“机构为支撑”,这标志着将“社会养老”不再简单等同于“机构养老”。“社会养老服务体系”主要由居家养老、社区养老和机构养老等三个有机部分组成,那么就是说“居家”“社区”和“机构”都属于社会的范畴,至此“社会”狭隘的地点性含义彻底被摒弃,这使得“社会”概念有了回归其本身广泛内涵的可能性。

2 结果

2.1 尿液细菌培养结果

本届展会以“科学发展·低碳节能”为主题,以科技创新、清洁高效、节能减排为主要内容,来自中国及其他近10个国家的煤炭企业、煤炭洗选设备制造企业、煤矿节能及环保设备企业、煤化工及石化企业和相关科研院所的200多家单位参加了展览,展览面积超过1.3万m2,集中展示了煤炭洗选加工、资源综合利用、发展循环经济、矿区生态环境保护和煤化工及石油化工等领域的新技术、新工艺、新产品和新成果,充分体现了绿色、低碳、环保的理念。人民日报等20多家新闻媒体对展览会进行了采访报道。

2.2 ROC曲线绘制及最佳临界值判断

1.3.3 血清PCT检测 共检测550例标本的血清PCT(cobas e411全自动电化学发光免疫分析系统)。排除存在其他部位感染的患者标本146例,将其余的404例标本分为尿液细菌培养阳性组、尿液细菌培养阴性组和UF-1000i阳性组(白细胞计数、细菌计数同时阳性)、UF-1000i阴性组(白细胞计数、细菌计数同时阴性),与正常对照组(体检健康者87名)进行比较,并进行统计学分析。

  

图1 UF-1000i检测尿液白细胞计数的ROC曲线

  

图2 UF-1000i检测尿液细菌计数的ROC曲线

 

表1 白细胞计数和细菌计数诊断尿路感染的AUC最佳临界值

  

项目 AUC(95%可信区间) 临界值白细胞计数 0.723(0.659~0.787) 27.5/μL细菌计数 0.916(0.879~0.954) 143.5/μL

以大于白细胞计数和细菌计数的最佳临界值为阳性,1 338例标本中白细胞计数阳性667例,细菌计数阳性403例。UF-1000i细菌计数、白细胞计数与尿液细菌培养之间的关系见表2。单独以白细胞计数阳性作为筛查指标时,敏感性为80.1%,特异性为60.5%,阳性预测值为40.9%,阴性预测值为89.9%;单独以细菌计数阳性作为筛查指标时,敏感性为80.1%,特异性为87.0%,阳性预测值为67.7%,阴性预测值为92.7%;以细菌计数阳性或白细胞计数阳性作为筛查指标时,敏感性为90.0%,特异性为55.3%,阳性预测值为40.8%,阴性预测值为94.2%;以细菌计数阳性和白细胞计数阳性作为筛查指标时,敏感性为69.2%,特异性为92.7%,阳性预测值为76.4%,阴性预测值为89.8%。见表3。

由于缺乏思维的训练,学生课堂呈现“过快、过慢、过乱、过粗、过浅”的状态。“过快”指想到什么脱口而出,成为课堂的抢答仪;“过慢”指说话吞吞吐吐,宛若锯了嘴的葫芦;“过乱”指回答杂乱无章,思绪乱如麻;“过粗”指捕捉信息不全面,成了小小马虎眼;“过浅”指缺乏独立思考,生产附和的应声器。种种思维训练缺位的现象导致学生思维的零碎化、片段化、无序化。如何在课堂上锻造思维的利“箭”,稳稳射中语文的“靶心”?

2.3 UF-1000i细菌散点图信息分析

采用SPSS 16.0软件进行统计分析。非正态分布数据以中位数(M)[四分位数(P25P75)]表示,组间比较采用U检验。采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评价UF-1000i白细胞计数和细菌计数诊断尿路感染的价值。以P<0.05为差异有统计学意义。

 

表2 UF-1000i细菌计数、白细胞计数与尿液细菌培养的关系

  

尿液细菌培养 例数 白细胞计数 细菌计数 细菌计数或白细胞计数 细菌计数和白细胞计数阳性 阴性 阳性 阴性 阳性 阴性 阳性 阴性阳性 341 273 68 273 68 307 34 236 105阴性 997 394 603 130 867 446 551 73 924合计 1 338 667 671 403 935 753 585 309 1 029

2.4 血清PCT检测结果分析

1.3.2 UF-1000i尿液有形成分分析 将尿液细菌培养后剩余的标本立即混匀,倒10 mL至无菌试管中,运用UF-1000i对标本进行白细胞计数和细菌计数。根据UF-1000i分析软件提供的数据,记录白细胞计数及细菌计数的结果,并分析细菌散点图信息与尿液细菌培养结果的符合性。

尿路感染发病率高,多发于老年人、育龄女性和免疫力低下者,主要由细菌感染引起,如果治疗不当或延误治疗,容易转化为慢性尿路感染,影响患者的身心健康。目前,诊断尿路感染依旧以尿液细菌培养结果为金标准。尿亚硝酸盐和白细胞酯酶可为临床诊断尿路感染提供依据[5]。然而,尿干化学检测结果与尿液细菌培养结果相关性差,影响因素较多。尿液有形成分人工镜检可提高尿路感染筛查的可靠性。然而,在实际工作中,临床实验室标本量大,工作繁忙,人工镜检难以广泛应用。UF-1000i因快速、定量、易于质量控制等优点得到了广泛使用。

 

表3 细菌计数、白细胞计数单独或联合使用在尿路感染筛查中的价值 (%)

  

项目 敏感性 特异性 阳性预测值 阴性预测值 假阳性率 假阴性率白细胞计数阳性 80.1 60.5 40.9 89.9 39.5 19.9细菌计数阳性 80.1 87.0 67.7 92.7 13.0 19.9白细胞计数阳性或细菌计数阳性 90.0 55.3 40.8 94.2 44.7 10.0白细胞计数阳性和细菌计数阳性 69.2 92.7 76.4 89.8 7.3 30.8

 

表4 UF-1000i尿液有形成分分析结果

  

病原微生物 例数 白细胞计数(/μL) 细菌计数(/μL) 细菌散点图信息革兰阴性杆菌 222大肠埃希菌 126 3~2 218 119~30 321 倾向杆菌(有48例未提示)肺炎克雷伯菌 24 118~11 836 374~62 079 倾向杆菌(有8例未提示)阴沟肠杆菌 16 263~2 589 245~21 372 倾向杆菌(有5例未提示)铜绿假单胞菌 13 131~895 278~5 267 倾向杆菌(有3例未提示)弗劳地氏枸橼酸杆菌 11 115~2 129 144~2 991 倾向杆菌(有4例未提示)普通变形杆菌 11 36~1 598 763~1 896 倾向杆菌(有2例未提示)鲍曼不动杆菌 6 10~489 123~954 倾向杆菌(有2例未提示)奇异变形杆菌 5 19~878 57~782 未提示粘质沙雷菌 5 212~1 478 76~2 147 未提示副流感嗜血杆菌 5 271~1 658 1 215~3 214 球杆菌革兰阳性球菌 102屎肠球菌 31 10~683 50~3 947 球杆菌,球菌居多(有9例未提示)无乳链球菌 23 35~985 129~3 698 倾向球菌(有10例未提示)粪肠球菌 21 2~2 799 12~2 467 倾向球菌(有8例未提示)金黄色葡萄球菌 13 6~718 57~839 倾向球菌(有6例未提示)表皮葡萄球菌 8 97~556 321~4 072 球杆菌,球菌居多(有4例未提示)马链球菌 3 290~556 920~3 589 球杆菌杰克棒状杆菌 3 13~389 41~1 234 未提示真菌 17白假丝酵母菌 8 173~479 23~59 未提示热带假丝酵母菌 4 402~433 30~43 未提示光滑假丝酵母菌 4 62~358 16~158 未提示葡萄牙假丝酵母菌 1 138 58 未提示

 

表5 各组血清PCT水平及分布

  

注:与UF-1000i阳性组比较,*P<0.05

 

组别 例数 PCT水平分布(例) PCT[ng/mL,MP25P75)]≤0.5 ng/mL >0.5~1.0 ng/mL >1.0~2.0 ng/mL >2.0~3.0 ng/mL >3.0 ng/mL尿液细菌培养阳性组 166 6 15 27 64 54 2.517(1.738,3.722)尿液细菌培养阴性组 238 171 57 5 3 2 0.515(0.213,0.674)UF-1000i阳性组 242 33 35 39 79 56 2.214(0.705,2.779)UF-1000i阴性组 162 115 36 8 2 1 0.156(0.097,0.507)*正常对照组 87 86 1 0 0 0 0.037(0.023,0.046)*

 

表6 UF-1000i阳性组联合血清PCT检测筛查尿路感染的价值 (%)

  

血清PCT临界值(ng/mL) 敏感性 特异性0.5 68.4 93.0 1.0 61.2 94.2 2.0 58.1 95.1 3.0 55.7 96.8

3 讨论

当UF-1000i阳性组联合血清PCT检测筛查尿路感染时,随着血清PCT临界值的升高,特异性也随之升高,但敏感性随之降低。见表6。

本研究以尿液细菌培养结果为金标准,根据尿液有形成分分析结果,绘制出ROC曲线,得出细菌计数最佳临界值为143.5/μL,白细胞计数最佳临界值为27.5/μL,低于MANONI等[6]报道的40/μL,这可能是因为本研究尿液分析标本均为无菌方式留取所致,而非选取门诊随机尿,这可减少其他部位的携带污染。以细菌计数阳性和白细胞计数阳性作为筛查指标时,特异性达92.7%,显著高于白细胞计数或细菌计数单独使用时的特异性,但假阴性率也高达30.8%,存在一定的漏检。

UF-1000i根据不同细菌形态,通过激光束产生前向、侧向散射光以及荧光强度的不同,来大致区分球菌和杆菌。球菌的横截面直径往往大于杆菌,所形成的前向散射光强度也大于杆菌[7]。根据UF-1000i细菌散点图信息,可知UF-1000i细菌散点图信息与尿液细菌培养结果部分一致。本研究尿液细菌培养阳性率仅为25.5%,低于LE等[8]报道的40.4%和MOSHAVER等[9]报道的37.8%。有些患者临床尿路刺激征明显,UF-1000i细菌计数和白细胞计数结果也高于临界值,但是尿液细菌培养结果却为阴性,这可能有以下几种原因:苏州大学附属第二医院要求患者需清洗外阴后留取中段尿,门诊患者只能在第2天留取标本,而第1天晚上患者可能会服用抗菌药物,或者在清洗外阴时使用了消毒液,均可造成细菌活性受到抑制或者无活性,从而抑制细菌在血平板上的生长,另有部分患者可能为厌氧菌或支原体感染,故尿液细菌培养结果为阴性。

纳入网络分析的关键词频次分布如表1所示,共出现频次275次,占全部关键词总频次的53.82%。在关键词中,出现频次最高的三个关键词是 “日本” “东北地区” “日本移民”,可见我国日本移民研究中,关于日本在东北地区的移民侵略研究是重中之重;其次, “农业移民” “满洲移民” “美国” “关东军” “移民政策”等的学术研究也是当前的热点。

PCT在正常人的血清中水平很低,当发生细菌感染时会显著升高,故血清PCT检测近年来广泛应用于临床,对鉴别感染类型具有重要价值[10]。本研究血清PCT检测结果显示,尿液细菌培养阳性组和UF-1000i阳性组分别有96%(160/166)和86%(209/242)的患者血清PCT水平>0.5 ng/mL。当UF-1000i阳性组联合血清PCT检测筛查尿路感染时,随着血清PCT临界值的升高,特异性也随之升高,为临床筛查尿路感染提供了有力证据。

综上所述,UF-1000i以细菌计数>143.5/μL或白细胞计数>27.5/μL筛查尿路感染时,具有较好的敏感性以及较低的假阴性率,临床可筛查出大部分尿路感染患者,漏检率低,但具有较高的假阳性率。临床医生可结合血清PCT检测结果来决定是否进行尿液细菌培养,还可结合球菌、杆菌提示信息初步判断尿路感染的病原微生物类型,给予初步药物治疗以缓解病情,同时进行尿液细菌培养,根据结果对药物作进一步调整。若患者UF-1000i细菌计数<143.5/μL和白细胞计数<27.5/μL且血清PCT检测结果正常时,可基本排除尿路感染的可能。由此可见,采用UF-1000i尿液有形成分分析结合血清PCT检测,可筛查出大部分阴性结果,有针对性地进行尿液细菌培养,减少盲目培养的情况,为患者节约了医疗费用[11-12],满足临床检测快速、简便的需求。

参考文献

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虞培娟,张杲琳,严茹红,冯萍,孙兰云,朱雪明,王敬华
《检验医学》 2018年第04期
《检验医学》2018年第04期文献

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