牡蛎在北方被称为“海蛎子”、南方称为“蚝”，素有“海洋牛奶”（汪何雅等，2003）之美誉。世界各国都将牡蛎列为副食品中的佳品（曾庆祝等，2002）。研究表明，牡蛎体内含有丰富的糖原、蛋白质、氨基酸、维生素、微量元素等多种营养成分。其钙含量接近牛奶1倍，铁含量是牛奶的21倍。牡蛎体内还富含牛磺酸、多不饱和脂肪酸等有益于人体健康的营养物质（贾吉明，1994；庚晋等，2002）。

牡蛎也是世界水产养殖产量最高的种类。据世界粮农组织统计，全世界仅太平洋牡蛎养殖产量在2003年就已达到440万吨。我国是贝类养殖大国，同时也是牡蛎养殖大国，牡蛎产量一直呈上升趋势。据2016年中国渔业年鉴统计，2015年牡蛎养殖产量已达457.337万吨，占养殖贝类总产量的33.03%（农业部渔业渔政管理局，2016）。

总体来说，行政任务多，工作时间长，持续位列前三位原因，2018年新增加的原因是“缺乏来自上司和同事的尊重”，工作环境特别是人际关系对美国医生倦怠的影响日益增加。“人际关系”一直被认为是“保健因素”而被管理者忽视，但今年来越来越多的研究证明“人际关系”因素是影响员工倦怠的重要因素，离职的重要原因，创造和谐稳定、积极向上的人际关系应成为构筑医疗工作环境的重要考量因素[9]。

然而，由于牡蛎具有滤食及富集的生理特点，其品质较其他养殖品种更易受养殖环境影响。并且，近年来养殖区域受污情况日益严重，牡蛎食用安全问题越来越突出。贝类污染问题经常导致我国养殖的大多贝类出口受阻。因此，国家科技部2015年支撑计划明确把研究养殖经济贝类净化技术列入计划指南。

贝类净化概念源于19世纪的欧洲。从20世纪40年代末臭氧灭杀海水中细菌，到如今一些工业发达的西方国家如法国、美国等用臭氧净化贝类已经形成先进的商业规模（谭洪新等，2006）。期间相继发现紫外线、氯化物等也能净化贝类（吴国涛等，2007；乔庆林等，2008）。后者因次氯酸残留对人体有害，逐渐被淘汰，前者很少形成工厂化。

此后，城投公司作为牵头单位，相继开发了安逸新天地、安逸花园、安逸生活广场项目，承担国资系统安居家园、安居尚苑、安居雅苑、安居花苑经济适用房项目，主持了肇庆市阅江大桥疏浚工程疏浚物（河砂）的处置（包括河砂的开采和销售）。

1 材料和方法

1.1 材料

截至2018年半年末，G-SIBs平均资本充足率达到16.32%，较上年末下降0.15个百分点，剔除新兴市场国家G-SIBs(我国四大行)后平均水平为17.19%，较上年末下降0.24个百分点，30家G-SIBs有9家资本充足率较上年上升。我国G-SIBs平均资本充足率14.74%，较G-SIBs平均水平低1.58个百分点，差距较上年有所缩小( 2017年末相差1.8个百分点)，建行和农行排名分别上升2位和5位，工行和中行排名分别下滑3位和1位

1.2 净化方法

（2）菌落检测：按4789.2-2010《食品微生物学检验 菌落总数测定》标准测定。

先采取3种方法分别对砂滤海水进行6小时的灭菌处理。然后，将上述清洗后的牡蛎放入灭菌处理后的海水中净化养殖，连续充气。海水温度为20℃、盐度为30‰、pH为8.0。在0 h、12 h和24 h时分别对这些牡蛎进行取样，用于检测菌落总数和大肠菌群数。每次每种净化组取3个样品。

实验所用的牡蛎为葡萄牙牡蛎（Crassostrea angulata），现也被称为福建牡蛎，取自于国家贝类产业技术体系汕头综合试验站核心示范区养殖的成贝。随机取150个，清除壳表附着物，用砂滤海水清洗干净，并用电子天平称量活体重，平均75.0g±1.6 g。

1.3 微生物指标测定

2.2.2 3种方法处理后的牡蛎体内大肠杆菌含量的比较

3种净化方法被设计使用。A.大蒜素灭菌法：每升砂滤海水中加入0.4 g大蒜素。B.紫外灭菌法：紫外灯直接照射砂滤海水。C.混合灭菌法：每升砂滤海水中加入0.4 g大蒜素后再用紫外灯照射。

贝类净化技术在我国始于1997年，起步较晚，净化工厂始建立2001年（杨华等，2004）。各种净化技术的研究仍处于探索阶段，商业规模化的贝类净化工厂并不多见。近年来，如何净化贝类特别是净化牡蛎的技术是企业和研究者都感兴趣的研究课题。迄今为止，国内外净化牡蛎的技术都是用臭氧或紫外线处理，还没有使用大蒜素来净化牡蛎的报道。本文采用大蒜素、紫外线及大蒜素+紫外线三种方法处理的海水净化养殖牡蛎，目的是寻求净化牡蛎体内大肠杆菌的最佳方法，以便为生产服务。

1.4 数据处理和分析

2.2.1 3种方法处理后的牡蛎体内菌落总数的比较

2.2 结果

数据的平均值间比较采用ANOVA的LSD方法，方差分析采用双因素方差分析。所有的数据分析都是使用SAS8.0软件进行，设定P＜0.05。

表1中列出了3种方法处理后的葡萄牙牡蛎体内的菌落总数。3种净化方法的效果都非常显著（P＜0.05），经12 h净化后，菌落总数以5～10的倍数被降低；三种净化方法没有显著差异（P＞0.05），尽管紫外灭菌法和混合灭菌法的效果都优于大蒜素灭菌法。表2的方差分析表明，只有净化时间对菌落总数能够产生显著影响，净化方法对菌落总数无显著影响。

 

表1 3种净化方法处理后的牡蛎体内菌落总数（cfu/100 g）的比较

  

注：表中9组平均值进行对比，具有相同字母者表示差异不显著（P＞ 0.05）。

 

净化方法 净化时间0 h 12 h 24 h大蒜素灭菌法 113 717a±21 811 20 406b±8 302 20 200b±8 326紫外灭菌法 113 717a±21 811 8 561b±5 520 9 933b±5 686混合灭菌法 113 717a±21 811 11 411b±6 990 7 522b±6 375

 

表2 净化处理对菌落总数影响的方差分析

  

方差来源 自由度df 均方MS F值 P值净化方法 2 159796512 0.84 0.4491净化时间 2 30430036327 159.44 ＜0.0001交互作用 4 45416080 0.24 0.9132误差 18 190858158

（1）大肠杆菌检验：按GB4789.3-2010《食品微生物学检验大肠菌群计数》标准测定。

从表3中可以清晰地发现，3种净化方法都能够显著地降低牡蛎体内的大肠杆菌含量（P＜0.05），以大蒜素灭菌法的净化效果最好，净化后的牡蛎体内大肠杆菌含量显著低于紫外灭菌法的和混合灭菌法的。随着净化时间被延长到24 h，大蒜素灭菌法和紫外灭菌法两组的大肠杆菌含量都显著降低（P＜0.05）。表4中的方差分析结果也表明：净化方法、净化时间都能够对牡蛎体内大肠杆菌含量产生显著影响（P＜0.001）。

 

表3 3种方法处理后的牡蛎体内大肠杆菌含量（MPN/100 g）的比较

  

注：表中9组平均值进行对比，具有相同字母者表示差异不显著（P＞0.05）。

 

净化方法 净化时间0 h 12 h 24 h大蒜素灭菌法 2307a±71 240d±25 189e±22紫外灭菌法 2307a±71 744b±13 322d±33混合灭菌法 2307a±71 384c±18 359c±55

 

表4 净化处理影响大肠杆菌数量的方差分析

  

方差来源 自由度df 均方MS F值 P值净化方法 2 101555.70 43.80 ＜0.0001净化时间 2 11280656.59 4865.69 ＜0.0001交互作用 4 62315.70 28.88 ＜0.0001误差 18 2318.41

3 讨论与结论

随着环境的日益恶化及公众对健康的日益重视，贝类净化越来越成为国内外关注的热点。目前，贝类净化方法主要是紫外线、氯和臭氧。但用氯净化存在着效率不高、容易产生有毒的胺氯及影响贝类品质等问题，紫外线净化也有受制于水深、浑浊度等问题，尽管臭氧净化不会改变贝类的风味和外形，但会影响贝类的活动，而且其杀菌效果还与臭氧接触时间、臭氧浓度、水温、海水pH值等众多因素有关（沈和定等，2001），另外水中残余的臭氧对生物具有一定的毒性（张国柱等，2007）。并且在预实验中，我们曾使用过臭氧法。由臭氧制造机制造臭氧，然后将臭氧充入水体中，但在这个过程中，会有臭氧泄露，泄露的臭氧刺激工作人员的呼吸系统，引起呼吸困难，吸入一定量的臭氧，会损伤人体肺部。目前的研究表明，紫外线能够有效地降低葡萄牙牡蛎体内的大肠杆菌含量，净化效果极为显著，大肠杆菌含量（MPN/100g）由最初的2 307经12 h和24 h的净化后降至为774和322，这与其他双壳贝类的结果基本一致。如经臭氧-紫外处理12 h和24 h后的毛蚶体内大肠杆菌含量（个/100g）可由初始时的4×105降低到9×102和5×102（王艳等，2004）、经紫外线系统净化12 h和24 h后的文蛤体内大肠杆菌含量（MPN/100 g）可由最初的2300降至460和90（乔庆林等，2008）、经紫外线系统净化的长牡蛎体内大肠杆菌含量（MPN/100 g）可在36 h内降低2个对数值（慕翠敏等，2012）。

煤粉燃烧特性参数见表3。由表3可知，钙硫比的增加导致燃烧残余率加大，钙硫比由1.0增至3.0后，燃烧残余率升高了3.61%，发热量降低了1.73 MJ/kg，着火点温度由405 ℃下降至400 ℃。这是因为，钙硫比的增加意味着样品中可燃质含量的减少，导致样品发热量逐渐减小，同时其可折算为灰分增加，灰分的增加降低了O2在焦炭表面的扩散速度，延长了燃烧时间，使相同时间内燃烧不完全程度递增。结合图8可知，随着燃烧温度的升高，有机气体快速析出，焦炭开始大量燃烧，燃烧强度更加剧烈，在460 ℃左右燃烧最激烈，相比之下，钙硫比在1.0～3.0，其对最大燃烧速率的影响较弱。

目前的研究更为令人感兴趣的结果是，大蒜素灭菌法的净化效果比紫外灭菌法和混合灭菌法的净化效果都更有效。至于混合法为什么没有大蒜素灭菌法效果更好，推测可能是紫外线破坏了大蒜素的某种活性，从而导致在混合灭菌法中使用大蒜素使得效果适得其反。经12 h和24 h的净化后，牡蛎体内的大肠杆菌含量（MPN/100 g）由最初的2 307降至为240和189，显著低于紫外灭菌法的744和322以及混合灭菌法的384和359。而且24 h的189 MPN/100 g大肠杆菌含量已低于欧盟和我国双壳贝类养殖水域划分依据中规定的大肠杆菌含量E.coli≤230 MPN/100 g时可以直接上市并供生食的标准（刘小玲等，2010），而其他两种净化方法处理后的牡蛎都不能生食。目前的研究也是首次尝试使用大蒜素来净化养殖贝类体内的大肠杆菌。因此，本研究无论在贝类净化的理论上还是应用上都具有重要的意义。

采用SPSS 24.0统计学软件对该研究所得数据进行处理和分析，计量资料采用（±s）表示，用 t检验，计数资料采用[n（%）表示，用 χ2检验，P＜0.05 为差异有统计学意义。

首先，大蒜素是从葱科葱属植物大蒜的鳞茎（大蒜头）中提取的一种有机硫化合物，学名“二烯丙基硫代亚磺酸酯”。它可以作为食品添加剂，不仅诱发动物食欲使动物快速摄食，而且动物摄食后可以改善肉品质，使其肉蛋奶品质显著提高，原有的腥臭味降低，味道也变得更加鲜美。其次，大蒜素还具有杀菌抗菌、防病、提高成活率等多种功能，并且无毒、无副作用、无药物残留、无耐药性，对人体健康有益无害（时威等，2010）。第三，使用大蒜素作为养殖贝类体内大肠杆菌的净化剂，还具有取材方便、成本低廉、安全环保等优点。

因此，根据目前的研究结果，当综合考虑净化效果、可操作性、经济性和环保性时，我们可以得出这样的结论：大蒜素灭菌法在本研究中是净化养殖的葡萄牙牡蛎体内大肠杆菌的最佳方法，而且这种方法也可尝试推广应用于其他海产养殖双壳贝类。

参考文献

庚晋,周洁,2002.海中珍馐—牡蛎.北京水产,(6):48-50.

贾吉明,1994.高级海洋天然药物—牡蛎.山东医药工业,13(1):42-46.

刘小玲,陈德慰,林莹,等,2010.解读我国与欧盟在双壳贝类在食品安全管理上的差异.水产科技情报,37(3):105-110.

慕翠敏,孔令峰,于红,等,2012.太平洋牡蛎中大肠杆菌净化的实验研究.中国海洋大学学报,42(增刊):83-86.

农业部渔业渔政管理局编制,2016.2016年中国渔业统计年鉴.北京:中国农业出版社,5,23-29.

乔庆林,蔡友琼,徐捷,等,2004.利用臭氧系统净化太平洋牡蛎中的大肠杆菌.食品与发酵工业,30(5):72-75.

乔庆林,蔡友琼,徐捷,等,2008.紫外线系统净化文蛤中大肠杆菌的研究.海洋渔业,30(4):371-375.

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时威,张岩,白阳,等,2011.大蒜素的抑菌作用及其稳定性研究.食品与发酵工业,47(3):76-78,86.

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汪何雅,杨瑞金,王璋,2003.牡蛎的营养成分及蛋白质的酶法水解.水产学报,27(2):163-168.

王艳,周培根,徐文达,等,2004.臭氧—紫外组合法净化贝类研究.水产科学,23(5):31-33.

吴国涛,孙恢礼,李君,等,2007.海洋微宇宙生态系统及其在贝类净化中的应用.现代渔业信息,22(5):3-7.

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