滞育是由基因调控的比休眠更深的一种新陈代谢受抑制的生理阶段，可以使昆虫度过不良环境，也可以调节个体发育，使整个群体发育整齐以利于雌雄个体间的交配，从而保证物种的繁衍(Denlinger, 1986, 2002)。对昆虫滞育机制的研究将有利于经济昆虫的开发利用和农林害虫的防治。家蚕Bombyx mori是典型的以卵滞育的昆虫，可作为研究滞育机理的模式生物，因此家蚕滞育一直受到国内外学者的关注。

家蚕卵的滞育由母体咽下神经节分泌并作用于蛹期卵巢的滞育激素调控，滞育开始于蚕卵中胚层分裂完成时(Nakagaki et al., 1991)。随着滞育的开始，蚕卵中储存的糖原转化为山梨醇和甘油，它们可能作为防冻剂来保护细胞的结构和基本功能。大量的山梨醇也可能是用来抑制胚胎细胞的发育(Takahashi et al., 1971)。而当滞育卵经过5℃低温长期(30 d以上)冷藏，或短期冷藏并浸酸处理，可以打破滞育，山梨醇又转化成糖原为细胞的发育提供营养。可见山梨醇的含量与滞育的发动、持续和解除具有密切的平行关系(Niimi and Yaginuma, 1992; Niimi et al., 1993a, 1993b)，山梨醇脱氢酶(sorbitol dehydrogenase, SDH)是调节催化山梨醇代谢的关键酶，因此对家蚕BmSDH的研究将帮助我们进一步理解滞育的分子机制。

家蚕有3个BmSDH基因，即BmSDH-1, BmSDH-2a和BmSDH-2b，均为单拷贝，分别位于第21号染色体的不同位点(Rubio et al., 2011)。前期我们用半定量PCR的方法分析了BmSDH表达的时空特异性(朱娟等, 2014)。本研究以家蚕二化性品种“秋丰”为材料，分析了BmSDH基因的转录起始位点及其启动子的特性，为进一步的BmSDH转录调控研究奠定基础和阐释家蚕滞育的分子机制积累实验依据。

1 材料与方法

1.1 材料

供试家蚕二化性品种“秋丰”由农业部蚕桑遗传改良重点实验室保存，常温桑叶 Folium mori饲养。以家蚕5龄第3天幼虫的后部丝腺组织为材料，提取基因组DNA；取家蚕蛹期第3天卵巢组织为材料，提取总RNA。家蚕培养细胞BmN(本实验室保存)，用含10%胎牛血清和双抗(氨苄青霉素和链霉素)的TC100培养基27℃培养；转染试剂EntransterTM-H4000，为北京英格恩生物科技有限公司产品；双荧光素酶检测试剂盒(E1910)，为Promega公司产品；β-蜕皮激素由中国农业科学院蚕业研究所附属蚕药厂提供，保幼激素类似物购自Sigma公司，滞育激素(MW: 2 731.01)由上海强耀生物科技有限公司合成；pGL3-Basic和pRL-CMV质粒均由本实验室保存。

1.2 BmSDH-1，BmSDH-2a和BmSDH-2b基因转录起始位点的确定

家蚕蛹期第3天卵巢组织总RNA用Trizol法提取，根据STARTTM RACE Kit试剂盒提供的方法制备5′ RACE准备cDNA，采用Oligo7.0软件设计5′ RACE特异引物BmSDH-GSP1和BmSDH-GSP2，交由上海生工公司合成(表1)。用特异引物BmSDH-GSP1，BmSDH-GSP2和试剂盒中通用上游引物Universal Primer A Mix(UPM)，按照试剂盒提供的方法，进行5′ RACE PCR扩增。第1轮touchdown PCR扩增程序： 94℃ 30 s, 72℃ 3 min, 5个循环；94℃ 30 s, 70℃ 30 s, 72℃ 3 min， 5个循环； 94℃ 30 s, 68℃ 30 s, 72℃ 3 min, 25个循环。以第1轮扩增产物为模板进行第2轮扩增，扩增程序： 95℃ 5 min； 94℃ 30 s, 65℃ 30 s, 72℃ 1 min, 30个循环； 72℃, 10 min。PCR产物用1%的琼脂糖凝胶电泳检测。将第2轮PCR产物与pMD18-T载体连接，挑取单克隆送上海生工公司测序，分析确定家蚕BmSDH基因转录起始位点。

 

表1 实验用引物Table 1 List of primers used

  

引物Primers引物序列(5'-3')Primer sequence引物用途PurposeBmSDH-1-GSP1BmSDH-2a-GSP1BmSDH-2b-GSP1BmSDH-1-GSP2BmSDH-2a-GSP2BmSDH-2b-GSP2GAGCGACTCTCTGCGCCGACCCGTACCCCTCCCATGCCGACCAGCACCGCCACGCCCGCTCCCATGCCGACCAGCACCGCCACGTCCCTCGCTTGCACAGCTCACAGGACCGGACACGGCACGCCGGGCTCTATGGCCACTCCGTGTACTGGGGGCGTGGCGCAGAAG5' RACEBmSDH-2a-1117FBmSDH-2a-674FBmSDH-2a-355FBmSDH-2a-1117RBmSDH-2b-1104FBmSDH-2b-1104RBmSDH-1-1136FBmSDH-1-1136RCTCGAGGGGATGCTGACTATACGATCTCGAGAACAATGCTGCACAGGGAACTCGAGTCATGTTTTTCGGCGACCCTCCATGGCGGTTAGGTTATCTGTGGCCACTCGAGCACTAAGCCTAATGATTCGTCCATGGTTATGTTATCTGTGGCCATCTCGAGCCCACCCTTCAAACCGTAACCCATGGTAGTTCTCGGTCATCTTGCA启动子片段扩增Promoter fragment amplification

Niimi T, Yaginuma T, 1992. Biosynthesis of NAD-sorbitol dehydrogenase is induced by acclimation at 5℃ in diapause eggs of the silkworm, Bombyx mori. Comp. Biochem. Physiol. B Biochem. Molec. Biol., 102(1): 169-173.

每一次人类文明的重大进步都源于科技的发展。而总览全体行业，大到航天、小到一颗螺丝钉，都蕴含着科技的力量，事关民生之本的食品行业也不例外。

1.3 家蚕BmSDH基因启动子及BmSDH-2a基因逐段缺失启动子片段的PCR扩增

1.3.1 启动子5′侧翼区序列克隆: 利用在线软件NNPP(http:∥www.fruitfly.org/seq_tools/promoter.html), Alibaba2.1(http:∥gene-regulation.com/pub/programs/alibaba2/index.html)以及DNAStar软件对家蚕数据库(http:∥sgp.dna.affrc.go.jp/KAIKObase/)中BmSDH-1，BmSDH-2a，BmSDH-2b基因上游序列进行生物信息学分析，选取相应启动子区核苷酸序列，应用Oligo7.0软件设计用于扩增BmSDH基因启动子区的引物(表1)，引物由上海生工公司合成。

以家蚕5龄第3天幼虫丝腺基因组DNA为模板，用引物BmSDH-F/R扩增家蚕BmSDH基因启动子5′侧翼区，反应体系: 10×Ex Taq buffer 2 μL, dNTPs (2.5 mmol/L) 2 μL, Ex Taq (5 U/μL) 0.25 μL, ddH2O 13.75 μL，模板DNA 1 μL，上/下游引物(10 μmol/L) 0.5 μL，共20 μL。PCR扩增程序: 94℃ 5 min; 94℃ 30 s, 60℃ 30 s, 72℃ 1 min, 30个循环； 72℃ 10 min。用1%琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物，切胶回收纯化后，与pMD18-T载体于16℃连接过夜，连接产物转化感受态细胞TOP10，涂布于含氨苄青霉素的LB固体培养基，37℃培养10 h。挑选阳性单克隆菌落，经酶切鉴定正确后，送上海生工公司测序。

同时，那些从事越剧说唱的村民也可变外出巡演为本地坐演，结束历代越剧说唱艺人外出巡回唱戏的漂泊生存状态，这也是村民回乡创业、就业的一个重要内容.

以家蚕5龄第3天幼虫丝腺基因组DNA为模板，分别用上游引物BmSDH-2a-1117F, BmSDH-2a-674F, BmSDH-2a-355F和下游引物BmSDH-2a-1117R进行PCR反应。PCR反应体系同1.3.1节。PCR扩增程序: 94℃ 5 min; 94℃ 30 s, 60℃ 30 s, 72℃ 30 s, 35个循环； 72℃ 10 min。PCR产物用1.5%琼脂糖胶电泳检测，胶回收后送上海生工公司测序。

1.4 双荧光素酶报告基因载体的构建

干部教育培训作为建设高素质干部队伍的先导性、基础性、战略性工程，近年来，河南司法行政系统教育培训工作认真贯彻落实中共中央《干部教育培训工作条例》，在推进干部教育培训工作的科学化、制度化、规范化建设等方面进行了有益的探索和实践，取得了一定成效。为做好新时代司法行政系统干部教育培训工作，进一步提升教育培训工作的质量和效益，河南省司法厅教育培训组织管理部门对机关和直属单位教育培训工作进行了调研，全面了解干部教育培训工作现状，总结经验做法，查找问题与不足，思考提升教育培训工作质量和效益的途径和方法，着力增强干部教育培训工作的系统性、持续性、针对性和有效性。

1.5 BmN细胞的培养与转染

在12孔细胞培养板中按每孔950 μL加入从细胞生长状况良好的培养瓶中轻缓吹打下来的BmN细胞悬浮液约1×105个细胞，设3个复孔，过夜培养，使其贴壁。在1.5 mL EP管中分别准备两种溶液，A液：用不含抗生素和FBS的TC-100培养基稀释400 ng pGL3-BmSDH-P-luc质粒DNA和100 ng pRL-CMV质粒(内参质粒)；B液：将2 μL的EntransterTM-H4000转染试剂用不含抗生素和FBS的TC-100培养基稀释。将A和B两种溶液分别混匀后，将两者均匀混合，室温放置15 min。A和B混合液加入含细胞和完全培养基的细胞孔中，以pGL3-Basic转染的细胞为空白对照。激素处理试验中，27℃转染6 h后更换含不同浓度(0.1, 1, 10, 100, 1 000和10 000 ng/mL)滞育激素(DH)、保幼激素(JHA)和蜕皮激素(20E)的完全培养基，以不加激素处理为对照，细胞均在更换培养基48 h后收集，每组试验重复3次，并进行3次独立实验。

1.6 家蚕BmSDH基因启动子相对活性的测定

转染48 h后，按照Dua1-Lueiferase@ Reporter Assay System操作说明和LuminoMeter TD20/20荧光光度计上检测荧光素酶活性。取1.5节转染后细胞裂解液上清20 μL加入荧光素酶检测试剂Ⅱ(LARII) 100 μL，测量萤火虫荧光素酶活性，然后加入Stop& Glo@试剂100 μL猝灭反应，同时启动海肾荧光素酶反应，测量海肾荧光素酶活性。以萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶活性的比值表示启动子的活性。

1.7 数据分析

Denlinger DL, 1986. Dormancy in tropical insects. Annu. Rev. Entomol., 31: 239-264.

2 结果

2.1 BmSDH转录起始位点的确定

 

本研究提取家蚕蛹期第3天卵巢组织总RNA，以5′RACE技术寻找BmSDH-1, BmSDH-2a和BmSDH-2b基因的转录起始位点。5′RACE的PCR产物电泳结果显示各只有一条有效扩增的DNA片段(图1)。BmSDH-1的转录起始位点为A(-41)，BmSDH-2a的转录起始位点为C(-41)，BmSDH-2b的转录起始位点为A(-40) (翻译起始位点为+1)，其中BmSDH-1和BmSDH-2a基因转录本的起始位点比现有NCBI数据库中(D13371.1, AB164059)公布的位置分别向前推移了36 bp(GGGGAATCA TTTCTCAAATAGTTATCGAAGTTAACGGGTTGCAAG ATG)和5 bp(GGGGCAGTAAAGCCGA-GACTGTCA GTGAGATTCCGCGCGTCCGACATG)。

1.3.2 BmSDH-2a启动子3个逐段缺失片段的PCR扩增: 通过家蚕数据库检索并下载BmSDH-2a基因上游启动子序列，利用DNAStar软件预测BmSDH-2a基因启动子区可能的转录因子结合位点。根据软件预测的结合位点，设计2条逐段缺失启动子序列的5′端包含XhoⅠ酶切位点的上游引物和1条5′端包含NcoⅠ酶切位点的下游引物，引物相关信息见表1，由上海生工公司合成。

2.2 BmSDH基因启动子的生物信息学及转录活性分析

利用在线软件NNPP对BmSDH基因转录起始位点上游序列进行启动子预测，分别在BmSDH-1基因-388～338 bp, BmSDH-2a基因-185～-135 bp和BmSDH-2b基因-176～-126 bp处得到score为0.95, 0.99和0.93的核心启动子区，利用Alibaba2.1和DNAStar软件对它们的转录因子结合位点进行预测，结果发现其转录因子结合位点多集中在近1 kb序列区，其中包括C/EBP, GATA, Antp, EcR和En等元件。

将构建好的3种BmSDH启动子报告基因重组质粒分别转染家蚕BmN细胞，同时共转染内参质粒pRL-CMV，以萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶活性的比值表示启动子的活性。启动子活性分析显示，与pGL3-Basic(无启动子)载体相比，BmSDH-1, BmSDH-2a和BmSDH-2b基因的启动子均有活性，且BmSDH-2a的启动子的活性极显著高于BmSDH-1(P=0.002<0.01)和BmSDH-2b的启动子(P=0.004<0.01)，分别是它们的21倍和9.7倍(图2)。

职业生涯规划是指，对个人的定位和发展相结合的认识剖析，对决定个人今后发展方向问题的认识、分析、总结。确定今后发展的目标与方向，为选择的事业和工作进行不懈的努力，对每一段时间、每迈出一步都做好准备和策划，对实现目标的每一步骤都作出合理的安排，已达到最终实现的目标。[3]

 

2.3 BmSDH-2a不同长度启动子片段的转录活性分析

为了进一步了解BmSDH-2a启动子的特性，我们分别构建了5′端缺失的不同长度片段的BmSDH-2a启动子驱动的报告基因重组质粒pGL3-BmSDH-2aP-1117 bp-luc, pGL3-BmSDH-2aP-674 bp-luc和pGL3-BmSDH-2aP-355 bp-luc与pRL-CMV质粒共转染家蚕BmN细胞。结果显示，355 bp长度的BmSDH-2a启动子活性显著高于674 bp(P=0.018<0.05)和1 117 bp长度的启动子(P=0.021<0.05)，分别是它们的5.2倍和3.4倍(图3)。

 

2.4 不同激素处理对BmSDH-2a启动子活性的影响

滞育激素(DH)、保幼激素(JHA)和蜕皮激素(20E) 是家蚕在蛹期第3天分泌水平急剧变化的3类内分泌激素(Mizoguchi et al., 2001; Furuta et al., 2013; 孟勐, 2015)。为探明这3类激素对BmSDH-2a启动子的影响，我们用pGL-BmSDH-2aP-1117质粒与pRL-CMV(对照)共转染BmN细胞，转染4～6 h后，用含有不同浓度激素的细胞培养基替换原培养基，转染48 h后收集细胞，检测启动子活性。结果显示DH在0.1～100 ng/mL之间对BmSDH-2a启动子活性虽然有一个逐渐升高的趋势但差异不显著，在浓度高于100 ng/mL时启动子活性维持在较高水平不再有明显变化(图4)；随着JHA浓度的逐渐升高，启动子的活性逐渐降低，分别为对照组的1.08, 0.87, 0.78, 0.67, 0.71和0.54倍，JHA浓度为10 000 ng/mL时启动子活性极显著低于对照组(P=0.004<0.01)(图5)；当20E浓度为0.1 ng/mL时，BmSDH-2a启动子活性降低，是对照组的0.71倍，随着20E浓度的升高BmSDH-2a启动子的活性也逐渐升高，当浓度为100 ng/mL时活性达到最高，为对照组的1.76倍， 显著高于对照组(P=0.026<0.05)，在浓度为1 000 ng/mL时，活性开始降低(图6)。

 

 

 

3 讨论

根据家蚕二化性品种子代滞育性受亲代胚胎期催青条件调控的原理，我们前期利用半定量的方法分析了BmSDH在常温(25℃)和低温(17℃)催青处理条件下的亲代及其子代卵的表达情况，发现BmSDH-1基因的转录水平无明显差异；而BmSDH-2a和BmSDH-2b基因则不同，低温催青处理这2个基因在家蚕5龄第3天幼虫的卵巢和血淋巴组织中的转录水平明显低于常温催青处理，在蛹期第3天的卵巢和血淋巴中却明显高于常温处理，在滞育维持到滞育解除这一进程中，家蚕卵内原本作为防冻剂功能的山梨醇逐步转化为生长发育所需要的糖原，而SDH是山梨醇转化为糖原的关键酶，提示这2个基因与家蚕二化性品种的滞育有重要关系。

为了进一步探明BmSDH基因的转录活性，本研究对BmSDH-1, BmSDH-2a和BmSDH-2b基因的启动子活性进行分析。结果表明，BmSDH-2a的启动子活性极显著高于BmSDH-2b和BmSDH-1，分别是BmSDH-2b和BmSDH-1的9.7倍和21倍，说明BmSDH的活性主要来自BmSDH-2a和BmSDH-2b，这一推论与Rubio等(2011)在打破滞育的卵中没有检测到BmSDH-1(当时并未发现BmSDH-2a和BmSDH-2b)蛋白的表达的结果相佐证。为进一步研究BmSDH-2a基因启动子的特性，我们对BmSDH-2a不同5′侧翼截短的启动子活性进行检测，发现355 bp的启动子活性极显著高于674 bp和1 117 bp长度启动子，分别是它们的5.2倍和3.4倍。提示在355-674 bp及674-1 117 bp区间存在负调控元件，我们对这一区域的序列进行分析，发现多次出现En(Engrailed)元件，此元件对果蝇某些基因在转录水平有抑制作用(Smith and Jaynes, 1996)，推测En元件在BmSDH-2a转录过程中起负调控的作用。

家蚕的发育受多种激素的协同调控。激素对家蚕滞育的调控是一个复杂的网络系统。从蛹期第2-3天，家蚕体内的DH和20E的滴度都急剧升高达到10 000 ng/mL，而JH在家蚕眠期以及化蛹期的滴度较高，但在其他时期都处于较低水平(孟勐, 2015)。本研究模拟家蚕体内激素浓度，对BmSDH-2a启动子驱动的报告质粒转染的BmN细胞培养基中添加不同种类和浓度的激素，DH浓度在0.1～100 ng/mL以内，启动子活性有逐渐升高的趋势，浓度高于100 ng/mL时启动子活性有所降低但仍维持在较高水平；添加JHA时，随着JHA浓度的升高BmSDH-2a启动子的活性逐渐降低，这可能是由于高浓度的JHA对细胞的生理造成影响，导致启动子活性降低；20E浓度在0.1～100 ng/mL时，BmSDH-2a启动子活性逐渐升高，推测在这段5′侧翼区存在与20E结合的调控因子。软件分析发现该区域存在EcR (Luo et al., 1991; 孟勐, 2015) 和Antp (孟勐, 2015)2个与20E相关的元件，并未发现滞育激素和保幼激素的相关结合元件；随着20E浓度的继续升高，BmSDH-2a启动子的活性逐渐降低，推测也是与高浓度的激素对细胞的生理产生影响有关。

Luo Y, Amin J, Voellmy R, 1991. Ecdysterone receptor is a sequence-specific transcription factor involved in the developmental regulation of heat shock genes. Mol. Cell. Biol., 11(7): 3660-3675.

上述结果为进一步探究山梨醇脱氢酶基因的转录调控机制奠定基础，为阐明家蚕滞育的分子机制提供了实验数据。

参考文献 (References)

启动子活性数据使用SPSS16.0软件采用t检验的方法进行差异显著性分析，P<0.05为差异显著，P<0.01为差异极显著。

Denlinger DL, 2002. Regulation of diapause. Annu. Rev. Entomol., 47: 93-122.

Furuta K, Ichikawa A, Murata M, Kuwano E, Shinoda T, Shiotsuki T, 2013. Determination by LC-MS of juvenile hormone titers in hemolymph of the silkworm, Bombyx mori. Biosci. Biotechnol. Biochem., 77(5): 988-991.

乳腺增生症是常见的慢性乳腺良性疾病，与内分泌紊乱有关，主要表现为胀痛，有时刺痛或隐痛，肿块界限不清，成片状增厚，与月经周期密切相关，月经前感觉肿块增大、疼痛加重，月经后肿块缩小、疼痛减轻。在妊娠期和哺乳期肿块常变得不明显，疼痛症状减轻甚至消失。

Meng M, 2015. Regulation of Homeodomain Transcription Factors on the Biosynthesis of Juvenile Hormone and 20-Hydroxyecdysone in the Silkworm. PhD Dissertation, Southwest University, Chongqing. 14-22. [孟勐, 2015. Homeodomain转录因子对家蚕保幼激素及蜕皮激素合成的调控. 重庆: 西南大学博士学位论文. 14-22]

秦明月再问了一些问题，已经没什么价值了，他掏出名片给两个搬运工，告诉他们要是再想起什么可以给他打电话，搬运工如释重负地走了。

Mizoguchi A, Ohashi Y, Hosoda K, Ishibashi J, Kataoka H, 2001. Developmental profile of the changes in the prothoracicotropic hormone titer in hemolymph of the silkworm Bombyx mori: correlation with ecdysteroid secretion. Insect Biochem. Molec. Biol., 31(4-5): 349-358.

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pGL3-Basic载体含有荧光素酶报告基因，不含启动子和增强子。将纯化的家蚕BmSDH基因启动子目的片段和pGL3-Basic载体分别用XhoⅠ和NcoⅠ于37℃双酶切2 h，琼脂糖凝胶电泳检测，并切胶回收目的片段。将回收的目的片段与pGL3-Basic载体用T4 DNA连接酶连接，16℃连接过夜。连接产物转化感受态细胞TOP10，涂布于含氨苄青霉素的LB固体培养基，37℃培养10～12 h，挑选阳性单克隆菌落，37℃下220 r/min摇菌培养12 h。取菌液提取重组质粒，经XhoⅠ和NcoⅠ双酶切鉴定正确后，送上海生工公司测序。

下划线标记部分CTCGAG和CCATGG分别为XhoI和NcoI的酶切位点。Underlined parts CTCGAG and CCATGG are the restriction sites of XhoI and NcoI, respectively.

如果要完整地翻译说话者所要传达的信息，法庭口译员不能忽略说话者的肢体语言。有些肢体语言具有文化特性，需要译员的解释。比如南非人用大拇指表示数字“6”。在回答“你有几个孩子？”这个问题时，说话人可能一边竖起大拇指一边说“这么多”，表示其有6个孩子。如果译员没有对其肢体语言做出解释，来自不同文化背景的听众是不能理解其意思的。

Niimi T, Yamashita O, Yaginuma T, 1993a. A cold-inducible Bombyx gene encoding a protein similar to mammalian sorbitol dehydrogenase. Yolk nuclei-dependent gene expression in diapause eggs. Eur. J. Biochem., 213(3): 1125-1131.

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上司的小老婆也阴阳怪气，把李公甫讽刺为监守自盗。但他只能点头哈腰，陪笑脸说好话打包票，保证自己粉身碎骨也要把盗贼缉拿归案。

Rubio RO, Suzuki A, Mitsumasu K, Homma T, Niimi T, Yamashita O, Yaginuma T, 2011. Cloning of cDNAs encoding sorbitol dehydrogenase-2a and b, enzymatic characterization, and up-regulated expression of the genes in Bombyx mori diapause eggs exposed to 5℃. Insect Biochem. Molec. Biol., 41(6): 378-387.

Smith ST, Jaynes JB, 1996. A conserved region of engrailed, shared among all en-, gsc-, Nk1-, Nk2- and msh-class homeoproteins, mediates active transcriptional repression in vivo. Development, 122(10): 3141-3150.

Takahashi SY, Ohnishi E, Yoshitake N, 1971. Sorbitol in the eggs of the silkworm, Bombyx mori. Dev. Growth Differ., 13(2): 89-95.

一位社工负责全职照看结核病人的工作，在结核病房工作的其他社工负责把所有的结核病人都转介给她。她参加结核病门诊，查看所有由医生转介的结核病人，并尽力安排他们去门诊治疗，或是住院，或是住疗养院，或是回家休养。无论如何，治疗都是合理的。结核病人所需的治疗方式，是医生和社工根据对患者的病情、社会和经济状况的慎重考虑而共同决定的。服务重点是照顾处于早期阶段的结核病患者，以及有足够收入以完成整个治疗过程的病人。

Zhu J, Wang X, Wei BY, Tang SM, Huang JS, Hao BF, Shen XJ, 2014. Transcriptional characteristics of sorbitol dehydrogenase gene in silkworm, Bombyx mori. China Sericul., 35(2): 4-7. [朱娟, 王欣, 韦博尤, 唐顺明, 黄金山, 郝碧芳, 沈兴家, 2014. 家蚕山梨醇脱氢酶基因的转录水平特性分析. 中国蚕业, 35(2): 4-7]

作物根部施肥方式和传统的抛撒方式相比有如下的优点：一是更有利于农作物通过根部充分吸收化肥的养分，尤其适合不能从叶面吸收养分的作物；二是抛撒在作物叶面和土壤表面的化肥很容易挥发，根部施肥可提高作物化肥养分的吸收率，降低施肥成本；三是抛撒的化肥可能会被雨水冲入河道、流入农田周边水系，造成水资源环境的污染[5]。