0 引言

忧遁草为爵床科(Acanthaceae)鳄嘴花属鳄嘴花Clinacan-thus nutans(Burm. F.)Lindau 的全草,别名有鳄嘴花、扭序花、青箭、沙巴蛇草、柔刺草等.广泛分布于我国南部至西南部,如海南、广东、广西、云南等地区,以及马来西亚、印度尼西亚、泰国等国家[1-3].始见于《广西药用植物名录》,一般以全草或叶片入药,味甘、微苦,性凉,入肝、肾经,具有清热利湿、利尿消肿、活血疏经、抗肿瘤等功效[4].鳄嘴花含有多种不同类型的化合物,主要包括甾醇类及三萜类(豆甾醇、β-谷甾醇、羽扇豆醇、白桦脂醇、β-胡萝卜苷),黄酮碳苷类(牡荆草素、异牡荆草素、夏佛塔苷、异粟米素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、红草素、异红草素、肥皂草苷),含硫糖苷类等[5],忧遁草中的黄酮类化合物种类多,含量高,具有抗癌,抗氧化,抗病毒等功效.考察提取条件、检测波长等对建立忧遁草黄酮类化合物HPLC指纹图谱的影响,初步建立指纹图谱.

56例患者均顺利手术，无血管、神经损伤等严重并发症。术后切口均一期愈合，无感染、脂肪栓塞或下肢深静脉血栓形成，仅有1例患者术后发生小腿肌间静脉血栓。手术时间 51～84 min，平均（66.39±7.26） min；术中出血量 130～350 ml，平均（230.91±14.28）ml。

1 材料与方法

忧遁草鲜叶,于2015年9月中下旬采自海南省五指山市松青科技有限公司忧遁草种植基地.60 ℃鼓风干燥6 h,粉碎过60目筛,密封备用.

1.1 主要试剂

HPLC用甲醇为色谱纯,盐酸、硫酸、乙醇、甲醇为分析纯,锌粉(粒)、氢氧化钠、乙酸镁、硝酸铝、亚硝酸钠、四氢硼钾均为分析纯。

1.2 主要仪器设备

高效液相色谱仪(型号：LC-2010A，日本岛津公司),双光束紫外可见分光光度计(型号：TU-1901,北京普析通用仪器有限责任公司),旋转蒸发仪(型号：RE-52,上海亚荣生化仪器厂),低速离心机(型号：TDL-8-2B,金坛市盛蓝仪器制造有限公司),超级恒温水浴槽(型号：HWA-26,金坛市盛蓝仪器制造有限公司)等。

1.3 研究方法

1.3.1 显色反应

取忧遁草粉末5.0 g,置具塞平底烧瓶中,用70%乙醇100 mL,料液比为1:20 (g:mL),在50℃恒温浸提2 h.抽滤,低温高速离心30 min,取上清液.利用黄酮类化合物与显色试剂发生特定颜色反应来判断黄酮类化合物的类型,分别用忧遁草样品提取液与盐酸+锌粉、氢氧化钠溶液、乙酸镁、硝酸铝、浓硫酸试剂反应,观察颜色,对照文献资料[6]分析忧遁草中黄酮类化合物的类型.

1.1 资料来源 ①全市的HIV抗体检测量和感染者发现例数来源于艾滋病综合防治信息系统。②将全市的医院按照大型综合医院、中等规模医院和社区医院分为3个层次，每个层次随机选取1家医院，收集PITC实施前后（2012年和2016年）各科室的门诊量、检测量及HIV抗体阳性数。

1.3.2 检测波长选择

参照文献方法[7-8],用紫外分光光度计对忧遁草样品提取液在200～600 nm波长范围内进行全波长扫描确定其最大吸收波长.

1.3.3 忧遁草黄酮类化合物的提取及HPLC指纹图谱分析

相对于原来的租赁增值服务，信息化管理能够降低租赁公司及施工单位的成本控制，并且面对施工项目的复杂性也能够及时解决各种应急计划，对于现在的租赁公司也可以通过信息化技术提供专业建模的技术增值服务，与原来的租赁服务工作程序Word、Excel也远远不能满足现在的市场需求，BIM以及Revit的建模软件势必要成为租赁行业管理人员的服务首选，信息化的租赁业务要能够解决施工单位对周转材料用量及成本控制的难点问题，租赁公司能够按照自身数据库里的材料规格尽量周转自有材料，不仅降低自身成本，同时也完成技术性质的增值服务(如图3所示)。

(2)取忧遁草粉末5.0 g,置具塞平底烧瓶中,用70%乙醇100 mL,料液比为1:20 (g:mL),在28 ℃(室温)、40 ℃、50 ℃、60 ℃恒温浸提2 h.抽滤,低温高速离心30 min,取上清液备用.

(1)取忧遁草粉末5.0 g,置具塞平底烧瓶中,分别用50%、60%、70%乙醇(或甲醇)各100 mL,料液比为1:20 (g:mL),在50℃恒温浸提2 h.抽滤,低温高速离心30 min,取上清液备用.

1.3.4 色谱条件

由图1,忧遁草样品提取液在215 nm与271 nm波长条件下都得到明显出峰的光谱曲线,但215 nm波长条件下出的峰比271 nm波长条件下出的峰高度更高.所以215 nm比271 nm更适合做色谱扫描波长条件.

2 结果与分析

2.1 忧遁草黄酮提取液的显色反应及分析

显色反应结果如表1.

 

表1 黄酮提取液的显色反应

  

显色剂样品反应颜色盐酸+锌粉忧遁草提取液(黄绿色清液)红褐色清液亚硝酸钠忧遁草提取液(黄绿色清液)黄绿色～黄色清液氢氧化钠忧遁草提取液(黄绿色清液)黄色～棕黄色硝酸铝忧遁草提取液(黄绿色清液)黄色浊液浓硫酸忧遁草提取液(黄绿色清液)橙色微浊液乙酸镁忧遁草提取液(黄绿色清液)棕黄色清液四氢硼钾忧遁草提取液(黄绿色清液)黄绿色清液

在氢氧化钠溶液条件下,二氢黄酮类主要是在碱液里面的开环,转化成相应的异构体查耳酮类化合物,显橙或黄色.而黄酮醇类化合物在碱液里烯醇-烯酮互变先显黄色通空气后氧化变成棕色.而有些黄酮类化合物在碱液中不稳定,易氧化,色彩由黄色变为深红色并伴随有绿棕色沉淀.实验显色为黄色到棕黄色,通入空气有棕绿色沉淀可推断忧遁草粗提液中黄酮类化合物可能有黄酮、黄酮醇、二氢黄酮.

四氢硼钾与黄酮提取液反应无明显显色现象,可知提取液中无二氢黄酮.

硝酸铝显色法是先利用亚硝酸钠溶液还原黄酮,再加入硝酸铝溶液络合,最终加入碱液,在碱性环境中黄酮类化合物开环,生成 2-羟基查耳酮显色.黄酮醇类显黄色.实验显色为黄色浊液可推断忧遁草粗提液中黄酮类化合物可能有黄酮、黄酮醇.

紫外扫描结果,忧遁草黄酮类化合物乙醇提取液在215 nm与271 nm波长处分别有明显吸收峰.

在浓硫酸溶液条件下,黄酮、黄酮醇一般显色为黄色或橙色.实验显色为橙色微浊液可推断忧遁草粗提液中有黄酮、黄酮醇.

显色反应结果及分析:二氢黄酮、二氢黄酮醇类与乙酸镁溶液,加热有荧光.而黄酮、黄酮醇及异黄酮类等加入乙酸镁溶液则显黄、橙黄、褐色.实验显色为棕黄色清液可推断忧遁草粗提液中黄酮类化合物可能有黄酮、黄酮醇,无二氢黄酮、二氢黄酮醇、异黄酮.

苍南县位于温州东南沿海,台风暴雨、大风、风暴潮严重影响的地区之一。据资料统计,台风在厦门以北和温州以南登陆,对苍南影响严重[1]。苍南县拥有130多万人口,地理气候独特,因此对影响苍南的登陆台风过程进行分析和积累经验显得尤为重要。一直以来,许多学者对登陆台风的强度、路径变化等研究成果丰富[2-5]。对各类台风暴雨的成因及天气学诊断也做了大量工作[6-9]。其中,董大治对严重影响苍南的台风进行防汛减灾及政策制定方面的研究,得出了有意义的结论[10-11]。

大部分黄酮、黄酮醇、二氢黄酮及二氢黄酮醇类化合物在盐酸+锌粉条件下显橙红～紫红色,异黄酮类一般不显色.实验显色为红褐色清液可推断忧遁草粗提液中黄酮类化合物可能有黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、二氢黄酮醇,无异黄酮.

综上,可知忧遁草的乙醇粗提液中含有黄酮、黄酮醇,无二氢黄酮和异黄酮.

1.确定评价标准。课程标准对各学段的口语交际都有相应的培养目标，归纳起来我认为主要涉及三个方面：一是听的习惯和能力；二是交际语言，如是否使用普通话，表达是否完整、有条理，语气、语调是否适当，表达内容与角色或相关情境是否相适应；三是其他与口语交际相关的素养，如交际过程中是否做到尊重别人，注意文明礼貌，交际过程中是否表现得自信、积极、大方，具有一定的应对能力。

2.2 忧遁草黄酮类化合物的色谱图及分析

黄酮类化合物因分子中具备酚羟基,故显酸性,加入亚硝酸钠后,亚硝基在H+存在下,有强氧化性,将黄酮类化合物复原,故有颜色改变.实验显色为黄绿色～黄色清液可推断忧遁草粗提液中有黄酮类物质.

在前期实验基础上,确定色谱条件为:色谱柱为C18,流动相为甲醇∶水(98∶2),流速为1.0 mL/min,检测波长为215 nm(271 nm),柱温为30.0 ℃,进样量为10 μL.

  

注：实线的曲线为215 nm检测，虚线的曲线为271 nm检测图1 黄酮提取液色谱图

  

图2 70%乙醇提取60℃色谱图(215 nm)

  

注：出峰最高的曲线为在50℃提取，在215 nm检测图3 70%乙醇不同温度下提取色谱图

由图2,用70%乙醇溶液在60℃条件下浸提2 h,得到的忧遁草样品的黄酮提取液在215 nm波长条件下得到的光谱曲线,有明显出峰,且出峰效果好,出峰多,峰面积大,杂峰少,光谱曲线相对光滑稳定.所以70%乙醇溶液是做忧遁草中黄酮类化合物的适合提取剂.

胃溃疡合并胃出血的出现几率高,我们日常生活饮食习惯不佳,生活快节奏,压力大,所以消化系统疾病是高发疾病,胃溃疡合并胃出血发生率不断增加,对我们的工作和生活带来了很大的危害,胃溃疡合并胃出血的发病是胃黏膜被胃消化液消化,对黏膜和肌层造成了损伤,患者的消化道有出血症状。严重患者还会有幽门梗阻和胃穿孔症状,以及恶性肿瘤病变,对患者的生命产生威胁。胃出血主要就是因为胃溃疡,患者接受治疗的时候,对胃溃疡进行控制,改善症状,然后进行溃疡的治疗,抑制幽门螺杆菌的作用,可以促进治疗效果的提升[2]。

由图3,用70%乙醇溶液在常温(28℃)、40℃、50℃、60℃提取条件下浸提2 h,得到的忧遁草黄酮提取液的HPLC光普曲线的出峰效果不同,出峰时间稍不一致,峰形基本吻合,各峰面积不同.其中50℃时的光谱曲线出峰效果明显,在12.5～15 min和17.5～22.5 min时出峰效果更好,高度更高,峰面积更大.所以用70%乙醇溶液提取忧遁草中黄酮类化合物时,浸提温度为50℃最佳.

综上,并结合表2可得出,由70%乙醇在50℃提取的忧遁草黄酮提取液的光谱曲线出峰效果明显,出峰多,峰面积大,且相对稳定.

 

表2 黄酮提取物色谱图信息

  

名称保留时间/min峰面积/mAU．min-1峰高/mAU峰开始时间/min峰结束时间/min面积/%RT5．0325．032140556137444．8425．1752．2833RT5．8105．8106967750825．5335．9671．1319RT6．0916．0915773157545．9676．3670．9378RT7．1977．19712777585076．9587．3832．0757RT8．2128．212500205406037．9338．6008．1257RT9．1839．183453734288498．8089．9007．3708RT10．18810．188302337207149．90810．4504．9114RT10．62910．629143870968110．45010．9582．3371

 

续表2

  

名称保留时间/min峰面积/mAU．min-1峰高/mAU峰开始时间/min峰结束时间/min面积/%RT12．96012．9603756212114412．49213．3756．1019RT13．75813．758168790917313．39214．3422．7420RT15．70715．7073630841862615．29216．4005．8982RT17．06717．0673224221368816．41717．7835．2377RT18．88618．886132486419618．47519．6832．1522RT21．00321．0034785981236120．20022．3427．7747RT28．42328．42311356273064027．42529．47518．4480RT33．23733．237335891789832．62534．0005．4565

注:检测波长:215 nm;提取溶剂:70%乙醇,提取温度:50℃,提取时间:2 h

3 结论

本实验采用色谱柱为C18,流动相为甲醇∶水(98∶2),流速为1.0 mL/min,检测波长为215 nm,柱温为30.0 ℃,进样量为10 μL.初步得出忧遁草中黄酮类化合物的最佳提取剂为是70%乙醇溶液,提取温度为50℃,料液比1∶20,提取时间2 h,该条件下出峰效果明显,出峰多,峰面积大,且相对稳定.

由表5可知，针对无压W1胎体配方，H304和T304焊料的焊接强度均值分别是125 MPa和126 MPa，基本一致，但H304焊料的焊接强度最高值为152 MPa，且其他焊料强度均不足100 MPa，可见最适合的焊接材料是H304和T304焊料。

参考文献:

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