邻苯二甲酸二辛酯(di-2-ethylhexyl phthalate，DEHP)是邻苯二甲酸酯类(phthalates acid esters，PAEs)的重要成员，也是近代全球使用最为广泛的塑料增塑剂之一，被认为是广泛的环境持久性有机污染物(persistent organic pollutants，POPs)。DEHP主要用于生产柔性聚氯乙烯(polyvinyl chloride，PVC)塑料，赋予聚氯乙烯塑料柔韧性，可以占软PVC的40%。由于其实用性和成本效益，DEHP被广泛用于消费产品，包括玩具、个人护理产品、化妆品、农药、涂料、印染、室内装修材料、药品和食品包装材料 [1-4]。由于DEHP与塑料基质之间是以不牢固的氢键和范德华力连接，所以伴随使用时间的推移，DEHP不断地从塑料中逸出，挥发至大气、土壤、水域中，造成环境介质、生物、食品等的污染。众多研究表明，DEHP是重要的环境内分泌干扰物，具有雄性、雌性生殖内分泌毒性、肝肾毒性、神经毒性和遗传毒性等多种生物毒性，并带来生物血液和生化方面的改变 [5-11]。本研究拟通过对大鼠进行不同剂量的DEHP喂饲染毒，用ADVIA2120i型全自动五分类血细胞分析仪测定各组大鼠血液中白细胞、红细胞和血小板等生理指标的变化，以期研究DEHP亚慢性暴露对大鼠血细胞的影响。

在提交试用模型供使用者验证试用过程中，应细心观察操作者初次接触时的反应时间，如果某一操作停留时间过长，即可看出用户在此操作上需要时间来理解，说明在用户体验上存在缺陷。

1　材料与方法

1.1　主要试剂与仪器

DEHP(纯度≥99.5%，美国Sigma公司)、一次性塑料培养皿(美国Corning 公司)、1.5 mL EP管(美国Corning公司)；ADVIA2120i型全自动五分类血细胞分析仪(德国Siemens公司)

1.2　动物饲养与分组

1.2.1　动物的分组 　健康清洁级SD大鼠100只，雌雄各半，体质量为70～90 g。购自北京维通利华实验动物技术有限公司，动物生产许可证号SCXK(京) 2012-0001，质量合格证号11400700158173。在适应性饲养3 d后，将受试大鼠按体质量随机分为5组，即对照组(饲喂基础饲料)、4个DEHP染毒组(染毒剂量分别为5、50、500和2 500 mg/kg)，每组20只，雌雄各半，单笼饲养。

1.2.2　动物的饲养 　大鼠饲养于屏障环境动物实验室中，实验动物环境使用许可证号SYXK(苏)2012-0037。动物实验室温度控制在20～26 ℃，湿度为40%～70%。各剂量组按相应比例将DEHP均匀拌入饲料中，将饲料以平均每日动物体质量8%的摄食量按组别给予大鼠，连续饲喂染毒90 d。染毒期间，大鼠可自由饮水、摄食。

1.3　指标与方法

1.3.1　体质量及食物利用率 　观察并记录大鼠在饲养期间的一般情况(如日常行为表现、中毒和死亡情况等)；于每周称量记录体质量、摄食量，并计算总的食物利用率(总食物利用率=总增质量/总摄食质量×100%)。

1.3.2　血细胞参数测定方法 　90 d喂养结束后，大鼠空腹16 h称量并记录最终空腹体质量，用滴加EDTA抗凝剂的1.5 mL EP管分别取雌雄大鼠全血1.0 mL，应用全自动血细胞分析仪立即进行血细胞分析。检测白细胞总数(WBC)、中性粒细胞(NEUT)、嗜酸性粒细胞(EOS)、嗜碱性粒细胞(BASO)、单核细胞(MONO)、淋巴细胞(LYM)、红细胞总数(RBC)、血红蛋白(HGB)、红细胞压积(HCT)、平均红细胞体积(MCV)、平均血红蛋白含量(MCH)、平均血红蛋白浓度(MCHC)、直接测定的血红蛋白浓度(CHCM)、血红蛋白含量分布宽度(HDW)、血小板总数(PLT)、平均血小板体积(MPV)和未染色的大细胞数量(LUC)以及其相应的百分比等指标。

1.5　统计学方法

在染毒期间，对照组经观察均未出现异常现象；与对照组比较，DEHP 5、50和500 mg/kg剂量组均未观察到明显的差异；而2 500 mg/kg DEHP染毒组动物则均表现出精神亢奋、被毛蓬松、局部脱毛(头颈部和四肢以及腹部)等中毒体征，摄食量减少，大鼠体质量在染毒后显著下降，差异有统计学意义(p＜0.05)，见表1。

2　结果　

2.1　DEHP对大鼠体质量的影响

采用SPSS 19.0软件进行统计学分析，多组间均数比较经方差齐性检验后采用单因素方差分析，各实验组与对照组用Dunnett’s法比较；组间率的比较采用非参数检验。所有结果用 表示，以α=0.05为检验水准。

如表4所示。由表4可见，在雄性大鼠中，2 500 mg/kg DEHP染毒组红细胞总数(RBC)、血红蛋白(HGB)和红细胞压积(HCT)与对照组相比显著下降，差异均具有统计学意义(p＜0.01)。

表1　不同剂量DEHP染毒对大鼠体质量的影响(g，-，n=10)

与对照组相比，*p＜0.05.

分组(mg/kg) 雄性 雌性染毒前 染毒后 染毒前 染毒后对照组 78.7±4.1 552.0±23.7 77.7±5.0 312.1±33.9 DEHP 5 78.9±3.6 554.0±39.1 78.5±3.9 327.7±30.7 50 77.9±3.4 544.3±35.2 79.1±5.3 344.7±27.3 500 79.3±2.9 551.2±23.9 79.6±5.3 321.4±39.3 2 500 79.5±4.6 408.1±18.8* 79.9±5.9 273.8±13.6*

2.2　不同染毒剂量DEHP对大鼠食物利用率的影响

从DEHP亚慢性染毒对大鼠体质量、增质量、总摄食量及食物利用率的影响结果来看，随着染毒剂量的增加，DEHP 2 500 mg/kg组大鼠的体质量、体质量的增量、总摄食量与对照组相比显著下降，提示，DEHP亚慢性暴露对大鼠的体质量和摄食量有一定的影响。

表2　不同剂量DEHP染毒对大鼠食物利用率的影响(-x±s，n=10)

与对照组相比，*p＜0.05.

雌性体质量增量/g 总摄食/g 总利用率(%) 体质量增量/g 总摄食/g 总利用率(%)对照组 473.3±24.9 2 499.8±146.0 18.93±0.8 234.4±32.3 1 825.1±203.3 12.84±0.7 DEHP 5 475.1±41.1 2 587.8±89.1 18.36±1.1 249.2±30.5 1 875.1±140.2 13.29±0.8 50 464.3±39.8 2 489.1±128.3 18.65±1.0 265.6±26.6 1 982.8±102.3 13.40±0.8 500 471.9±24.5 2 645.6±64.4 17.84±0.9 241.8±40.7 1 933.5±157.0 12.51±1.3 2 500 328.6±17.5* 1 835.4±137.2* 17.70±1.6 193.9±14.9* 1 519.2±81.7* 12.50±1.2分组(mg/kg) 雄性

2.3　DEHP对大鼠白细胞的影响

在雌性大鼠中，DEHP 500 mg/kg和2 500 mg/kg组血红蛋白(HGB)显著下降，与对照组相比，差异有统计学意义(p＜0.05)。平均血红蛋白含量(MCH)随着剂量的增加而降低，呈现出剂量-效应关系，在500 mg/kg和2 500 mg/kg剂量下与对照组相比显著下降，差异均有统计学意义(p＜0.05或p＜0.01)。在2 500 mg/kg剂量下，平均血红蛋白浓度(MCHC)和直接测定的血红蛋白浓度(CHCM)与对照组相比显著下降，差异均有统计学意义(p＜0.05或p＜0.01)。

表3　不同剂量DEHP染毒对大鼠白细胞相关指标的影响(-x±s，n=10)

与对照组相比，*p＜0.05，**p＜0.01.

性别 分组(mg/kg) 3白细胞总数(×10/μL) 中性粒细胞(%) 淋巴细胞(%) 单核细胞(%) 嗜酸性粒细胞(%)嗜碱性粒细胞(%)雄性 对照组 9.2±1.7 23.66±6.08 69.68±6.45 4.08±1.59 1.88±0.55 0.18±0.09 DEHP 5 12.1±3.0 25.75±5.62 67.50±6.12 3.65±0.73 1.77±0.33 0.22±0.08 50 11.5±2.6 24.14±4.40 72.22±2.53 3.17±1.40 1.73±0.71 0.17±0.07 500 9.4±1.9 18.13±10.61 75.33±10.58 4.35±2.76 1.56±1.05 0.15±0.05 2 500 10.6±3.3 21.61±6.15 72.50±7.16 4.01±0.93 0.91±0.35** 0.22±0.04雌性 对照组 7.6±1.3 27.13±6.37 66.97±6.89 3.52±1.01 1.53±0.38 0.14±0.05 DEHP 5 6.8±1.9 23.50±7.03 70.68±6.58 3.39±0.85 1.58±0.39 0.15±0.07 50 6.1±1.3 26.54±7.43 67.58±7.81 3.33±1.07 1.75±0.42 0.13±0.08 500 7.7±1.3 22.61±5.69 74.31±6.71* 2.87±0.89 1.42±0.44 0.14±0.05 2 500 5.6±2.1* 20.62±2.55 74.21±3.49* 3.50±0.81 1.72±0.41 0.14±0.07

2.4　DEHP对大鼠红细胞的影响

观察组术后6个月的关节退变、囊性变、关节面塌陷、坏死等并发症总发生率为8.5%（5/59），显著低于对照组的25.4%（15/59）（P＜0.05）。见表3。

见表3。结果表明，2 500 mg/kg组雄性大鼠嗜酸性粒细胞(EOS)显著减少，雌性大鼠白细胞总数(WBC)显著降低，与对照组相比差异均具有统计学意义(p＜0.05或 p＜0.01)。在500和2 500 mg/kg剂量下，雌性大鼠淋巴细胞(LYM)与对照组相比显著增加，差异有统计学意义(p＜0.05)。

表4　不同剂量DEHP染毒对大鼠红细胞相关指标的影响(-x±s，n=10)

RBC：红细胞总数；HGB：血红蛋白；HCT：红细胞压积；MCH：平均血红蛋白含量；MCHC：平均血红蛋白浓度；CHCM：直接测定的血红蛋白浓度；HDW：血红蛋白含量分布宽度。与对照组相比，*p＜0.05，**p＜0.01.

性别 分组(mg/kg) 6 RBC(×10/μL) HGB/(g/dL) HCT(%) MCH/pg MCHC/(g/dL) CHCM/(g/dL) HDW/(g/dL)雄性 对照组 8.59±0.31 13.75±0.60 41.66±1.88 16.18±0.50 32.92±0.42 35.96±0.43 3.15±0.12 DEHP 5 8.40±0.53 13.49±1.11 41.21±3.15 16.05±0.69 32.72±0.53 36.17±0.48 3.10±0.23 50 8.54±0.52 13.66±0.74 41.37±2.31 16.24±0.50 33.19±0.82 36.41±0.62 3.15±0.22 500 8.36±0.10 13.69±0.49 41.67±1.37 16.27±0.73 32.67±0.54 35.87±0.28 3.54±0.49 2 500 7.56±0.35** 12.34±0.77** 37.73±2.26** 16.28±0.46 32.66±0.47 35.57±0.31 3.19±0.29雌性 对照组 7.32±0.50 12.92±0.72 37.91±1.93 17.70±0.75 34.08±0.36 36.79±0.42 2.53±0.11 DEHP 5 7.45±0.47 12.93±0.74 38.39±2.01 17.37±0.31 33.65±0.27 36.96±0.48 2.49±0.14 50 7.13±0.58 12.30±0.86 36.43±2.47 17.30±0.51 33.80±0.36 37.01±0.39 2.54±0.13 500 6.98±0.35 11.99±0.53* 35.54±1.56 17.16±0.46* 33.67±0.55 36.96±0.36 2.55±0.15 2 500 7.27±0.39 11.85±0.63* 37.60±2.46 17.02±0.29** 32.88±0.70** 35.10±1.14* 2.65±0.17

2.5　不同染毒剂量DEHP对大鼠血小板的影响

服装PDM系统使用功能模块化设计的思路，可以很好的适应多种运作模式，提升PDM系统产品化程度。企业在实施应用过程中无需重组运营架构，甚至无需改变产品开发人员的工作习惯，选用适合企业运营架构需求的PDM模块进场实施即可。模块化设计的PDM系统结构，使其在各类服装企业尤其是中小型服装企业的适用性得到进一步提升

见表5。在DEHP染毒期间，未发现其对大鼠血小板各项指标产生影响。

事业单位要重视预算绩效管理在单位的重要程度，务必将预算管理贯穿到单位管理的始终，建立贯穿预算编制、执行、监督全过程的预算绩效管理体系。预算的编制需要多个部门相互配合，单位管理者和各部门人员都应参与其中。预算目标设定要与事业发展规划和年度工作计划紧密衔接，确定预算重点投向，满足未来事业发展的需要。

表5　不同剂量DEHP染毒对大鼠血小板相关指标的影响(，n=10)

平均血小板体积/fL分组(mg/kg)平均血小板体积/fL雄性 雌性血小板总数 血小板总数(×10/μL)3(×10/μL)3对照组 900.6±157.9 7.53±0.78 933.0±121.8 7.23±0.47 DEHP 5 1 008.7±133.5 6.82±0.82 973.8±114.3 6.96±0.45 50 1 042.7±55.1 7.71±0.57 908.6±136.8 6.98±0.48 500 955.6±205.1 7.02±0.41 985.4±94.1 7.13±0.36 2 500 864.0±153.4 8.26±0.91 1 034.2±106.2 7.92±0.60

3　讨论　

在DEHP染毒期间，5、50和500 mg/kg剂量组的体质量和摄食量与对照组相比差异均无统计学意义(P＞0.05)，而2 500 mg/kg剂量组的大鼠体质量和摄食量与对照组相比明显下降，且差异具有统计学意义(p＜0.05)。见表2。

白细胞是血液细胞的一种，通常也被称为免疫细胞，在机体内更新的速度比较快。作为免疫系统的一部分，具有防御和免疫功能，参与对细菌、病毒等异物入侵时的免疫过程，白细胞各项指标的变化是机体免疫力变化的标志 [12]。在DEHP 500 mg/kg剂量下，雌性大鼠淋巴细胞(LYM)与对照组相比显著增加(p＜0.05)，2 500 mg/kg剂量时，淋巴细胞(LYM)持续增加(p＜0.05)，白细胞总数(WBC)显著降低，与对照组相比差异具有统计学意义(p＜0.05)，说明高剂量的DEHP可能影响机体的免疫系统功能，对免疫细胞产生细胞毒性并破坏白细胞。这也和有关DEHP在高浓度下，可使自由基产生增加，影响机体的抗氧化酶系和引起氧化损伤，从而产生细胞毒性的报道结果相一致 [13]。研究 [14-16]表明，DEHP具有“佐剂”的作用，能增强免疫原性的活力、诱发哮喘、诱导巨噬细胞分化和分泌促炎性因子，加重炎症过敏反应。

红细胞负责供给全身组织和细胞所需的O2，带走其产生的部分CO2，对机体的正常运行具有重要作用。红细胞总数(RBC)、血红蛋白(HGB)和红细胞压积(HCT)主要用来判断有无贫血及贫血的程度，较为常见的是3者降低即为贫血，根据HGB降低程度划分贫血程度 [17]。由本研究结果可见，在雄性大鼠中，2 500 mg/kg组红细胞总数(RBC)、血红蛋白(HGB)和红细胞压积(HCT) 与对照组相比显著下降，差异有统计学意义(p＜0.01)。说明2 500 mg/kg剂量下，DEHP可对大鼠的红细胞产生一定的影响。平均血红蛋白含量(MCH)、平均血红蛋白浓度(MCHC)和直接测定的血红蛋白浓度(CHCM)均为红细胞的平均值，据此可进行贫血的形态学分类[18]。在雌性大鼠中，平均血红蛋白含量(MCH)随着剂量的增加而降低，在500 mg/kg和2 500 mg/kg剂量下与对照组相比显著下降(p＜0.05或p＜0.01)。同时，平均血红蛋白浓度(MCHC)和直接测定的血红蛋白浓度(CHCM) 在2 500 mg/kg剂量下与对照组相比显著降低(p＜0.05或p＜0.01)，说明机体发生了严重贫血，血红蛋白含量显著下降，从而携带O2和CO2的能力也显著降低。

传统的产品开发人工管理模式下，大量与产品开发相关的数据散布于各个部门，量产部门想要全面获取与使用数据有一定难度。产品数据应用于不同形式的表格时，例如原料采购表、原料品质控制表、产品工艺参数表、生产工艺单往往都要由跟单人员重新核对数据进行制表，跟单环节容易出现对接错误，占用了大量的人力，造成开发周期不必要的延长。

血小板的功能主要是促进止血和加速凝血，以及维护毛细血管壁完整性。在本实验中，不同剂量的DEHP对大鼠血小板的指标无显著影响。说明在本实验中，DEHP对大鼠的凝血止血功能无显著影响。

综上所述，一定剂量的DEHP会对实验性大鼠的体质量、摄食量和血液系统产生影响。

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