脂肪酸含量及组成是评定营养价值的重要指标之一［1，2］，人体必需脂肪酸只有两种，亚麻酸名列首位。亚麻酸作为人体必需不饱和脂肪酸，在医药、保健、食品市场需求量巨大。当人体摄入亚麻酸后，在酶的作用下，经过肝脏代谢生成 EPA 和 DHA［3－5］。EPA和DHA对促进胎儿和婴幼儿的大脑神经细胞发育有不可替代的作用，此外，亚麻酸还具有降血压、降血脂、抑制过敏反应、抗血栓、抗癌以及对视觉功能和学习行为活动的促进作用等功效，是一种营养性和功能性极高的食用油脂［6－8］。

人们通过食物中获取亚麻酸的主要途径有两种：一是植物源性的，如核桃、花生等干果；二是动物源性的，如含有丰富的亚麻酸代谢物的深海鱼类等肉制品［9－12］，但是深海鱼类资源贫乏且价格昂贵。

20世纪70年代，国内外才开始认知并接受亚麻酸的功能性营养价值，并逐渐开始进行研究。中国在2002年以后才逐步认识到亚麻酸对人体健康的重要性［13－16］。目前，对亚麻酸的研究主要集中在植物油脂中的脂肪酸，对动物中尤其是西北牛种肉制品中功能性营养物质亚麻酸的研究较少，尤其是肉制品中气相色谱法（Gas chromatography，简称 GC）直接用于肉制品中亚麻酸的检测并不多见。因此，本研究运用GC法对西北内陆地区牛肉中的亚麻酸进行检测分析，旨在建立牛肉等肉制品中亚麻酸的气相色谱分析方法，为以后摄取分析亚麻酸提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 材料、试剂与仪器

亚麻酸甲酯标准品（Sigma公司）；盐酸（优级纯，天津市凯信化学工业有限公司）；甲醇（色谱纯，Bcl international trading ltd.co）；无水乙醇（分析纯，天津市百世化工有限公司）；乙醚（洛阳昊华化学试剂有限公司）；石油醚（60～90℃，分析纯，天津市百世化工有限公司）；异辛烷（色谱纯，天津市凯信化学工业有限公司）；一水合硫酸氢钠（分析纯，天津市兴复精细化工研究所）；无水硫酸钠（分析纯，莱阳市双双化工有限公司）；氢氧化钾（分析纯，天津市百世化工有限公司）。

“一带一路”为我国企业走出去带来了前所未有的新契机，正是因为前所未有，所以企业经验不足，缺乏相关的人才。现有的知晓国际税收的人才多数集中在大企业，中下层较少。同时，由于“一带一路”提出之前企业中懂得小语种的人才较少，或者是懂得的小语种种类较少，这也是走出去倡议中的绊脚石之一。面临这些挑战，国家与企业应该大力培养更多的人才，加强对相关领域人才的培训，引进更多新的人才。尽快培育出一批适应“一带一路”倡议需求的国际税收人才。

林孟不耐烦了，他摆摆手说：“不管你怎么说，我都认为你对不起我了，你不要再说废话，你给我听着就是了，我们不能在一起生活了，你明白吗？”

本试验中亚麻酸甲酯在牛肉中的回收率通过“1.2.3”和“1.2.4”的方法进行处理，0.10、0.50 和 1.00 mg／mL 3个不同浓度每个浓度平行测定3次，以测定亚麻酸甲酯的浓度与加入的标准品浓度的比值计算回收率。

根据出错因子所在的认知层[12]，由界面设计师确定评价因素n个，选择m个典型操作界面，由核电专家确定各界面对应各评价因素的得分，得到评判矩阵A=(aij)m×n。

1.2.4 氢氧化钾－甲醇溶液的配制 称取 13.1 g氢氧化钾，溶于约80 mL甲醇中。冷却至室温，用甲醇定容至100 mL，加入5 g事先处理好的无水硫酸钠，充分搅拌后过滤，保留滤液，备用。

1.2 方法

1.2.2 标准品溶液的配制 精确称取亚麻酸甲酯标准品100.00 mg，异辛烷定容到10 mL容量瓶中，得到10 mg／mL的标准储备液，置于－20℃冰箱备用。

1.2.1 色谱条件 色谱柱：Agilent J＆W 123－3233（30 m×320 μm，0.5 μm）。载气为氮气；检测器为氢火焰离子化检测器（FID）；进样口温度为250℃，检测器温度为260℃。氢气30 mL／min；空气300 mL／min； 进样量 2 μL， 流速 1.3 mL／min， 平均速率20.806 cm／s。 升温程序：起始温度 150 ℃，保持运行2 min；4℃／min 到 210℃，保持运行 8 min；5℃／min到220℃，保持运行5 min。

1.2.3 样品的制备 称取牛肉试样2.00 g，置于100 mL试管内，加8 mL水，混合均匀后加10 mL盐酸，将大试管和内容物置于60℃水浴中加热40～50 min。每隔5～10 min用玻璃棒搅拌一次，至试样消化完全。加入10 mL乙醇，混合均匀，冷却至室温加入25 mL乙醚，剧烈振荡1 min，再加入25 mL石油醚，振摇2 min，静置分层，将有机溶剂层转移到50 mL试管中，于 60 ℃下将有机溶剂蒸干，保留脂肪［17－19］。

牛肉样品分别采于甘肃省康乐牛肉市场、兰州市柏树巷牛羊肉市场、平凉牛肉市场和平凉家养牛肉。

1.2.5 亚麻酸甲酯的制备 称取60.00 mg（精确到0.01 mg）经“1.2.3”方法提取的脂肪，置于 10 mL 具塞试管中，依次加入4 mL异辛烷、0.2 mL氢氧化钾－甲醇溶液（2 mol／L），塞紧试管塞，剧烈振荡 2 min，至试管内混合溶液澄清。加入1 g一水合硫酸氢钠，剧烈振荡 1 min，静置，取上清液用 0.45 μm 微孔滤膜过滤后检测。

1.2.6 数据处理 通过亚麻酸甲酯色谱峰的峰面积与标准品色谱峰的峰面积比较定量，按下述公式计算得出：

“厚葬”是此地无银三百两的行为，无异于埋金于下而书表其上，“丰财厚葬以启奸心”，难怪乎棺椁被毁、形骸曝露，被人剥臂捋环、扪肠求珠，以财招掘、自取其辱。“自古及今，未有不死之人，又无不发之墓也。”皇甫谧的振聋发聩之声，不知被多少人记住？

 

式中，X 为试样中亚麻酸的含量，mg／g；C为样品中亚麻酸甲酯的含量，mg／mL；V为待测样品最终定容体积，mL；m为称样量，g；D为稀释因子。根据亚麻酸甲酯的含量直接得出亚麻酸的含量。

2 结果与分析

2.1 GC的定性与分离

采用“1.2.1”的色谱柱和色谱条件，对牛肉中的亚麻酸具有良好的分离效果，采用保留时间比对法确定亚麻酸甲酯的峰位置。由图1可见，亚麻酸甲酯标准品的保留时间为26.212 min。

  

图1 亚麻酸甲酯标准品（A）和样品（B）的GC色谱情况

2.2 线性范围

分别配制 0.01、0.05、0.50、1.00、5.00、10.00 mg／mL的亚麻酸甲酯标准溶液，按上述试验条件进样，对亚麻酸甲酯标准品的GC吸收峰面积（Y）与待测样品中浓度（X）进行线性回归（图2）。由图2可知，在浓度为 0.01～10.00 mg／mL 时，亚麻酸甲酯的色谱吸收峰面积与待测样品中亚麻酸甲酯浓度具有良好的线性关系。 回归方程为 Y＝1 569.200 07X＋20.203 23，R2＝0.999 95。

不管怎么说，靠孟导的天生条件是很难光彩夺目了，于是孟导把目光投在了身外之物上。靠钱，虽然不少，但是要说多到出名的地步，还远远不够。再说钻进钱眼的人名声多半也不好，和孟导璀璨人生的计划也不协调。靠股票，虽然股票大亨这个头衔听起来诱人，但是孟导朋友里因为炒股从8位数回到7位数，乃至一朝回到解放前的也大有人在。孟导仔细掂量了一下自己的身价，就不再做这个梦了。

  

图2 亚麻酸甲酯标准品标准曲线

2.3 精密度

配制 0.10、0.50 和 1.00 mg／mL 3 个浓度的亚麻酸甲酯样品溶液按“1.2.3”和“1.2.4”方法操作，每个样品在同1 d内重复测定5次，计算相对标准偏差，得日内精密度；将每个样品连续测定3 d，并计算相对标准偏差，得日间精密度。方法精密度和准确度的结果如表 1 所示。 在本试验中 0.10、0.50 和 1.00 mg／mL三个不同浓度的日内、日间精密范围分别为0.73%～1.08%和 0.75%～1.01%，均小于 15%，表明本试验所建立的方法重复性良好，符合样品的检测要求。

 

表1 方法精密度和准确度（n＝3）

  

浓度m g/m L 0.1 0 0.5 0 1.0 0日内 日间精密度//%0.7 3 0.8 9 1.0 8准确度//%9 3.7 3 9 2.8 7 9 5.7 9精密度//%0.7 5 1.0 1 0.9 2准确度//%9 4.1 8 9 3.2 3 9 1.1 5

2.4 回收率

Agilent 7890A气相色谱仪（配有FID检测器）（Agilent公司）；BUCHI Mixer B－400 均质仪（BUCHI Labortechnik AG 9320 Flawil／Switzerland）；AB－105电子天平（Mettler Toledo Group）；HH－2 数显恒温水浴锅（江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司）。

按照回收率测定方法，本试验中 0.10、0.50和1.00 mg／mL 3个不同浓度亚麻酸甲酯在牛肉中的回收率在 83.33%～95.79%（表 2）， 其相对标准偏差为 0.72%～0.91%，均小于 1.12%，适合分析方法学的需要。

 

表2 萃取回收率

  

浓度//m g/m L 0.1 0 0.5 1.0 0回收率//%8 3.3 3±0.7 9 8 8.5 0±1.1 2 9 5.7 9±0.6 4 R S D//%0.8 4 0.9 1 0.7 2

2.5 样品测定结果

12种牛肉样品中亚麻酸的含量测定结果见表3。由表3可知，家养牛肉中亚麻酸的含量明显高于市卖牛肉，不同地区的牛肉中亚麻酸含量具有一定的差异，表明不同的饲粮以及饲养条件影响肉制品脂肪酸含量。

 

表3 牛肉中亚麻酸的含量的测定结果

  

编号1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 0 1 1 1 2来源甘肃省康乐牛肉市场甘肃省康乐牛肉市场甘肃省康乐牛肉市场甘肃省康乐牛肉市场兰州市柏树巷牛羊肉市场兰州市柏树巷牛羊肉市场兰州市柏树巷牛羊肉市场兰州市柏树巷牛羊肉市场甘肃省平凉牛羊肉市场甘肃省平凉牛羊肉市场甘肃省平凉农民家养甘肃省平凉农民家养样品质量//g 2.0 4 0 5 2.0 2 1 2 2.0 6 2 0 2.0 4 7 0 2.0 6 0 5 2.0 3 0 6 2.0 1 6 5 2.0 6 6 8 2.0 1 0 4 2.0 4 2 0 2.0 5 5 0 2.0 2 3 8实际含量//m g/g 0.1 0 1 3±0.1 2 0.1 1 9 2±0.0 8 0.1 0 9 8±0.1 5 0.1 0 0 4±0.0 9 0.2 3 7 7±0.1 7 0.0 3 4 8±0.0 4 0.0 2 5 4±0.0 2 0.1 2 5 8±0.1 4 0.1 0 8 4±0.1 6 0.0 9 0 2±0.0 7 0.2 4 2 4±0.1 5 0.2 1 7 9±0.1 1

3 小结

亚麻酸作为人体必需不饱和脂肪酸，在医药、保健、食品市场需求量巨大。但亚麻酸迄今不能人工合成，只能依赖于有限的自然资源［19］。然而α－亚麻酸动植物自然资源因为含量问题无法满足市场对高纯度α－亚麻酸原料的需求。虽然通过一些工艺方法可以提纯α－亚麻酸，但因成本、金属残留等客观条件，限制了其推广和应用。

南通地处沿海，多次遭受外敌入侵，在家乡面临生死存亡的关键时刻，有许多普通的人物英勇地站了出来与敌人周旋，谱写了许多可歌可泣的英雄壮举。这些是今天学习先进人物可以利用的资源，特别是学习英雄人物舍小家顾大家的高尚情怀，当个人的诉求、利益与社会、国家的需要利益发生矛盾时，能够自觉以社会、国家的利益为重。

通过运用建立的肉制品中亚麻酸的GC检测方法得到的色谱图可以看出，亚麻酸甲酯的峰形对称，处理后的样品杂质成分少，该方法灵敏度好、准确度高、线性好以及分离度好，说明本研究建立的试验方法和色谱条件适合肉制品中亚麻酸的分析检测。

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