饲料间组合效应(associative effective,AE)是指来自不同饲料来源的营养物质、非营养物质及抗营养物质间互作的整体效应。当饲料的整体互作使饲粮内某养分的利用率或采食量指标高于各个饲料原料数值的加权值时，为“正AE”；若低于加权值，为“负AE”；若二者相等，为“零AE”。研究AE的方法分为体外试验、体内消化代谢试验和动物试验3种。自Menke等发现由于气体产量同有机物消化率高度相关以来，体外产气法被应用于不同种类的饲料间组合AE研究。在中国，各种秸秆可收集利用总量为68 595×104t, 平均可收集系数为0.81；残留田间和收集过程中浪费的秸秆占19%。其中，适宜加工饲喂的秸秆为58 764×104t，占85.67%。农作物秸秆都存在着含氮量低、采食量少、消化性差、可利用能低等缺陷，单独饲喂仅可作维持用能量饲料。为此，研究人员提出给农作物秸秆补饲优质牧草苜蓿以提高其利用率。荞麦、大豆等在我国种植面积很广，但其副产品荞麦秸秆、大豆秸秆及冰草等却没有被更科学地利用起来。本试验在精粗比30∶70下，运用体外产气法研究不同水平苜蓿配比荞麦秸秆、大豆秸秆、冰草后对绵羊饲粮AE的影响。

1 材料与方法

1.1 试验材料

荞麦秸秆、大豆秸秆、冰草、苜蓿干草均采样于甘肃省临洮县。精料补充料配方组成：玉米84.87%，豆粕7.32%%，棉籽粕3.66%，食盐1.71%，预混料2.44%。

1.2 试验设计

精粗比(concentrate∶roughage, C∶R)为30∶70，精料补充料占40%，某种农作物秸秆、苜蓿干草占60%。具体为：精料补充料:某秸秆:苜蓿(Concentrate: Straw: Alfalfa)分别为30∶70∶0、30∶60∶10、30∶50∶20、30∶40∶30、30∶30∶40、30∶:20∶50、30∶10∶60、30∶0∶70共24种组合，荞麦秸秆、大豆秸秆、冰草、苜蓿、精料补充料5种饲料单独培养，共29种饲粮组合。

综上所述,皮肤软组织扩张术作为外科整形的重要技术,明显优于传统修复技术,但是也要注意其不足之处只有将手术感染机率不断降低才能够使患者的生活质量得到进一步改善。

1.3 试验方法

1.3.1 瘤胃液供体动物及其饲养 试验动物为3只装有永久性瘤胃瘘管的青年小尾寒羊，体重30±5 kg。饲喂饲粮精粗比为30∶70，即小麦秸秆700 g/d和精料补充料300 g/d。每天喂料两次(8:00和16:30)，自由饮水。在早饲前抽取3只瘘管羊的瘤胃液，混合后经4层纱布过滤至预热处理过的收集瓶，置于39℃恒温水浴箱中保存，连续通入CO2，待用。

1.3.3 体外培养程序 准确称取待测饲料样品约200 mg(干物质基础)，置于注射器(体外产气管)中，加入始终用CO2气体饱和的微生物培养液30 mL，排出注射器中气体，用胶管和夹子封住注射器前端，记录下产气管活塞的初始刻度读数(mL)。在39℃恒温水浴锅上放上自制72孔有机玻璃支架，将注射器头朝下插入支架孔中培养，分别培养各饲料组合和5种饲料原料2、4、6、9、12、24、36、48、72、96 h。每个饲料组合3个重复。每批样品培养时做3个空白样，记录注射器位置读数(mL)，并记录培养过程中空白管以上10个时间点的产气量(gas production,GP)。某时间点的GP(mL)=该段时间样品GP-对应时间段内空白管GP。严格按照程序和记录操作。

1.3.2 体外培养体系 按Menke和Steingass方法配制人工唾液，A、B、C、D、E各溶液配方及人工唾液配方见表1。

表1 人工唾液配方组成及其配制方法

微量元素溶液(A)13.2 g CaCl2·2H2O+10.0 g MnCl2·4 H2O +1.0 g CoCl2·6H2O+8 g FeCl3·6H2O,加蒸馏水溶解,定容至1 000 mL缓冲液(B)4.0 g NH4HCO3 +35 g NaHCO3,加蒸馏水溶解,定容至1 000 mL常量元素溶液(C)5.7 g Na2HPO4(无水)+6.2 g KH2PO4 (无水)+0.6 g MgSO4·7H2O,加蒸馏水溶解,定容至1 000 mL刃天青溶液(D)0.1%(W/V)刃天青溶液,即100 mg刃天青溶解于100 mL蒸馏水还原液(E)还原剂溶液(现配现用):4.0 mL NaOH+625 mg Na2S·9 H2O +95 mL蒸馏水人工唾液配方400 mL蒸馏水+ 0.1 mL(A)+ 200 mL(B)+200 mL(C)+1.0 mL(D),用CO2饱和并升温至39℃,加40 mL(E),继续通CO2,直至淡蓝色变无色。体外发酵培养液的配制:将瘤胃液与人工唾液按1∶2的体积比混合,搅拌均匀即可。

2.1 图像特点 数字X线引导下下肢静脉造影：静脉通畅度尚可，但静脉内径明显增大，静脉扩张呈直筒状，瓣膜影多不清甚至消失，静脉瓣膜竹节状形态不清或消失，做Valsalva呼吸下，多有对比剂反流，且反流持续时间超过1 s。见图1。彩色多普勒超声：大隐静脉的静脉管腔增宽，全程或节段性曲张，瓣叶回声增强，出现旗飘征。二维超声检查提示，静脉瓣闭合不完全，存在双向彩色血流信号；彩色多普勒血流显像提示，存在静脉瓣反流频谱，反流持续时间1.0～12.1 s。见图2～3。

同列无字母或相同字母表示差异不显著(P>0.05)，不同小写字母表示差异显著(P<0.05)，不同大写字母表示差异极显著(P<0.01)。下同。

1.4 测定项目和方法

碳源同化试验基础培养基：(NH4)2SO4 0.5%、KH2PO4 0.1%、MgSO4 0.05%、CaCl2 0.01%、NaCl 0.01%、酵母浸膏0.02%、糖或其它碳源2%，115 ℃高压蒸汽灭菌20 min。

1.4.4 组合效应的估算 组合效应=(实测值-加权估算值)×100/加权估算值，式中，实测值为实际测定的样品产气量(mL)，加权估算值=某秸秆实测值×某秸秆配比(%)+精料补充料实测值×精料补充料配比(%)+苜蓿实测值×苜蓿配比(%)。

1.4.3 产气参数计算 利用'fit curve'软件(MLP；Lawes Agricultural Trust)，根据Фrskov和McDonald的产气模型公式将各种样品在2，4，6，9，12，24，36，48，72，96 h时间点的GP代入，计算消化动力参数。模型公式为：GP= a+b(l-exp-ct) 式中，t，发酵开始后的某一时间(h)；a，快速产气部分(mL)；b，缓慢产气部分(mL)；c，b的产气速度常数；a+b，潜在产气量(mL)。

1.4.2 体外GP 测定2，4，6，9，12，24，36，48，72，96 h的GP。 GPt=200×(Vt-V0) /W 式中，t，发酵开始后的某一时间(h)；GPt，样品在t时刻的产气量(mL)；Vt，样品发酵t小时后培养管刻度读数(mL)；V0，样品在开始培养时空白培养管刻度读数(mL)；W，样品干物质重(mg)。

1.5 统计分析

数据采用SPSS 16.0软件，采用ANOVA对数据进行单因子方差分析，差异显著时采用Tukey法进行多重比较，P<0.05为差异显著，P<0.01为差异极显著，P>0.05为差异不显著，0.05<P<0.10为有差异显著的趋势。

2 结果与分析

2.1 饲料营养水平及产气参数

由表2可见，冰草的粗蛋白质含量大于荞麦秸秆和大豆秸秆。对于中性洗涤纤维，冰草低于苜蓿，荞麦秸秆和大豆秸秆高于苜蓿。6种原料的快速产气部分a值，冰草为正值，其余4种均为负值，说明这4种饲料均不同程度地存在产气滞后效应。

1.4.1 饲料常规营养水平 常规法测定荞麦秸秆、大豆秸秆、冰草、苜蓿、精料补充料的干物质(DM)、粗蛋白质(CP)、粗脂肪(EE)、粗灰分(Ash)，中性洗涤纤维(NDF)含量。

表2 饲料营养水平及产气参数(风干基础)

项目 各原料营养水平(%)荞麦秸秆 大豆秸秆冰草 精料补充料 苜蓿干物质 97.3391.1496.9791.5392.75有机物 91.2195.6685.9894.2588.42粗蛋白质 8.337.2813.3020.0511.55粗脂肪 0.980.701.643.861.20中性洗涤纤维56.0361.5042.4646.1553.21各成份体外产气参数 快速产气部分 -1.58-1.262.12-2.53-5.40 缓慢产气部分 42.3936.4542.7022.1530.01产气速度常数 (%/h)0.0350.0690.0150.0610.091潜在产气量l, (a+b)40.8135.1944.8219.6224.6024 h产气量 23.0029.3014.5014.2519.67

*各饲料的营养水平均为实测值。

2.2 各饲粮组合产气参数及组合效应

由表4可见，大豆秸秆各组a、b、c、(a + b)、AE均无显著差异(P>0.05)。各组GP24h，70大豆秸秆组显著大于0组(P<0.05)，70组有大于20组的趋势(P=0.090)，50组有大于0组的趋势(P=0.083)。因此，大豆秸秆∶苜蓿为10∶60组，AE最优。

表3 荞麦秸秆补饲苜蓿体外培养后的产气参数及24 h产气量上的组合效应 mL

荞麦秸秆:苜蓿产气参数及24 h产气量上的组合效应(mL)快速产气部分 缓慢产气部分 缓慢产气速度常数 (%/h)潜在产气量 (a + b)24 h产气量 组合效应70:0-5.90±0.1327.56±2.910.077±0.00121.62±3.0119.33±3.21-27.79±10.4560:10-2.84±1.4140.18±3.410.043±0.00437.35±3.8023.50±2.7831.55±13.4250:20-4.58±0.3933.29±8.830.053±0.01128.71±9.0021.50±6.610.36±33.8040:30-4.84±0.9135.12±11.240.070±0.02530.29±12.1623.75±4.6010.60±45.0630:40-5.76±1.3634.33±9.590.066±0.02528.58±10.9222.67±3.217.26±43.3520:50-5.59±1.2233.23±1.690.059±0.00427.64±1.3121.67±1.615.06±5.2410:60-5.21±0.5128.91±3.510.063±0.01623.70±3.9419.17±2.25-7.48±16.490:70-4.65±2.1929.94±8.570.046±0.01425.29±6.6215.83±6.031.65±29.54P 值0.1250.4400.1210.2700.3610.394

常爱兰知道这样的事后又将周小羽绑起来打了一顿，从那时开始，周小羽每天放学回家就上楼，然后直到他们叫他来帮忙时才下来。可是天天这样按时上楼的情况并没有让老师罢手，老师还是过个三五天就带消息来，说周小羽的作业这次又是没有完成。

由表3可见，荞麦秸秆各组a、b、c、(a + b)、GP24h、AE均无显著差异(P>0.05)。但从产气参数b、(a + b)、GP24h、AE结果均表明，60荞麦秸秆组AE最优(31.55%)，其次是40、30、20组。

随着九年义务教育及城乡一体化的推进，我们发现初中阶段的一个学校甚至是一个班级的学生由于来自不同的区域，学生的生源发生了结构性的变化。这样就造成了初中学生基础知识参差不齐，学习习惯及经验不相统一，使得课堂教学出现一部分学的兴高采烈，一部分鸦雀无声。尤其是来自农村的学生，由于小学的独立思考能力的缺陷，被动与落后的学习方式使这部分学生不敢或不能融入到正常的学习交流中来，从而导致对学习失去兴趣，产生厌学心理。因此，如何应对这些不利因素，通过有效的促进初中学生独立思考能力积累来提高学习兴趣，成为每个一线教师急需解决的课题。

表4 大豆秸秆补饲苜蓿体外培养后的产气参数及24 h产气量上的组合效应

大豆秸秆∶苜蓿产气参数及24 h产气量上的组合效应(mL)快速产气部分 缓慢产气部分 缓慢产气速度常数 (%/h)潜在产气量 (a + b)24 h产气量 组合效应,AE/%70∶0-6.27±1.1436.91±3.540.074±0.01830.64±4.4326.00±2.18a-11.30±12.3060∶10-5.81±0.7734.51±4.370.060±0.01028.70±5.1322.17±2.02ab-12.76±17.1950:20-4.92±0.4336.44±5.230.066±0.01031.52±4.8126.25±0.35ab-0.98±15.0540∶30-5.68±0.1531.53±3.530.057±0.01525.85±3.4019.50±5.77ab-16.65±13.8530∶40-5.19±0.2632.81±2.350.045±0.00327.63±2.6117.50±0.71ab-6.61±10.1520∶:50-4.30±0.2929.20±0.760.048±0.00224.90±1.0216.83±0.29ab-11.90±2.8910∶:60-3.48±0.0831.91±3.970.041±0.00728.43±3.8817.00±0.71ab6.45±15.480∶70-4.65±2.1929.94±8.570.046±0.01425.29±6.6215.83±6.03b1.65±29.54P 值 0.1430.4650.0840.5870.0210.747

由表5可见，冰草各组a、b、(a + b)、AE均无显著差异(P>0.05)。各组c值，10组极显著大于70、40组(P<0.01)，显著大于30、60组(P<0.05)；0组c值显著大于70组(P<0.05)。各组GP24h，10组极显著大于40组(P<0.01)，显著大于50、60、70组(P<0.05)。各组AE，除了50组为-0.65%、0组为1.65%外，其他各组AE分布在32.49%～49.93%。因此，70、60、40、30、20、10冰草组AE均较好，尤以70组最优。

表5 冰草补饲苜蓿体外培养后的产气参数及24 h产气量上的组合效应

冰草∶苜蓿产气参数及24 h产气量上的组合效应快速产气部分 缓慢产气部分 缓慢产气速度常数 (%/h)潜在产气量 (a + b)24 h产气量 组合效应,AE/%70:0-3.14±0.9145.67±12.190.021±0.008BCc42.52±13.1015.67±2.02ABb49.93±28.5060∶10-2.05±0.7937.56±10.770.027±0.010ABCbc35.51±10.5915.67±0.76ABb33.91±28.3450∶20-2.90±0.4427.29±10.650.040±0.010ABC24.39±10.2113.75±3.18ABb-0.65±36.6640∶30-1.99±0.2745.56±1.760.015±0.002CD43.57±1.9912.50±2.00B40.35±11.8330∶40-3.71±1.2842.54±9.170.026±0.008ABCbc38.82±8.3616.00±1.00AB43.87±24.3020∶:50-3.02±1.3140.00±1.390.032±0.007ABC36.99±2.0118.17±2.36AB45.95±2.4510∶60-4.10±1.5636.53±3.510.054±0.006Aa32.42±2.0423.83±1.89Aa32.49±4.880∶70-4.65±2.1929.94±8.570.046±0.014ABab25.29±6.6215.83±6.03AB1.65±29.54P 值 0.2100.1560.0010.0890.0090.134

3 讨论

本试验中，荞麦秸秆∶苜蓿以60∶10组AE最优。大豆秸秆∶苜蓿为10∶60组AE最优。冰草:苜蓿以70∶0、60∶10、40∶30、30∶40、20∶50、10∶60组AE均较好，尤以70∶0组最优。表明：冰草与苜蓿配比更易实现高的AE效果，不加苜蓿，以精料补充料:冰草为30∶70即可获得高的AE值；荞麦秸秆效果比冰草稍差，除了70∶0和10∶60组为负AE外，其他均为正值，尤以60∶10组AE最优，表明高比例荞麦秸秆低比例苜蓿能产生较好的AE；大豆秸秆组，以10∶60组AE最优，0∶70组次之，其他各组AE为负值，表明：大豆秸秆与苜蓿配比不易呈现较好的AE，以低比例大豆秸秆和高比例苜蓿配合AE较好。分析原因主要是冰草的CP含量高于苜蓿、荞麦秸秆、大豆秸秆，NDF含量低于苜蓿、荞麦秸秆、大豆秸秆，故70、60、40、30、20、10冰草组AE均较好，尤以70组最优。荞麦秸秆的CP含量高于大豆秸秆，NDF含量低于大豆秸秆，且荞麦秸秆的b和(a+b)等产气参数的值与冰草接近，二者均高于大豆秸秆。故荞麦秸秆:苜蓿为60∶10组、大豆秸秆:苜蓿为10∶60组AE最优。

袁翠林等将花生秧、豆秸、青贮玉米秸分别以0∶100、20∶80、40∶60、60:40、80∶20、100∶0两两组合，发现豆秸与花生秧、青贮玉米秸均以20∶80，花生秧与青贮玉米秸以60∶40时MFAEI达到最大。王志军等对几种饲草间AE研究发现，苜蓿∶沙打旺∶狼尾草为40∶40∶20时和苜蓿∶沙打旺∶高丹草为40∶40∶20时的组合效应综合指数(MFAEI)分别为1.13和1.21。孟梅娟等采用体外产气法将小麦秸与橘子皮、大豆皮、喷浆玉米皮、苹果渣分别按0∶100、25∶75、50∶50、75∶25、100∶0组合48 h发酵发现，小麦秸与喷浆玉米皮、大豆皮、苹果渣、橘子皮的最优组合依次是75∶25、75∶25、50∶50、50∶50。张勇等通过体外产气法发现油菜秆∶玉米∶豆粕为55∶30∶15为最优组合，瘤胃发酵效率最高，正AE值最大。孟梅娟等将小麦秸秆与米糠粕按100∶0、75∶25、50∶50、25∶75、0∶100组合发现，产气量AE、干物质降解率AE均以75∶25组合最优，纤维降解率AE以25∶75组合最优。以上研究表明，各种粗饲料需要搭配适量的精料补充料，才能达到最优的AE。这与本试验结果一致。

4 结论

荞麦秸秆∶苜蓿为60∶10组AE最优；大豆秸秆∶苜蓿为10∶60组AE最优；冰草∶苜蓿以70∶0、60∶10、40∶30、30∶40、20∶50、10∶60组AE均较好，尤以70∶0组AE最优。

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