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不同金属离子对吲哚乙酸荧光的影响及其生物活性的研究

更新时间:2009-03-28

植物生长调节剂是一类具有天然植物激素活性的人工合成物质,具有提高农作物产量的作用,在农业生产中已被广泛应用[1-2],但同时也带来了生长调节剂使用量不当的诸多问题。

吲哚乙酸是大多数植物中最主要的生长素,它对植物的细胞分裂和分化不仅有促进作用还有抑制作用[3-4],但是作为一种植物生长调节剂它没有相应的限量规定[5]。近一个世纪以来,人们对植物生长素的研究涉及合成、检测、作用机理和生物效应等各个方面。刘红梅等[6]通过元素分析、红外光谱及荧光光谱分析,对吲哚乙酸与微量元素的配合物的结构进行了表征。李君等[7]证明了吲哚乙酸与稀土硝酸盐在形成稀土配合物后,对植物的生长起到了协同促进作用。同时,基于吲哚乙酸类化合物对植物生长的重要调节作用,薛旭玲[8]研究了一种吲哚乙酸的配合物对水稻种子生物活性的影响,发现该配合物在一定浓度范围内对植物的生物活性有显著的增强作用。陈杨丽等[9]通过研究IAA的作用机理,阐述了IAA 对园艺植物生长发育的影响。

已有的文献报道中,吲哚乙酸常用的测定方法有高效液相色谱法[10-11]、气相色谱法[12]、免疫检测法[13]、离子色谱法[14]、毛细管电泳法及光度法[15]。而荧光光谱分析法近年来得到广泛的应用[16-17],因具有灵敏度高、选择性好、操作简便等优点,因而受到广大分析工作者的青睐。

近年来随着吲哚乙酸的广泛施用,其在植物或蔬菜中的残留对人体健康的危害,越来越引起人们的关注[18-19]。本实验拟以吲哚乙酸的荧光性质研究为起点,用荧光光谱法对系列金属-吲哚乙酸溶液进行分析检测,以期建立一种有效检测吲哚乙酸的方法,并以此试验了Zn-吲哚乙酸溶液体系对萝卜种子萌发过程的调节作用。

1 实验部分

1.1 材料与仪器

甲醇、乙醇、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、N,N-二甲基乙酰胺(DMA)、乙腈、乙酸乙酯、吲哚-3-乙酸、六水合硝酸锌、氯化镍、六水合氯化钴、醋酸铅(均为AR)。

在分析天平上称取吲哚-3-乙酸(0.01g,约0.05 mmol),加入到20mL平底闪烁瓶中,然后加入10mL的N,N-二甲基甲酰胺(DMF),盖上盖子小心振摇使其溶解。放入超声清洗机中,在240W的功率下震荡30 min使其充分混合后,贴上标签备用。

综上所述,在需进行输血治疗患者的治疗中,相比于常规输血路径来说,输血路径治疗路径的治疗效果更为显著,有效提高护理满意度,降低输血差错率,强化输血知识评分,值得进一步的推广。

1.2 荧光检测溶剂的确定

1.2.1 配制系列吲哚乙酸溶液

本文从歌词的语言出发,通过两首典型“中国风”歌曲歌词修辞格运用的分析,试探究修辞格的不同运用给“中国风”歌曲带来的效果。试着通过对同一类型歌词修辞格运用的研究,来探索“中国风”歌曲对修辞格态度的异同以及由此带来的效果对歌曲的影响。

F-4600型荧光光谱仪、DNG-90764电热恒温鼓风干燥箱、EL104型电子天平、SB-4200 DTD型超声清洗机。

按上述方法分别配制六水合氯化钴、醋酸铅、氯化镍与吲哚-3-乙酸的溶液,将配好的溶液体系放入超声清洗机中,在240 W的功率下震荡30min使其充分混合后,贴上标签备用。

1.2.2 吲哚乙酸的荧光测定

采用日立F-4600型荧光分光光度计,分别测试上述吲哚-3-乙酸目标样液的荧光激发谱及荧光发射谱。仪器工作条件:光源为50W 氙灯,电压设置为500V,扫描速度为2400nm·min-1,入射狭缝宽度2.5 nm,出射狭缝2.5 nm,波长准确性为1 nm。

1.3 金属离子对吲哚乙酸溶液体系荧光性能的影响

由图1可知,在狭缝宽度为2.5nm的条件下,该系列不同溶剂的吲哚乙酸溶液的荧光强度中,乙腈溶液中吲哚乙酸的荧光强度最大。经过对比发现,当溶剂为DMF、乙醇、甲醇、DMA时,吲哚乙酸的荧光强度依次降低。这可能是因为不同溶剂对吲哚乙酸的溶剂化效应,导致荧光强度发生了改变。

在分析天平上称取吲哚-3-乙酸0.01 g(约0.05mmol),加入到20mL平底闪烁瓶中,加入0.02g六水合硝酸锌(约0.05mmol),并加入10mL的N,N-二甲基乙酰胺(DMA),盖上盖子后小心振摇使其溶解。

按上述步骤,分别选取乙腈、甲醇、乙醇、N,N-二甲基乙酰胺(DMA)为溶剂,制备系列吲哚-3-乙酸目标样液。

本次种子萌发实验以萝卜种子为实验对象,以5个不同浓度的吲哚乙酸协同锌离子溶液为培养液,空白对照组ck(蒸馏水),测试不同浓度的样液对目标种子的生长调节作用。平行3组试验。

将上述配成的系列金属-吲哚乙酸溶液,采用日立F-4600型荧光分光光度计,分别测试其荧光激发谱及发射谱。仪器工作条件:光源为50W 氙灯,电压设置为500 V,扫描速度为2400 nm·min-1,入射狭缝宽度5 nm,出射狭缝5 nm,波长准确性为1nm,考察在不同金属离子作用下,吲哚乙酸溶液体系的荧光性质。

2 结果与讨论

2.1 系列吲哚乙酸溶液的荧光光谱分析

图1为吲哚乙酸在不同溶剂中的荧光光谱图。经过反复扫描,发现系列吲哚乙酸溶液在320~350nm波长范围内均有一个强的发射峰,最终确定吲哚乙酸为荧光物质,它的发光位置在λem/ex=337/307nm处,与贾俊芳等人的实验结果基本一致[20]

接着,徐通理给他细细解释“色即空,空即色”的处世哲学:他们把人生所需要的能看得见摸得着的东西都归纳为色,把无求无欲的崇高的为人道德归纳为空。人只有达到无求无欲这种“空”的境界,才能求得正果而获得一切。如果只求“色”的东西,求来求去,越求反而离自己所需的东西越远了。接着,老人又说,普通人大多一味地只求“色”的东西,这么一味地求下去,就叫作尘缘未了。

  

图1 吲哚乙酸在不同溶剂中的荧光光谱图

1.3.1 配制系列金属-吲哚乙酸溶液体系

荧光实验中我们发现,该吲哚乙酸溶液在一定的光源狭缝宽度范围内,荧光物吲哚乙酸的发光强度会随着狭缝宽度的增大而增大。在后续探究金属离子对吲哚乙酸荧光性能影响的实验中,综合考虑荧光物浓度及荧光检测的灵敏度等因素,我们选择在狭缝宽度为5.0 nm的条件下,以DMA作为溶剂进行下一步实验测定。

2.2 系列金属-吲哚乙酸溶液的荧光光谱分析

图2为系列金属离子对吲哚乙酸(DMA作溶剂)荧光强度影响的对比图。我们选择自然界中几种常见的金属离子作为目标测试项。吲哚乙酸的DMA溶液的发光位点在λem/ex=340/303nm处,由图2可见,金属-吲哚乙酸溶液在320~360nm波长范围之间有一个强的发射峰,确定该体系中发光物质仍然为吲哚乙酸。

  

图2 系列金属-吲哚乙酸溶液的荧光光谱图

引入不同的金属离子后,由于金属与吲哚乙酸的相互感应作用,使得吲哚乙酸荧光位点及其强度也随之变化,其中锌离子可能起到了“天线效应”的作用,对吲哚乙酸的荧光激发具有一定程度的敏化作用;而镍离子、钴离子和铅离子则使吲哚乙酸的荧光强度发生不同程度的减弱。

我们知道,锌是生物体内一种重要的金属元素,且锌对生长激素吲哚乙酸有着一定的荧光敏化作用,故而在后续实验中,我们选择Zn-吲哚乙酸溶液体系来研究其对一些植物的生长调节作用。

2.3 生长调节实验

2.3.1 实验过程

1.3.2 测定系列金属-吲哚乙酸溶液的荧光强度

培养液配置:0.015 g吲哚乙酸、15 mL的DMF置于烧杯中混合均匀。分别吸取 1、2、3、4、5 mL 上述溶液于5个培养液瓶中,再分别加入0.15g的硝酸锌后,加入500mL蒸馏水摇匀,贴上标签样液1~样液5。

绩效评价和薪酬管理是医院人力资源管理中的两项重点工作,对员工工作积极性以及医院运营管理效率都有直接影响。在新医改背景下,为了切实提升医院的医疗服务水平和服务质量,提升患者及家属满意度,必须对绩效评价和薪酬管理作出创新。通过采用科学、合理的评价方法和薪酬激励措施,调整医院内部结构,优化人力资源配置,最大化的发挥现有人力资源优势,实现医院经营效益与社会满意度的共同提升。

生9:因为∠PNM=∠PNA,∠NPM=∠NPA,所以△APN ∽△PMN;在做这道题的时候我觉得要会找相似的条件,那就是一要抓住相等的角,二要抓公共角,这样就容易一些.

常言道:“亲其师,信其道。”教师要教好学生,首先要让学生亲近自己,进而信服自己、以自己为榜样。因此,构建和谐师生关系是有效教学的助推良方。和谐师生关系的构建方法关键在于关注学生的存在感,再研究学生,最后开展因材施教的方法。

种子预处理:选取360个较好的萝卜种子放于试管中,用75%乙醇消毒30s后,用纯水清洗,加入蒸馏水于45~50℃下浸种10 min后取出,留待下步操作使用。

四库馆臣所述犹未精确。其实在王尧臣于北宋庆历二年编成的《崇文总目》中,已经只着录《嵇康集》十卷,其后诸家所录,除郑樵外,未见有录十五卷本《嵇康集》者;可见康集“已非完本”不是到陈振孙《直斋书录解题》中才能见出,更非南宋后之事,而是远在北宋庆历《崇文总目》中即已见其端倪。综合前段论述可推知,宋代通行的十卷本《嵇康集》最早在晁公武编成《郡斋读书志》(1151年)之后,又有所散佚,而至于宋末元初陈振孙著录解题之时,已非完书。陈氏所录十卷本《嵇中散集》应是据旧传录之书所辑,是异于旧本的另一版本。

国际金融服务提供商瑞士信贷研究院日前发布的最新报告称,亚洲新兴经济体正在快速发展,到2050年,该地区在全球经济产出的占比有望达到55%。2030年亚洲地区股市和企业债券市场有望占全球市场近30%。究其原因,在于整个地区的经济活动重心正在转移。报告认为,中国经济向服务业转型将拉动国内消费,人口老龄化将提升中国医疗行业的发展水平。

皿法培养:培养皿贴好标签。每个培养皿中放置20粒萝卜种子,分别加入样液1~样液5和蒸馏水5 mL。每24 h测量一次种子发芽个数(冲破种皮)、株高、根长,等种子停止萌发后测量萝卜种子的鲜重。

2.3.2 数据处理

在铣槽机的运用中,要加强对防渗墙施工的监督,在施工中要避免一些施工问题的出现,以下是铣槽机在防渗墙施工中常见特殊情况处理方法:

发芽率指测试种子发芽数占测试种子总数的百分比,是反映种子质量优劣的主要指标之一。发芽率高的种子,说明种子生命力强,在场地的播种发芽率较高,播种后幼苗出土正常。

 

2.3.3 实验结果分析

2.3.3.1 不同浓度培养液对萝卜种子萌发的影响

表1为萝卜种子的萌发率统计表,不同浓度的培养液对萌发率的影响如图3所示。培养液对于种子的萌发率整体上为抑制作用,但是在浓度梯度上对种子的萌发率的影响表现为先增加再减小。

随着沟槽辊转速增大,环形流道内浆流流速上升幅度较大,流道内浆流速度越大,在溢流口和进口产生的负压越大。即沟槽辊转速越高,抽吸作用越强。

 

表1 萝卜种子萌发率统计表

  

浓度1 0.2 0.5 0.55 0.7 0.7 0.7浓度2 0.1 0.4 0.55 0.65 0.7 0.75浓度3 0.1 0.5 0.65 0.7 0.75 0.8浓度4 0 0.35 0.5 0.55 0.6 0.65浓度5 0 0.3 0.6 0.65 0.7 0.7 ck 0.4 0.6 0.65 0.75 0.8 0.8

  

图3 样液对萝卜种子萌发影响的对比图

2.3.3.2 培养液对株高和根长的影响

由表2可以看出,培养液的浓度越高,对萝卜的株高和根长的抑制作用越大,其中对根长的影响较为明显;而低浓度的样液1和样液2对萝卜株高和根长有一定的促进作用。

 

表2 萝卜种子萌发平均株高、根长统计表

  

第1天 0.36 0.32 0.30 0.22 0.30 0.24 0.19 0.12 0.21 0.23 0.54 0.34第2天 1.06 0.80 0.76 0.86 0.68 0.34 0.51 0.17 0.54 0.28 0.83 0.66第3天 3.45 0.92 3.43 1.05 2.73 0.40 1.92 0.33 1.46 0.25 3.45 0.76第4天 3.90 1.17 3.91 1.42 3.15 0.57 2.17 0.39 1.95 0.42 3.84 0.85第5天 4.21 1.10 4.61 1.23 3.65 0.81 2.82 0.38 2.26 0.42 4.16 0.82

3 结论

以N,N-二甲基乙酰胺为溶剂,采用荧光检测方法对吲哚乙酸的发光性能进行了初步的表征。采用溶液法对系列金属-吲哚乙酸溶液的荧光性能进行了测定。结果表明,过渡金属锌离子加入吲哚乙酸溶液后,吲哚乙酸相应的特征发射峰荧光强度增加,提示锌离子可以作为吲哚乙酸荧光测定中的一种光敏化剂。

生长调节实验表明,锌离子加入后,吲哚乙酸样液对萝卜种子的萌发整体表现出低浓度促进、高浓度抑制的效果。

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张露,刘阳,刘磊,王涛,姜敏
《化工技术与开发》 2018年第04期
《化工技术与开发》2018年第04期文献

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