牙本质敏感(dentin hypersensitivity，DH)又称为过敏性牙本质，是指暴露的牙本质在受到温度、化学、机械、渗透压等外界刺激时所引发的短暂而尖锐的牙齿酸痛症状[1]。造成牙本质敏感的原因很多，包括各种使釉质或牙骨质的完整性受到破坏、导致牙本质小管暴露的病理、生理性因素，例如：机械磨耗、牙龈萎缩、龋病、牙折、不当的刷牙方式、摄取过多的酸性食物等。2008年我国成年人牙本质过敏症患病率40.7%，在牙周病患者中的患病率更高达60%～98%，且患病人数呈逐渐上升趋势[2]，因此研发防治牙本质敏感症的有效方法十分必要。

临床上治疗牙本质过敏的方法很多，如脱敏剂药物治疗、抗敏感牙膏和漱口水、YAG 激光脱敏、电凝法脱敏、冷冻脱敏等。各种脱敏治疗效果因人而异，其中使用抗敏感牙膏是牙本质过敏症患者人群的首选。用作抗敏感牙膏的功效成分很多，但主要的功效成分一般有两种作用基理：一是降低牙本质小管的通透性，封闭牙本质小管，目前主要有氟化钠、Pro?Argin 技术(主要成份为精氨酸、碳酸钙和氟化钠)、Novamin技术、氯化锶等，二是阻断神经应答，降低神经兴奋性，主要为含钾制剂、丹皮酚等[3]。其中，含氟制剂是临床上最常用的方法。有研究表明，含氟制剂只能封闭牙本质小管口而无法渗透到牙本质小管内，经刷牙后封闭的牙本质小管重新开放，仅在小管周边部位残留少量封闭物[2]。因此，通过封堵牙本质小管促进牙本质的再矿化手段已经成为抗敏感技术最热门的研究方向。近年来，关于羟基磷灰石(hydroxyapatite，HAP)用于牙本质过敏症治疗的研究很多。羟基磷灰石是人体骨和牙齿的主要无机成份，安全无毒，与牙釉质有很高亲和力, 能修补牙齿表面的细小裂缝牙本质[4]，使牙齿表面产生一层致密的矿化层[5]，表现出良好的自然封闭牙本质小管、抗牙本质过敏的潜能，已成为抗敏感活性成份的研究热点。经研究证实HAP 间存在着同质吸附作用，HAP 微粒子具有明显的封闭暴露牙本质小管的作用，并发现纳米羟基磷灰石(nano hydroxyapatite，n-HAP)对牙本质小管的封闭效果更好[6]。本文以纳米羟基磷灰石为原料，制备了含不同梯度的纳米羟基磷灰石抗敏牙膏，探讨了不同含量的羟基磷灰石对牙本质小管封堵率的影响。

实验不仅是生命观念和科学思维的实践，也是培养社会责任的途径。“模拟尿糖的检测”中有一个问题： 医生仅凭一份尿液样本就能断定某人患糖尿病吗？意在引导学生基于生物学的认识，参与个人与社会事物的讨论，并作出理性解释和判断。教师可引导学生进行充分讨论，并达成统一认识： 仅凭一份尿液样本不能断定某人患糖尿病，食糖过多使血糖暂时过高，也会导致尿液中暂时出现葡萄糖。从而理解任何确诊或治疗决策都不能基于某一单项检测结果。此外，通过关注糖尿病，鼓励学生宣传关爱生命的观念和知识，崇尚健康的生活方式。再如在“种群的特征”的教学中，引导学生从年龄结构的角度解读全面二胎政策，关注社会议题。

1 材料和方法

1.1 主要实验器材

 

表1 主要实验器材

  

仪器名称型号规格电子天平Sartorius CP224S低速精密切割机ISOMET Low Speed Saw磨抛机Metaserv 2503D轮廓仪Contour GT-K超声波清洗剂SK8200H水浴摇床SHA-C偏振光显微镜Eclipsc LV100N POL电子扫描显微镜JSM-6610LV电动牙刷Oral-B

1.2 人工唾液的制备

2.200g/L胃粘蛋白(gastric mucin)(用80℃温水进行溶解)，0.38g/L NaCl，0.213g/L CaCl2·H2O，0.738 g/L KH2PO4·3H2O，以及1.114 g/L KCl。最后用0.02 mol/L NaOH溶液调节pH值为7.0[3]。

1.3 牙本质样本的制作

选取新鲜拔除的离体牛牙(拔牙时间在1个月内)，要求牙冠完整无裂纹、无龋坏，充分清洁干净后储存于中性10% 甲醛溶液中备用。用低速精密切割机垂直于牛牙长轴切割，获得平坦的牙本质暴露区。平坦区尺寸约为8mm×8mm，厚度控制在2mm左右。样本使用 磨抛机在水灌注情况下使用碳化硅砂纸( 依次使用600目、1000目、2000目) 抛光形成5mm×5mm平面，形成均一、平整、光滑的表面，去离子水超声波清洗3次，每次10 min。 用40%的正磷酸腐蚀牛牙样本20min去除模糊层，腐蚀过程中将样本置于摇床进行轻微来回震荡。后用去离子水冲洗，用5.0% NaOCl轻度腐蚀5min，再用去离子水超声清洗20min。用偏振光显微镜观察筛选处理后牙本质小管充分暴露的牛牙样本42颗，得到牙本质小管开放的牙本质片(图1)。

计算各组牙小管封堵率R：

  

图1 经5.0% NaOCl轻度腐蚀5min后的牙本质片扫描电镜图像×5000

2 含羟基磷灰石牙膏对暴露牙小管的封堵实验研究

2.1 实验样品

硬件在回路仿真 （Hardware-in-the-Loop Simulation）主要是在上一阶段已经结束后，并已完成产品，而应用的仿真。由于真实环境中测试条件有限不能对产品进行多种情况的测试。这一阶段就能应用dSPACE实时仿真系统的硬件在回路仿真来实现。图2是对汽车防抱死装置（ABS）控制器的测试原理图。

 

表2 封堵实验分组方案

  

实验分组样本名称空白对照组去离子水阴性对照组不含羟基磷灰石的牙膏;实验组含2.5%羟基磷灰石的牙膏含5.0%羟基磷灰石的牙膏含7.5%羟基磷灰石的牙膏含10.0%羟基磷灰石的牙膏阳性对照组高露洁专效抗敏牙膏

注：1) 实验组牙膏仅羟基磷灰石含量存在差异；2) 高露洁专效抗敏牙膏为市售牙膏。

统计分析结果(见表5)。

各组牙小管封堵率(见表4)。

2.2 封堵实验

将牛牙本质样本随机平均分成 7组。通过体外刷牙实验对各组牙样本进行牙小管封堵处理。体外刷牙实验： 将各组牛牙样本转移至脱矿液[2] (0.1M乳酸，pH=4.1)中浸泡 30min。脱矿后用去离子水冲洗干净样本。空白对照组使用去离子水、阴性对照组使用不含羟基磷灰石的牙膏、阳性对照组使用高露洁专效抗敏牙膏、实验组使用不同含量羟基磷灰石牙膏按牙本质循环处理的方法处理牙本质。牙本质循环处理方法为：(9∶00 am)按 1∶1.5( 牙膏∶水)的比例分别制备各个实验组的牙膏浆液。电动牙刷用200克的力分别在牙膏浆液中对各组的3个平行牛牙牙本质样本刷洗2min、静置2min。牙本质片置于去离子水下轻轻冲洗30s以去除表面的实验样品，空白对照组的牙本质样本仅用电动牙刷蘸蒸馏水刷洗，所有牙本质样本处理后分别保存于新鲜人工唾液中，并存放于 37℃恒温水浴箱中。保存8小时后(5∶00 pm)，按脱矿、清洗、刷牙、清洗的流程进行当天的第二次牛牙牙本质样本处理。处理后将其保存于新鲜人工唾液中，并存放于 37℃ 恒温水浴箱中过夜。连续刷洗7天，每天2次，具体方案按照表3进行。循环7 天后，将牛牙牙本质样本放置于去离子水中，在 37℃的恒温摇床中以 120 rpm 的频率轻微震荡2min。最后在25℃ 的恒温箱中将牛牙本质样本干燥 24h，干燥后进行扫描电子显微镜( SEM) 观察。

将处理好的牛牙牙本质样本随机分成7组，每组6颗牙齿，用电动牙刷刷牙，实验分组见表2：

 

表3 牙本质封堵过程操作方案

  

时 间实验方案8∶30～9∶00去矿化液中浸泡30分钟9∶00～9∶30电动牙刷刷洗2min9∶30～17∶30浸泡于37℃人工唾液过夜17∶30～18∶00去矿化液中浸泡30分钟18∶00～18∶30电动牙刷刷洗2min18∶30～8∶30浸泡于37℃人工唾液过夜

3 实验结果

3.1 扫描电子显微镜观察

评价方法：采用单因素方差分析，比较实验组和对照组的牙小管封堵率(%)，校验水准α=0.05。

  

a：空白对照组； b：2.5% HAP组； c：5.0% HAP组；d：7.5% HAP组； e：10.0% HAP组； f：阳性对照组(高露洁)

 

图2 经不同含量的羟基磷灰石处理7d后牙本质小管的扫描电镜图像×2000

从扫描电镜结果看，用阳性对照和测试样品牙膏进行7天阻塞处理后，牙本质表面有沉积，绝大部分暴露的牙小管被阻塞。而不含羟基磷灰石的空白牙膏，在经过7天阻塞处理后，牙本质样本表面仍然有很多小孔，牙小管几乎没有被阻塞。

3.2 图像分析计算封堵率

我国当前的职业教育主要以学校培养为主。因为企业规模不大、职业流动率高，由企业担当职业教育主体的可能性小。这决定了职教体系在教学内容、实训设备、师资结构上有着“先天不足”的特点。但是，低福利、高失业率的社会特征决定了谋求相对稳定的职业仍然是我国劳动者获取收入、求得生存的主要手段。经过高质量的培训，顺利上岗的劳动者在激烈的人才竞争中，能够脱颖而出。所以，职业教育的发展空间很大，适合市场和职业教育发展规律的人才培养模式将有助于培养此类技能型人才。

 

将牙小管阻塞处理后的牛牙牙本质样本进行喷金处理，进行扫描电镜观察( 放大倍数为 2000 倍)，进行暴露的牙小管计数C 。观察结果如图 1 所示。分别于处理区和非处理区各取3个视野的图片(2000倍)，进行暴露的牙小管计数C。

检验结果：

生活面前，心态平和，不抱怨，不悲观，想得通，看得开，好运自然来。这就是一名运气甚佳的的士司机的处世之道。

 

表4 各组牙小管封堵率R(%)

  

组 别封堵率R(%)空白对照组3.25阴性对照组6.23阳性对照组88.38实验组1(含2.5%羟基磷灰石)50.24实验组2(含5.0%羟基磷灰石)82.56实验组3(含7.5%羟基磷灰石)85.72实验组4(含10.0%羟基磷灰石)89.52

分区：用胶带粘贴一半区域(约5 mm × 2.5 mm)的牙本质样本，作为非处理区，另外的一半区域作为刷牙实验处理区

 

表5 实验组与各对照组牙小管封堵率的比较

  

组间比较P值实验组1实验组2实验组3实验组4空白对照组<0.001<0.001<0.001<0.001阴性对照组<0.001<0.001<0.001<0.001阳性对照组0.04580.58230.60300.8498

注：采用SPSS20.0统计软件，单因素方差分析。

4组实验组与空白对照组及阴性对照组比较，P值均小于0.05，差异有显著性，标明实验组封堵牙小管效果优于空白对照组及阴性对照组；与阳性对照组比较，实验组1的P值小于0.05，差异有显著性，其余3组实验组P值大于0.05，无显著差异，标明实验组2、3、4具有与阳性对照组相同的牙小管封堵效果。实验组2、3、4之间无显著差异。

4 结论与讨论

含2.5%、5%、7.5%、10%羟基磷灰石的牙膏对牙本质小管具有封堵效果，扫描电镜下可见牙本质表面有大量矿物质覆盖形成的表面沉积层。其中含5%、7.5%、10%羟基磷灰石的牙膏对牙本质小管具有显著的封堵效果，封堵率高达80%以上，远远高于空白对照组和阴性对照组，与市售抗敏感牙膏相当。

随着牙膏中羟基磷灰石含量的增加，膏体对牙本质小管的封堵率也逐步提高，但当含量达到5%及以上时，不同含量的羟基磷灰石牙膏对牙本质小管的封堵率无显著差异，这可能是由于一定面积内牙本质小管的数量是一定的，在羟基磷灰石的含量较低时，随着羟基磷灰石含量的增加，被封堵的牙小管的数量也随之增加，封堵率提高，当羟基磷灰石含量达到一定浓度时，被封堵的牙小管的数量达到饱和，和，封堵率基本不变。此外，在牙膏配方中，高浓度的羟基磷灰石的使用会大大增加生产工艺复杂性和膏体稳定性，所以在实际的配方设计中建议在有效的情况下选择较低含量的羟基磷灰石。

本实验仅设计了封堵率，未设计封堵层厚度，后期实验将继续探讨不同含量的羟基磷灰石牙膏对牙本质小管封堵层厚度的影响，并使用牙本质渗透性测定、能谱仪检测钙、磷元素等更多客观指标来评价不同含量羟基磷灰石牙膏封闭牙本质小管的效果。

样本非财务异常公司Z值均在预警值以上，财务异常公司在预警值中，面临财务失败的风险，样本公司的估值明显受到资产负债表和利润表的影响，这与财务困境公司的估值理论是一致的。企业的市场价值越高，资产负债表和利润表在企业价值评估中的作用越大。上市公司应提高会计信息披露的有效性，确保财务数据的真实性和可靠性。上市公司应披露更多的非报表信息，防止投资者仅利用资产负债表信息来形成对上市公司的错误评价。

参考文献

[1] Canadian Advisory Board on Dentin Hypersensitivity. Consensus-based recommendations for the diagnosis and management of dentin hypersensitivity [J].J Can Dent Assoc,2003,69(4):221- 226.

[2] 杨剑珍，申晓青，刘成霞等. 不同粒径和形貌的羟基磷灰石对牙本质小管的堵塞作用及耐磨性研究[J]. 口腔疾病防治，2017.25 (5):288-293.

[3] 谢晓芳，陈敏珊，江山. 抗牙本质敏感牙膏发展概况 [J]. 口腔护理用品工业,2013.23(2).

[4] 蒙衍强，黎昌健. 纳米级羟基磷灰石在牙膏中的应用研究 [J]. 日用化学工业,2006.36(2).

[5] 吕奎龙，滕立群，孟祥才等.纳米羟基磷灰石牙膏对人工龋再矿化研究 [J]. 黑龙江医药科学, 2002, 25(3): 26-27.

[6] 张鹏，管红雨，钟小君. 钛种植体羟基磷灰石和神经生长因子复合涂层的制备及缓释性能研究[J]. 广东牙病防治, 2014, 22(5): 238-240.