安全药理学研究作为新药临床前安全性评价领域中一个重要的组成部分，主要是应用实验动物通过体内和体外的方法，预测和评价新药在人体或动物体临床试验中有可能出现的不良反应，近年来愈发受到各国药品监督管理局和新药研究与开发人员的普遍关注[1]。其主要是研究药物及其代谢产物在治疗剂量或治疗剂量以上的暴露水平时,潜在不期望出现的对生理功能的不良影响,核心组合观察药物对中枢神经系统、心血管系统和呼吸系统的影响[2-3]。根据需要进行追加和/或补充安全药理学研究。板连败毒口服液以板蓝根、石膏、芦根和连翘等药组方，拟用于鸡风热感冒。本试验在受试药物急性毒性、长期毒性试验的基础上，进一步明确其临床用药的安全性。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 KM系小鼠，20 g±2 g；SD大鼠，200 g±20 g。所有动物雌雄各半，SPF级，由广东省医学实验动物中心提供，许可证号为SCXK(粤)2013-0002。

1.1.2 药物与试剂 板连败毒口服液，四川通达动物保健科技有限公司，批号150903；戊巴比妥钠，上海试剂公司，批号65C10218。

回填黏土时，根据选定的黏土及夯实工具，预先做夯实试验，以确定铺土厚度、土的最佳含水量、夯打遍数等主要参数，经监理工程师批准确认后，作为控制正式回填的标准。回填过程中严格控制铺土厚度，严格按确定的夯打遍数和行进速度确保充分夯实。

1.1.3 仪器设备 MC4000小动物无创血压分析系统，美国Hatteras公司产品；EMKA小动物无创肺功能监测系统，法国EMKA Technologies公司产品；YLS-1B多功能小鼠自主活动记录仪，XZC-5C转棒式疲劳仪，山东省医学科学院设备站。

1.1.4 剂量换算 鸡的推荐剂量为0.215 g/kg体重，根据我们的研究结果，鸡→小鼠体表面积折算系数为0.05，鸡→大鼠体表面积折算系数为0.37。换算公式：目标动物剂量=鸡的剂量×鸡体重×动物体重÷体表面积折算系数，即得到小鼠等效剂量为0.065 g/kg体重，大鼠等效剂量为0.087 g/kg体重。

1.2 方法

1.2.1 神经系统安全药理学

1.2.1.1 对戊巴比妥钠阈剂量催眠作用的影响 小鼠随机分成4组，每组20只，分别为对照组(9 g/L生理盐水)、低剂量组(0.065 g/kg)、中剂量组(0.13 g/kg)和高剂量组(0.26 g/kg)。分别按照设计剂量灌药1次，50 min后，分别腹腔注射50 mg/kg戊巴比妥钠，记录从翻正反射消失到翻正反射恢复的时间，即小鼠的睡眠持续时间。

1.2.1.2 对戊巴比妥钠阈下剂量催眠作用的影响 小鼠随机分成4组，每组20只，分别为对照组(9 g/L生理盐水)、低剂量组(0.065 g/kg)、中剂量组(0.13 g/kg)和高剂量组(0.26 g/kg)。分别按照设计剂量灌胃给药1次，50 min后，分别腹腔注射25 mg/kg戊巴比妥钠 。小鼠的翻正反射消失达到1 min以上即为睡眠，观察灌药后30 min内小鼠出现睡眠的个数。

2.1.1 对戊巴比妥钠阈剂量催眠作用的影响 板连败毒口服液高、中、低剂量组与对照组比较，戊巴比妥钠阈剂量引起的小鼠睡眠维持时间没有显著差异(P>0.05)(表1)。

1.2.1.4 对小鼠机能协调运动的影响 先对小鼠进行训练，直到其在转棒式疲劳仪(16 r/min)上运动3 min不坠落，筛选训练成功的小鼠80只，随机分为4组，每组20只，分别为对照组(9 g/L生理盐水)、低剂量组(0.065 g/kg)、中剂量组(0.13 g/kg)和高剂量组(0.26 g/kg)。分别按照设计剂量灌药1次，50 min后，通过转棒式疲劳仪(16 r/min)来观察小鼠的机能协调运动(1 min及3 min内转棒坠落率)。

一般情况下，项目总体是由技术队长、专册循序渐进成长的。根据铁路项目实践，可研究将学历、资历等静态指标转变为能力、个性等动态评价标准，作为总体人才的选取原则(见表3)。

1.2.3 呼吸系统安全药理学 大鼠随机分为4组，每组10只，分别为对照组(9 g/L生理盐水)、低剂量组(0.087 g/kg)、中剂量组(0.174 g/kg)和高剂量组(0.348 g/kg)。分别灌药1次，用无创肺功能分析仪在给药前1 h及给药后0 h、1 h、2 h、4 h时测定潮气量(tidal volume,TV)、呼吸频率(f)等[4]。

潮气量(tidal volume,TV)同一时间点比较，差异均不显著(P>0.05)；呼吸频率同一时间点比较，差异亦不显著(P>0.05)(表9，表10)。各剂量组大鼠呼吸节律稳定。

1.2.4 统计分析 计量资料用表示，组间差异性采用单因素方差分析和多重比较；计数资料采用x2检验。P<0.05表示差异具有显著意义。

2 结果

2.1 神经系统安全药理学

1.2.1.3 对小鼠一般状态和自主活动的影响 小鼠随机分成4组，每组20只，分别为对照组(9 g/L生理盐水)、低剂量组(0.065 g/kg)、中剂量组(0.13 g/kg)和高剂量组(0.26 g/kg)。分别按照设计剂量灌胃给药1次。于灌药前60 min及灌药后10 min、30 min及60 min观察小鼠的一般状态和自主活动(10 min内小鼠的运动次数)的情况。

表1 板连败毒口服液对小鼠戊巴比妥钠阈剂量催眠效果的影响

Table 1 Hypnotic effect of Banlian Baidu oral liquid on sodium pentobarbital threshold dose in mice

组别 Goup动物数量 Number of animal睡眠维持时间 Sleep maintenance time对照组 Control group2032.40±7.15低剂量组 Low-dose group2030.53±7.83中剂量组 Middle-dose group2028.47±11.78高剂量组 High-dose group2028.73±9.38

2.1.2 对戊巴比妥钠阈下剂量催眠作用的影响 板连败毒口服液高、中、低剂量组与对照组比较，戊巴比妥钠阈下剂量引起的小鼠睡眠数量没有显著差异(P>0.05)(表2)。

表2 板连败毒口服液对小鼠戊巴比妥钠阈下剂量催眠效果的影响

Table 2 Hypnotic effect of Banlian Baidu oral liquid on sodium pentobarbital subthreshold dose in mice

组别 Goup对照组 Control group低剂量组 Low-dose group中剂量组 Middle-dose group高剂量组 High-dose group动物数量 Number of animal20202020睡眠/% Sleep0(0/20)0(0/20)0(0/20)0(0/20)未睡/% No sleep100(20/20)100(20/20)100(20/20)85(18/20)

2.1.3 对小鼠一般状态的影响 灌药后连续观察1 h，各组小鼠的一般活动、姿势、步态均表现正常，精神状态良好，毛色光滑，运动活跃、摄食以及大小便均正常，无流涎、肌肉震颤、不安、嘶叫及瞳孔变化等异常表现。提示板连败毒口服液对小鼠的一般状态无明显影响。

2.1.4 对小鼠自主活动的影响 板连败毒口服液高、中、低剂量组与对照组相比较,小鼠自主活动次数相同时间比较，无显著差异(P>0.05)；灌药前后各组自身比较也均无显著差异(P>0.05)(表3)。说明板连败毒口服液对小鼠的自主活动无明显影响。

静脉注射40 g/L的石膏上清液1 mL/kg，会导致家兔出现血压下降、血流量减少等反应。有石膏配伍的中药方剂，低剂量会使动物血压上升。连翘的有效生物成分齐墩果酸，具有强心利尿的功效，给犬注射100%连翘注射液，能使犬的尿量增多，血压下降[7]，家兔耳缘静脉注射连翘注射液，也能使血压出现下降现象，3 min～4 min恢复正常[8]。石膏和连翘均能对动物血压产生一定的作用。

2.1.5 对小鼠协调运动的影响 板连败毒口服液高、中、低剂量组与对照组比较，各剂量组于给药后1 min及3 min内的转棒坠落率均无显著差异(P>0.05)。分析中剂量组小鼠坠落(3 min内转棒坠落1只，坠落率为5%)原因可能是人为操作不当造成的(灌药时导致小鼠受伤)(表4)。说明板连败毒口服液对小鼠机能协调运动无明显影响。

作为“非遗”的雕刻艺术，它与中国传统绘画艺术之间的关系，也许还可以从其它更多的角度加以探讨。但是，我们单就文化同源、理念相近的角度就已经可以做出合理的推断，它们二者之间的姻缘关系都是建立在民族文化大环境的基础之上的。作为同属于中华民族文化大家庭中的一分子，它们二者之间所共有的文化基因，即便随着时间的推移也无法遭到否定与质疑。

2.2 对大鼠心血管系统的影响

同一时间点比较，各组收缩压无显著差异(P>0.05)；舒张压灌药1 h高剂量与中剂量组有显著差异(P<0.05)，灌药4 h高剂量组与低剂量组有显著差异(P<0.05)；平均压灌药0 h高剂量组与其他3组有显著差异(P<0.05)；脉搏的同一时间点比较，各组均无显著差异(P<0.05)(表5～表8)。

石膏主要含有Ca2+、Mg2+等，Ca2+能促使纹状体、下丘脑释放内阿片肽，抑制大脑C类纤维传入引起的体感皮层诱发电位(C-CEP)，发挥镇痛的作用。

表3 小鼠自主活动情况(10 min内运动次数)

Table 3 Situation of autonomic activity in mice (motion times in 10 min)

组别 Goup对照组 Control group低剂量组 Low-dose group中剂量组 Middle-dose group高剂量组 High-dose group给药前1h 1 h before administration200.5±22.63189.8±29.68183.0±37.26204.5±24.76给药后10 min 10 min after administration174.4±24.06161.4±30.86171.5±31.78186.8±14.99给药后30 min 30 min after administration157.0±34.19153.8±19.03154.8±27.84155.8±32.38给药后60 min 60 min after administration157.8±36.95158.8±32.75159.8±41.79160.8±43.00

表4 小鼠机能协调运动试验结果

Table 4 Test result of functional coordination movement in mice

组别 Goup小鼠数量/只 Number of animal1 min內转棒坠落率/%Drop rate in 1 min3 min內转棒坠落率/%Drop rate in 3 min对照组 Control group2000低剂量组 Low-dose group 2000中剂量组 Middle-dose group2005高剂量组 High-dose group2000

表5 板连败毒口服液对大鼠收缩压的影响

Table 5 Effects of Banlian Baidu oral liquid on systolic pressure in rats

组别 Goup对照组 Control group低剂量组 Low-dose group中剂量组 Middle-dose group高剂量组 High-dose group给药前1 h 1 h before administration117.37±12.21122.24±11.37126.46±14.64132.37±11.01给药后0 h 0 h after administration129.58±13.24135.03±8.79132.91±9.99135.08±17.62给药后1 h 1 h after administration123.66±12.41132.01±7.52122.16±9.24141.89±15.79给药后2 h 2 h after administration123.21±18.17125.64±11.11118.27±15.09130.13±21.42给药后4 h 4 h after administration117.71±12.36117.10±8.51115.87±10.82124.31±16.72

表6 板连败毒口服液对大鼠舒张压的影响

Table 6 Effects of Banlian Baidu oral liquid on diastolic pressure in rats

组别 Goup对照组 Control group低剂量组 Low-dose group中剂量组 Middle-dose group高剂量组 High-dose group给药前1 h 1 h before administration89.54±21.5388.71±21.2699.90±15.48104.08±9.65给药后0 h 0 h after administration104.60±11.9695.36±14.27100.47±17.35110.42±12.054给药后1 h 1 h after administration100.03±9.86107.08±10.4389.89±6.98b116.67±24.81a给药后2 h 2 h after administration100.91±12.4897.63±12.7589.67±14.39100.69±20.77给药后4 h 4 h after administration91.86±7.6382.18±17.47b92.02±10.5798.93±11.34a

注：同列数据相比，不同字母代表差异显著(P<0.05)，相同字母代表差异不显著(P>0.05)。

Note:Different letters represent significant differences within the same column (P<0.05),the same letters represent no significant difference (P>0.05).

2.3 对大鼠呼吸系统的影响

3.3 年龄增高增加经产妇中各类高危妊娠的发生率 已有的国内外研究均发现，高龄初产妇发生前置胎盘、妊娠高血压疾病、慢性高血压合并妊娠、妊娠期糖尿病比例显著高于非高龄组 [3-6]。

1.2.2 心血管系统安全药理学 大鼠随机分为4组，每组10只，分别为对照组(9 g/L生理盐水)、低剂量组(0.087 g/kg)、中剂量组(0.174 g/kg)和高剂量组(0.348 g/kg)。分别灌药1次，用无创血压分析仪在给药前1 h及给药后0 h、1 h、2 h、4 h时测定平均动脉压(mean arterial pressure，MAP)、脉搏(pulse)、舒张压(systolic pressure，SP)、收缩压(diastolic presure，DP)等[3]。

3 讨论

3.1 板连败毒口服液对神经系统的影响

有研究表明，连翘的主要活性物质连翘酯苷能使小鼠白介素1β(IL-1β)、一氧化氮(NO)、脂质过氧化产物丙二醛(MDA)显著减低，而脑的总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)、谷氨酸(GLU)、乙酰胆碱(Ach)水平显著提高[4]。连翘苷酯可增加短暂性脑缺血小鼠海马CAI区可变神经元的数量[5]。说明连翘苷酯能对神经系统有良好的保护作用。同时，连翘有良好的镇吐止呕作用，其机制可能与延髓的呕吐神经有关[6]。

表7 板连败毒口服液对大鼠MAP的影响

Table 7 Effects of Banlian Baidu oral liquid on MAP in rats

组别 Goup对照组 Control group低剂量组 Low-dose group中剂量组 Middle-dose group高剂量组 High-dose group给药前1 h 1 h before administration90.77±16.7699.58±17.75108.51±15.07113.18±8.09给药后0 h 0 h after administration110.13±13.76b106.98±30.55b98.49±20.25b142.18±10.34a给药后1 h 1 h after administration119.61±10.31115.06±8.62100.30±7.11124.75±21.23给药后2 h 2 h after administration107.93±14.20106.72±11.1398.86±13.92110.19±20.59给药后4 h 4 h after administration100.18±6.6093.50±12.88699.60±8.52107.03±12.50

注：同列数据相比，不同字母代表差异显著(P<0.05)，相同字母代表差异不显著(P>0.05)。

Notes:Different letters represent significant differences within the same column (P<0.05),the same letters represent no significant difference (P>0.05).

表8 板连败毒口服液对大鼠脉搏的影响

Table 8 Effects of Banlian Baidu oral liquid on pluse in rats

组别 Goup对照组 Control group低剂量组 Low-dose group中剂量组 Middle-dose group高剂量组 High-dose group给药前1 h 1 h before administration397.28±33.211412.78±33.453427.17±26.758425.67±14.28给药后0 h 0 h after administration391.10±37.28 403.60±20.03 398.50±17.52410.40±35.64给药后1 h 1 h after administration404.86±29.45408.73±30.45420.30±31.45404.01±32.45给药后2 h 2 h after administration405.69±13.25407.34±36.85408.65±29.00415.59±33.68给药后4 h 4 h after administration383.40±21.72403.56±30.42401.20±16.81386.60±30.01

表9 板连败毒口服液对大鼠TV的影响

Table 9 Effects of Banlian Baidu oral liquid on tidal volume in rats

组别 Goup对照组 Control group低剂量组 Low-dose group中剂量组 Middle-dose group高剂量组 High-dose group给药前1 h 1 h before administration1.41±0.371.54±0.381.35±0.461.56±0.23给药后0 h 0 h after administration1.41±0.371.54±0.381.35±0.461.56±0.23给药后1 h 1 h after administration1.41±0.371.54±0.381.35±0.461.56±0.23给药后2 h 2 h after administration1.41±0.371.54±0.381.35±0.461.56±0.23给药后4 h 4 h after administration1.41±0.371.54±0.381.35±0.461.56±0.23

表10 板连败毒口服液对大鼠呼吸频率的影响

Table 10 Effects of Banlian Baidu oral liquid on respiratory rate in rats

组别 Goup对照组 Control group低剂量组 Low-dose group中剂量组 Middle-dose group高剂量组 High-dose group给药前1 h 1 h before administration178.55±32.32170.55±31.17173.05±28.61182.81±47.75给药后0 h 0 h after administration201.46±10.53194.73±16.23182.99±16.93176.49±4.18给药后1 h 1 h after administration182.55±25.60186.48±27.57175.49±11.81180.75±26.45给药后2 h 2 h after administration187.39±16.93175.68±18.52171.05±20.48200.44±41.93给药后4 h 4 h after administration164.33±19.37180.21±30.03173.04±20.63158.51±12.82

初冬的天地干净、宽广、朴实，阳光则显得格外珍贵，照在玻璃窗上，让人不困思眠。趁这个残秋尽、冬未隆的日子里，不如与三五好友，围炉煮酒，在腾起的水汽中畅食畅饮，忘却拖沓了几个季度的疲惫。就算此时屋外寒风横虐，那也是时光恰好。

在小鼠戊巴比妥钠阈剂量催眠结果中，药物组对戊巴比妥钠阈剂量引起的睡眠维持时间与对照组无显著差异(P>0.05)。在小鼠戊巴比妥钠阈下剂量催眠结果中，各剂量组对戊巴比妥钠阈下剂量引起小鼠睡眠数量无显著差异(P>0.05)，但高剂量组中，有2只小鼠进入了睡眠的状态，这可能与连翘对于神经系统具有保护作用有关，但在后续的神经系统试验中，各个剂量组与对照组均无差异，表明该药物对小鼠的自主活动、机能协调性等方面的机能均无影响。

图1 板连败毒口服液对大鼠的呼吸节律影响

Fig.1 Effects of Banlian Baidu oral liquid on breath rhythm in rats

3.2 板连败毒口服液对心血管系统的影响

“说什么呢？威尔很厉害。”克里斯蒂娜耸了耸肩，“再说，我终于知道怎么可以不输了，他教我找到了自己的弱点，我以后只要阻止别人打我的下巴就好了。”

1.6 捕食线虫真菌的鉴定 通过菌株形态特征及捕食器官类型〔10〕进行形态学鉴定，同时通过ITS（internal transcribed spacer region of the ribosomal RNA gene，核糖体RNA上的非转录间隔区）和TUB（β-tubulin gene，微管蛋白编码基因）基因序列同源性分析进行分子生物学鉴定〔11-12〕，两者结合进行种属的鉴定。

在板连败毒口服液心血管系统安全药理学试验中，在各个时间段，各组大鼠的收缩压无显著差异(P>0.05)。灌药后1 h，板连败毒口服液高剂量组舒张压显著升高与中剂量组对比差异显著(P<0.05)，可能由于连翘等药物的作用大鼠的舒张压均升高,1 h后，药物的影响逐渐消失，各组的舒张压开始下降。灌药4 h后，高剂量组与低剂量组的舒张压出现差异，在各个时间段，对于高剂量组，药物的影响尚存在，因此会出现与其他剂量组的差异。各剂量组与空白对照组相比均差异不显著(P>0.05)。药物可能对大鼠舒张压造成一定的影响，但是对大鼠并无毒副作用。

给药0 h后，高剂量组MAP上升，与空白对照出现显著差异(P<0.05)，可能是连翘和石膏的作用，使大鼠血压在灌药0 h的时候暂时上升，随着药物作用的消失，其余4个时间点的MAP，各剂量组与对照组均无显著差异(P>0.05)。板连败毒口服液对大鼠脉搏没有影响。

可见，由于其药性作用，在灌药的初期会使大鼠的舒张压上升，平均动脉压上升，但随着药性的影响逐渐消失，舒张压和平均动脉压在灌药后2 h恢复正常，板连败毒口服液对收缩压和脉搏并无影响。总体说明，板连败毒口服液对心血管系统无明显影响。

3.3 板连败毒口服液对呼吸系统的影响

芦根性寒、味甘，具有清热泻火、生津止渴、除烦、止呕、利尿之功效，临床报道可以治疗感冒、急慢性支气管炎、肺脓疡等症[9]。石膏降肺热，化痰清热解毒，用于治疗肺热咳嗽、气喘。板蓝根善于清解实热火毒，并且以解毒利咽见长，临床上用于咽喉肿痛、流感等的治疗[10]。

所检索文献还没有关于板蓝根、石膏、芦根、连翘等药物或其有效成分对呼吸系统影响的报道。本次试验中，通过测定并且记录大鼠在给药前后不同时间点的呼吸频率和潮气量的变化，结果表明，呼吸频率和潮气量与药前比较均无显著差异(P>0.05)。说明板连败毒口服液对大鼠呼吸系统无显著影响。

随着信息技术的发展，互联网已经被普遍运用在各个地方，在青少年的日常生活中已经离不开互联网，各种游戏，不良信息，诱惑着青少年思想及心智，在一定程度上已经影响了青少年的正常成长。在青少年成长时期，教师必须要给予正确引导。

综上所述，板连败毒口服液对动物的神经系统、心血管系统和呼吸系统均无显著影响。

参考文献:

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