麦胚是面粉生产过程中的主要副产物之一，具有高达30%的蛋白质含量，而且麦胚蛋白是一种全价蛋白，能满足人体所必需的8种氨基酸，还蕴含着许多具有生理活性的氨基酸序列[1]。目前，脱脂麦胚的抗氧化活性已被很多研究证实，Adom等[2]研究了麦粒各部分的体外抗氧化活性，结果表明麦胚抗氧化活性明显强于麦粒的其他部分。Zhu等[3]研究发现，相对分子质量在1 500以下的麦胚蛋白水解物显示的各种体外抗氧化活性指标均较高。麦胚中具有抗氧化活性作用的主要是肌肽和谷胱甘肽，以及蛋白质被酶解之后获得的抗氧化肽。麦胚的抗氧化性提取物可以作为某些功能食品的基料，或者直接食用，起到增强人体免疫力、延缓机体衰老、减少一些自由基对机体损伤的作用[4]。目前已被证实具有抗氧化活性的天然肽大多都是通过酶解蛋白质获得的，水解脱脂蛋白能显著提高麦胚的抗氧化活性[5]。

本研究通过测定还原力、DPPH自由基清除率、超氧阴离子自由基清除率等指标，比较酶解前后，不同稳定化方法处理麦胚水解物的抗氧化活性。

大学生在大学期间学习钢琴时应注重自身对于所学知识的掌握，只有自身掌握到了知识，才能够将这些知识通过自己的转化与研究运用到钢琴教学中。首先大学生应在大学期间努力积累钢琴知识，并能够保证这些知识能够得以实践，现在越来越多的大学生都只是自己学会了但并不能够将这些知识运用到实践中，也就不能够很好的运用到钢琴教学中。因此我认为，当代大学生应首先注重将自身学到的钢琴知识完全掌握，并能够保证将所掌握知识熟练到可以运用到实践当中，再从实践中吸取经验并做积累，这样才能够在钢琴教学中将自己所学知识巧妙地运用到钢琴教学中。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

小麦胚：淮安市新象面粉有限公司；福临门一级大豆油：中粮集团；氯化钠、氢氧化钠、浓盐酸、浓硫酸、SDS、正己烷等（均为分析纯）：国药集团化学试剂有限公司。

1.2 仪器与设备

JR-Y10臭氧灭菌箱：南京金仁环保科技有限公司；HG101-2电热鼓风干燥箱：南京实验仪器厂；P70D20TL-D4微波炉：格兰仕微波炉电器有限公司；FW100高速万能粉碎机：天津泰斯特仪器有限公司；HH-4数显恒温水浴锅：国华电器有限公司；722光栅分光光度计：上海精密科学仪器有限公司；SYQDSX-280B不锈钢压力蒸气灭菌锅：上海华线医用核子仪器有限公司；IKAT18高速分散机：北京中联科仪科技有限公司；酶标仪：美国Bio Tek公司。

1.3 麦胚稳定化处理方法

烘烤处理 [6]：料层厚 1～2cm，110℃烘干 30min，待温度自然降到室温后用聚乙烯自封袋包装；微波处理[6]：料层厚1～2cm，600W处理2min，待温度自然降到室温后用聚乙烯自封袋包装；高压蒸汽处理[6]：料层厚1～2cm，0.1MPa处理20min，冷风干燥20min；臭氧处理：双层纱布包装麦胚置于臭氧灭菌箱的滚筒内，80mg/mL处理15min，取出，用聚乙烯自封袋包装。

本文实验选用了两个公开数据集：FilmTrus[注] www.librec.net/datasets.html和Epinions[注] trustlet.org/wiki/Epinions_datasets.它们均含有用户-项目评分和用户间的信任关系，统计属性分别如表1所示.

1.4 脱脂麦胚蛋白的制备

稳定化处理后的麦胚用80%乙醇清洗，45℃烘干12h，置于锥形瓶中，按1∶5（M/V）的比例加入正己烷，恒温振荡箱浸泡12h，倒掉上清液，再按1∶3（M/V）的比例加入正己烷，恒温振荡箱浸泡12h，倒掉上清液，低温烘干，获得脱脂麦胚。粉碎，全部过80目筛，将细化的样品按料水比为1∶20（g/mL）搅拌均匀，用0.5mol/L的NaOH溶液将pH值调至9.0，搅拌浸提30min，浸提液3 500r/min离心20min，取上清液，然后用1.0mol/L的HCl溶液将上清液的pH值调至6.3，加入适量的淀粉酶，并置于60℃的水浴锅中，酶解至遇碘不呈蓝色为止，将溶液pH值调为4.0，然后离心去上清液，冷冻干燥得脱脂麦胚蛋白。

1.5 脱脂麦胚蛋白的酶解

利用碱性蛋白酶在50℃、pH8.0、加酶量6.0%、底物浓度4.0%的条件下进行酶解3h，沸水浴灭酶10min，冷却后冷冻干燥备用。

1.6 还原力的测定

式中，A0为未加样品的DPPH自由基的吸光度；Ai为加样品后的DPPH自由基的吸光度；Aj为样品与无水乙醇混合后的吸光度[8]。

1.7 DPPH自由基清除率的测定

取冷冻干燥后的脱脂麦胚蛋白，配制质量浓度分别为 0.1mg/mL、0.5mg/mL、1.0mg/mL、5.0mg/mL、10.0mg/mL的梯度液，取2.0mL，加入2.0mL1.0×10-4mol/L的DPPH自由基无水乙醇溶液，混合均匀，室温下避光反应 20min，取出，4 000r/min离心 10min，取上清液在波长517nm处测定吸光度Ai，以2.0mL样品和2.0mL无水乙醇溶液，测定其吸光度Aj，以相同质量浓度的VC做对照实验。DPPH自由基清除率计算见公式（1）。

DPPH自由基清除率是抗氧化性的一种反映，清除率越高，说明抗氧化活性越强。由图2可知，VC具有很高的DPPH自由基清除率，当质量浓度为10mg/mL时达到了93.86%，不同稳定化处理的麦胚蛋白的清除率不同，但其DPPH清除率均随蛋白浓度的增加而升高，在低浓度时，不同处理麦胚蛋白的清除率比较接近，随着蛋白浓度的增大增加较快，当质量浓度为10mg/mL时，均能达到60%左右，当质量浓度为5.0mg/mL时，微波和臭氧处理后的麦胚显示了较好的DPPH清除率，其清除率均高于未处理麦胚，反映在此浓度时其处理下的麦胚蛋白具有较高的抗氧化活性。

2.1.2 DPPH自由基清除率

 

取冷冻干燥后的脱脂麦胚蛋白，配制质量浓度为 0.1mg/mL、0.5mg/mL、1.0mg/mL、5.0mg/mL、10.0mg/mL的脱脂麦胚蛋白液，取0.8mL各浓度液，分别加入1.6mL0.2mol/L（pH6.6）的磷酸盐缓冲液，2.0mL1%的铁氰化钾溶液，混合后于50℃恒温水浴中反应20min，取出冷却，再加入2.0mL10g/mL的三氯乙酸溶液，混合均匀后3 500r/min离心10min，取2.0mL上清液，并加入2.0mL蒸馏水和0.4mL0.1g/mL的三氯化铁溶液，混合均匀，室温静置30min，在波长700nm处测定吸光度A，以相同质量浓度的VC做对照实验[7]。

1.8 超氧阴离子自由基（O2－）清除率

取干燥洁净的试管，向试管中依次加入1.0mL 0.05mol/L的Tris-HCl缓冲溶液，1.0mL0.001mol/L的EDTA溶液，再加入0.4mL质量浓度分别为0.1mg/mL、0.5mg/mL、1.0mg/mL、5.0mg/mL、10.0mg/mL 的脱脂麦胚蛋白液以及1.0mL0.000 4mol/L的邻苯三酚溶液，混合均匀后，静置反应10min，再加入30μL0.1mol/L的二硫苏糖醇溶液终止反应，测定溶液在波长325nm处的吸光度A，以相同质量浓度的VC做对照实验，样品对O2-的清除能力，见公式（2）。

2.2.1 还原力

 

式中，A0为邻苯三酚与溶剂混合液的吸光度；A1为邻苯三酚与样品反应的吸光度；A2为样品与溶剂混合液的吸光度[9]。

1.9 数据处理

抗氧化剂是通过自身的还原作用来清除自由基，抗氧化活性正相关于还原力，700nm波长处吸光度的高低可以间接反映抗氧化剂的抗氧化活性，吸光度越大，还原力越强，说明抗氧化活性越高[10]。由图1可知，麦胚蛋白在酶解前，麦胚还原力随蛋白浓度增加而升高，但是还原力水平较低，不同稳定化处理麦胚蛋白的吸光度值相差很小，说明不同处理方法对未酶解麦胚蛋白的还原力影响较小。

2 结果与分析

2.1 稳定化处理后脱脂麦胚蛋白酶解前抗氧化活性分析

2.1.1 还原力

数据为三次平行试验的平均值，测定结果用EXCEL作图，并进行回归分析。

  

图1 不同稳定化处理后麦胚蛋白酶解前的还原力

2015年1月～2018年7月共进行关节镜微创手术治疗臀肌挛缩症患者70例。男26例，女44例；年龄18～35岁，平均（23.71±1.62） 岁。其中单侧者8例，双侧者62例，合计132髋。术前常规评估臀肌挛缩程度（图1）。本研究经医院伦理委员会批准通过。患者均签署知情同意书。按照贺西京等的分级标准，其中Ⅰ度挛缩22髋，Ⅱ度挛缩86髋，Ⅲ度挛缩24髋。

科学思维，即指尊重事实和证据，崇尚严谨和务实的求知态度，运用科学的思维方法认识事物、解决实际问题的思维习惯和能力[1]。在实际教学中，往往从科学思维方法和思维品质两方面培养学生科学思维。科学思维方法包括抽象与概括、比较与分类、解释与推断、分析与综合等。思维品质实质是人的思维的个性特征，包括深刻性、批判性、创造性、灵活性和敏捷性[2]。

2.1.3 超氧阴离子自由基（）清除率

  

图2 不同稳定化处理后麦胚蛋白酶解前的DPPH清除率

脂质过氧化过程是一个产生自由基和自由基参与的链式反应过程，超氧阴离子自由基对细胞损伤的一个重要方面就是使细胞的膜相系统发生过氧化，对超氧阴离子自由基的清除效果反映了物质的抗氧化能力[11]。由图3可知，当质量浓度为0.1～10mg/mL时，VC和不同稳定化处理的麦胚蛋白水解物对自由基清除率不同，且随着蛋白浓度的增加而不断升高。当质量浓度为10mg/mL时，VC对的清除率达到98.31%，未处理麦胚蛋白在此时显示出较高的清除率，高于臭氧处理和不同热处理下的麦胚蛋白的清除率，说明经过不同处理后的麦胚蛋白超氧阴离子自由基清除率反映的抗氧化活性均有所降低。

  

图3 不同稳定化处理后麦胚蛋白酶解前的超氧阴离子自由基清除率

2.2 稳定化处理后脱脂麦胚蛋白酶解后抗氧化活性分析

正是在这种情况下，很多的小微企业不得不通过民间借贷的方式进行融资。然而民间借贷融资的方式在中国尚处于半公开、半地下的运行阶段。没有统一的、完善的运行机制以及合理的抵押担保制度，更没有相应的监管部门和风险防范措施。正是民间借贷市场的不完善，导致了资金需求方和资金供给方之间的信息极度不对称，存在着巨大的道德风险等潜在风险，经常出现携款出逃的违约行为。

不同稳定化方法处理后，脱脂麦胚蛋白酶解后的还原力如图4所示。由图4可知，当质量浓度为0.1～10mg/mL时，不同处理后的酶解麦胚蛋白的还原力先缓慢增加后逐渐增大，但远低于VC。在低浓度时，臭氧和微波处理后的麦胚蛋白的还原力与未处理麦胚相差较小，随着麦胚蛋白浓度的增加，未处理和臭氧处理的麦胚蛋白的还原力增加较高，高于微波处理的麦胚蛋白，说明臭氧处理对麦胚蛋白的还原力影响较小。

2.2.2 DPPH自由基清除率

  

图4 稳定化处理后麦胚蛋白酶水解物的还原力

不同稳定化处理后脱脂麦胚酶解后的DPPH自由基清除率如图5所示。当质量浓度为0.1～10mg/mL时，VC和不同方法处理的麦胚蛋白水解物对DPPH的清除率均随质量浓度的增大而逐渐增大，但不同处理麦胚蛋白水解物变化过程有所不同。臭氧处理麦胚蛋白水解物清除率变化趋势与未处理麦胚蛋白较为相似，当质量浓度为5mg/mL时趋于平缓，分别达到84.48%、84.89%。微波处理麦胚蛋白水解物清除率则在1.0mg/mL后趋于平缓，当质量浓度为1.0mg/mL时，其清除率已达到81.87%，当质量浓度为10mg/mL时，VC、未处理麦胚水解物、臭氧处理麦胚水解物、微波处理麦胚水解物对DPPH自由基的清除率分别达到93.86%、84.89%、84.16%、82.74%，说明不同处理对麦胚DPPH自由基清除率影响差别不大。

  

图5 稳定化处理后麦胚蛋白酶水解物对DPPH自由基的清除率

2.2.3 超氧阴离子自由基（O2-）清除率

10月26日，上海市图书馆学会用户与信息服务专业委员会主办的学术沙龙活动在虹口区图书馆顺利举行。来自上海各高校、公共图书馆的100余名沙龙成员参加了此次活动。本次活动围绕“新技术与创新服务”这一主题，四川大学公共管理学院李桂华教授、复旦大学图书馆副馆长张计龙、上海财经大学图书馆常务副馆长陈骁、西安电子科技大学图书馆副馆长黄小强、上海师范大学图书馆副馆长蔡迎春分别作了专题报告。我们对部分专家的报告进行了整理摘编，在此向大家呈现报告的精华和主要观点。

地面堆载对桥梁结构的影响，最直观的反应是使桥墩发生水平和竖向位移。为了验证该桥T梁位移是由堆载造成，一方面通过数值模拟计算堆载土压力作用下桥墩的水平位移和竖向位移，另一方面与现场测量结果来对比分析。根据墩柱结构、桩基础及岩土分布情况，模拟被动桩的变形和受力状态。计算模型如图1所示。

麦胚蛋白水解物对超氧阴离子自由基的清除率如图6所示。可以看出，当质量浓度在0.1～10mg/mL时，VC以及不同处理的麦胚蛋白水解物对O2-的清除率均随质量浓度的增大而逐渐增大，但不同处理麦胚蛋白水解物变化过程有所不同。当质量浓度低于1.0mg/mL时，微波处理麦胚蛋白的水解物的清除率与未处理麦胚蛋白较为接近，臭氧处理麦胚蛋白水解物的清除率均低于未处理和微波处理的麦胚蛋白水解物。当质量浓度为10mg/mL时，VC、未处理麦胚水解物、微波处理麦胚水解物、臭氧处理麦胚水解物对超氧阴离子自由基的清除率分别达到88.31%、63.56%、52.99%、48.85%。

  

图6 稳定化处理后麦胚蛋白酶水解物对的清除率

3 结 论

以还原力、DPPH自由基清除率、超氧阴离子自由基清除率为指标，比较不同稳定化方法处理后麦胚的抗氧化活性。研究表明，酶解后麦胚的抗氧化活性明显高于酶解之前，不同稳定化方法处理麦胚的抗氧化活性变化趋势基本一致，均随质量浓度的增加而不断增加。同一麦胚蛋白浓度时，其还原力和DPPH自由基清除率差别较小，且与未处理麦胚较为接近，超氧阴离子自由基清除率均有降低趋势，且低于未处理麦胚，说明以还原力和DPPH自由基清除率表现的抗氧化活性受不同稳定化方法的影响较小，超氧阴离子自由基清除率表现的抗氧化活性受不同处理方法影响较大。通过比较不同稳定化方法下麦胚抗氧化活性指标，明确了不同稳定化方法对麦胚抗氧化活性的影响，对麦胚蛋白开发利用时选择合适的处理方法提供依据。

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