六味地黄膏由熟地黄、酒萸肉、牡丹皮、山药、茯苓、泽泻等六味药材组成，具有滋阴补肾之功效。膏滋药历史悠久，其效以滋补为主，兼有缓和的治疗作用，尤其适合慢性病患者及年老体弱者调养之用。六味地黄膏现行标准收载于《卫生部药品标准》[1]WS3-B-2489-97，其质量标准已严重落后于现有六味地黄其他制剂。本文参照《中国药典》[2]2015版一部中六味地黄制剂质量标准及相关文献报道[3-5]，采用高效液相色谱法测定六味地黄膏中莫诺苷和马钱苷的含量，并进行了方法学验证，表明该方法简便易行，结果准确可靠，可用于六味地黄膏的质量控制。

1 仪器与材料

1.1 仪器 Agilent 1200 高效液相色谱仪(美国安捷伦科技有限公司)；科昌达超声波清洗器(南昌科昌达超声波仪器厂)；CPA 225型电子天平(赛多利斯)；AB204-N 型分析天平(梅特勒-托利多仪器有限公司)；HH-4数显恒温水浴锅(国华电器有限公司)。

1.2 材料 六味地黄膏3批(江中药业，批号2015080001、2015080002、2015080003)；莫诺苷对照品(中国食品药品检定研究院111998-201501)；马钱苷对照品(中国食品药品检定研究院，批号：111640-201606)；乙腈为色谱纯,其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 对照品溶液的制备 精密称取莫诺苷、马钱苷适量，精密称定，加50%甲醇制成每1mL含20μg的溶液，作为混合对照品溶液。

2.2 供试品溶液的制备 取六味地黄膏1g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇溶液25mL，密塞，称定重量，加热回流1h，放冷，再称定重量，用50%甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。

2.6 稳定性试验 取六味地黄膏约1 g，按“2.2”项下方法制备供试品溶液，室温下放置，分别于0，2，4，6，8，10，12，24 h进样分析，记录莫诺苷及马钱苷的峰面积，其RSD值分别为2.49%，1.09%，表明供试品在24h内基本稳定。

2.9 样品测定 取三批六味地黄膏样品，依法制备并测定，结果见表3。

2.3 色谱条件与系统适应性 色谱柱为ZORBAX SB-C18(4.6mm×150 mm，5 μm)；流动相为乙腈(A)-0.3%磷酸溶液(B)；梯度洗脱(0～7min，5%～8% A；7～20min，8% A；20～35min，8%～20% A；35～45min，20%～80% A)；检测波长为240 nm；柱温为40 ℃；流速为1.0mL/min；进样量为10 μL。理论塔板数不低于4000，在该色谱条件下莫诺苷和马钱苷与其他组分之间分离度良好(R>1.5)。

以前，福建省立医院面向患者的非医疗服务相对分散。门诊部承担着便民服务，出入院中心也提供便民服务，还有一些类似服务分散在其他部门。

2.7 重复性试验 取同一批次的六味地黄膏样品6份，按“2.2”项下方法制备供试品溶液，测定莫诺苷及马钱苷含量，莫诺苷及马钱苷的平均含量分别为0.6448mg/g、0.4691mg/g，RSD值分别为0.98%、1.94%，结果表明该方法重复性良好。

你的空间我无权干涉，但是你总要把握一个度吧。王树林把这句话再次卡在嗓子眼里。春天了，春天不说冬天的话。况且，老话说得好，己所不欲，勿施于人。

精密吸取各浓度的混合对照品溶液10 μL，分别注入高效液相色谱仪，按2.3项下色谱条件测定峰面积，以峰面积(Y)为纵坐标，对照品浓度(X)为横坐标，绘制标准曲线。得莫诺苷及马钱苷的回归方程分别为Y=16.5025X-7.1242(r=0.9999)，Y=15.7320X-1.9777(r=0.9999)。结果表明莫诺苷及马钱苷分别在5.5～87.6μg/mL、5.4～85.6μg/mL范围内线性关系良好。

不过艺术家本人表示，其作品与当代诸多问题之间的相似点，可以说只是出于偶然。她试图阻止作品意义变得狭隘，争辩道：“如果政治是开放而非封闭的，艺术家的作品则会适应这种环境。”

阴性干扰试验：取混合对照品溶液、供试品溶液和缺酒萸肉阴性对照溶液，分别进样10 μL，结果表明阴性无干扰，该法专属性较强，见图1。

2.5 精密度试验 精密吸取莫诺苷浓度为21.9μg/mL，马钱苷浓度为21.4μg/mL的混合对照品溶液10 μL，连续进样5次，依法测定，记录莫诺苷及马钱苷的峰面积，RSD值分别为0.77%，0.73%，结果表明仪器精密度良好。

 

A.混合对照品溶液；B.供试品溶液；

C.阴性对照溶液；1.莫诺苷；2.马钱苷

图1 莫诺苷、马钱苷HPLC图谱

缺酒萸肉阴性对照溶液的制备：取缺酒萸肉阴性对照样品1g，按供试品溶液制备方法同法制备缺酒萸肉阴性对照溶液。

2.4 线性关系考察 精密称取莫诺苷对照品10.95 mg及马钱苷对照品10.70 mg，置25 mL量瓶中，加50%甲醇溶液溶解稀释至刻度，制成每1 mL含0.438 mg莫诺苷及0.428 mg马钱苷的混合对照品母液。等梯度稀释混合对照品母液，即得混合对照品溶液(莫诺苷依次为浓度5.5，11.0，21.9，43.8，87.6μg/mL，马钱苷浓度依次为5.4，10.7，21.4，42.8，85.6μg/mL)。

2.8 加样回收率试验 取已知含量的六味地黄膏(莫诺苷含量为0.6448 mg/g，马钱苷含量为0.4691 mg/g)0.5g(6份)，精密称定，分别精密加入混合对照品溶液(莫诺苷浓度为0.3066 mg/mL，马钱苷浓度为0.2996 mg/mL)1.0 mL，按“2.2”项下方法制备供试品溶液，按“2.3”项下方法测定莫诺苷及马钱苷的含量，计算该方法的回收率。结果六味地黄膏中莫诺苷及马钱苷的平均回收率分别为96.7%，91.02%，RSD值分别为1.67%，1.81%，结果表明该方法加样回收率较好。结果见表1-2。

 

表1 莫诺苷加样回收率试验结果

  

No取样量/g样品中的量/mg加入量/mg实测值/mg回收率/%平均值/%RSD/%10．51210．33020．30660．633198．7920．50990．32880．30660．625096．6330．50940．32850．30660．618694．6540．52200．33660．30660．628095．0450．52090．33590．30660．636097．9060．52880．34100．30660．639097．2096．701．67

 

表2 马钱苷加样回收率试验结果

  

No取样量/g样品中的量/mg加入量/mg实测值/mg回收率/%平均值/%RSD/%10．51210．24020．29960．510890．3220．50990．23920．29960．508289．7930．50940．23900．29960．507589．6240．52200．24490．29960．518691．3650．52090．24440．29960．516990．9660．52880．24810．29960．530094．0991．021．81

SF6断路器的检修和维护一方面要以断路器维护的基本原则为基础，对断路器内部组件和外部情况进行检查，以确认其是否存在受潮问题。

 

表3 样品测定结果 mg/g

  

样品批号莫诺苷含量马钱苷含量20150800010．650．4220150800020．640．4220150800030．580．38

根据药材含量和三批样品含测数据，初步暂定产品的含测限度为本品每克含莫诺苷和马钱苷含量总和应不低于0.30 mg。

第四，顶升。顶升的目的是消除托换新桩变形对托换体系的不利影响，防止托换新桩桩顶沉降带动墩柱沉降，检验托换梁体系的承载能力。施工时在托换梁两端桩帽处各放三台千斤顶，实现桩、梁间的可控作用力。顶升分二次顶升：第一次顶升为预备顶升（也称为超顶），主要检测顶升整个系统的可靠性，二次顶升为阶段性分级加载顶升，主要完成托换桩的沉降变形及托换梁的扰度变形，同时实时同步顶升至设计要求标高以满足隧道区间净空要求。

3 讨论

(1)本文建立的含测方法经方法学验证，表明方法方法简便易行，结果准确可靠，为六味地黄膏的质量控制提供了参考依据。

(2)本试验还优化了流动相梯度洗脱条件，使各峰得到较好的分离。

根据前期单因素试验的结果，选择蔗糖添加量、黄精浸提液添加量、发酵温度和发酵时间作为4个因素，进行四因素三水平L9（34）的正交试验，根据每组的感官评分确定黄精酸奶制作的最佳工艺。

(3)本试验考察了超声提取及回流提取两种方法制备供试品，结果表明回流提取提取率优于超声提取，故选择回流提取制备供试品溶液。

(4)本文根据药材含量和三批样品含测数据，初步暂定产品的含测限度为本品每克含莫诺苷和马钱苷含量总和应不低于0.30mg。

参考文献

[1]国家药典委员会.卫生部药品标准·中药成方制剂第十三册[S].北京:人民卫生出版社,1997:44.

[2]国家药典委员会.中国药典·一部[S].北京:中国医药科技出版社,2015:705-706.

[3]杨明明,袁晓旭,赵桂琴,等.山茱萸化学成分和药理作用的研究进展[J].承德医学院学报,2016,33(5):398-400.

[4]李观林.山茱萸中环烯醚萜苷类的研究进展[J].亚太传统医药,2014,10(18):48-49.

[5]吴红,梁恒,刘永红,等. 山茱萸总皂苷的提取分离与含量测定[J].第四军医大学学报,2003,24(5):430-432.