更全的杂志信息网

番茄黄化曲叶病毒及根结线虫抗性基因的检测

更新时间:2009-03-28

番茄由于其风味独特、维生素等含量丰富,深受人们喜爱,种植广泛[1-2]。随着种植面积、复种指数不断增加,各种病害也接踵而至,抗病育种成为番茄产业上的重要课题。至今,已有200多种番茄病害严重影响番茄的生产[3]。其中,黄化曲叶病毒病和根结线虫病是2种严重影响番茄产量和质量的病害[4-6]。黄化曲叶病毒是遍及全世界的病毒病,主要通过烟粉虱传播,传播迅速,来势凶猛[7]。目前,抗黄化曲叶病毒基因的应用较多,主要是Ty-1、Ty-2、Ty-3[8]。根结线虫主要是通过寄生在番茄的根部,影响营养生长以及生殖生长,甚至导致植株死亡[9]。根结线虫病是一种常见的影响番茄产量的土传病害,严重时会导致番茄绝产,此外,还会引发枯萎病等其他土传病害[10]。目前已发现9个Mi 基因,其中Mi-1是被用于番茄生产应用的抗性基因,对南方根结线虫、爪哇根结线虫和花生根结线虫具有抗性,在番茄育种中起着重要的作用[11]。本试验通过分子标记对包含有耐贮运、果实排列较好,长势好,果实硬度大,可溶性固形物较高等都能作为后期杂交组合的亲本材料在内的203份番茄材料分别进行黄化曲叶病毒和线虫的抗病基因进行了筛选[12-14],为培育优质抗病性番茄奠定了基础。

1 材料与方法

1.1 试验材料

材料共203份,为河北省农林科学院经济作物研究所经多代单株分离取得的高代材料。于2017年1月15日播种,3月15日定植在河北省农科院经作所试验大棚及大河园区三联栋日光温室,2017年4—5月进行Ty-1、Ty-2、Ty-3和Mi-1共4个抗性基因的检测。

1.2 番茄总DNA的提取

取各个待测材料的幼嫩叶片,利用CTAB法提取总DNA,用TE溶解,于-20°C保存。

1.3 引物及试剂

引物由华大基因科技服务有限公司合成,Taq DNA聚合酶等试剂药品购自北京全式金生物技术有限公司。

1.4 抗性基因检测方法

参照葛乃蓬、张建盈、于力[15-17]使用的分子标记来检测。PCR反应体系:DNA模板200 ng,10×Buffer 2.5μL,dNTPs(10mmol)2μL, 引物(10μmol)各1μL,Taq DNA聚合酶2.5 U ,ddH2O补足至25 μL;反应程序的设置如表1所示;PCR产物在含GoldView的1%琼脂糖凝胶中,100 V电泳45 min,利用紫外凝胶成像仪记录并统计结果,重复3次。

 

表1 PCR反应程序的设置

 

Table 1 The setting of the PCR reaction program

  

基因Gene预变性Predegeneration变性Degeneration退火Annealing延伸Extension后延伸Afterstretching循环数CyclenumberTy-194°C5min94°C30s57°C30s72°C90s72°C10min35Ty-294°C5min94°C30s55°C30s72°C30s72°C10min35Ty-394°C5min94°C30s55°C30s72°C40s72°C10min35Mi-194°C5min94°C30s56°C30s72°C30s72°C10min35

2 结果与分析

2.1 黄化曲叶病毒抗性基因Ty-1的检测

黄化曲叶病毒抗性基因Ty-1的检测结果如图1所示,仅有984 bp条带的材料为含有Ty-1纯合材料,仅有1434 bp条带的材料为不含Ty-1的材料,2个条带皆有的为含Ty-1的杂合材料。共含有抗性基因Ty-1纯合材料共32个,杂合材料共29个。

  

M:Marker;CK:阴性对照;1~16:不同番茄材料的编号,下同。

 

图1 黄化曲叶病毒抗性基因Ty-1的检测结果

 

Fig.1 Detection of resistant gene Ty-1 to tomato yellow leaf curl virus disease

2.2 黄化曲叶病毒抗性基因Ty-2的检测

黄化曲叶病毒抗性基因Ty-2的检测结果如图2所示,仅有195 bp条带的材料为含有Ty-2纯合材料,仅有550 bp左右条带的材料为不含Ty-2的材料,2个条带皆有的为含Ty-2的杂合材料。共含有抗性基因Ty-2杂合材料共1个,纯合材料没有检测出。

  

图2 黄化曲叶病毒抗性基因Ty-2的检测结果

 

Fig.2 Detection of resistant gene Ty-2 to tomato yellow leaf curl virus disease

2.3 黄化曲叶病毒抗性基因Ty-3的检测

黄化曲叶病毒抗性基因Ty-3的检测结果如图3示,仅有630 bp材料为含有Ty-3纯合材料,仅有320 bp条带的材料为不含Ty-3的材料,2个条带皆有的为含Ty-3的杂合材料。共含有抗性基因Ty-3纯合材料共2个,杂合材料共23个。

  

图3 黄化曲叶病毒抗性基因Ty-3的检测结果

 

Fig.3 Detection of resistant gene Ty-3 totomato yellow leaf curl virus disease

2.4 根结线虫抗性基因Mi-1的检测

根结线虫抗性基因Mi-1的检测结果如图4所示,仅有550 bp条带的材料为含有Mi-1纯合材料,仅有350 bp条带的材料为不含Mi-1的材料,2个条带皆有的为含Mi-1的杂合材料。3次重复的结果显示,共含有抗性基因Mi-1纯合材料共15个,杂合材料共10个。

  

图4 根结线虫抗性基因Mi-1的检测结果

 

Fig.4 Detection of resistant gene Mi-1 root-knotnematode in tomato

2.5 抗病性统计

[5] 白晓娟,李亚栋,王国华,等.番茄黄化曲叶病毒石家庄分离物的分子鉴定及序列分析[J].园艺学报, 2015, 42(1):167-173.

 

表2 抗病性统计

 

Table 2 Statistics of test resistant genes

  

编号No.Ty-1Ty-2Ty-3Mi-1编号No.Ty-1Ty-2Ty-3Mi-189------+-265-1+---+-++90------++269-1----+-++98-11+-------269-2+---+-++132++--+---270------+-134++--++++271------+-182++------272-1------++183++------272-2------++184++------273-1+---+-++

续表

  

编号No.Ty-1Ty-2Ty-3Mi-1编号No.Ty-1Ty-2Ty-3Mi-1185++------274-1++--++++186++------274-2++--++++188-1+-------275-1+---+---188-2++------275-2+---+---188-3+-------276-2+---+---188-6+-------277-1++--++--188-7++------279-1++--++--188-8++------279-2----+---189++--+---279-3++--++--192-1+---+---280-1----+---192-4++--++--281-1------++192-5++--++--281-2------++193-2+---+---282-1------++193-3+---+---282-2+---+-+-193-4++--++--283-1+---+---193-5+---+---283-2+---+---193-6+---+---284-1+---+-+-193-7++--++--284-2+---+-+-195--+-----285-1+---+-+-209++--++++287-1+-------224-6+-------289------+-234+---+---292------+-262----+---299-1+-------263-1+---+---306-1+-------263-1-1++--++--306-2+-------263-1-2+---+---310------++264------++

注:“++”表示检测到该抗性基因,且基因型为纯合,“+-”表示基因型为杂合,“--”表示未检测到该抗性基因。

3 讨论与结论

分别统计了试验结果中含Ty-1、Ty-2、Ty-3的基因类型及其比例。共有Ty-1、Ty-2、Ty-3以及同时含有Ty-1和Ty-3共4种类型,分别所占比例为30.36%,1.79%,7.14%,60.71%。含有Ty-1、Ty-1和Ty-3材料所占比例较高。这与郑积荣[18]对番茄黄化曲叶病毒抗性基因的检测的19.23%,7.69%,7.69%,65.38%,陈宝玲[19]试验中的7.14%,7.14%,14.29%,71.43%,米国全[20]检测的57个抗番茄黄化曲叶病毒病的番茄材料中的43.86%,3.51%,7.02%,45.61%的较为相似,即含Ty-2的番茄材料较少、含有2个黄化曲叶病毒病抗性基因的都是Ty-1和Ty-3。其中Ty-1和Ty-3相同的占两者都有的94.29%,郑积荣的结果为94.12%,付蓉蓉[21]的检测结果为80%,这个问题还有待于进一步分析。叶青静指出,含有相同的抗性基因的材料在不同的地区对番茄黄化曲叶病毒的抗性能力不同,因此需要针对不同地区选择不同的抗性鉴定[22],也可以选择将多个抗性进行聚合基因,以抵御多地区的番茄黄化曲叶病毒。魏偲[11]和郑积荣[23]都指出,含有Mi-1的番茄对南方根结线虫具有较好的抗性。本次试验中,共检测出25个,可以作为抗性的番茄资源。本次检测的共69个不同基因型的抗性材料都可以作为抗性番茄资源,其中的多抗纯合材料将用于日后抗性育种工作,聚合多种抗病和品质基因,以培育适合番茄市场的新品种。

[12] 尹庆珍,张立永,王国华,等.硬粉果番茄硬度遗传分析[J].农学学报, 2016, 6(10):35-40.

学习语言需要了解和体会一种语言所蕴含的文化,因此要更好地学习英语,必须了解英语的文化。课堂教学中教学材料的安排、教学活动的安排设计应该把语言材料和活动的交际性、跨文化体验及语言认知作为重要的原则。教师可以补充大量现实生活中的语言材料,利用多媒体在小学英语课堂的应用,选取时下流行的几部英文动画片,在学生观看影片的时候,对英语国家特定情境下特殊的表达进行讲解。

[16] 张建盈,严景日,杨石奇,等.利用多重 PCR 反应同时鉴定番茄Ty-3a 基因和抗溃疡病QTL[J].中国瓜菜, 2015,28(3):5-8.

综上所述,多相位分段调制干扰是一种部分相干干扰,值得一提的是,通过各分路长度和相位调制值的不同组合,干扰方可以改变干扰信号对回波信号特征的保留程度与破坏程度,从而实现干扰效果的多样性。

[2] 王国华,尹庆珍,吕清燕,等.樱桃番茄新品种红宝石的选育[J].河北农业科学, 2007, 11(4):94-95.

模型假设所有的生产部门采用规模报酬不变的生产技术,选择最优的投入组合来实现生产者成本最小化的目标。生产过程用多层嵌套的不变替代弹性生产函数(CES)描述。在第一层,对总产出进行分解,总产出为增加值和中间投入的加总。具体方程的结构与推导过程如下式所示:

[3] 李景富.中国番茄育种学[M].北京:中国农业出版社, 2011.

我国会计监督工作的成效、问题和未来展望——基于财政部2018年会计信息质量检查公告的研究刘胜良22-8

[4] 苗相伟.番茄黄化曲叶病毒病的研究进展[J].中国果菜, 2017, 37(3):31-35.

抗病性统计见表2,共得到含有抗性基因的番茄材料共69个,其中,含有Mi-1共25个;含有黄化曲叶病度抗性基因的番茄材料56个:含Ty-1共51个,含有Ty-2的共1个,含有Ty-3共38个。同时携带Ty-1和Ty-3的共34个,仅有Ty-1的17个,仅有Ty-3的共3个。同时含有3个抗性基因的共11个,同时有2个抗性基因的共24个。

[6] 耿亚玲,李秀花,马娟,等.南方根结线虫初始种群密度对不同抗性番茄品种生长的影响[J].河北农业大学学报, 2013, 36(5): 29-33+42.

[7] 杨欢欢,赵婷婷,刘冠,等.番茄黄化曲叶病抗病基因与抗病育种的最新进展[J].分子植物育种,2016,14 (8):2044-2049.

(6)健全群团组织,发挥积极作用。新形势下农村群团工作必须要坚持围绕中心,服务大局,在维护稳定、发展生产,摒除陋习、倡树新风,扶贫帮困、带头致富中发挥积极作用。

[8] 杨晓慧.番茄抗黄化曲叶病基因Ty-2的精细定位及不同抗性基因效应比较[D].北京:中国农业科学院, 2012.

[14] 尹庆珍,杨超沙,尹伟平,等.优质抗病耐运番茄新品种冀番137和冀番138的选育[J].河北农业科学,2017, 21(3):86-88.

[9] 席先梅,白全江,李玉民.不同番茄品种抗根结线虫评价[J].北方农业学报,2016,44(4):50-52.

近几年,中药材越来越受到人们的关注,越来越多的人使用中药治疗或保健,从而人们十分关注中药的质量问题。在中药材中,由于各个中药成分的含量差异较大、农药残留及重金属污染等问题使得中药质量一度堪忧。而重金属污染则是中药质量下降的重要原因之一,同时,重金属的含量也是评价中药材优质分级的重要衡量指标之一。对于常用中药材苍耳子而言,在2015年版《中华人民共和国药典》中对其性状、显微、水分、灰分、有效成分含量进行检测,但尚未拟定苍耳子药材重金属限量检测,因此,检测其重金属含量就显得极为必要。

[10] 高莹梅,胡靖康,赵婷婷,等.番茄抗根结线虫Mi-1基因研究进展[J].分子植物育种,2017,15 (8):3015-3015.

当k值较大时,代表车轮运动接近于稳态,即接触斑和其他参数变化较慢;当k值较小时,代表车轮运动在非稳态,即接触斑和其他参数变化较快。

参考文献

[13] 尹庆珍,王国华,闫树成,等.早熟 优质 抗病 耐运番茄新品种冀P135和冀S136的选育[J].河北农业科学, 2010, 14(1):61-62.

[11] 魏偲,史倩倩,茆振川,等.Mi基因家族番茄对南方根结线虫的抗性鉴定及评价[J].中国蔬菜, 2016, 1(6):29-33.

不管是在航空业当中还是旅游业当中相关地区的政府都应该发挥其主导作用,从政策和制度上对相关的产业进行双重支持,并减少其发展的阻碍因素,减少监管的力度,适当放开优惠政策,有效地促进旅游业和航空的协同发展。就我国来说,当前的民航局和国家旅游局已经制定出相关的协议,两者共同开拓市场,并有效地提高当前的服务质量,从而促进航空旅游业向着更加人性化的方向不断发展。例如,有些地区的景区可以设立专门的监管局或是管理局,如此一来就能在一定程度上加强对旅游地区的监管力度,而且相关的航空业合作的伙伴也能更加具体明确[2]。

[15] 葛乃蓬,崔龙,李汉霞,等.番茄抗黄化曲叶病毒基因Ty-1的双重SNP标记的开发[J].园艺学报, 2014, 41(8):1583-1590.

[1] 王国华,高志杰,尹庆珍.番茄新品种毛T5 的选育[J].华北农学报, 2005,20(S) : 140-143.

3.法治保障社区居民合法权益。社区秩序法治,才能保障居民的合理诉求和合法权益。通过制定小区居民公约、楼规民约、议事规则、财务管理、停车管理办法和“三事分流”清单等,引导建立小区规范;加大普法宣传,发挥了社区民警和法律服务者的作用,增强居民法治观念;建立网格民警为主、网格长和志愿者为辅的帮扶帮控小组,对重点对象进行动态监管,确保小区和谐稳定;采取小区“红袖标”白天巡、网格民警夜间巡“两巡”相结合的方式,加强小区治安防控。

[17] 于力,朱龙英,万延慧,等.多重PCR反应同时筛选番茄Ty-1和Mi基因[J].分子植物育种,2008,6(1):165-169.

[18] 郑积荣,胡浅浅,王慧俐.番茄育种材料对黄化曲叶病毒抗性鉴定及抗性基因检测[J].浙江农业学报, 2015, 27(6):1015-1023.

[19] 陈宝玲,甘桂云,王先裕,等.126份番茄材料的抗性基因分子标记检测[J].中国蔬菜,2016,1(6):34-41.

[20] 米国全,陈梦莹,史艳艳,等.番茄种质资源黄化曲叶病毒病抗性的鉴定与评价[J].河南农业科学, 2017, 46(5):77-83.

[21] 付蓉蓉.番茄黄化曲叶病的Ty-1和Ty-3抗性基因的PCR鉴定[J].分子植物育种,2011, 9(1):1647-1652.

[22] 叶青静, 周国治,王荣青,等.番茄黄化曲叶病毒病抗性鉴定技术研究[J].分子植物育种, 2011, 9(2):210-217.

[23] 郑积荣,胡浅浅,李戌清.番茄育种种质对南方根结线虫抗性评价及Mi-1基因检测[J].分子植物育种, 2015, 13(4):832-839.

美国教师总爱说:“没有提问,就没有回答。一个好的提问比一个好的回答更有价值!”我十分欣赏这句话,其中蕴含着一个值得探讨的问题,那就是课堂教学中每一位教师都会面临的一个问题——怎么教。要回答“怎么教”,我们必须先解决课堂教学中“放”与“收”的问题。

 
杨超沙,王国华,吴志明,尹庆珍,尹伟平
《河北农业大学学报》2018年第02期文献

服务严谨可靠 7×14小时在线支持 支持宝特邀商家 不满意退款

本站非杂志社官网,上千家国家级期刊、省级期刊、北大核心、南大核心、专业的职称论文发表网站。
职称论文发表、杂志论文发表、期刊征稿、期刊投稿,论文发表指导正规机构。是您首选最可靠,最快速的期刊论文发表网站。
免责声明:本网站部分资源、信息来源于网络,完全免费共享,仅供学习和研究使用,版权和著作权归原作者所有
如有不愿意被转载的情况,请通知我们删除已转载的信息 粤ICP备2023046998号