中国是食管癌发病率和病死率较高的地区[1]，全国发病率占第6位，病死率占第4位。与此同时，食管癌也是新疆地区人群中最常见的恶性肿瘤，病死率达 155.9/10 万[2]。然而，当患者确诊时，病程往往已经发展为进行性吞咽困难并出现恶病质症状，5年生存率低于15%[2]。因此，寻找食管癌特异性较强、灵敏度高的血清标志物，提高其早期诊断率并改善患者预后是目前食管癌领域中迫切需要解决的问题。

microRNAs(miRNAs)通过促进或抑制来调节靶基因的表达， 其表达水平发生紊乱是诱发一系列肿瘤形成的重要因素，同时miRNAs也可作为肿瘤标志物用于食管癌、肝癌等恶性肿瘤的诊断和预后评估，并有望在食管癌的早期诊断方面取得进展，成为食管癌治疗靶点[3]。

本实验通过miRNA芯片分析筛选患者外周血单一miRNA候选指标，并用RT-qPCR法进行检测和比较，探讨其对食管癌的诊断和预后评估的临床意义。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 材料：收集2013年4月至2013年12月在新疆医科大学第一附属医院就诊或住院治疗的36例食管癌患者，其中男24例，女12例，平均年龄64；并选取26名健康志愿者。所有食管癌患者均符合食管癌的临床诊断标准，并经病理学检查确诊。患者一般资料之间相比无差异，具有可比性，设置健康志愿者为对照组。食管癌组患者均经病理学检查确诊并符合诊断标准，入选对象年龄范围48～71岁，性别和民族不限；患者无其他位置肿瘤；实验前未经放化疗以及相关抗肿瘤药物治疗；所有患者无心血管疾病以及肾功能不全；所有患者平素身体状况较好，无感染性疾病及血液系统疾病；食管癌患者和健康志愿者均同意实验措施，并签署知情同意书。不符以上条件患者均排除实验对象。此研究经伦理委员会批准。

1.1.2 试剂：miRNAs反转录试剂盒(Qiagen公司)；荧光定量PCR试剂盒(TaKaRa公司);引物由生工生物工程(上海)股份有限公司合成。

本研究采用半结构式访谈的方式搜集资料，以ASEB栅格分析法作为工具对访谈资料进行分析。ASEB栅格分析法是基于传统SWOT分析基础上建立的，主要针对体验型消费引发的问题，是以消费者需求为导向的新型管理方法。ASEB栅格分析综合考虑活动Activity、环境Setting、体验Experience、利益Benefit在优势 Strength、劣势Weakness、机会Opportunity、威胁Threat四方面的基本情况，依此建立矩阵分析图，即从消费者出发对活动、环境、体验、利益四个方面的矩阵分析（见表1），描绘、评价消费者真实的体验、本真的感受，做出结论分析。

本研究结果显示，食管癌患者外周血中miR-181b-5p的表达水平明显低于健康志愿者，与报道[12]中通过表达上调抑制细胞增殖的结果相一致。推测miR-181b-5p在食管癌中可能有新的作用靶点，也可能在食管癌中的低表达是促癌作用的表现。因此，miR-181b-5p可否有望成为食管癌患者新的特异性诊断指标或预后评估指标，甚至是有效的临床治疗靶点，尚待进一步深入研究。

1.2 方法

委托北京博奥生物有限公司对白细胞总RNA的miRNA芯片筛查分析，并筛选差异表达候选单一miRNA，RT-qPCR法进行检测比较。收集全血样本3 mL，静置，3 000 r/min离心10 min。Trizol法提取外周血白细胞总RNA，按照试剂盒说明反转录合成cDNA，并进行RT-qPCR实验，结果以2-ΔΔCt法进行计算。

1.3 统计学分析

数据采用Graphpad Prism 6.0进行统计学分析,各项数据以均数和标准差表示。

2 结果

食管癌组患者外周血白细胞miR-181b-5p表达水平明显低于正常对照组(P<0.01)(图 1)。

  

*P<0.01 compared with control图1 正常对照组与癌组的miR-181b-5p表达水平Fig 1 Expression of miR-181b-5p in control group

食管癌是恶性肿瘤之一，具有早期诊断难、预后差等特点。中国是食管癌的高发国家，食管癌目前的诊断率仍然很低，且对食管癌的治疗方法仍以手术为主，患者术后的 5年总生存率仅为 15%[4]。近年来，肿瘤标志物在肿瘤的早发现、肿瘤的筛查、肿瘤的诊断及鉴别诊断、肿瘤的分期、肿瘤的检测和预后判断等方面发挥着重要作用。miRNA的异常表达可能与多种肿瘤的发生发展有关[5]，研究肿瘤患者外周血液中特异性miRNAs，既可以探索其在肿瘤发病机理中的作用，也可以用于肿瘤早期诊断的血清标志物的筛查，实现肿瘤的“早发现，早治疗”。miRNAs广泛存在于生物体内，是一类内源性非编码的单链小分子 RNA，在调节细胞功能，在个体发育、细胞凋亡、代谢以及疾病的发生方面发挥着重要的作用[8]。miRNAs表达异常的现象普遍存在于多种肿瘤中，已经有研究报道，miRNAs通过调控多种信号通路直接或间接参与肿瘤的发生与发展。

3 讨论

miR-181-a和内参基因U6的RT-qPCR实验结果(图2)，均出现特异的单峰，曲线整齐可信。

  

A.dissociation curre 1; B.amplification curre; C.dissociation curre 2图2 U6与miR-181b-5p的熔解曲线和扩增曲线Fig 2 Dissociation curve，amplification curve of U6 and miR-181b-5p

[2] Lin Y, Totsuka Y, He Y, et al. Epidemiology of esophageal cancer in Japan and China[J]. J epidemiol, 2013, 23: 233.

内参U6引物序列：上游引物：5′-GCTTCGGCA CATATA-3′；下游引物：5′-CGAATTTGCGTGTCATC CTT-3′；miR-181b-5p引物序列：上游引物：5′-AA CACGCAACATTCATTGCTG-3′；下游引物：5′-GTCG TATCCAGTGCAGGGT-3′。

[3] Napier KJ, Scheerer M, Misra S. Esophageal cancer: A Review of epidemiology, pathogenesis, staging workup and treatment modalities[J]. World J Gastrointest Oncol, 2014, 6:112-120.

[1] 王立东,胡守佳,吕双,等.食管癌基础研究进展及临床应用前景[J].河南医学研究，2016, 25:1345-1347.

蔡元培此番解释，虽站在但采尔角度，但入情入理，同事们也无话可说了。但采尔在北平工作一段时间后，于1932年4月底回国，月俸都是当月提前预付，回国的费用一分也没有拖欠。这也从侧面见证了蔡元培的诚信和对这位友人的真情。

本研究通过miRNA芯片分析筛选食管癌患者外周血差异表达的miR-181b,探讨其在食管癌中的诊断和预后中的意义。miR 181家族有4个成员：miR-181(a、b、c、d)。经数据库(miRNA.org)分析预测，它们有相同的靶基因：INPP4B和PHLPP2。INPP4B基因通过抑制PI3K/AKT信号传导通路，从而调控细胞增殖和血管生成等过程，是一种新发现的潜在肿瘤抑制因子。INPP4B基因在胃癌患者外周血[6]、前列腺癌 [7]、结肠癌及乳腺癌[8]中的表达水平均下调，但在食管癌中的研究不多。PHLPP2是[9]新发现的抑癌基因，其主要功能抑制AKT通路，促进细胞凋亡和抑制细胞增殖，它的异常表达与卵巢癌[10]和肺癌[11]相关。

参考文献：

伴随着全球气候环境的不断改变以及极端气候环境的频发，近些年关于洪涝、干旱等灾害事故的发生率随之提升，灾害强度相比以往也有明显的提高。对此，单纯性的依赖于工程措施显然无法满足实际需求，作为非工程型方式的水文情况预报工作在抗灾减灾方面所能够起到的作用也在随之提高，其在防汛抗旱方面的作用主要在于两个方面。

[5] 许宇彪, 杨建荣. microRNA在人类恶性肿瘤中的研究进展[J].中国临床新医学, 2016, 9: 833-837.

[6] Yang M, Wang HB, Hu QL. significance of the expres-sion of INPP4B mRNA and protein in peripheral blood of gastric cancer patient[J].Modern Oncol,2016,24：3443-3446.

由图7可知：4列AW0车起动电流峰值出现在B点到C点，最大值约为4 000 A，最小值约为3 000 A，持续时间约为7 s；列车起动电流从A点到B点持续稳定上升，上升率约为363 A/s(0.36 A/ms)。另一方面，对侧牵引变电所直流馈线开关的电流峰值约为3 182 A。与表1中该线路直流馈线保护参数数值对比可知：

1.1.5 心律失常 心律失常是最常见的并发症之一，据袁岩等［8］对456例永久心脏起搏器植入术研究，发现致命性心律失常发生率为3%。

[7] Murillo H, Huang H, Schmidt LJ, et al．Role of P13K signaling in survival and progression of LNCaP prostate cancer cells to the androgen refractory state [J]. Endocrinology, 2001, 142: 4795-4805.

[4] Zhao BS, Liu SG, Wang TY, et al. Screening of microRNA in patients with esophageal cancer at same tumor node metastasis stage with different prognoses [J]. Asian Pac J Cancer Prev, 2013, 14: 139-143

[8] Croft A, Gou ST,Shervin S,et al. Functional identification of a novel transcript variant of INPP4B in human colon and breast cancer cells[J]. Biochem Biophys Res Commun, 2017,485: 47-53.

[9] Gao T, urnari F, ewton AC, et al. PHLPP: A phosphantase that directly dephosphorylates AKT, promotes apoptosis, and suppresses tumor growth[J]. Mol Cell,2005, 18:13-24.

[10] Liao Y, Deng Y,Liu J,et al. MiR-760 overexpression promotes proliferation in ovarian cancer by downregulation of PHLPP2 expression[J]. Gynecol Oncol, 2016,143: 655-663.

[11] Mei Z,He Y,Feng J, et al. MicroRNA-141 promotes the proliferation of non-small cell lung cancer cells by regulating expression of PHLPP1 and PHLPP2[J]. FEBS Lett, 2014,588: 3055 -3061.

[12] Zhi F, Wang Q, Deng D, et al. miR-181b-5p down regulates NOVA1 to suppress proliferation, migration and invasion and promote apoptosis in astrocytoma[J]. PLoS One, 2014, 9:1-9.

石警官笑了：“很有道理，得找个合适的地方。箫这古物，最讲究了。”他小心地把箫取下，掏出一方雪白的丝绢，仔细擦拭一遍，恭恭敬敬递给刘雁衡。刘雁衡接过，细细一看，又赞叹道：“的确是好箫，难得一见。”

1.国际税制改革深化对中国参与及智力贡献的挑战。2016年是后BEPS时代的开局之年，国际税制改革转入打造非“最低标准”项目成果升级版的后BEPS议程，中国的作用及国际税收规则智慧贡献再次面临考验，这关切发展中国家在国际税收合作中的话语权及税收利益的公平分配。