高尿酸血症及其引发的痛风给人类健康造成了严重的威胁，受到众多研究者的关注。研究[1]表明尿结石和运动诱发的急性肾损伤 (exercise-induced acute kidney injury, EIAKI)是低尿酸血症的并发症。低尿酸血症也是健康人发生肾功能异常的危险因素[2]。韩国、日本报道其低尿酸血症患病率分别为0.53%和0.19%～0.58%[3- 4]。本研究团队正在发表中的研究显示宁夏人群低尿酸血症的患病率为2.4%，远高于日韩人群。

本研究拟借助低尿酸血症高发的宁夏人群，探索低尿酸血症相关的基因位点，从而为其诊断提供有效信息。本研究依据Merriman等[5]的研究结果，选取了最常见的影响尿酸水平的SLC22A12基因rs505802位点和SLC2A9基因rs6855911、rs737267、rs12498742、rs7442295、rs734553和rs16890979 位点进行单核苷酸多态性检测。

1 材料与方法

1.1 研究对象

用多阶段、分层、随机整群抽样的方法于2011年10月至11月在宁夏回族自治区纳入受试者6 056例，将血尿酸水平低于2 g/L(119 μmol/L)作为低尿酸血症的诊断标准，确定低尿酸血症受试者98例。由于低尿酸血症的患病率普遍较低，因此样本例数较少。用1∶1配对病例对照研究方法，按照性别和年龄严格匹配84名血清尿酸正常人群作为对照组。所有研究对象均签署知情同意书，并由北京协和医院伦理委员会批准。

1.2 方法

1.2.1 体格检查和生化指标检测：测量血压、身高、体质量和腰围，计算体质指数(BMI)=质量(kg)/身高2(m2)。空腹抽取静脉血5 mL×2(抗凝血和非抗凝血)，其中非抗凝血静置30～45 min后分离血清，-80 ℃冰箱保存，抗凝血用于DNA提取，同批测量。尿酸(uric acid, UA)、血糖(blood glucose, Glu)、总胆固醇(total cholesterol, TC)、三酰甘油(triglyceride, TG)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein, LDL-C)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein, HDL-C)、肌酐(creatinine, Cr)和尿素(BUN)用Beckman AU 5400生化分析仪测定。血脂检测试剂为Sekisui公司产品，其余生化指标试剂为Beckman配套试剂。

1.2.2 SNP检测: 使用天根血液基因组DNA提取试剂盒从抗凝血中提取基因组DNA作为模板。用Sequenom Mass ARRAY iPLEX GOLD 技术检测SLC22A12基因rs505802位点和 SLC2A9 基因rs6855911、rs737267、rs12498742、rs7442295、rs734553和rs16890979 位点的单核苷酸多态性。通过Sequenom公司的Assay Design 3.1软件对以上SNPs位点进行引物设计，引物序列(表1)。SNP检测前处理分3步，PCR扩增、碱性磷酸酶消化及IPLEX 单碱基延伸后点样进入Agena MassARRAY Analyzer 4基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪进行反应，确定SNP分型。

1.3 统计学分析

在开展微课设计时，不仅要从具体的内容上来进行研究，同时也要控制好微课的时间，加深学生对知识的理解。所以在教学中要保证微课时间上的有效性，通过对知识进行提炼，在综合学生实际情况的同时来保证微课内容的准确性，实现对时间的合理控制，保证微课的有效性，为下一阶段教育活动的开展奠定基础。如在阅读教学中就可以从培养学生写作能力上出发，利用简短的微课来激发出学生的学习兴趣，帮助学生掌握好写作方法，提高学习的效果。

 

表1 引物序列Table 1 Primer sequence

  

SNP_IDforwardprimerreverseprimersinglebaseextensionsequencers5058025'-ACGTTGGATGAGGTCCAACATAAG-CAAGGG-3'5'-ACGTTGGATGACATGGCTTACCAAGC-CAAC-3'5'-GAAGCATGTACAGGGCA-3'rs68559115'-ACGTTGGATGTGGTCCCGATAGACACAT-AG-3'5'-ACGTTGGATGTCTCCCAATCAAATC-CCCTC-3'5'-TTCATCTACTTGGCATCATTT-3'rs7372675'-ACGTTGGATGTGGGCCACACCATG-CATATC-3'5'-ACGTTGGATGCTTCCAGCAGTGTCAGTA-AG-3'5'-GGACGATTCTGTGGTCTTA-CAGAG-3'rs124987425'-ACGTTGGATGCTAGATATCTAGCGGTG-GTG-3'5'-ACGTTGGATGGATCTTAGGGTCTCCT-TCTC-3'5'-CATGCAGGCTCCATTC-3'rs74422955'-ACGTTGGATGTGACTTGTTGATGGAGAG-GC-3'5'-ACGTTGGATGTTCAAACACTTAGGGTCT-GG-3'5'-CCTTTGCAGCCTCATATT-3'rs7345535'-ACGTTGGATGTGAATGTGTGCTTGAAG-GCG-3'5'-ACGTTGGATGGAAAGATCAGAGCACT-GAGC-3'5'-GCTGACTGATTAGATCCC-3'rs168909795'-ACGTTGGATGTCAGCCAGGACCTCCTCTA-3'5'-ACGTTGGATGGATGGACACTCTAATC-CCTG-3'5'-CCTCTACCTCTTGGGAAA-3'

2 结果

2.1 研究人群基本资料

迄今为止，同类型的研究中尚未从SNPs的角度进行与低尿酸血症相关基因的鉴定，本研究首次报道了SLC2A9基因rs7442295位点突变与中国宁夏地区人群低尿酸血症相关，为后续中国地区低尿酸血症的病因研究提供了有效的信息。

2.2 等位基因和基因型频率

探索涠洲岛旅游区改革和开发建设新路径 …………………………………………………………………………… 陈禹静（6/51）

本研究采用SPSS 20.0软件进行分析，计量资料以平均数±标准差或中位数(四分位数)表示。两组间均数比较采用t检验或秩和检验。分类资料用χ2检验。应用MassArray TYPER 4.0对质谱结果进行处理，通过判断分子质量的差异而进行SNP分型检测。基因型频率及等位基因频率的统计及组间比较采用SHEsis软件，用Hardy-Weinberg检验确认研究对象群体的代表性。

 

表2 低尿酸组与对照组一般体检指标比较

 

Table 2 Comprision between hypouricaemia group and

  

index/unitscontrol(n=84)hypouricaemia(n=98)age/years32.8±17.232.7±16.6gender male24(28.9%)25(25.5%) female59(71.1%)73(74.5%)BMI/(kg/m2)22.3±3.721.7±3.3SBP/mmHg122±18121±16DBP/mmHg78±1277±12Glu/mmol/L5.1±0.65.1±1.2TC/mmol/L4.2±0.83.9±0.9*TG/mmol/L1.0±0.61.1±0.8HDL-C/mmol/L1.2±0.31.3±0.4LDL-C/mmol/L2.4±0.72.1±0.8*Cr/(μmol/L)72.2±10.168.7±11.5*UA/(μmol/L)252.5±28.689.4±27.1*

*P<0.01 compared with control group.

3 讨论

[3] Son CN, Kim JM, Kim SH, et al. Prevalence and possible causes of hypouricemia at a tertiary care hospital[J]. Korean J Intern Med,2016, 31:971-976. doi:10.3904/kjim.2015.125.

本研究检测SLC22A12基因rs505802位点， 未发现其与低尿酸血症的相关性。SLC2A9基因编码的葡萄糖转运体蛋白9(GLUT9)主要表达于肾小管细胞，参与尿酸重吸收，是血尿酸的主要遗传决定因素。SLC2A9基因的rs7442295位点与血尿酸水平密切相关[9]。随着rs7442295位点的主要等位基因A拷贝数目的增加，高尿酸血症的风险增加[9]。同时在一项研究rs7442295与痛风关系的Meta分析结果表明含有该位点杂合基因的人群发生痛风的风险较低[10]。本研究结果显示在rs7442295位点上，携带A/A基因型人群低尿酸血症的患病风险低于携带A/G基因型人群，提示基因A突变为G可能与低尿酸血症发生相关。携带该位点A/A基因型的人群发生低尿酸血症的风险较低，这一结果与上述两项研究的结果相符。检测SLC2A9基因的其余5个SNPs位点均未显示与低尿酸血症相关。此外，本研究还发现低尿酸组的TC、LDL-C及Cr低于对照组，这和之前的报道[4]一致。低尿酸组的BMI水平低于对照组，可能由于样本例数过少，并无统计学差异。低尿酸组的低BMI水平可能与血脂水平较低有关，Cr偏低可能是由于肾脏排泄增加所致。

 

表3 7个SNPs位点等位基因及基因型在低尿酸组和对照组的分布Table 3 Distribution of alleles and genotypes in hypouricaemia group and control group in 7 SNPs

  

geneSNPeffectallelefrequencycase,controlPPcgenetypefrequencycase,controlχ2PPcOR(95%CI)SLC22A12rs505802T0.32,0.210.0310.218C/C0.48,0.625.010.0810.567/C/T0.40,0.33T/T0.12,0.05SLC2A9rs6855911G0.06,0.010.0210.149A/A0.89,0.985.510.0220.1540.19[0.04^0.88]A/G0.11,0.02rs737267T0.06,0.010.0210.150G/G0.89,0.985.500.0200.1400.19[0.04^0.88]G/T0.11,0.02rs12498742G0.06,0.010.0150.103A/A0.89,0.986.200.0110.0770.17[0.04^0.81]A/G0.11,0.02rs7442295G0.06,0.010.0040.029A/A0.88,0.998.560.0030.0210.08[0.01^0.66]A/G0.12,0.01rs734553G0.06,0.010.0150.103T/T0.88,0.986.200.0130.0915.72[1.24^26.34]G/T0.12,0.01rs16890979T0.06,0.010.0160.109C/C0.88,0.986.090.0100.0700.18[0.04^0.82]C/T0.12,0.01

Underline is of statistical significance (Pc<0.05，by the Bonferroni correction).

本研究的局限性在于病例数量较少，由于低尿酸血症患病率低，国外报道其患病率均低于1.0%。本研究团队分析中国6省(黑龙江、内蒙古、四川、湖南、宁夏和云南)的大型流行病学调查数据显示，中国地区低尿酸血症的患病率约为0.7%，其中宁夏回族自治区人群患病率最高为2.4%，因此本研究选取宁夏人群进行了低尿酸血症与SNPs位点关系的研究。

低尿酸组98例，平均年龄(32.7±16.6)岁，对照组84名，平均年龄(32.8±17.2)岁，临床及代谢指标(表2)。结果表明低尿酸组的TC、LDL-C及Cr均低于对照组(P<0.05)。

[4] Kuwabara M, Niwa K, Ohtahara A, et al. Prevalence and complication of hypouricemia in a general population: A large-scale cross-sectional study in Japan[J]. PLoS One, 2017, 12:e176055. doi: 10.1371/journal.pone.0176055.

郭 敏 男，1992年生于浙江东阳，现为浙江工业大学计算机学院研究生，研究方向包括可充电传感器网络、无线协助中继网络等.

[1] Ishikawa I. Acute renal failure with severe loin pain and patchy renal ischemia after anaerobic exercise in patients with or without renal hypouricemia[J]. Nephron, 2002, 91: 559-557. doi:10.1159/000065013.

还有人工智能之无人彩妆店、无人汽车4s店、无人环卫车等。人工智能是新一轮科技革命和产业变革的重要驱动力量，随着时代的发展，科技的进步，人工智能将更加深入地渗透于我们工作生活的方方面面，“无人”的人工智慧城市会越来越完善，城市服务，即将成为智慧的“无人之境”！

[2] Kanda E,Muneyuki T,Kanno Y,et al. Uric acid level has a U-shaped association with loss of kidney function in healthy people:a prospective cohort study[J].PLoS One,2015,10:e118. doi:10.1371/journal.pone.0118031.

目前对低尿酸血症的界值并没有公认的标准，依据之前主流文献对低尿酸血症的定义，本研究将低尿酸血症定义为血清尿酸水平低于2 g/L(119 μmol/L)[6-7]。肾性低尿酸血症包括原发性和获得性。原发性肾性低尿酸血症是一种以肾小管尿酸转运体缺陷为特征的遗传性、异质性疾病[8]，分为1型和2型，分别由SLC22A12基因和SCL2A9基因突变引起。

参考文献：

[5] Merriman TR. An update on the genetic architecture of hyperuricemia and gout[J].Arthritis Res Ther, 2015, 17: 98. doi: 10.1186/s13075-015-0609-2.

SLC22A12基因rs505802位点及SLC2A9基因rs6855911、rs737267、rs12498742、rs7442295、rs734553和rs16890979位点基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05)，所选择的研究对象均具有群体代表性，可用来作为遗传标记分析SLC22A12和SLC2A9基因与低尿酸血症的相关性。等位基因分析结果(表3)显示，SLC2A9基因的rs7442295位点与低尿酸血症相关。rs7442295位点低尿酸组基因G的频率高于对照组(6.00% vs 1.00%, Pc<0.05)，A/G基因型在低尿酸组的分布频率高于对照组。携带该位点的A/A基因型的人群低尿酸血症患病风险低于含有A/G基因型的人群(Pc<0.05，OR=0.08，95% CI：0.01～0.66)。结果表明SLC2A9基因的rs7442295位点与低尿酸血症相关，而SLC22A12基因rs505802位点及SLC2A9基因rs6855911、rs737267、rs12498742、rs734553和rs16890979位点与低尿酸血症未见相关。

[6] Wakasugi M, Kazama JJ, Narita I, et al. Association between hypouricemia and reduced kidney function: a cross-sectional population-based study in Japan[J]. Am J Nephrol, 2015, 41:138-146. doi:10.1159/000381106.

[7] Fujita K, Ichida K. A novel compound heterozygous mutation in the SLC22A12 (URAT1) gene in a Japanese patient associated with renal hypouricemia[J]. 2016, 463:119-121. doi:10.1016/j.cca.2016.10.025.

在小编小时候，是胶卷、胶片流行的年代，照片都要冲印出来，欣赏一番，再放进相册里保存。可能很久很久以后，在某天大扫除的时候，会翻出来自己小时候的“囧”照。这不，唐伯兮无意中翻出了自己小时候的照片，发在了微信朋友圈中，引起《花火》编辑部的一阵骚动。

[8] Stiburkova B, Sebesta I, Ichida K, et al. Novel allelic variants and evidence for a prevalent mutation in URAT1 causing renal hypouricemia: biochemical, genetics and functional analysis[J]. Eur J Hum Genet, 2013, 21: 1067-1073. doi:10.1038/ejhg.2013.3.

[9] Wallace C, Newhouse S J, Braund P, et al. Genome-wide association study identifies genes for biomarkers of cardiovascular disease: serum urate and dyslipidemia[J]. Am J Hum Genet, 2008, 82: 139-149. doi:10.1016/j.ajhg.2007.11.001.

[10] Meng Q, Yue J, Shang M, et al. Correlation of GLUT9 polymorphisms with gout risk[J]. Medicine (Baltimore), 2015, 94: e1742. doi: 10.1097/MD.0000000000001742.

与以往的宪法修改相比，2018年修宪凸显了时代和改革需求，整个修改过程体现了审慎、严肃的工作态度。但在全面深化改革时期，全方位的改革随时可能触碰到宪法文本的内容，何时启动宪法修改程序，需要构建一个相对规范的约束机制。而这次在全国推行监察体制改革试点工作的决定，全国人大常委会是在2017年11月4日通过的， 2018年初才通过《宪法修正案》，也就是说，全面开展监察体制改革试点工作在先，修改宪法在后，虽然时间跨度不大，但从规范意义上讲，存在一定程序瑕疵，应在立法中加以完善。