川崎病,又称皮肤粘膜淋巴结综合征，主要发生在儿童。目前川崎病的诊断尚缺乏确切的实验室指标，但C反应蛋白，血小板计数，血沉，不明原因的贫血等可作为川崎病诊断的参考指标[1]。此外，有报道发现川崎病患儿外周血嗜酸性粒细胞计数与百分比也较健康儿童升高[2]。IL-5为Th2淋巴细胞产生的一种细胞因子,对嗜酸性粒细胞有较强的吸附作用，延长其存活时间。ECP为嗜酸性粒细胞分泌的强碱性毒蛋白，是嗜酸性粒细胞活化的特异性标志。本文通过检测外周血嗜酸性粒细胞、IL-5及ECP水平，探讨川崎病患儿嗜酸性粒细胞及相关细胞因子IL-5,嗜酸性粒细胞阳离子蛋白-ECP变化及相互关系。

“领情了，不过我是不会接受邀请的。”英格曼神甫手也不伸，让那张脸面印得很漂亮的请柬，在他和大佐之间尴尬着。

1 资料与方法

1.1 临床资料 2011年01月至2015年12月 浙江省人民医院儿科收治的川崎病患儿42例，均符合实用儿科学第7版诊断标准，所有患儿入院前均无IVIG静脉注射治疗。其中男26例，女16例，年龄10个月至5岁，平均30个月，其中有7例存在冠脉扩张。对照组为有发热的急性化脓性扁桃体炎患儿38例，其中男20例，女18例，年龄15个月至6岁，平均38个月。健康体检儿50例，其中男23例，女27例，年龄8个月至5岁，平均32个月。均无过敏性疾病。三组儿童年龄，性别差别均无统计学差异(P>0.05)。

1.2 方法 42例KD患儿分别于发热第5至7天及IVIG治疗后体温正常后3至5天空腹无菌采集静脉血3ml。对照组空腹无菌采集静脉血3ml。2ml用自动血细胞分析仪检测嗜酸性粒细胞计数与百分比, 1m l于枸橼酸钠抗凝试管中, 提取血浆, 待测IL-5和ECP。用 ELISA 法检测血浆中IL-5、ECP水平。试剂盒购自杭州联合生物有限公司。

1.3 统计学处理 用SPSS18. 0 软件处理数据。计量资料以 表示；所有数据均进行正态性和方差齐性检验，各组样本均数比较采用单因素方差分析，两两比较采用LSD检验，治疗前后比较采用配对t检验，相关分析采用Pearson相关法。

2 结果

2.1 42例川崎病患儿急性期、恢复期与对照组嗜酸性粒细胞计数与百分比、IL-5、ECP比较川崎病患儿急性期、恢复期嗜酸性粒细胞计数与百分比、IL-5明显高于对照组。单因素方差分析提示三组嗜酸性粒细胞计数与百分比、IL-5比较，差别有统计学意义(P<0.05)；ECP含量则差别无统计学意义(P>0.05)。LSD法两两比较，EOS、EOS%、IL-5 急性期、恢复期均较对照组明显升高，差别有统计学意义(P<0.05)。EOS%恢复期较急性期明显升高，差别有统计学意义(P<0.05)，EOS、IL-5急性期与恢复期比较差别无统计学意义(P>0.05)。(见表1)

表1 三组嗜酸性粒细胞计数与百分比、IL-5、ECP比较

EOS(×109)EOS%IL-5(ng/L)ECP(ng/ml)川崎病组急性期0．40±0．38∗3．07±1．81∗#30．36±9．10∗4．89±2．05恢复期0．41±0．284．74±2．3433．92±15．664．08±1．07发热扁桃体炎患儿0．16±0．111．98±1．3120．39±6．735．46±2．35健康对照组0．14±0．151．76±1．4317．34±9．344．06±2．48F值6．84112．29310．5461．171P值0．0010．0000．0000．339

*与对照组比较，P<0.05；#与恢复期比较，P<0.05

2.2 相关性分析 经Pearson相关性分析，川崎病患儿急性期IL-5水平与嗜酸性粒细胞计数、百分比呈正相关，恢复期IL-5水平与嗜酸性粒细胞计数呈正相关。ECP与嗜酸性粒细胞计数、百分比、IL-5均无明显相关性(见表2～3，图1～3)。

表2 急性期嗜酸性粒细胞、IL-5、ECP之间的相关分析(r值)

指标EOSEOS%ECPIL-5IL-50．661∗0．658∗-0．006—ECP-0．095-0．160—-0．006

*P<0.05

表3 恢复期嗜酸性粒细胞、IL-5、ECP之间的相关分析(r值)

指标EOSEOS%ECPIL-5IL-50．550∗0．4150．218—ECP0．0500．248—0．218

*P<0.05

3 讨论

川崎病自从1967年日本儿科医生川崎富首次报道。嗜酸性粒细胞是变态反应疾病中最活跃的一类细胞。研究发现嗜酸性粒细胞水平在川崎病患儿血清中也有明显升高，但在川崎病嗜酸性粒细胞增多的机制尚不明确。IL-5为Th2类细胞因子，被认为是调节嗜酸性粒细胞功能最重要的细胞因子，可介导嗜酸性粒细胞的分化和活化，阻止嗜酸性粒细胞发生凋亡，可以使嗜酸性粒细胞存活时间显著延长，且IL-5为嗜酸性粒细胞炎症反应的主要介质，通过与细胞表面的IL-5R结合后，促进嗜酸性粒细胞与血管内皮细胞的粘附能力，脱颗粒和组织浸润，有较强趋化活性[3]。ECP为一种碱性蛋白质，为嗜酸性粒细胞激活后分泌的毒蛋白，具有强烈的神经毒性和细胞毒性，同时它又是嗜酸性粒细胞活化的重要标志。能诱导肥大细胞释放组胺[4]。有研究发现，积聚的嗜酸性粒细胞对组织损伤相关，而这些损伤是激活的嗜酸性粒细胞释放ECP等毒蛋白的结果[5]。

取收集的小鼠血液样本，待血液凝固约30 min后，3500×g离心15min取上清。按照试剂盒说明书操作，测定小鼠血清中BUN和Cr水平。酶标仪405 nm波长处测定吸光度，根据说明书计算BUN和Cr含量。

Kuo H-C等研究发现，川崎病患儿在IVIG治疗前嗜酸性粒细胞及相关介质IL-4、IL-5、趋化因子、ECP较对照组明显增加，而IVIG治疗后，ECP下降，但IL-4、IL-5、趋化因子水平升高，与本文研究结果较一致。嗜酸性粒细胞在微血管积聚和外周血中嗜酸性粒细胞增多可能参与嗜酸性粒细胞在川崎病患儿中血管损伤的发病机制[6]。

因此，嗜酸性粒细胞可能参与了川崎病的发病过程，而嗜酸性粒细胞的增高可能与IL-5等Th2类细胞因子相关。

[参　考　文　献]

[1]A usawaM, SonobeT, U emura S, et al. Revision of diagnostic guide-lines forK awasaki disease ( the 5th revised edition)[J] . PediatrInt,2005，47( 2): 232- 234.

[2]?ner T, Y?lmazer MM, Güven B, Devrim I, et a1. An observational study on peripheral blood eosinophilia in incomplete kawasaki disease[J]. Anadolu Kardiyol Derg2012，12(2):160-16411

[3]O. Donn ell， M P Renal tubulointerstitial fibrosis New thoughts on its development and progression[J]. Postg rad Med, 2000, 108(1):159-162.

[4]Khadadah M，Onadeko BO，Ezeamuzie CI et aI. The association of skin test reactivity，totaI serum IgE levels，and peripheral bIood eosinophiIia with asthma in Kuwait [J] . Asthma2000 ，37(6)：481-488

[5]Rosenberg HF, Domachowske JB. Eosinophis, eosinophil ribonucleases, and their role in host defense against respiratory virus pathogens[J].Journal of Leukocyte Biology2001,70(5):691-698.

[6] Terai M, Yasukawa K, Honda T, .et al.Peripheral blood eosinophilia and eosinophil accumulation coronary microvessels in acute kawasaki disease[J].Pediatr Infect Dis J2002 ，21(8):777-781