前列腺癌是男性泌尿生殖系统最常见的恶性肿瘤，手术切除、内分泌去势、放化疗是主要的治疗手段[1]，但仍缺乏有效的靶向治疗药物、与疾病发生发展有关的关键分子机制也未阐明。垂体肿瘤转化基因1(pituitary tumor transforming gene 1，PTTG1)是近年来新发现的恶性肿瘤相关基因，多项研究证实PTTG1的高表达与是结肠癌、食管癌等恶性肿瘤发生发展的共同病理环节[2，3]。国内曹希亮的离体细胞研究表明，抑制前列腺癌细胞内PTTG1的表达能够使癌细胞的增殖、侵袭过程受阻[4]，由此也提示PTTG1可能参与了前列腺癌的发生及发展。在下列研究中，为了明确PTTG1的前列腺癌发生及发展过程中的具体作用，我们分析了前列腺癌病灶内PTTG1表达量的变化及其与增殖、侵袭基因的相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2015年3月～2018年1月期间在我院接受根治性手术的前列腺癌患者作为研究的恶性组，所有患者均经术后病理学检查诊断为前列腺素癌，共82例，年龄48～69岁，身高(171.3±19.4)cm，体重(68.3±8.4)kg。另取同期因良性前列腺增生在我院接受前列腺电切治疗的患者作为研究的良性组，所有患者均经术后病理学检查诊断为良性前列腺增生，共114例，年龄50～71岁，身高(179.6±18.4)cm，体重(67.5±9.1)kg。两组患者一般资料的比较无显著性差异(P>0.05)。

1.2 研究方法

1.2.1 病灶组织采集方法 手术切除后，收集恶性组前列腺癌病灶及良性组前列腺增生病灶适量，用生理盐水清洗后在滤纸上吸尽水分，装入冻存管后在液氮内冷冻保存；经病理学确认组织性质后用于后续检测。

1.2.2 基因mRNA表达量的检测方法 取恶性组前列腺癌病灶及良性组前列腺增生病灶适量，加入Trizol裂解液后进行充分研磨，得到组织研磨液后按照RNA抽提试剂盒的说明书进行操作、分离组织中的RNA，而后按照RT-PCT试剂盒的说明书配置反应体系并进行扩增反应，根据反应曲线计算PTTG1、Survivin、Bcl-2、CyclinD1、CDKN2、p21、GPRC6A、TFPI2、ZEB1、CatB、CatD、PAR-1的mRNA表达量。

1.3 统计学处理

采用SPSS22.0软件录入资料后对两组间的计量资料进行t检验分析，P<0.05为差异有统计学意义。

恶性组前列腺癌病灶内PTTG1的mRNA表达量为(2.31±0.36)，良性组前列腺增生病灶内PTTG1的mRNA表达量为(1.03±0.15)。经t检验分析恶性组前列腺癌病灶及良性组前列腺增生病灶内PTTG1表达量的差异可知：恶性组患者前列腺癌病灶内PTTG1的mRNA表达量显著高于良性组(P<0.05)。

2 结果

2.1 PTTG1的表达量

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2.2 增殖基因的表达量及其与PTTG1的相关性

创新教育强调以培养人的创新精神和创新能力为基本价值取向，其核心是要研究和解决如何培养学生的创新意识、创新精神和创新能力的问题。创新教育不仅要教会学生知识，更重要的是方法，启发学生从不同的角度去思考问题，起到“引爆”思维的作用，挖掘其潜能。在科技日新月异的今天，只有不断地创新才能使之成为真正的第一生产力。

恶性组前列腺癌病灶内Survivin、Bcl-2、CyclinD1的mRNA表达量显著高于良性组(P<0.05)，CDKN2、p21的mRNA表达量显著低于良性组(P<0.05)。见表1。

前列腺癌具有浸润性生长的特性，与该特性相关的生物学行为不仅包括细胞过度增殖，同时还包括细胞过度侵袭。细胞上皮间质转化是细胞侵袭的首要环节，其特征是上皮表型的细胞向间质表型转化、细胞间极性减弱且运动性能增强[10，11]；GPRC6A是调节上皮间质转化的G蛋白偶联受体，通过下游信号转导能够使转录因子ZEB1激活，进而通过ZEB1对上皮标志基因E-cadherin表达的阻碍作用来促进细胞发生上皮间质转化[12，13]。在细胞获得运动性能后，需要通过降解细胞外基质及基底膜来完成向邻近组织侵袭的过程，CatB、CatD是组织蛋白酶家族的成员，能够水解细胞外基质及基底膜中的多种成分；PAR-1能够增强蛋白酶的活性并促进细胞侵袭，TFPI2能够降低蛋白酶的活性并阻碍细胞侵袭[14，15]。我们通过分析前列腺癌病灶内上述侵袭基因表达的变化发现：恶性组患者前列腺癌病灶内GPRC6A、ZEB1、CatB、CatD、PAR-1的mRNA表达量显著升高，TFPI2的mRNA表达量显著降低。这就说明促侵袭基因表达的上调、侵袭抑制基因表达的下调与前列腺癌的发生有关。进一步分析前列腺癌病灶内PTTG1基因高表达与上述侵袭基因表达变化的关系可知：高PTTG1的前列腺癌病灶内GPRC6A、ZEB1、CatB、CatD、PAR-1的mRNA表达量显著升高，TFPI2的mRNA表达量显著降低。这就说明前列腺癌病灶内PTTG1基因表达的上调能够影响多种侵袭基因的表达，进而促进了癌细胞的侵袭。

 

表1 恶性组和良性组增殖基因表达量的比较

  

组别nSurvivinBcl-2CyclinD1CDKN2p21恶性组822.44±0.372.09±0.343.18±0.470.42±0.060.38±0.06良性组1141.04±0.151.01±0.130.99±0.141.05±0.161.02±0.13t27.69818.98335.38221.03923.286P<0.05<0.05<0.05<0.05<0.05

 

表2 恶性组增殖基因与PTTG1的相关性

  

PTTG1nSurvivinBcl-2CyclinD1CDKN2p21高表达413.20±0.512.75±0.414.75±0.620.25±0.040.21±0.04低表达411.69±0.251.46±0.221.71±0.230.61±0.080.55±0.07t15.67613.04929.39822.38426.541P<0.05<0.05<0.05<0.05<0.05

2.3 侵袭基因的表达量及其与PTTG1的相关性

综上所述，前列腺癌病灶内PTTG1基因的表达显著升高；高表达的PTTG1与多种增殖、侵袭基因表达的变化密切相关，能够促进癌细胞的增殖及侵袭。

 

表3 恶性组和良性组侵袭基因表达量的比较

  

组别nGPRC6ATFPI2ZEB1CatBCatDPAR-1恶性组822.33±0.350.56±0.081.87±0.241.96±0.252.55±0.462.71±0.41良性组1141.04±0.151.02±0.130.97±0.120.99±0.141.06±0.141.01±0.15t25.49811.98413.58612.75922.58628.938P<0.05<0.05<0.05<0.05<0.05<0.05

 

表4 恶性组侵袭基因与PTTG1的相关性

  

PTTG1nGPRC6ATFPI2ZEB1CatBCatDPAR-1高表达413.10±0.460.30±0.062.32±0.342.44±0.343.42±0.523.84±0.55低表达411.72±0.230.81±0.121.41±0.161.48±0.201.69±0.261.62±0.25t11.03923.48414.57510.94818.93822.173P<0.05<0.05<0.05<0.05<0.05<0.05

3 讨论

前列腺癌细胞的过度增殖是造成病灶生长的重要生物学行为，多种增殖相关基因参与该行为的调控。Survivin、Bcl-2是具有凋亡抑制活性的基因，通过抑制细胞凋亡来为细胞增殖创造有利条件，前者能够直接拮抗多种caspase家族成员的活性并抑制凋亡反应的级联激活[5]，后者能够阻碍线粒体内细胞色素C的释放及其所介导的线粒体途径凋亡[6，7]；CyclinD1是参与细胞周期调控的关键基因，与CDK4、CDK6形成复合物后能够使Rb发生磷酸化、促进E2F发生解离并进入细胞核，进而启动多种DNA合成相关酶的转录并加速细胞周期进程、促进细胞增殖[8]。CDKN2、p21是细胞周期的负性调控基因，前者能够阻碍Rb所介导的E2F解离、后者能够阻碍CDKs家族成员的激活，两者共同阻碍细胞周期发展、抑制细胞增殖[9]。我们通过分析前列腺癌病灶内上述增殖基因表达的变化发现：恶性组患者前列腺癌病灶内Survivin、Bcl-2、CyclinD1的mRNA表达量显著升高，CDKN2、p21的mRNA表达量显著降低、这就说明促增殖基因表达的上调、增殖抑制基因表达的下调与前列腺癌的发生有关。进一步分析前列腺癌病灶内PTTG1基因高表达与上述增殖基因表达变化的关系可知：高PTTG1的前列腺癌病灶内Survivin、Bcl-2、CyclinD1的mRNA表达量显著升高，CDKN2、p21的mRNA表达量显著降低。这就说明前列腺癌病灶内PTTG1基因表达的上调能够影响多种增殖基因的表达，进而促进了癌细胞的增殖。

3)采动影响系数K值的大小直接决定含应力包裹体瓦斯煤体动力现象发生后形成的孔洞形状，K值越大，孔洞口越小。

前列腺癌的发病率呈逐年升高趋势，病灶内癌细胞恶性增殖及侵袭是与疾病发生发展密切相关的生物学行为，但调控上述生物学行为的相关分子机制并未阐明。PTTG1是参与食管癌、结直肠癌等恶性肿瘤发生发展的基因，国内学者的离体细胞实验结果表明：抑制前列腺癌细胞内PTTG1的表达能够使PI3K/AKT/mTOR通路以及RAF/MEK/ERK通路活化受到抑制，进而阻碍癌细胞的增殖、侵袭过程[4]，由此也提示PTTG1可能参与了前列腺癌的发生及发展。在上述研究中，为了明确PTTG1在前列腺癌发生及发展过程中的直接作用，我们对前列腺癌病灶内PTTG1表达量的变化进行分析，结果显示：恶性组患者前列腺癌病灶内PTTG1的mRNA表达量显著高于良性组。这就说明局部病灶内PTTG1的高表达与前列腺癌的发生密切相关，结合PTTG1基因的离体生物学效应我们推测：高表达的PTTG1能够通过PI3K/AKT/mTOR通路以及RAF/MEK/ERK通路来促进病灶内癌细胞的增殖、侵袭，进而造成前列腺癌的发生及发展。

高PTTG1的前列腺癌病灶内Survivin、Bcl-2、CyclinD1的mRNA表达量显著高于低PTTG1的前列腺癌病灶(P<0.05)，CDKN2、p21的mRNA表达量显著低于低PTTG1的前列腺癌病灶(P<0.05)。见表2。

恶性组患者前列腺癌病灶内GPRC6A、ZEB1、CatB、CatD、PAR-1的mRNA表达量显著高于良性组(P<0.05)，TFPI2的mRNA表达量显著低于良性组(P<0.05)。见表3。 高PTTG1的前列腺癌病灶内GPRC6A、ZEB1、CatB、CatD、PAR-1的mRNA表达量显著高于低PTTG1的前列腺癌病灶(P<0.05)，TFPI2的mRNA表达量显著低于低PTTG1的前列腺癌病灶(P<0.05)。见表4。

建筑符号还包含了初始功能与二次功能，一方面是外延的实用性“功能”，另一方面是“象征性”的内涵[1]19。乡村民宿传达的内涵是其精髓所在，内涵的传达来源于形式，而形式不可脱离功能性，脱离了体验的感受，显得空而乏力。当代乡村民宿的设计在注重“神”之传达的同时，也不忘却“体”之感受。揽清与即下山轴线的错位，增加了空间体感。

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