食管癌是我国常见的消化道恶性肿瘤之一，早期诊断率低、5年生存率低是其基本的流行病学特点。在临床实践中，手术切除联合术后化疗、靶向治疗是食管癌的主要治疗手段，但术后容易发生局部复发及远处转移，进而对整体预后及生存情况造成不利影响。新辅助化疗是近年来被越来越多用于恶性肿瘤辅助治疗的手段，通过手术前进行全身静脉化疗来杀伤病灶内的癌细胞、降低癌细胞生长及浸润的活力，进而能够消灭手术无法切除的微小转移灶，有利于预防手术后的局部复发及远处转移[1]。紫杉醇+顺铂是食管癌术前常用的新辅助化疗方案，该方案已经被证实能够提高食管癌根治术后的生存率[2]，但对病灶内肿瘤恶性程度的影响尚未见报道。在下列研究中，我们从癌细胞凋亡、侵袭及血管新生的角度分析了食管癌根治术前紫杉醇+顺铂化疗对肿瘤恶性程度的影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料

将自贡市第三人医院2015年3月～2017年11月期间进行的食管癌根治术病例纳入本次回顾性研究，所有患者均经术前病理学活检诊断为食管癌且符合食管癌根治术的指征，临床资料完整且术后均留取食管癌组织适量，排除合并手术禁忌症的患者。共纳入128例患者，回顾病史资料并根据是否进行术前紫杉醇+顺铂新辅助化疗分为实验组和对照组。实验组共58例，包括男性34例，女性24例，年龄39～59岁；对照组共70例，包括男性41例，女性29例，年龄41～60岁。两组患者一般资料的比较无显著性差异(P>0.05)。

1.2 术前化疗方法

实验组按照紫杉醇+顺铂的方案进行化疗，方法如下：紫杉醇注射液135 mg/m2、静脉滴注，第1天，顺铂注射液75 mg/m2、静脉滴注、第1～3天，连续21天为一个疗程，连续进行2个疗程；化疗过程中监测血常规、肝肾功能，对症给予脏器保护、促进造血等支持治疗。化疗结束后3周进行后续手术切除治疗。对照组患者进行常规术前准备、不进行化疗，而后直接进行手术切除治疗。

1.3 实验室检测方法

手术切除后，经病理学确认组织性质后取食管癌组织适量，按照RNA抽提试剂盒及反转录试剂盒的说明书进行实验操作，抽提食管癌组织中的RNA后反转录合成cDNA；取cDNA样本并按PCR试剂盒的说明书配置反应体系，而后在PCR仪上进行PCR反应，根据反应曲线计算Smac、Caspase-9、p21、Spink8、ADAMTS5、CNTN1、β-catenin、MMP9、N-cadherin的mRNA表达量。

1.4 统计学处理

采用SPSS20.0软件录入数据并对两组间计量资料的差异进行t检验分析，P<0.05为差异有统计学意义。

他自诩为正宗的武汉人，觉得自己高人一等，开口闭口就是“你们乡里人……”，可这儿所有的“乡里人”都打心眼里瞧不起他，瞧不起这个吃软饭的家伙。

2 结果

2.1 手术切除食管癌组织中凋亡基因的表达量

食管癌病灶内癌细胞的增殖和侵袭均依赖于局部新生血管所提供的能量，TGF-β1、VEGF是两种与肿瘤血管新生直接相关的细胞因子。TGF-β1通过调控成纤维细胞的活化、胶原蛋白的形成和聚集来参与内皮细胞出芽及管腔结构形成的过程，能够使局部组织中形成广泛的分支样血管结构、有利于新生血管的形成[14，15]。VEGF是直接刺激内皮细胞生长的细胞因子，通过促进内皮细胞生长来增加血管样结构的数目[16，17]。我们通过分析食管癌病灶内血管新生分子表达的变化来反应新辅助化疗对食管癌恶性程度的影响，结果显示：与未进行新辅助化疗的对照组比较，进行新辅助化疗的实验组患者手术切除食管癌组织中TGF-β1、VEGF的mRNA表达量显著降低。TGF-β1、VEGF均是分泌型的细胞因子，由肿瘤组织表达的TGF-β1、VEGF能够分泌进入血液循环[18]，我们进一步分析血清中血管新生分子的含量可知：与未进行新辅助化疗的对照组比较，进行新辅助化疗的实验组患者血清中TGF-β1、VEGF的含量显著降低。

两组患者手术切除食管癌组织中侵袭基因ADAMTS5、CNTN1、β-catenin、MMP9、N-cadherin表达量的分析如下：实验组患者手术切除食管癌组织中ADAMTS5、CNTN1、β-catenin、MMP9、N-cadherin的mRNA表达量显著低于对照组。两组患者食管癌组织中ADAMTS5、CNTN1、β-catenin、MMP9、N-cadherin表达量的差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

 

表1 两组手术切除食管癌组织中凋亡基因的比较

  

组别nSmacCaspase-9p21Spink8实验组582.12±0.351.75±0.252.33±0.391.89±0.26对照组701.03±0.180.96±0.131.00±0.140.98±0.13t19.29214.95823.84916.857P<0.05<0.05<0.05<0.05

2.2 手术切除食管癌组织中侵袭基因的表达量

工作人员积极性地维护需要得到绩效管理体系的有利支持，因此，针对人力资源管理工作的不足之处加以研究，并制定与发展诉求相关的具体策略，对提升人力资源管理工作的综合质量，具有十分重要的意义。

 

表2 两组手术切除食管癌组织中侵袭基因的比较

  

组别nADAMTS5CNTN1β-cateninMMP9N-cadherin实验组580.42±0.070.56±0.080.38±0.060.32±0.050.59±0.07对照组701.02±0.141.01±0.150.97±0.141.03±0.170.99±0.13t15.49812.83321.33224.58213.217P<0.05<0.05<0.05<0.05<0.05

2.3 血清中血管新生分子的含量及手术切除食管癌组织中血管新生分子的表达量

至此，老徐的摊点上，就有两种颜色的面糊，后来还有荞麦面糊，替一些血糖偏高、爱上火的老人准备的。老徐说，某一天，发现你的轮椅不再出现，还有点小失落；跟老伴算算时间，明白你是毕业了，就没想到今儿还能再见着你，真高兴。“找到工作了吗？”

食管癌手术后远处转移的发生与癌细胞侵袭性生长的生物学行为密切相关。ADAMTS5是ADAM家族中分泌型亚家族ADAMTS的成员，拥有血小板反应蛋白、金属蛋白酶、整合素等结构，一方面能够通过金属蛋白酶的活性来使细胞外基质、细胞基底膜内的成分发生水解，进而有利于肿瘤细胞的侵袭；另一方面能够通过整合素的活性来启动细胞的上皮间质转化过程，进而增强细胞的运动活性、有利于细胞的迁移和浸润[8]。CNTN1是最早在神经系统中发现的一类黏附分子，近年来关于其在恶性肿瘤发生发展中的研究发现该分子能够增加多种蛋白酶的表达，进而通过相应蛋白酶的生物学活性来促进肿瘤细胞的侵袭[9]。β-catenin是Wnt通路下游的效应分子，该通路激活后能够削弱GSK-3β对β-catenin的抑制及降解活性，进而促进β-catenin向细胞核移位并通过调节相应基因的表达来产生生物学效[10，11]；MMP9是受到β-catenin调控的蛋白酶之一，具有极强的胶原水解活性，通过使细胞外基质中的胶原发生水解来为细胞侵袭创造有利的局部环境；N-cadherin是受到β-catenin调控的间质标志基因，能够使细胞间互相黏附的作用减弱、有利于细胞向临近组织运动并发生浸润、侵袭[12，13]。我们进一步通过分析食管癌病灶内侵袭基因表达的变化来反应新辅助化疗对食管癌恶性程度的影响，结果显示：与未进行新辅助化疗的对照组比较，进行新辅助化疗的实验组患者手术切除食管癌组织中ADAMTS5、CNTN1、β-catenin、MMP9、N-cadherin的mRNA表达量显著降低。这就说明新辅助化疗能够抑制食管癌病灶内多种侵袭基因的表达，进而抑制癌细胞的侵袭、降低肿瘤的恶性程度。

 

表3 两组患者血清及手术切除食管癌组织中血管新生分子的比较

  

组别n血清TGF-β1VEGF食管癌组织TGF-β1VEGF实验组5824.92±3.7444.46±5.740.48±0.070.59±0.06对照组7049.51±6.3883.41±10.371.03±0.161.01±0.14t14.28916.40815.48414.293P<0.05<0.05<0.05<0.05

3 讨论

紫杉醇+顺铂的新辅助化疗方案已经被广泛用于食管癌术前的辅助治疗，对提高术后远期生存率具有积极价值[3]，但对病灶内肿瘤恶性程度的影响尚未见明确报道。癌细胞过度增殖是食管癌发生发展过程中最基本的病理环节，病灶内癌细胞的增殖活跃程度与肿瘤恶性程度直接相关。凋亡基因参与细胞凋亡过程的调控，当凋亡基因表达减少或缺失时，细胞无法正常进入凋亡程序、进而出现过度增殖。Smac基因的编码产物是定位于线粒体膜间隙的凋亡蛋白，一方面能够增加线粒体膜对细胞色素C的通透性、有利于细胞色素C进入胞浆并启动细胞凋亡，另一方面能够与多种凋亡抑制蛋白结合并抑制其对促凋亡分子的抑制活性、进而增强促凋亡分子所介导的凋亡过程[4]；Caspase-9是Smac下游调控细胞凋亡的信号分子之一，Smac通过增加细胞色素C进入胞浆来引起Caspase-9发生激活、通过减弱凋亡抑制蛋白对Caspase-9的抑制活性来增强Caspase-9的活性，活化后的Caspase-9能够通过一系列级联激活反应来造成细胞发生凋亡。p21基因的编码产物是一类细胞周期抑制分子，通过拮抗细胞周期蛋白复合体的活性来使细胞周期发生停滞，处于停滞状态的细胞会进一步发生凋亡[5，6]。Spink8基因的编码产物属于Spink家族，同时对细胞的增殖和侵袭均有抑制作用[7]。在上述研究中，我们通过分析食管癌病灶内凋亡基因表达的变化来反应新辅助化疗对食管癌恶性程度的影响，结果显示：与未进行新辅助化疗的对照组比较，进行新辅助化疗的实验组患者手术切除食管癌组织中Smac、Caspase-9、p21、Spink8的mRNA表达量显著升高。这就说明新辅助化疗能够增加食管癌病灶内多种凋亡基因的表达，进而促进癌细胞发生凋亡、降低肿瘤的恶性程度。

平面上，总体上中部矿体厚大，向周边逐渐变薄；单工程Zn品位0.5%～17.8%，一般1%～4%，Pb品位0～3.4%，一般0.1%～0.8%，品位属均匀—较均匀；垂向上Zn的变化无显著变化规律，Pb具下少上多的总体特点，Zn/Pb由下向上呈递减趋势。

实验组手术切除食管癌组织中Smac、Caspase-9、p21、Spink8的mRNA表达量显著高于对照组。两组患者食管癌组织中Smac、Caspase-9、p21、Spink8表达量的差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

两组患者血清中血管新生分子TGF-β1(ng/mL)、VEGF(ng/mL)含量及手术切除食管癌组织中血管新生分子TGF-β1、VEGF表达量的分析如下：实验组患者血清中TGF-β1、VEGF的含量以及手术切除食管癌组织中TGF-β1、VEGF的mRNA表达量显著低于对照组。两组患者血清中TGF-β1、VEGF含量及食管癌组织中TGF-β1、VEGF表达量的差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

综上所述，食管癌根治术前紫杉醇+顺铂化疗能够促进癌细胞凋亡、抑制癌细胞侵袭并降低血管新生的活力，通过新辅助化疗能够有效降低食管癌的恶性程度。

参考文献

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