D101树脂对红景天黄酮的吸附和解吸特性研究
红景天属景天科植物红景天(Gladiola Hosea)或大花红景天(R.granulate)(多年生草本或亚灌木植物)的根及根状茎的干燥根或根茎。其中总黄酮为其主要有效成分。黄酮类化合物有抗氧化、清除自由基、抗菌、降压等生物学活性[1-3]。黄酮类化合物是植物界分布最广的一类成分,是指两个苯环通过中央三碳链相互联结而成,基本母核为C6-C3-C6的天然产物,主要是指以2-苯基色原酮为母核的化合物,分为黄酮类、黄酮醇类、二氢黄酮类、二氢黄酮醇类等15种,其中最多的是黄酮醇和黄酮[4-7]。大孔吸附树脂利用大孔树脂的多孔结构和选择性吸附功能从天然药物中分离纯化有效成分,目前已经广泛应用于中药化学成分研究[8-11]。本实验通过考察上样量、pH、解吸剂、质量浓度和温度对红景天黄酮的吸附和解吸的影响,确定了适宜D101树脂吸附解吸红景天黄酮的工艺条件,并绘制D101树脂对黄酮的吸附动力学曲线和动力学模型,为红景天中黄酮类成分的分离纯化提供理论依据。
1 仪器与试剂
1.1 仪 器
T6新世纪紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司),THZ-D台式恒温振荡器(太仓市实验设备厂),RE3000旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)。
采用口服自拟中药汤剂降脂汤,方剂如下:黄芪30 g、生大黄6 g、白芍15 g、草决明20 g、山楂20 g、泽泻10 g、红花15 g、炒白术20 g,茯苓20 g,枳实10 g、丹参20 g,肝肾亏虚加:何首乌10 g、女贞子10 g、桑寄生15 g、杜仲10 g;脾虚痰湿加:半夏6 g、胆南星10 g、薏苡仁20 g、山药10 g;气滞血瘀加:红花10 g、桃仁10 g、当归10 g、陈皮15 g。
1.2 试 剂
红景天黄酮,本室自制。芸香叶苷:国药集团化学试剂有限公司(批号:F20130930);无水乙醇,氢氧化钠,硝酸铝,亚硝酸钠;实验用水为二次蒸馏水。
2 结果与分析
2.1 D101树脂的预处理
商品树脂存在惰性溶剂,在使用前进行预处理。将树脂放入层析柱内,加入高于树脂层20 cm的95%乙醇浸泡4 h,然后放净洗涤液,反复洗涤至出口洗涤液无乙醇味为止,然后用蒸馏水淋洗至无乙醇味即可。
2.2 吸附率和解析率的计算方法[12]
Q1=(C0V0-C1V1)/W,
红景天提取液在温度低时有沉淀析出,红景天浓度越高,此现象越明显,适当升高吸附温度,有利于红景天黄酮的溶解。
E1(%)=(C0V0-C1V1)/C0V0×100%;
Q2=C2V2/W,
C2—吸附后料液中总黄酮质量浓度(g/L);
⑤ 图面配置,地图整饰:合理安排附图、附表、文字说明、图例的位置,突出表达地图主题,且生动活泼、灵活多变,并按统一设计要求进行地图整饰。
E2(%)=C2V2/(C0V0-C1V1)×100%
式中:Q1—吸附量(mg/g);
E1—吸附率(%);
(2)数字阅读引发深度思考的缺失。长期浏览数字阅读设备不仅容易造成视力疲劳,而且也会导致学习者深度思考的缺失。认知心理学的研究表明,每一个学习者的认知加工能力是有限的[5],当学习者在浩如烟海的网络信息中一味地追求知识容量的广度时,必然其知识加工的深度就会受到制约。由于成人学习者长期使用超文本以及超链接来进行学习,在引发学习者的注意力和思维发生跳转的同时也加大了学习者的认知负荷。学习者不仅要抵制有趣但无关信息的干扰还要从众多信息快速筛选出相关的信息,学习的深度因而受到影响。成人学习者在查找、阅读学习的时候,通常搜索到的信息不是连贯系统的知识框架,只是其中的某些片段,使得思维平面化、浅层化。
Q2—解吸量(mg/g);
E2—解析率(%);
本研究显示,实验组老年非小细胞肺癌患者满意水平高于对照组,P<0.05;实验组术后治疗的依从性评分、住院时间优于对照组,P<0.05;护理前两组血气分析的相关指标以及焦虑情绪相似,P>0.05;护理后实验组血气分析的相关指标以及焦虑情绪优于对照组,P<0.05。实验组术后肺部感染及呼吸衰竭等老年非小细胞肺癌并发症发生率低于对照组,P<0.05。
解吸剂对红景天黄酮的存在状态影响较大并影响树脂对红景天黄酮的吸附性能。由图3所示,在乙醇体积分数在10%~80%间,D101树脂对红景天黄酮的解析率逐渐升高;当乙醇体积分数大于60%时,解析率大于70%;在乙醇体积分数为80%时达到最大值,之后变化不太明显。所以,当乙醇体积分数为80%时,解析率最好。
准确称取预处理后的D101湿树脂1.0 g,于100 mL具塞磨口三角瓶中,分别精密加入已配好的红景天总黄酮提取液30 mL,在温度为40 ℃、转速为100 r/min中振荡,每隔10 min取样1次,紫外可见分光光度法测吸光度,计算吸附量并绘制吸附等温线。
生态旅游促使了区域传统旅游形式向自然、社会和经济协同发展转变,这种重生态性、亲自然性和软文化性的旅游模式日益受到广大游客的青睐,已然成为一种全新的旅游选择取向,成为当代旅游市场中一个极为重要的增长极。中俄界江地区是指沿黑龙江与乌苏里江向两侧延伸,以当壁镇—龙王庙一线为分界,南北各属中国与俄罗斯的总面积4 380 km2多的广袤地带。该区域在地理位置上位于我国疆土的最北端与最东端,同时与俄罗斯的三大州和两大区接壤,地理位置极为重要。全面分析界江地区丰富的生态旅游资源及其分布表征是其发展生态旅游的先决条件。
● HMI多媒体交互式动态机台:以产线智能监控概念打造的赛车趣味竞赛动态机台,由7台台达全新12英寸和15英寸的人机界面DOP-100系列、智能传感器、网络/模拟监控摄影机以及线性电机移动平台等,现场操控及转播赛道上线性移动平台。DOP-100系列是台达最新的高阶人机界面,拥有多媒体功能,同时支持十多种语言输入及以太网高速传输,搭配Cortex A8高性能微处理器与高亮度、高解析LCD显示屏幕,为生产流程及设备监控提供整合性与弹性兼具的解决方案。
V0—吸附前料液体积(mL);
V1—吸附后料液体积(mL);
V2—解吸后料液体积(mL);
W—湿树脂质量(g)
2.3 上样量对D101树脂吸附和解吸的影响
吸附:准确称取预处理后的D101湿树脂1.0 g,于100 mL具塞磨口三角瓶中,分别精密加入已配好的红景天总黄酮提取液,体积分别为22、24、26、28、30、32 mL,温度为30 ℃,转速为100 r/min,振荡5 h,待反应完全后,测定料液中总黄酮浓度,并计算吸附量和吸附率。
解吸:取已经吸附饱和的树脂,精密加入体积分数为95%的乙醇40 mL,30 ℃温度,转速为100 r/min振荡5 h,待其充分解吸后,测定料液中黄酮浓度,并计算解吸量和解析率。结果见表1。由表1可见,树脂D101对红景天黄酮有较好的吸附和解吸性能,但吸附率在总体上呈下降趋势。
表 1 上样量对D101树脂的吸附和解吸红景天黄酮的影响
上样量mL吸附量mg/g吸附率%解吸量mg/g解析率%2219.9269.8514.8375.132420.8867.5616.3977.162620.2560.6818.4991.322820.5357.2518.7191.153022.6458.9621.3194.093224.8160.1122.7191.59
2.4 料液质量浓度对D101树脂吸附的影响
吸附:准确称取预处理后的D101湿树脂1.0 g,于100 mL具塞磨口三角瓶中,分别精密加入不同质量浓度红景天黄酮提取液25 mL,在温度为30 ℃、转速为100 r/min中振荡6 h,待反应完全后,测定料液中总黄酮浓度,并计算吸附量和吸附率。
1.2.3 出血护理患者每次进餐前要进行漱口,以1次/2h为宜,护理人员要指导患者进行冲击性漱口,使患者黏膜皱劈部位能够和漱口液充分接触。护理人员建议患者使用软毛牙刷不要用使用牙签剔牙,以免受到外力撞击对皮肤粘膜进行保护,一旦牙龈口腔出血,可以使用棉棒蘸生理盐水进行擦拭,口腔局部涂抹止血药。鼻出血可以给予填塞法或是局部冷敷法。拔针后注射部位加压数分钟,一旦出现渗漏现象或是局部红肿应当立即用50%的硫酸镁对局部湿敷,或是在血管的上方外敷新鲜马铃薯片,可以使局部的肿痛现象减轻[3]。
解吸:取已经吸附饱和的树脂,精密加入体积分数为95%的乙醇40 mL,在30 ℃、转速为100 r/min振荡6 h,待其充分解吸后,测定料液中黄酮浓度,并计算解吸量和解析率。
红景天料液黄酮不同浓度1.22、1.50、1.90、2.20 g/L处分别测定其吸附量及吸附率,结果见表2:随着红景天料液质量浓度的增加,D101树脂对红景天黄酮的吸附量也随之增加;而吸附率随着红景天料液浓度增加而降低,因此选择料液浓度为1.22。
表 2 料液质量浓度对D101树脂吸附的影响
料液浓度/(g/L)吸附量/(mg/g)吸附率/%1.2223.1476.661.5028.1775.591.9034.1272.372.2039.0071.35
2.5 温度对D101树脂吸附的影响
准确称取预处理后的D101湿树脂1.0 g,于100 mL具塞磨口三角瓶中,分别精密加入已配好的红景天总黄酮提取液25 mL,在不同温度下,转速为100 r/min中振荡6 h,待反应完全后,测定料液中总黄酮浓度,并计算吸附率。
考察温度对黄酮的存在状态的影响和对树脂D101的吸附的影响,结果当温度20、30、40 ℃时,吸附率分别为74.45%、80.21%、81.11%,可见随着温度的升高,树脂D101对红景天黄酮的吸附率逐渐升高。
湖北渔业现状是:2017年湖北省水产品产量465.42万吨。其中水产品常规品种养殖产量大,总量供给充足,但产品价格低,结构不合理,经济效益差,渔民收入低;渔业发展方式粗放,渔业发展不平衡、不协调、不可持续问题非常突出,湖北渔业发展中的深层次矛盾逐步显现。
2.6 pH对D101树脂吸附的影响
准确称取预处理后的D101湿树脂1.0 g,于100 mL具塞磨口三角瓶中,分别精密加入已配好的红景天总黄酮提取液30 mL,在温度为30 ℃,不同pH下,转速为100 r/min中振荡6 h,待反应完全后,测定料液中总黄酮浓度,并计算吸附率。
由图4所示,D101树脂在1~60 min内吸收速度最快,随后吸收速率增长缓慢,在60 min时吸附量达到最大值,qe为25.58 mg/g。
慢性鼻窦炎,属中医学“鼻渊”、“脑漏”范畴,以鼻流浊涕、量多不止为主要临床特征。张重华教授熟读中医经典,深知鼻渊一病最早见于《内经》,该书已明确指出胆、肺之热可致鼻渊,如《素问·气厥论》曰:“胆移热于脑,则辛頞鼻渊,鼻渊者,浊涕下不止也。”《素问·至真要大论》亦有鼻渊的论述:“少阴之复……甚则入肺,咳而鼻渊。”
红景天黄酮偏碱性,在酸性条件下更容易吸附。由图1所示,D101树脂对红景天黄酮的吸附率随pH的增大而降低。pH在1~3时,吸附率大于80%,pH在4~5时,吸附率大于78%,红景天提取液pH为4,有较高的吸附性能,因此pH可以不调。但当pH过低时黄酮已形成“徉盐”,所以pH不宜过低。
2.7 不同pH对D101树脂解吸的影响
准确称取预处理后的D101湿树脂1.0 g,于100 mL具塞磨口三角瓶中,分别精密加入已配好的红景天总黄酮提取液30 mL,在温度为30 ℃、转速为100 r/min中振荡6 h,待吸附反应完全后,测定料液中总黄酮浓度。过滤去溶液,用蒸馏水洗净残留料液,在吸附饱和的树脂中加入30 mL 90%乙醇,并调节pH使之在1~14,在温度为30 ℃,转速为100 r/min中振荡6 h,待解吸反应完全后,测定料液中总黄酮浓度。碱性天然产物红景天黄酮在酸性条件下容易吸附,但在碱性条件下易于解吸。从图2可看出,从总体上看来,用90%乙醇做解吸剂,随着pH的增大解析率也随着增大,在pH在7~10间解析率增长最快,在pH=12时,解吸率达到最大。
2.8 解吸剂对D101树脂解吸的影响
准确称取预处理后的D101湿树脂1.0 g,于100 mL具塞磨口三角瓶中,分别精密加入已配好的红景天总黄酮提取液25 mL,在温度为30 ℃、转速为100 r/min中振荡6 h,待吸附反应完全后,测定料液中总黄酮浓度。过滤去溶液,用蒸馏水洗净残留料液,在吸附饱和的树脂中加入30 mL体积分数为10~100%乙醇,在温度为30 ℃、转速为100 r/min中振荡6 h,待解吸反应完全后,测定料液中总黄酮浓度。
C0—吸附前样液中总黄酮质量浓度(g/L);
2.9 D101树脂对红景天黄酮的吸附等温线
C1—吸附后残留黄酮质量浓度(g/L);
在天然产物中有一些具有酸碱性成分,在不同的酸碱性溶液中溶解度不同,在大孔吸附树脂中,酸碱性的影响比较大。一般原则为:酸性物质在酸性溶液中进行吸附,在碱性溶液中解吸。
从表1可知,风机盘管的风量和房间的温湿度以及系统冷水总流量是符合设计及规范要求,102房间的总新风量为361m3/h,和该房间设计要求为1200m3/h的新风量相差较大,102所在的一层空调房间的面积约800m2,但是设计上只安装一台额定风量为2000m3/h新风机组,明显不符合人员密度新风标准的设计要求。新风系统对改善室内空气质量有很大作用,但是没有引起建筑各方的重视。
2.10 D101树脂对红景天黄酮的吸附动力学模型
一级动力学方程:ln(qe-qt)=-k1t+lnqe
二级动力学方程:
式中:qt—特定时间吸附量(mg/g)
qe—平衡吸附量(mg/g)
k1—一级动力学参数
k2—二级动力学参数
一级动力学线性回归方程为:
y=-0.040 7x+3.107 1,R2=0.979 5
PVA-g-PAA-c-PER的制备路径如图 1。单体丙烯酸(AA)在通过自由基聚合反应接枝到线性高分子聚乙烯醇(PVA)上,生成接枝共聚物PVA-g-PAA,与不同比例的PER交联剂混合均匀,在交联温度下发生酯化反应,得到网状的PVA-g-PAA-c-PER。
二级动力学线性回归方程为:
根据不同的分类标准,研究方法有不同的分类方式。以研究的目标或目的为标准,可分为“基础研究”和“应用研究”;以研究方法为标准,可分为“定性研究”和“定量研究”;以研究方式为标准,可分为“理论研究”“实验研究”“调查研究”等。借鉴这些分类,本文将英语词汇学习研究方法分类两大类,一类是以实验为基础的实证研究,另一类是以理论分析为基础的理论研究。
y=0.031 5x+0.580 7,R2=0.975 2
由表3所示一级、二级动力学模型线性拟合系数>0.95,所以D101树脂对红景天黄酮的吸附符合一级、二级动力学模型。
表 3 40 ℃下树脂D101对红景天黄酮吸附的动力学数据
T/minCt/(g/L)qt/(mg/g)qe-qtln(qe-qt)t/qt01.160.0025.583.24-100.7511.9313.662.610.84200.5617.088.502.141.17300.4718.966.621.891.58400.3920.475.111.631.95500.2722.782.801.032.20600.1225.580.00-2.35
3 讨 论
本实验采用D101树脂纯化红景天中黄酮成分,分别对上样量、料液质量浓度、温度、pH、解吸剂5个方面进行了优化。结果表明,上样量为32 mL,料液质量浓度1.22 g/L,温度为40 ℃,pH为偏碱性条件,解吸剂乙醇体积分数80%时,D101树脂对红景天中黄酮成分具有较好的吸附和解析附能力。试验中采用紫外分光光度法测定树脂处理前后种黄酮成分的含量,能够准确、科学地反应红景天黄酮成分在D101树脂上的吸附与洗脱等特点。该工艺稳定、可行,可以为红景天药材的进一步研究研究提供理论依据。
参考文献:
[1] 王晓梅,王燕,胡君萍,等.新疆蔷薇红景天黄酮提取工艺的研究[J].中国现代药物应用,2011,5(4):5-6.
[2] 黄仁福,吴周和,韩春城,等.响应面法优化红景天总黄酮提取工艺的研究[J].氨基酸和生物资源,2010,32(1):59-63.
[3] 李君,陈志,李建民,等.红景天的研究进展[J].云南农业大学学报,2007,22(1):61-64.
[4] 涂华,陈碧琼,张燕军.天然黄酮物质的提取工艺研究进展[J].中国实验方剂学杂志,2011,17(6):277-279.
[5] 马森林,陈四平.天然黄酮类化合物分离方法研究进展[J].中国医药导报,2011,8(21):8-10.
[6] 陈秋荣.黄酮类化合物药理作用的分析[J].中国实用医药,2012,7(21):254-255.
[7] 严振宇,张秋菊.黄酮类化合物提取分离方法简介[J].微量元素与健康研究,2012,29(3):55-58.
[8] 袁菊丽.大孔吸附树脂在中药研究中应用近况[J].中国中医药信息杂志,2011,18(8):103-105.
[9] 董漪,吴虹.大孔吸附树脂提取及纯化中药研究进展[J].安徽中医学院学报,2012,31(3):76-78.
[10] 陈强.大孔吸附树脂在中药新药制备工艺研究中的应用[J].福建中医学报,2009,19(2):67-70.
[11] 刘玥.大孔吸附树脂在中药提取纯化中的应用进展[J].世界中医药,2013,8(2):232-234.
[12] ZHANG Z F,LIU Y,LUO P,et al.Separation and purification of two flavone glucuronides from Erigeron multiradiatus (Lindl.) Benth with macroporous resins[J].J Biomed Biotechnol,2009,2009:875629.
上一篇:没有了
下一篇:本刊入网声明