竹蝗是直翅目Orthoptera蝗科Acrididae斑翅蝗亚科Oedipodinae竹蝗属Ceracris昆虫的统称。黄脊竹蝗Ceracris kiangsu是竹蝗属中最著名的竹林害虫，其种群严重危害我国南方竹林。尽管人们对其生物学特性已经有了较为深入的了解，然而，关于其种群遗传结构以及种群发生、发展和迁移的历史研究极少，这对其灾害的预测十分不利。

对学生进行角色的分配来阅读课文，是一种将思想带入课文的好方法。体会课文中人物的思想情感，就需要自身带着强烈情感去阅读课文，分角色的朗读会让人有一种未见其人便闻其声的意境，增进文章的理解。必要的时候，可以适当地加些动作来进行演示，更能体会人物的性格特征。情境教学对于语文阅读来说是相辅相成的，合理运用这种方法会使教育成为有生命力的教育，作为小学语文老师，应当孜孜不倦地潜心研究情境教学在阅读上发挥的作用，促进阅读教育的不断发展。

目前，国内学者对黄脊竹蝗种群遗传结构和系统地理学的研究进展，如姜石生等(2011)对湖南桃江、广东广宁、广西桂林、重庆永昌、四川长宁等5个黄脊竹蝗地理种群，结果发现这5个黄脊竹蝗种群分化程度很低，说明其群体遗传多样性单一。Fan等(2014)使用16s rDNA和AFLP技术对黄脊竹蝗地理种群的遗传多样性和系统发生结构进行了分析，结果表明黄脊竹蝗是单系群，提出黄脊竹蝗处于初级分化阶段的假说，并指出人类活动对黄脊竹蝗的基因流动具有显著的影响。Feng等(2015)对沿环境梯度的黄脊竹蝗种群进行基因组扫描，并对其中的异常值进行了识别，结果表明黄脊竹蝗基因组中有97个高度统计支持的异常位点，并提出每个种群生存的局部环境会弱化歧化自然选择。最近，黄脊竹蝗种群间在形体大小方面的地理差异以及密度制约非遗传多型性也有报道(Feng et al.，2016)。

线粒体细胞色素C氧化酶亚基II是在系统发生学和谱系地理学研究中最受欢迎的分子标记之一(Caterino and Sperling，1999；Emerson et al.，2000；Ozeki et al.，2007；Simonato et al.，2007；Hasan et al.，2009)。本文应用线粒体COII基因标记对中国黄脊竹蝗分布范围内的种群进行了种群遗传学分析，以期对今后该物种的生物防治提供基础资料。

1 材料与方法

1.1 样品采集

本次实验选取了黄脊竹蝗分布范围内的20个采样点，共有331头黄脊竹蝗标本。所有标本保存于无水乙醇中，供实验用。样品采集地、样本数等详见图1和表1。

1.2 基因组DNA提取

本实验采用蛋白酶K法，即酚-氯仿抽提法提取基因组DNA(Sambrook et al.，2000)。选用黄脊竹蝗的后足股节肌肉为实验材料。抽提出的模板用PCR产物纯化试剂盒纯化。将提取的DNA以Loading buffer ∶DNA=2 ∶3，在1%琼脂糖凝胶电泳中检测，抽提成功的产物放置-30℃保存，备用。

1.3 引物设计

本次实验所用的引物选用通用引物LCOI1490和HCO2198 (Folmer et al.，1994)。引物序列分别为：5′-TAAACTTCAGGGTGACCAAAAAATCA-3′和5′-GGTCAACAAATCATAAAGATATTGG-3′，委托上海生工生物工程有限公司合成。

 

表1 本研究中黄脊竹蝗的取样地点和取样数量

 

Table 1 Sampling sites and number of samples forCeracris kiangsu in this study

  

代码Code采样地点Site经纬度LongtitudeandLatitude数量No.AH安徽舒城县31°20'08″N/116°37'55″E20CH重庆缙云山29°52'04″N/106°21'06″E20FJ福建建瓯市27°01'21″N/118°18'17″E12GN广东广宁县23°38'04″N/112°26'26″E36GX广西全州县25°55'43″N/111°04'22″E19HG贵州麻阳河28°35'32″N/108°23'45″E2HR湖南华容县29°31'51″N/112°32'25″E20JX江西石城县26°19'35″N/116°20'36″E21QZ浙江衢州市28°58'06″N/118°52'16″E14RA广西融安县25°17'32″N/109°32'21″E20SC四川长宁县28°34'56″N/104°55'16″E20TY湖南桃源县28°54'09″N/111°29'20″E50ZJ江苏南京市32°04'14″N/118°50'57″E20GJ贵州锦屏县26°40'34″N/109°12'02″E7GL广西桂林市24°54'57″N/110°18'23″E10HY湖南衡阳市27°06'42″N/112°42'13″E4ML云南勐腊县21°29'18″N/101°33'23″E5SP湖南双牌县25°57'42″N/111°39'35″E19YN云南勐仑植物园21°55'25″N/101°15'56″E7ZY四川资阳县30°01'32″N/104°35'22″E5 总计Total331

  

图1 黄脊竹蝗的采样地点分布图Fig.1 Sampling location map for Ceracris kiangsu注 ：采样地点和代码在表1中呈现。Note:Sampling localities and code are listed in Table 1.

1.4 PCR扩增与测序

PCR反应过程的反应循环参数为：94℃预变性4 min，94℃变性30 s，49℃退火30 s，72℃延伸1 min，扩增29-34个循环，最后72℃终延伸10 min，15℃保温。

Long-PCR反应循环参数为：94℃预变性4 min，94℃变性30 s，49℃退火30 s，72℃延伸1 min，扩增16-17个循环；94℃变性30 s，49℃退火30 s，72℃延伸1 min，扩增16-17个循环，在每个循环后加8 s，最后72℃终延伸10 min，15℃保温。

单一条带的PCR产物和经过菌落PCR验证的阳性克隆，均委托上海生工生物工程有限公司用相应的自带引物进行测序。

1.5 数据处理

1.5.1 统计分析

序列人工校对使用软件Chromas 2.22，拼接使用Seqman(DNASTAR, Steve，2001)和Clustal X1.83 (Thompson et al.，1997)，拼接后的序列在National Center for Biotechnology Information(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/guide/)中进行搜索以确保是所扩增的目的片段。

黄脊竹蝗存在低的核苷酸多样性和从中度到相对较高的单元型多样性，共享单元型有广泛地理分布，以及稀有单元型不是很狭窄的地理分布，缺乏明显的系统地理学结构，这些结果均表明：高度的基因流是影响黄脊竹蝗种群遗传结构最重要的因素。根据本实验的结果，在迁飞能力较强的物种分子谱系地理学研究中，进化速率相对较快的COII基因是适合的分子标记。在今后的研究中，我们将采集更多地区的标本，选择进化更迅速的标记，比如线粒体控制区，或配合使用微卫星等标记，可能对证明本文的假设更加有效。

1.5.2 多态性和变异

所有的序列采用MEGA version 7.0.14 (Kumar et al.，2016)里的Clustal W选项和默认参数进行比对。序列的基本统计采用MEGA计算。单元型的鉴定，单元型多态性(Hd)，核苷酸多态性(π)(Nei，1987)和多态性位点的数目(S)在DnaSP version 5.00.04 (Librado and Rozas，2009)中进行计算。

1.5.3 种群遗传结构分析

为了检测黄脊竹蝗有等级的遗传结构，在ARLEQUIN 3.11(Excoffier L. Zoological Institute，University of Berne，Switzerland)中用1000次置换进行了分子变异分析(AMOVA)以此来检验种群内和种群间的遗传多样性划分。预先指定的等级(hierarchy)产生3种分子遗传变量：FST为相对于整个物种的种群间(among populations)的统计，FSC为同一地区种组内的种群间(among populations within groups)和FCT为不同地区种组间的统计(among groups)(Stepien and Paber，1998；Paulo et al.，2002)。FST仅用单元型频率进行种群间的遗传划分。

2个选择中性检验，Tajima’s D (Tajima，1989)与Fu’s F (Fu，1997)以及错配分布分析在ARLEQUIN 3.11中进行，以此来检测种群扩张的近期种群统计学信号(Rogers，1995)。在种群快速扩张的情况下，这些统计被认为具有明显的负值。如果种群经历过爆发和扩张，通过公式τ=2ut (Rogers，1992)来进一步计算种群发生爆发或扩张的大约世代数目(t)，在这里τ是估量的增长或者衰退的突变时间的日期，u是每个世代每段序列的突变速率。u的值通过u=2μk来计算，μ是每个核苷酸的突变速率，k是分析片段的核苷酸数目。最后，扩张的大约时间通过黄脊竹蝗的世代时间乘以t来计算。黄脊竹蝗的世代时间基于它们性成熟的时间约为8个月来计算。对于线粒体DNA的替换速率，本研究根据Knowles(2000)在研究黑蝗属Melanoplus分子进化的经验，选用来自于其它节肢动物线粒体DNA校准的标准分歧速率每百万年2.3% (Brower，1994)。通过上述方法估算黄脊竹蝗可能的种群扩张时间。

为了比较这种扩张模型下的期望分布与观测分布，本研究计算了sum of square deviation(SSD)和the Harpending’s raggedness index(HRI)(Harpending，1997)。

1.5.4 谱系地理学结构

为了呈现单元型间的谱系地理学结构，通过NETWORK version 4.5.1.6(Fluxus Technology Ltd)利用所有的单元型构建了一个中间-连接网络图，使用的是中间连接的方法(Bandelt et al.，1999)。

1.5.5 系统发生学分析

AMOVA分析表明黄脊竹蝗存在明显的种群遗传结构(FST = 0.297，P < 0.001)。当把每一个采样点看作一个地理种群，AMOVA揭示种群间的变异占总变异的29.72%而总变异的70.28%存在于种群内。本研究也尝试了把采样距离上邻近的每一个省份的采样点归为同一个分类组，此时AMOVA分析显示分类组间的变异占总变异的13.07%，分类组内种群间的变异占总变异的17.36%，而总变异的69.56%存在于种群内。当做成对种群的比较时，50%以上的成对种群表现出显著差异(表3)。

2 结果与分析

2.1 PCR扩增与序列测定结果

基因组DNA提取结果良好，后续进行了COII片段的PCR扩增结果，效果很理想，COII基因片段扩增的部分结果如图2所示。从图2可以看出扩增结果为单一的清晰条带，COII片段的PCR扩增产物的测序结果亦均为清晰的单峰，可信度很高。总体上条带大小有从左到右的向下倾斜的趋势，这应该是因为进行凝胶电泳检测时凝胶出现偏移引起的。对于一次扩增结果较差的标本，配合进行重复扩增。

  

图2 COII基因片段扩增的部分结果Fig.2 Some results of amplified COII gene

2.2 遗传多态性和变异

331个黄脊竹蝗个体扩增获得的线粒体COII片段，测序后，经过比对得到680 bp的序列。该片段有207个多态性位点，其中155个简约信息位点，52个单变异位点。这一片段的T，C，A和G的核苷酸频率分别为31.64%，15.18%，40.08%和13.09%。在分析的338个个体中，经鉴定有61个单元型，其中有45个是仅有1个个体的单元型。对整个样本来说，单元型和核苷酸多样性分别为0.776%和1.029%。最常见的单元型分布非常广泛，它代表了本次实验个体总数的44.1%，包括HR、RA、SC、GN、ZJ、QZ、JX、AH、FJ、TY、GX、HG、SP、GJ、HY和GL共16个采样点的149个个体。居于第二位的共享单元型亦分布广泛，它代表了GN、JX、GX、SP和GL共5个采样点的47个个体，占实验个体总数的13.9%。重庆缙云山(CH)，四川长宁(SC)，广西全州(GX)，贵州麻阳河(HG)，云南勐腊(ML)和湖南桃源(TY)的单元型多样性水平对于其它样点的样本来说保持在一个相对较高的水平。黄脊竹蝗的核苷酸多样性的变化范围为从0(HG，QZ，RA and ZY种群)到11.913%(ML种群)。每一个采样点的核苷酸和单元型多样性的数据以及每一个采样点的个体数目等详细信息见表2。

 

表2 黄脊竹蝗COII片段单元型数目(Nh)，核苷酸多态性(π)，单元型多态性(Hd)，Fu’s Fs，Tajima’s D, sum of square deviation (SSD) 和Harpending’s raggedness index (HRI)

 

Table 2 Number of haplotypes (Nh), haplotype diversity (Hd), nucleotide diversity (π), Fu’s Fs, Tajima’s D sum ofSquare deviation (SSD), and Harpending's raggedness index (HRI) of COII for Ceracris kiangsu

  

代码CodeNNhπ(%)HdFusFsTajima'sDSSDHRIAH20141.0190.932-3.6881.0230.0090.022CH2030.0720.279-0.377-0.4400.0640.424FJ1240.1600.455-0.5870.0720.3090.373GN36251.6760.948-6.8151.1740.0110.015GX19161.2250.977-6.0841.3660.0050.010HG220.1581.0000.0000.000--HR2030.0740.279-0.335-1.1910.0080.336JX21140.9000.919-3.9341.3340.0090.025QZ1450.2730.593-0.289-1.1850.4480.090RA2070.4760.6420.020-0.1030.0510.127SC2030.0460.279-1.206-1.1410.0060.271TY50120.3940.395-2.539-1.1910.0530.343ZJ2060.2190.737-1.301-0.5790.0090.093GJ760.8730.952-0.9330.2250.1020.306GL1071.1550.8670.1511.0070.0700.069HY431.5010.8332.5381.6380.1990.528ML552.2751.0000.127-0.2410.0550.100SP19181.3090.994-9.8420.8070.0070.016YN740.3610.7140.1260.5940.0930.240ZY5100-0--总计Total3311121.2390.867-24.276-0.2610.0040.005

2.3 种群遗传结构

为了与中间-连接网络图进行比较，利用PAUP* 4.0b 10 (Swofford，2003)的最大简约法(MP)构建了所有单元型的系统发生树，用bootstrap and interior branch进行支持检验。MP分析通过PAUP* 4.0b 10 (Fry and Zink，1998)里的通过tree-bisection-reconnection(TBR)枝长的100个随机附加分析的启发式搜索来进行。序列的GTR+I+G替换模型通过基于AKAIKE INFORMATION CRITERION(AIC)(Nguyen et al.，2015)的IQ-TREE进行选择。MP树的节点的置信水平通过1000个bootstrap pseudoreplicates来计算。与黄脊竹蝗亲缘关系较近的青脊竹蝗Ceracris nigricornis的2个个体被选作构建系统发生树的外群(Akaike，1974)。

对于COII片段的整个采样范围的错配分析生成了一个几乎平滑的单峰曲线。其它的参数Sum of Squared deviation(SSD)=0.006(P=0.020)，Harpending’s Raggedness index(HRI)=0.064(P=0.052)。基于1000次模拟取样的中性检验的Tajima’s D统计显示为负值(D=-2.415)，Fu’s检验是显著的负值(FS=-20.394)。这些结果表明：黄脊竹蝗经历了一个近期集群和种群扩张(图3)。COII序列的τ=1.311，种群扩张时间估计为0.014百万年前。

心律失常性心肌病是指因心动过速、心动过缓、节律不规整及心脏收缩不同步等心律失常引起的左室结构或功能受损，经控制心室率或转复心律后，心脏功能大多可以逆转的一组心肌病。心律失常性心肌病又分为快速性和缓慢性两种，前者由房颤、房扑、阵发性室上速、室速等快速性心律失常引起。由于该类心肌病与扩张型心肌病的临床表现极为相似，因此临床上极易混淆。现就该病的发病机制进行阐述，以提高临床医师对该类疾病的认识。

 

  

图3 黄脊竹蝗COII基因片段单元型间的成对差异的总体数量分布Fig.3 Total distribution of the numbers of pairwise differences between haplotypes of COII of Ceracris kiangsu

  

图4 种群FJ，GJ，GL，GN，GX，HR，JX，SC，SP，TY和ZJ的种群扩张Fig. 4 The population-expansion exist in FJ, GJ, GL, GN, GX, HR, JX, SC, SP, TY and ZJ

  

图5 黄脊竹蝗COII基因片段不同地理种群单元型间的成对差异的数量分布Fig.5 Distribution of the numbers of pairwise differences between haplotypes of COII of the different geographic populations of Ceracris kiangsu

2.4 谱系地理学结构

中间-连接网络图呈现为一个星形结构，一个最普遍的单元型位于星形的中心，衍生单元型通过短枝与星形中心相连。除了ZY、YN、ML和CH 4个地理种群之外，最普遍的单元型在其余的16个地理种群中均有发现，比较普遍的几个单元型之间都有短枝相连通。总体上看，大部分地理距离较近的种群，在网络图中聚集到一起，H_3、H_4、H_5、H_6、H_52和H_54等代表湖南华容和湖南桃源的单元型在构图中的位置较近；H_7、H_8、H_9、H_10、H_12、H_13和H_42等代表重庆缙云山和四川长宁的单元型也是距离很近，甚至是两地点的个体分享同一个单元型；取样于云南勐仑植物园的H_44、H_45和H_46与采样于云南勐腊的部分单元型H_58亦聚集到了一起(图6)。

2.5 系统发生学分析

Hundertmark KJ, Shields GF, Udina IG,et al. Mitochondrial phylogeography of Moose (Alces alces): Late pleistocene divergence and population expansion [J]. Molecular Phylogenetics and Evolution, 2002, 22 (3): 375-387.

  

图6 用NETWORK version 4.6.0.0构建的COII基因片段的单元型网络图Fig.6 Network of COII haplotypes for Ceracris kiangsu constructed in NETWORK version 4.6.0.0

  

图7 黄脊竹蝗线粒体COII片段的最大简约法(Maximum Parsimony)系统发生树Fig.7 The Maximum Parsimony tree of COII genes of Ceracris kiangsu

3 讨论与结论

本文系统发生学和网络图分析没有把黄脊竹蝗的单元型划分为独立的分组，大部分种群的单元型与所有采样地的其它种群重叠交叉。中间-连接网络图也支持从个体数目较小的奠基者发生最近扩张的假说，因为普遍的祖先单元型位于星形网络图的中间，其它的单元型直接或间接由共享的普遍单元型衍生而来。蝗虫通常有相对较强的扩散能力，例如东亚飞蝗。有研究结果表明在中国东部距离1000 km以上的种群没有表现出遗传差异，在这一区域没有明显地理阻隔。依据经典的种群遗传理论，这表明存在较强烈的基因流(Zhang et al.，2009)。

被告方律师看了看杂志社代表和作者，大家都摇了摇头。作者首先站了起来，其他被告和律师也站起来。作者流下了泪水，以痛悔的眼光看着竹韵：“对不起，竹韵女士，请接受我真庆的道歉和敬意。我愿意接受法律的任何处罚……”

当把全部的COII序列作为一个整体进行错配分析时发现，单元型的成对突变差异的观测分布为平滑的单峰曲线(图3)。Tajima’s D分析和Fu’s检验均呈现为负值(表2)。上述结果表明，在COII分子标记中选择中性被拒绝。事实上，在本研究中Tajima’s D分析和Fu’s检验的显著负值可能是由最近的种群增长导致的。所有结果表明:黄脊竹蝗存在最近的集群和种群扩张。对我国飞蝗种群的微卫星DNA分析的结果显示，我国东部地区的飞蝗也是近期扩张的结果(Zhang et al.，2003)。利用COII数据推算的种群扩张时间为0.014百万年前，这处于末次冰期III和新冰期I之间的间冰期(Yi et al.，2005)。

虽然本研究中的采样地点至少间隔200 km(YN和ML除外)，在大部分采样地点间没有显示出明显的系统地理学格局。湖南华容和湖南桃源在系统地理学构图中的关系较近；四川长宁和重庆缙云山的单元型关系较近；广东广宁部分单元型关系很近；云南2个采样地(YN和ML)在系统地理学构图中聚为一个分支。共享单元型几乎在所有的采样地点发现，黄脊竹蝗缺少种群间的遗传变异，这表明种群间没有有效的基因流障碍。溯祖理论(Coalescence Theory)预测了最原始的单元型与它在样本中的频率一致的可能性，通过年代预测的单元型期望区间与通过频率预测的区间一致。COII分子标记的系统发生树结果表明，黄脊竹蝗有浅显的世系，这表明大部分普遍单元型共享一个最近祖先，假设COII标记的选择中性，这可以解释为一个低的长期有效种群大小持续的结果。这是由种群大小的波动或亚种群的灭绝和重新集群导致的(Fry and Zink，1998)。COII标记的最普遍的单元型在地理上分布非常广泛，其它一些不常见单元型与共享单元型类似。出现低频率的单元型分布广泛，这种现象暗示物种内高的基因流(Hale and Sing，1987)。高度迁飞的物种通常被认为在它们分布范围内存在不明显的谱系地理学结构(Avise et al.，1998)，因为强烈的基因流对地理上的种群有遗传变异均质化的影响，还可以消解随机漂变、选择和突变(Wright，1931；Mayr，1963；Peterson and Denno，1998)。虽然黄脊竹蝗广泛分布于中部东南部和中南部,但是这两大区域都属于东洋界(Zhang，1999)。本研究的结果表明,黄脊竹蝗也具有很强烈的基因流，这些结果同时也说明，武夷山和南岭山脉以及中国南部的其它一些山脉都不是限制这些山脉两侧邻近种群基因交流的有效障碍。作为一种林业和农业害虫，人为竹子移植和杀虫剂的使用或许在竹蝗种群地理学结构形成中发挥很重要的作用。错配分析结果出现的负值不是非中性分子进化的必要信号，因为很多作者己经指明Tajima's检验对其它的因素，比如最近的种群瓶颈或种群增长，也是敏感的。这些因素倾向于驱使Tajima’D值朝向更大的负值(Flook et al.，1995；Dotson and Beard，2001；Ding and Huang，2008)。

黄脊竹蝗COII基因片段的总体单元型和核苷酸多样性分别为0.776%和1.029%，此水平的单元型多样性与很多其它昆虫类似，但是核苷酸多样性低于报道过的很多其它昆虫(Vandewoestijne et al.，2004；Lee et al.，2006；Lai，2007)。在目前的研究中, 中度到相对较高的单元型多样性和低的核苷酸多样性揭示，在黄脊竹蝗中发生了始于很小有效种群大小的快速种群扩张(Li，2008)。高的单元型多样性也可以表明，黄脊竹蝗有多个避难所以及来自不同避难所的单元型的二次接触(Hundertmark et al.，2002)。安徽(AH)、广宁(GN)和勐腊(ML)种群具有最高的核苷酸和单元型多样性，因此，我们推测这些区域可能是第四次盛冰期的避难所(Hundertmark et al.，2002)。此外，从本研究的结果来看，云南的特殊地理位置极有可能是黄脊竹蝗的重要冰期避难所。

另外，值得关注的是，HG种群极高的单元型多样性和遗传多样性。本研究认为，这可能是由于这几个地理种群样本过少造成的。浙江衢州和广西融安的单元型多样性和遗传多样性均为零，推测可能是它们小范围内高度迁飞造成的。

在关于“英语朗读作用”的研究中，研究者对于“朗读”的操作呈现出了不同的形式（李黎，2016）：具体有朗读训练、教师意群朗读、大量重复性朗读和晨读等。有些研究者（周游，2010）在对朗读的研究中把朗读与阅读结合起来，还有些研究者（柯细香，2010）是把朗读与背诵结合。在相关研究中存在着对“朗读”概念理解及具体操作上的不一致。基于此，有研究者（李黎，2017）对朗读三个常见经典定义进行分析总结，提出了朗读的两个核心因素——外显状态与心理加工，并把朗读的外在表现划分为正确朗读、流畅朗读、意群朗读和有感情地朗读四个层次。

当前，我国医疗事业取得了长足进步，人们生活水平和社会服务条件进一步提高。在这样的大背景下，医疗卫生的要求也提升，各大医院必须不断提高服务水平与服务质量，才能满足民众的需求。加强内部控制是提高医院竞争力的重要举措，但在当前医院财务会计内部控制的工作中依旧存在不少问题，直接对财务控制效果产生影响，因此必须得到越来越多工作人员的高度重视。

参考文献(References)

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中国文明自信演进逻辑的力量源于持续不断的文明形态。优秀传统文化是一个国家或民族的继承和发展的根基所在。如果把这个根基丢失了，那将会切断民族的精神生命线。世界古代几大文明中，只有中国文明自有文字以来从未断流过，是世界上最古老且持续时间最长的文明形态，其孕育的中华优秀传统文化是中国特色社会主义的血脉源流。

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教师是课堂的主导者，在教学活动中发挥着重要的作用，教师必须深刻地了解任务型教学。首先任务型教学法应被视为教师的培训的必修课，并举行相应的考试。考试结果作为教师职称评定和奖金的重要参考。其次教师自身也要不断研究，努力学习不断提升。任务型教学法的理论内容主要有引导技巧、提问技巧、任务设置技巧、分组技巧、黑板设计技巧、表达技巧、评价技巧等。这些技能都是老师必须掌握的。学校应加强教师对课堂运用任务语言教学方法的认识，增加学生的理论存储空间，引导他们将理论付诸实践，使学生达到最佳的教学效果。

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2017年12月24日，我国自主研发的全世界最大水陆两栖飞机“鲲龙”AG-600在广东珠海成功首飞 。“ 鲲 龙”AG-600 是 继 运-20、C919之后我国大飞机家族的又一成员。那么，“鲲龙”AG-600到底是一款怎样的飞机呢？未来，它又会扮演怎样的角色呢？

Flook PK, Rowell CHF, Gellissen G. The sequence, organization and evolution of the Locusta migratoria mitochondrial genome [J]. Journal of Molecular Ecology, 1995, 411 (6): 928-941.

致谢:承蒙本课题组刘殿锋、陈爱辉、肖波等历届研究生协助采集竹蝗标本，潘志祥协助图片制作，在此一并致谢。

Folmer O, Black MB, Hoch W,et al. DNA primers for amplification of mitochondrial cytochrome coxidase subunit I from diverse metazoan invertebrates [J]. Molecular Marine Biology and Biotechnology, 1994, 3 (5): 294-299.

装置投产初期生产举步维艰。在国内它是一个先天不足的“头产儿”，一无先例、二无经验，当装置出现一些问题，常会令操作者迷惑不解。操作过程稍有偏差，流量、温度和压力等参数就会偏离控制值，几秒钟后反应器压力就会失控，造成气相物料超压排放，俗称“放炮”。单就超压排放损失的物料一项，价值少则几千元、多则上万元。1971年，装置开车投产的第二年，“放炮”次数就达20多次。

Fry AJ, Zink RM. Geographic analysis of nucleotide diversity and song sparrow (Aves: Emberizidae) population history[J]. Molecular Ecology, 1998, 7 (10): 1303-1313.

坚持“以人为本、重点突破、因势利导、统筹城乡、全面发展”的能源建设思路，提高清洁能源和可再生能源比重及利用效率。截至2017年底，全市风电装机规模达到274万kW，发电量57.28亿kWh，全市光伏装机规模达到1万kW。创新试点弃风清洁供暖工程，提高风电消纳能力，减轻电网外送压力，已建成并供暖面积103万m2，可节约标准煤1.88万t，对冬季供暖能源供应结构调整，具有积极的示范作用。

Fu YX. Statistical tests of neutrality of mutations against population growth, hitchhiking and background selection [J].Genetics, 1997, 147 (2): 915-925.

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用于构建系统发生树的序列用IQ-TREE，选择GTR+I+G为最优替换模型，利用PAUP* 4.0b 10构建的线粒体COII基因片段的MP系统发生树，与中间-连接网络图的结果相一致，大部分地理距离较近的种群，在系统发生树中聚集为一支。湖南华容和湖南桃源的大部分单元型在构树中的位置较近；代表重庆缙云山和四川长宁的单元型也是距离很近，甚至是两地点的个体分享同一个单元型；取样于云南勐仑植物园的所有单元型与采样于云南勐腊的部分单元型(2个)亦相聚在一起(图7)。

崇明岛内地势平坦，地面高程在3.20～4.40 m。岛上共有水闸 26座，涵闸53座；共有河道15 209条，共计9 226.38km。其中，市级河道1条（崇明环岛河），179.60km；县级河道28条，共 378.22km；乡（镇）级河道 568条，共1438.04km；村级河道14 612条，共7 230.52km，基本形成了南引北排、东西贯通的河道网络。

Jiang SS. Study on Genetic Diversity of Rammeacris Kiangsu of 5 Geographical Populations Based on Partial Sequences of 16S rRNA Genes, COI Gene, and COII Gene [D]. Central South University of Forestry & Technology, 2011. [姜石生. 基于线粒体DNA的16S rRNA, COI和COⅡ基因的黄脊竹蝗5地理种群遗传多样性研究[D]. 中南林业科技大学, 2011]

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当对20个地理种群单独进行错配分析时，由于HG、QZ、RA和ZJ种群因错配分布的变异太小，种群统计学参数不能评估，在FJ、GJ、GL、GN、GX、HR、JX、SC、SP、TY和ZJ共11个种群中发现存在扩张(图4)，其它5个种群为发生明显的扩张(图5)。

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将1号机发电机高压油泵出口压力开关拆除并进行校验，发现压力开关整定值已发生一定的漂移(整定值从10.0 MPa变化至10.71 MPa，返回值从8.0 MPa变化至8.44 MPa，见图2所示)，从而印证了对上述问题的相关分析，整定值发生漂移是导致高压油泵发生自动切泵等故障发生的直接原因。

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参照Trizol试剂说明书，对样品进行研磨，提取总 RNA，采用紫外分光光度计对提取到的总RNA进行质量检测，并储存于-80 ℃冰箱中备用。

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